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猕猴桃AcSPS1基因克隆及其在番茄中的过表达分析
1
作者
陈成
王依
+5 位作者
刘凤丽
万春雁
钱亚明
狄华涛
霍恒志
阎永齐
《西南农业学报》
北大核心
2025年第8期1637-1643,共7页
【目的】探究猕猴桃(Actinidia chinensis)蔗糖磷酸合酶(Sucrose phosphate synthase,SPS)的基因特性及其在果实发育过程中的作用,为猕猴桃果实品质改良提供理论基础。【方法】以猕猴桃为试材,采用生物信息学方法鉴定成熟果实高表达AcS...
【目的】探究猕猴桃(Actinidia chinensis)蔗糖磷酸合酶(Sucrose phosphate synthase,SPS)的基因特性及其在果实发育过程中的作用,为猕猴桃果实品质改良提供理论基础。【方法】以猕猴桃为试材,采用生物信息学方法鉴定成熟果实高表达AcSPS1基因,对该基因进行克隆、生物信息学分析、亚细胞定位以及遗传转化获得异源过表达番茄株系。【结果】从‘脐红’猕猴桃果实中克隆得到AcSPS1全长序列,该基因序列共3153 bp,编码1050个氨基酸,分子质量为117.98 kD,亲水性系数为-0.424。蛋白二级结构预测分析表明α-螺旋占比41.52%,β-转角占比6.48%,延伸链占比14.19%,无规则蜷曲占比37.81%。氨基酸序列多重比对分析发现猕猴桃AcSPS1与茶CsSPS1氨基酸系列相似度最高,达90.39%。系统进化树分析发现猕猴桃AcSPS1与茶CsSPS1具有密切的进化关系。拟南芥原生质体亚细胞定位分析表明AcSPS1定位在细胞质中。通过构建AcSPS1过表达载体并在Micro-Tom番茄中异源表达,PCR检测及蛋白水平检测得到3个过表达转基因转系。与野生型番茄相比,3个转基因株系果实中AcSPS1基因相对表达量均显著增加。【结论】鉴定并克隆得到猕猴桃果实高表达基因AcSPS1,蛋白定位在细胞质中,并成功获得异源过表达番茄材料,为进一步探究其在猕猴桃果实蔗糖生物合成中的功能提供参考。
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关键词
猕猴桃
蔗糖磷酸合酶
基因克隆
番茄过表达分析
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职称材料
桑树花青素合成相关基因MnANS和MnFLS的克隆及其在番茄中过表达分析
2
作者
代洁
唐清霞
+9 位作者
曾益春
刘江
何琴
危玲
佟万红
姚永权
郑继川
李永远
刘刚
黄盖群
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2024年第12期2602-2608,共7页
【目的】探究桑树(Morus notabilis)花青素生物合成途径中花青素合酶(Anthocyanidin synthase/Leucoanthocyanidin dioxygenase,ANS/LDOX)和黄酮醇合酶(Flavonol synthase,FLS)基因的功能,为桑椹品质改良提供理论基础。【方法】克隆2个...
【目的】探究桑树(Morus notabilis)花青素生物合成途径中花青素合酶(Anthocyanidin synthase/Leucoanthocyanidin dioxygenase,ANS/LDOX)和黄酮醇合酶(Flavonol synthase,FLS)基因的功能,为桑椹品质改良提供理论基础。【方法】克隆2个桑树花青素合成途径的关键基因MnANS和MnFLS,将这2个基因构建至过表达载体中,并通过农杆菌介导的遗传转化将2个载体转化至番茄Micro-Tom中。【结果】基因和蛋白序列分析表明,桑树MnFLS基因编码含335个氨基酸残基的蛋白,预测分子量为38.3 kDa,等电点为5.91;MnANS基因编码含358个氨基酸残基的蛋白,预测分子量为40.9 kDa,等电点为5.62。MnFLS蛋白和MnANS蛋白均含有Fe2OG-dioxygenase保守结构域。经转基因阳性鉴定,获得含MnFLS和MnANS基因的转基因番茄植株。表型观察结果显示,转MnANS基因番茄植株的茎秆呈深紫色,表明MnANS蛋白对花青素的积累具有潜在影响。转MnFLS基因番茄植株并未表显出明显的表型变化。【结论】通过对转基因番茄植株表型和基因表达量的综合分析,初步揭示MnANS基因在桑树花青素合成中的作用,并为桑树品质改良提供重要的分子生物学信息和进一步研究桑果颜色和花青素代谢工程奠定基础。
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关键词
桑树
花青素生物合成
MnANS基因
MnFLS基因
基因克隆
番茄过表达分析
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职称材料
题名
猕猴桃AcSPS1基因克隆及其在番茄中的过表达分析
1
作者
陈成
王依
刘凤丽
万春雁
钱亚明
狄华涛
霍恒志
阎永齐
机构
江苏丘陵地区镇江农业科学研究所
西安市阎良区农业技术推广中心
邯郸科技职业学院
