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抗登革病毒Ⅰ~Ⅳ型特异性单克隆抗体的研制 被引量:1
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作者 郭辉玉 刘乐和 +5 位作者 罗瑞仙 熊惠萍 陈佩嘉 杨国平 江丽芳 任铁玲 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1995年第S1期6-8,共3页
用登革病毒免疫Balb/c小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞,经PEG融合处理,共获得90株分泌登革病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。按照单抗质量标准,对杂交瘤细胞进行了严格的鉴定,筛选出19株具有型特异的细胞株,再从中选出4... 用登革病毒免疫Balb/c小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞,经PEG融合处理,共获得90株分泌登革病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。按照单抗质量标准,对杂交瘤细胞进行了严格的鉴定,筛选出19株具有型特异的细胞株,再从中选出4个血清型的型特异的单抗组成诊断盒,可用于登革病毒的准确的鉴定和分型。 展开更多
关键词 抗体 单克隆/生物合成 登革热病毒 抗体 病毒/生物合成
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HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化 被引量:4
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作者 彭方毅 姜海蓉 +5 位作者 陈远翔 陈盛珍 林治华 彭方亮 赵卫兵 陈保德 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期395-398,418,共5页
目的:构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109... 目的:构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆。其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功。提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定。结果:在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV16L1抗体发生特异性反应。结论:HPV16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 病毒蛋白质类/生物合成 病毒蛋白质类/遗传学 大肠杆菌/遗传学 基因表达 克隆 分子 乳头状瘤病毒 人/遗传学 HPV16L1 原核表达 GST融合蛋白 疫苗
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鼻咽癌体外传代细胞株SUNE中EBV-LMP_1全基因的扩增
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作者 陈宜芳 郭辉玉 +1 位作者 汪慧民 李满枝 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1997年第S1期38-41,共4页
用长片段高保真度PCR扩增系统(expandTMhighfidelityPCRsystem)从鼻咽癌(NPC)体外传代细胞株SUNE中扩增出EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白(LMP1)全基因,经凝胶电泳分析和DNA斑点杂... 用长片段高保真度PCR扩增系统(expandTMhighfidelityPCRsystem)从鼻咽癌(NPC)体外传代细胞株SUNE中扩增出EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白(LMP1)全基因,经凝胶电泳分析和DNA斑点杂交进行鉴定。扩增片段长度为3.43kb,相当于B95-8细胞EBV基因序列位置为170033~166608nt,包括LMP1基因的上游启动子/增强子序列、LMP1编码序列的3个外显子、两个内含子及下游polyA信号序列。LMP1全基因的扩增对于深入研究LMP1基因的结构与功能以及LMP1在NPC发生发展中的作用机制具有十分重要的价值。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤/遗传学 疱疹病毒4型.人/遗传学 基因.病毒/遗传学 病毒基质蛋白质类/生物合成
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