朝鲜淫羊藿多糖对HIV-1包膜蛋白质gp120的免疫佐剂活性 被引量：4

1

作者 张贵强 董娜 +7 位作者 王玉霞 李倩 贾培媛 武军华 麻浩 李海霞 单俊杰 王海南 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期959-965,共7页

目的评价淫羊藿总多糖(EKP)中组分B(EKP-B)和均一多糖B-1(EKP-B-1)对人类免疫缺陷病毒HIV-1 gp120蛋白的免疫佐剂活性。方法 EKP-B(150μg)、EKP-B-1(150μg)、铝佐剂(200μg)和生理盐水分别与HIV-1gp120(20μg)配伍肌内注射免疫小鼠1... 目的评价淫羊藿总多糖(EKP)中组分B(EKP-B)和均一多糖B-1(EKP-B-1)对人类免疫缺陷病毒HIV-1 gp120蛋白的免疫佐剂活性。方法 EKP-B(150μg)、EKP-B-1(150μg)、铝佐剂(200μg)和生理盐水分别与HIV-1gp120(20μg)配伍肌内注射免疫小鼠1次。免疫后2和4周收集小鼠血清,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度。4周后处死小鼠,MTT法测定小鼠脾T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测免疫小鼠血清干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)含量,流式细胞术测定脾细胞中CD4+/CD8+和CD3+/CD19+T细胞亚群百分比。结果免疫后2周,与HIV-1gp120单独免疫组相比,EKP-B-1与HIV-1gp120配伍可提高小鼠血清特异性抗体滴度(P<0.05),EKP-B无明显作用。免疫后4周,EKP-B和EKP-B-1与HIV-1gp120配伍均能明显提高小鼠血清特异性抗体滴度(P<0.05),还能明显促进B细胞增殖反应和IFN-γ的分泌(P<0.01),对小鼠脾T淋巴细胞增殖以及胸腺IL-4的分泌无明显影响,同时EKP-B还能提高脾细胞CD3+/CD19+细胞百分率(P<0.01),EKP-B-1提高脾细胞CD4+/CD8+细胞百分率(P<0.05)。结论 EKP-B和EKP-B-1(每只鼠150μg)对HIV-1gp120抗原显示良好的佐剂活性,能明显提高HIV-1gp120免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫功能,提示EKP-B和EKP-B-1有可能作为艾滋病疫苗的佐剂。 展开更多

关键词 朝鲜淫羊藿 多糖 人类免疫缺陷病毒 HIV包膜蛋白质gp120 佐剂

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重组汉坦病毒包膜糖蛋白G1、G2基因体内外表达的评价

2

作者 黄玉仙 翁心华 +3 位作者 瞿涤 朱函坪 陆群英 朱智勇 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期603-606,共4页

目的　构建分别编码汉坦病毒浙 37(Z37)株包膜糖蛋白G1、G2的真核表达质粒 ,并在离体及活体内评价重组汉坦病毒 (HV)包膜糖蛋白G1、G2基因的表达。方法　将编码G1、G2的基因片段分别插入至真核表达载体 pcDNA3.1(+) ,获重组质粒pcDNA3.1... 目的　构建分别编码汉坦病毒浙 37(Z37)株包膜糖蛋白G1、G2的真核表达质粒 ,并在离体及活体内评价重组汉坦病毒 (HV)包膜糖蛋白G1、G2基因的表达。方法　将编码G1、G2的基因片段分别插入至真核表达载体 pcDNA3.1(+) ,获重组质粒pcDNA3.1 G1、pcDNA3.1 G2。在体外转录翻译系统和真核细胞中表达重组基因 ,并在BALB/C小鼠中评价包膜糖蛋白G1、G2所激发的特异性体液免疫应答效果。结果　重组质粒pcDNA3.1 G1、pcDNA3.1 G2转染COS 7细胞后 ,IFA法可检测到细胞内有特异性荧光分布 ;在体外蛋白质转录、翻译系统 ,重组质粒 pcDNA3.1 G1、pcDNA3.1 G2所表达的蛋白质分子量分别约为 70KD及 5 5KD ;在免疫的部分小鼠体内可检测到特异性抗体。结论　成功地构建了分别编码HVZ37株包膜糖蛋白G1、G2的重组质粒 。 展开更多

关键词 包膜糖蛋白 体内 表达 PCDNA3 汉坦病毒 重组质粒 基因 蛋白质分子 转录 真核细胞

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乙型肝炎病毒外膜大蛋白与HBV DNA的关系研究 被引量：6

