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J亚群禽白血病SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立
被引量：
4
1
作者
王莉
黄安宁
+2 位作者
李槿年
张丹俊
刘雪兰
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期733-737,共5页
为建立一种能够快速、灵敏和特异地检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,本研究以ALV-J原型病毒株HPRS-103的pol基因3'端与gp85编码基因之间的保守区域(5 258 bp～5 802 bp)为检测目的片段,构建重组质粒并...
为建立一种能够快速、灵敏和特异地检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,本研究以ALV-J原型病毒株HPRS-103的pol基因3'端与gp85编码基因之间的保守区域(5 258 bp～5 802 bp)为检测目的片段,构建重组质粒并作为靶基因,通过对其浓度、引物浓度和退火温度的优化,建立了ALV-J SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。结果显示该方法的最低检测限度为2.36×102拷贝/μL,比普通PCR高100倍;与其他禽源病毒无交叉反应;批内和批间变异系数均小于5%。表明本研究建立的方法具有良好的特异性、稳定性和灵敏性。采用该方法对100只临床病鸡进行检测,ALV的检出率为44%。随机选择10只感染阳性鸡,检测病毒基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的分布与表达水平,结果表明ALV-J在各主要脏器中均有分布,但以肾脏中的病毒表达量最高。
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关键词
J亚群禽白血病
病毒
SYBR
Green
Ⅰ
荧光定量PCR
病毒基因表达水平
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职称材料
题名
J亚群禽白血病SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立
被引量：
4
1
作者
王莉
黄安宁
李槿年
张丹俊
刘雪兰
机构
安徽农业大学动物科技学院
安徽省农业科学院畜牧兽医研究所
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期733-737,共5页
基金
安徽省科技攻关战略性新兴产业项目(11010302119)
国家自然基金项目(31272696)
文摘
为建立一种能够快速、灵敏和特异地检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,本研究以ALV-J原型病毒株HPRS-103的pol基因3'端与gp85编码基因之间的保守区域(5 258 bp～5 802 bp)为检测目的片段,构建重组质粒并作为靶基因,通过对其浓度、引物浓度和退火温度的优化,建立了ALV-J SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。结果显示该方法的最低检测限度为2.36×102拷贝/μL,比普通PCR高100倍;与其他禽源病毒无交叉反应;批内和批间变异系数均小于5%。表明本研究建立的方法具有良好的特异性、稳定性和灵敏性。采用该方法对100只临床病鸡进行检测,ALV的检出率为44%。随机选择10只感染阳性鸡,检测病毒基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的分布与表达水平,结果表明ALV-J在各主要脏器中均有分布,但以肾脏中的病毒表达量最高。
关键词
J亚群禽白血病
病毒
SYBR
Green
Ⅰ
荧光定量PCR
病毒基因表达水平
Keywords
J subgroup of avian leukosis virus
SYBR GreenⅠ
fluorescent quantitative PCR
transcripts expression levels of ALV-J gene
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
J亚群禽白血病SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立
王莉
黄安宁
李槿年
张丹俊
刘雪兰
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
4
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