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携带SARS-CoV刺突蛋白N端片段重组腺病毒的构建
被引量：
2
1
作者
刘然义
黄必军
+5 位作者
黄嘉凌
吴立志
张如华
陈汉奎
曾益新
黄文林
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第B03期32-34,共3页
【目的】构建携带 SARS 冠状病毒刺突蛋白 N 端基因片段的重组腺病毒。【方法】从 SARS 病毒 cDNA 扩增刺突蛋白 N 端基因片段(-45～1469nt,截短的 S1区,S_N),插入腺病毒穿梭质粒 pShuttle,通过体外连接法构建重组腺病毒Ad-S_N。用 Ad-S...
【目的】构建携带 SARS 冠状病毒刺突蛋白 N 端基因片段的重组腺病毒。【方法】从 SARS 病毒 cDNA 扩增刺突蛋白 N 端基因片段(-45～1469nt,截短的 S1区,S_N),插入腺病毒穿梭质粒 pShuttle,通过体外连接法构建重组腺病毒Ad-S_N。用 Ad-S_N 感染 Vero-E6细胞,通过 RT-PCR 和 Western blot 法检测 S_N 的表达。【结果】克隆的 S_N 基因序列与文献报道基本一致;Ad-S_N 基因组结构与预期一致。在 Ad-S_N 感染的 Vero-E6细胞中存在 S_N 基因的转录和分泌型 S_N 蛋白的表达。【结论】体外连接法是一种简便易行的重组腺病毒载体构建方法;重组腺病毒 Ad-S_N 能正确表达分泌型 S_N 蛋白,可用于诱导抗 SARS 免疫的动物实验研究。
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关键词
SARS
病毒
刺突蛋白
体外连接法
疫苗/腺病毒载体
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职称材料
题名
携带SARS-CoV刺突蛋白N端片段重组腺病毒的构建
被引量：
2
1
作者
刘然义
黄必军
黄嘉凌
吴立志
张如华
陈汉奎
曾益新
黄文林
机构
中山大学肿瘤防治中心
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第B03期32-34,共3页
基金
国家"973计划"SARS 研究专项(2003CB514107)
教育部抗非典科技攻关项目(教技司【2003】64号)
+1 种基金
广东省抗非典科技攻关项目(粤科社字【2003】263号)
广州市科技攻关项目(2003Z3-E0451)
文摘
【目的】构建携带 SARS 冠状病毒刺突蛋白 N 端基因片段的重组腺病毒。【方法】从 SARS 病毒 cDNA 扩增刺突蛋白 N 端基因片段(-45～1469nt,截短的 S1区,S_N),插入腺病毒穿梭质粒 pShuttle,通过体外连接法构建重组腺病毒Ad-S_N。用 Ad-S_N 感染 Vero-E6细胞,通过 RT-PCR 和 Western blot 法检测 S_N 的表达。【结果】克隆的 S_N 基因序列与文献报道基本一致;Ad-S_N 基因组结构与预期一致。在 Ad-S_N 感染的 Vero-E6细胞中存在 S_N 基因的转录和分泌型 S_N 蛋白的表达。【结论】体外连接法是一种简便易行的重组腺病毒载体构建方法;重组腺病毒 Ad-S_N 能正确表达分泌型 S_N 蛋白,可用于诱导抗 SARS 免疫的动物实验研究。
关键词
SARS
病毒
刺突蛋白
体外连接法
疫苗/腺病毒载体
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
R563.3 [医药卫生—呼吸系统]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
携带SARS-CoV刺突蛋白N端片段重组腺病毒的构建
刘然义
黄必军
黄嘉凌
吴立志
张如华
陈汉奎
曾益新
黄文林
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
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