3

作者 温怀凯 余坚 +2 位作者 李小永 陶洪群 张信良 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期386-389,共4页

目的:探讨乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)与HBV DNA的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR法,检测320例乙型肝炎患者血清中的HBV-LP水平及HBV DNA载量。结果:HBV-LP水平与HBV DNA拷贝数变化相... 目的:探讨乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)与HBV DNA的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR法,检测320例乙型肝炎患者血清中的HBV-LP水平及HBV DNA载量。结果:HBV-LP水平与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关(r=0.949);不同模式的HBeAg血清中HBV-LP与HBV DNA阳性率,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:血清HBV-LP水平能反映乙型肝炎患者体内HBV复制程度,是判断HBV复制的血清学指标。 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 DNA 病毒/血液 病毒包膜蛋白质类/血液 肝炎抗原 乙型/血液 HBVDNA 乙肝病毒外膜大蛋白 复制

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EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞P53蛋白表达的影响 被引量：4

4

作者 张素珍 黄培春 +3 位作者 徐永 陈锦 蔡康荣 黄河 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1646-1649,共4页

目的研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)对鼻咽癌细胞P53蛋白表达的影响。方法将LMP1基因真核表达质粒转染至鼻咽癌CNE1细胞,脂质体介导端粒酶反义核酸处理转染细胞,MTT法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测LMP1和P53蛋白表达,原位杂交技术检测... 目的研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)对鼻咽癌细胞P53蛋白表达的影响。方法将LMP1基因真核表达质粒转染至鼻咽癌CNE1细胞,脂质体介导端粒酶反义核酸处理转染细胞,MTT法检测细胞增殖能力,免疫组化法检测LMP1和P53蛋白表达,原位杂交技术检测端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达。结果对照组,转染并表达LMP1基因的细胞的增殖能力、P53蛋白和hTERTmRNA表达水平均显著高于未转染细胞和转染空载质粒的细胞。端粒酶反义核酸作用组,LMP1基因转染细胞的LMP1蛋白表达水平显著低于对照组(P<001);LMP1基因转染细胞与未转染细胞和转染空载质粒的细胞的增殖能力、P53蛋白和hTERTmRNA表达水平均显著低于对照组(P<001),但LMP1基因转染细胞的增殖能力和P53蛋白表达水平仍显著高于未转染细胞和转染空载质粒的细胞(P<001)。结论EB病毒LMP1可促进鼻咽癌细胞P53蛋白的表达。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 疱疹病毒4型 人 膜蛋白质类 蛋白质P53 寡核苷酸类 反义

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HCV包膜蛋白E2的表达及其抗原性的检测

5

作者 史宣玲 曹凤 +3 位作者 杜勇 侯利华 季阳 王海涛 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期17-19,共3页

为研究丙型肝炎病毒 (HCV)包膜蛋白E2在原核细胞和真核细胞中的表达 ,并对表达蛋白的抗原性进行检测。将HCVE2区N端的一段基因分别克隆入原核表达载体pQE30和真核表达载体pEF1/HisC中进行E2蛋白的表达 ,采用ELISA和WB对表达蛋白的抗原... 为研究丙型肝炎病毒 (HCV)包膜蛋白E2在原核细胞和真核细胞中的表达 ,并对表达蛋白的抗原性进行检测。将HCVE2区N端的一段基因分别克隆入原核表达载体pQE30和真核表达载体pEF1/HisC中进行E2蛋白的表达 ,采用ELISA和WB对表达蛋白的抗原性进行检测。结果在原核细胞和真核细胞中均表达了预期大小的蛋白 ,能同HCV感染者血清发生特异性反应。提示该段E2基因在原核表达系统和真核表达系统均能表达出具有抗原活性的蛋白 ,其中真核细胞表达的蛋白可被糖基化。 展开更多

关键词 C型肝炎样病毒属 病毒包膜蛋白质类 基因表达 HCV 丙型肝炎

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硅橡胶包膜炭床血液灌流器的实验研究报告

6

作者 叶有新 朱琮 +6 位作者 王逸民 顾亚琴 朱立中 吴兔荣 吴光华 徐敏 杨松森 《浙江大学学报（医学版）》 CAS 1982年第S1期191-192,共2页

血液灌流是七十年代发展起来的血液净化新技术,本文介绍硅橡胶包膜炭床血液灌流器(SACB)的制作工艺及其特点。根据人工细胞原理,直径2mm微粒活性炭经硅橡胶包膜后,电镜扫描观察呈多孔网状结构,测定血液相容性良好。灌流器内选用固定炭... 血液灌流是七十年代发展起来的血液净化新技术,本文介绍硅橡胶包膜炭床血液灌流器(SACB)的制作工艺及其特点。根据人工细胞原理,直径2mm微粒活性炭经硅橡胶包膜后,电镜扫描观察呈多孔网状结构,测定血液相容性良好。灌流器内选用固定炭床式。 展开更多

关键词 硅橡胶 电工橡胶 包膜 病毒结构 血液灌流器

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丙型肝炎病毒E2蛋白结合蛋白的酵母双杂交筛选研究 被引量：7

7

作者 张健 成军 +5 位作者 王琳 邵清 陆荫英 梁耀东 陈天艳 洪源 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期766-767,共2页

HCV的包膜蛋白E2 (E2 )的生物学特性与HCV感染的慢性化和抗病毒免疫关系极为密切。为了进一步阐明这个多功能蛋白质与宿主蛋白的关系 ,采用酵母双杂交系统 3,在酵母细胞融合蛋白表达型人肝cDNA文库中进行筛选 ,得到 76个与E2特异性结合... HCV的包膜蛋白E2 (E2 )的生物学特性与HCV感染的慢性化和抗病毒免疫关系极为密切。为了进一步阐明这个多功能蛋白质与宿主蛋白的关系 ,采用酵母双杂交系统 3,在酵母细胞融合蛋白表达型人肝cDNA文库中进行筛选 ,得到 76个与E2特异性结合的阳性克隆 ,包括人类肝细胞癌相关抗原、硒结合蛋白、核苷传送系统、果糖磷酸激酶等 2 6种已知功能蛋白质基因和 14个未知功能基因。本研究结果为阐明E2在HCV致病中的作用提供了重要研究线索。 展开更多

关键词 肝炎病毒 丙型 病毒包膜蛋白质类 酵母双杂交

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霍奇金淋巴瘤潜伏膜蛋白1、p53及bcl-2蛋白的表达及意义 被引量：3

8

作者 齐宗利 赵彤 +3 位作者 周新华 张进华 韩西群 朱梅刚 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第3期225-227,共3页

目的探讨EB病毒潜伏膜蛋白(LMP1)、p53、bcl-2的蛋白表达在霍奇金淋巴瘤(HL)致病机制中的作用及其意义。方法对收集的31例石蜡包埋的HL组织进行LMP1、p53、bcl-2蛋白免疫组化染色。结果LMP1、p53、bcl-2的阳性率分别为58.1%、61.3%、35... 目的探讨EB病毒潜伏膜蛋白(LMP1)、p53、bcl-2的蛋白表达在霍奇金淋巴瘤(HL)致病机制中的作用及其意义。方法对收集的31例石蜡包埋的HL组织进行LMP1、p53、bcl-2蛋白免疫组化染色。结果LMP1、p53、bcl-2的阳性率分别为58.1%、61.3%、35.5%。LMP1与p53相关性分析具有统计学意义。结论p53可能参与LMP1在HL致病机制中的作用,bcl-2可能与HL的致病关系不大。 展开更多

关键词 霍奇金病 疱疹病毒4型 人 病毒包膜蛋白质类 蛋白质P53 原癌基因蛋白质C-BCL-2 免疫组织化学

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登革2型病毒重组E蛋白的生物学特性分析 被引量：2

9

作者 魏惠永 江丽芳 +2 位作者 曾祥凤 方丹云 郭辉玉 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期214-216,220,共4页

[目的]检测重组 D2V全长 E蛋白纯化后的免疫反应性与抗原性,为其亚单位疫苗研制奠定基础.[方法]酵母表达上清超滤浓缩后用金属螯合亲和层析(MCAC)法过柱,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术观察蛋白条带.将纯化蛋白与... [目的]检测重组 D2V全长 E蛋白纯化后的免疫反应性与抗原性,为其亚单位疫苗研制奠定基础.[方法]酵母表达上清超滤浓缩后用金属螯合亲和层析(MCAC)法过柱,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术观察蛋白条带.将纯化蛋白与组氨酸抗体、 D2V E单抗进行斑点印迹和蛋白印迹,以确定纯化物是否为含组氨酸尾的 D2V E融合蛋白,并用 ELISA检测纯化 E蛋白与不同 DV抗体的结合反应.用纯化的重组 D2V E蛋白免疫小鼠后测定其产生的抗体类型与滴度,以分析其抗原性.[结果]表达产物经 MCAC柱纯化获得单一的相对分子质量为 69× 103的蛋白,组氨酸抗体与 D2V E单抗的印迹试验证实该条带就是含多聚组氨酸尾型特异的重组 E蛋白(rEgp) , ELISA显示纯化的 rEgp保留有免疫反应性及型特异性,内糖苷酶 H消化证实其含有 N联高甘露糖残基.接种 rEgp可诱生针对 D2V抗原与重组 E蛋白的高效抗体.[结论]纯化的 D2V全长 E蛋白保留其免疫原性和免疫反应性,并具有型特异性. 展开更多

关键词 登革热病毒 膜糖蛋白类 重组蛋白质 分离 纯化 抗体 层析法

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不同来源潜伏膜蛋白1基因转染对鼻咽癌CNE1细胞生长的影响 被引量：1

10

作者 黄河 黄培春 +1 位作者 张素珍 陈锦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1890-1894,共5页

目的 :探讨不同来源的EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)基因转染对人高分化鼻咽癌 (NPC)细胞系CNE1生长的影响。方法 :采用脂质体介导法分别将含有来源于B95 - 8淋巴细胞标准株的LMP1基因 (B95 - 8-LMP1)和来源于NPC组织的LMP1基因 (CAO -LMP1... 目的 :探讨不同来源的EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)基因转染对人高分化鼻咽癌 (NPC)细胞系CNE1生长的影响。方法 :采用脂质体介导法分别将含有来源于B95 - 8淋巴细胞标准株的LMP1基因 (B95 - 8-LMP1)和来源于NPC组织的LMP1基因 (CAO -LMP1)的质粒转染CNE1;RT -PCR和蛋白印迹法分别鉴定LMP1mRNA和蛋白表达 ;结晶紫法、流式细胞术和平板克隆形成法测定不同来源的LMP1对CNE1生长特性的影响。结果 :成功建立稳定表达不同来源LMP1的CNE1细胞系。两种不同来源的LMP1均可促进CNE1细胞的生长 (P <0 0 1) ;CAO -LMP1比B95 - 8-LMP1具有更强促进CNE1生长的作用 (P <0 0 1)。结论 :不同来源LMP1对CNE1的体外生长均有促进作用 ,CAO -LMP1比B95 - 展开更多

关键词 膜蛋白质类 鼻咽肿瘤 疱疹病毒4型 人

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转基因动物中慢病毒载体包装的优化

11

作者 谭碧君 《上海畜牧兽医通讯》 2008年第2期15-16,共2页

慢病毒载体作为基因治疗载体发展起来,现已用于转基因动物制备。本实验用磷酸钙沉淀法将转移质粒(pCCL-hCMV-eGFP)、包装质粒(pCMVΔR8.9)、包膜蛋白质粒(pMDG(VSV-G))三质粒共转染来源于人胚肾细胞系的包装细胞—293T,转染48h后收集病... 慢病毒载体作为基因治疗载体发展起来,现已用于转基因动物制备。本实验用磷酸钙沉淀法将转移质粒(pCCL-hCMV-eGFP)、包装质粒(pCMVΔR8.9)、包膜蛋白质粒(pMDG(VSV-G))三质粒共转染来源于人胚肾细胞系的包装细胞—293T,转染48h后收集病毒上清,采用6孔板培养感染细胞,荧光显微镜计数EGFP阳性细胞法测定病毒滴度。载体滴度达2×107TU/ml左右。 展开更多

关键词 慢病毒载体 转基因动物 磷酸钙沉淀法 转移质粒 包装质粒 包膜蛋白质粒

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携带中国株HIV-1 gp120基因的重组腺病毒的构建及其感染巨噬细胞的形态学研究 被引量：2

12

作者 王通 马文心 +2 位作者 郭嘉慧 陈智鹏 崔毅峙 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1034-1038,共5页

目的:构建携带中国株HIV-1 gp120基因并可感染小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)的重组腺病毒。方法:利用AdMax腺病毒构建系统,以双质粒共转染人胚肾转化细胞293Ad5+细胞,完成重组腺病毒载体包装,并进一步扩增和纯化。通过ELISA测定gp120的蛋... 目的:构建携带中国株HIV-1 gp120基因并可感染小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)的重组腺病毒。方法:利用AdMax腺病毒构建系统,以双质粒共转染人胚肾转化细胞293Ad5+细胞,完成重组腺病毒载体包装,并进一步扩增和纯化。通过ELISA测定gp120的蛋白产量,以确认目的基因重组与表达成功。以Karber法对病毒进行TCID50滴度测定,利用BMM进行感染复数(MOI)流式细胞术测定,并利用荧光显微镜观察细胞活化形态。结果:成功构建AdMax-HIV-1 gp120(简称Ad-gp120)及其对照病毒(Ad-GFP),其滴度分别为108.3和108.1TCID50/mL。这些病毒可感染BMM,MOI测定结果表明2种重组腺病毒感染BMM和293Ad5+细胞的能力接近,验证了上述TCID50滴度结果。Ad-gp120可在293Ad5+细胞中表达gp120蛋白,并可感染和诱导BMM相关形态改变。结论:成功构建Ad-gp120,其感染可致BMM出现形态发生改变。 展开更多

关键词 重组腺病毒 HIV包膜蛋白质gp120 骨髓来源巨噬细胞

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小儿恶性淋巴瘤与EB病毒的相关性 被引量：2

13

作者 黄春鑫 李捷艳 +3 位作者 郑雪梅 林岳生 倪继军 黄君健 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期348-349,共2页

关键词 EB病毒 膜蛋白质类 儿童 P53蛋白 恶性淋巴瘤

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酵母双杂合体系研究丙型肝炎病毒进入肝细胞的受体 被引量：6

14

作者 梁庆华 蒋栋 +3 位作者 谢尧 高建恩 范涛 陶其敏 《北京医科大学学报》 CSCD 2000年第6期540-542,560,共4页

目的 :用酵母双杂合体系筛选肝细胞cDNA文库 ,寻找与丙型肝炎 (丙肝 )病毒 (hepatitisCvirus ,HCV)胞膜蛋白 2 (E2 )相作用蛋白的基因 ,探讨HCV与肝细胞的相互作用 ,寻找HCV进入细胞的受体。方法 :以HCVE2蛋白胞外区片段 ,构建酵母双杂... 目的 :用酵母双杂合体系筛选肝细胞cDNA文库 ,寻找与丙型肝炎 (丙肝 )病毒 (hepatitisCvirus ,HCV)胞膜蛋白 2 (E2 )相作用蛋白的基因 ,探讨HCV与肝细胞的相互作用 ,寻找HCV进入细胞的受体。方法 :以HCVE2蛋白胞外区片段 ,构建酵母双杂合体系中“饵”载体 ,从成人肝细胞cDNA文库筛选与HCVE2相作用蛋白的基因。结果 :筛出的阳性克隆基因序列分析后 ,经GenBank查询 ,与人的apoCⅢ同源 ,同源性为 98%。 结论 :HCVE2蛋白能与人的apoCⅢ在酵母双杂合体系中结合 。 展开更多

关键词 肝炎病毒 丙型 病毒包膜蛋白质类 脂蛋白类 VLDL 酵母菌 肝炎 丙型

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血清HBV大、中、小表面蛋白检测的临床意义 被引量：2

15

作者 庄辉 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期528-531,共4页

本文综述了HBV大、中、小表面蛋白相关研究进展,包括基因结构、特点、检测方法和临床意义等方面。截至目前,关于HBV大、中、小表面蛋白的临床意义尚不明确,亟需进一步研究探讨。

关键词 肝炎病毒 乙型 病毒包膜蛋白质类 诊断

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解码新型冠状病毒

16

《湖南农业》 2020年第3期40-40,共1页

2019新型冠状病毒(2019-nCoV),因2019年武汉病毒性肺炎病例而被发现,2020年1月12日被世界卫生组织命名。冠状病毒是一个大型病毒家族,已知可引起感冒以及中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)等较严重疾病。新型冠状病毒是... 2019新型冠状病毒(2019-nCoV),因2019年武汉病毒性肺炎病例而被发现,2020年1月12日被世界卫生组织命名。冠状病毒是一个大型病毒家族,已知可引起感冒以及中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)等较严重疾病。新型冠状病毒是从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。1.什么是新型冠状病毒?冠状病毒是一种单股正链RNA病毒,是自然界广泛存在的一大类病毒,因病毒包膜上有向四周伸出的突起,形如花冠而得名。 展开更多

关键词 类病毒 病毒性肺炎 冠状病毒 单股正链RNA病毒 病毒包膜

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