江苏省农业科学院果树研究所/江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室
出处
《西南农业学报》
北大核心
2025年第8期1637-1643,共7页
基金
江苏现代农业产业技术体系(JATS[2023]407)
江苏省农业科技自主创新项目[CX(23)2002]
江苏省亚夫科技服务项目[KF(23)1203]。
文摘
【目的】探究猕猴桃(Actinidia chinensis)蔗糖磷酸合酶(Sucrose phosphate synthase,SPS)的基因特性及其在果实发育过程中的作用,为猕猴桃果实品质改良提供理论基础。【方法】以猕猴桃为试材,采用生物信息学方法鉴定成熟果实高表达AcSPS1基因,对该基因进行克隆、生物信息学分析、亚细胞定位以及遗传转化获得异源过表达番茄株系。【结果】从‘脐红’猕猴桃果实中克隆得到AcSPS1全长序列,该基因序列共3153 bp,编码1050个氨基酸,分子质量为117.98 kD,亲水性系数为-0.424。蛋白二级结构预测分析表明α-螺旋占比41.52%,β-转角占比6.48%,延伸链占比14.19%,无规则蜷曲占比37.81%。氨基酸序列多重比对分析发现猕猴桃AcSPS1与茶CsSPS1氨基酸系列相似度最高,达90.39%。系统进化树分析发现猕猴桃AcSPS1与茶CsSPS1具有密切的进化关系。拟南芥原生质体亚细胞定位分析表明AcSPS1定位在细胞质中。通过构建AcSPS1过表达载体并在Micro-Tom番茄中异源表达,PCR检测及蛋白水平检测得到3个过表达转基因转系。与野生型番茄相比,3个转基因株系果实中AcSPS1基因相对表达量均显著增加。【结论】鉴定并克隆得到猕猴桃果实高表达基因AcSPS1,蛋白定位在细胞质中,并成功获得异源过表达番茄材料,为进一步探究其在猕猴桃果实蔗糖生物合成中的功能提供参考。
关键词
猕猴桃
蔗糖磷酸合酶
基因克隆
番茄过表达分析
Keywords
Actinidia chinensis
Sucrose phosphate synthase
Gene cloning
Tomato over-expression analysis
分类号
S663.4 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
桑树花青素合成相关基因MnANS和MnFLS的克隆及其在番茄中过表达分析
2
作者
代洁
唐清霞
曾益春
刘江
何琴
危玲
佟万红
姚永权
郑继川
李永远
刘刚
黄盖群
机构
四川省农业科学院蚕业研究所/四川省农业科学院特种经济动植物研究所
四川省园艺作物技术推广总站
出处
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2024年第12期2602-2608,共7页
基金
四川省财政自主创新专项(2022ZZCX085)
四川省重点研发计划项目(2024YFCY0009)
+3 种基金
四川省农业科学院“1+9”揭榜挂帅科技攻关项目(1+9KJGG004)
国家现代农业产业技术体系四川蚕桑创新团队项目(SCCXTD-2024-17)
国家现代农业产业技术体系项目(CARS-18-SYZ19)
南充市研发资金项目(23YYJCYJ0041)。
文摘
【目的】探究桑树(Morus notabilis)花青素生物合成途径中花青素合酶(Anthocyanidin synthase/Leucoanthocyanidin dioxygenase,ANS/LDOX)和黄酮醇合酶(Flavonol synthase,FLS)基因的功能,为桑椹品质改良提供理论基础。【方法】克隆2个桑树花青素合成途径的关键基因MnANS和MnFLS,将这2个基因构建至过表达载体中,并通过农杆菌介导的遗传转化将2个载体转化至番茄Micro-Tom中。【结果】基因和蛋白序列分析表明,桑树MnFLS基因编码含335个氨基酸残基的蛋白,预测分子量为38.3 kDa,等电点为5.91;MnANS基因编码含358个氨基酸残基的蛋白,预测分子量为40.9 kDa,等电点为5.62。MnFLS蛋白和MnANS蛋白均含有Fe2OG-dioxygenase保守结构域。经转基因阳性鉴定,获得含MnFLS和MnANS基因的转基因番茄植株。表型观察结果显示,转MnANS基因番茄植株的茎秆呈深紫色,表明MnANS蛋白对花青素的积累具有潜在影响。转MnFLS基因番茄植株并未表显出明显的表型变化。【结论】通过对转基因番茄植株表型和基因表达量的综合分析,初步揭示MnANS基因在桑树花青素合成中的作用,并为桑树品质改良提供重要的分子生物学信息和进一步研究桑果颜色和花青素代谢工程奠定基础。
关键词
桑树
花青素生物合成
MnANS基因
MnFLS基因
基因克隆
番茄过表达分析
Keywords
Mulberry
Anthocyanin biosynthesis
MnANS
MnFLS
Gene cloning
Tomato overexpression analysis
分类号
S888.3 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猕猴桃AcSPS1基因克隆及其在番茄中的过表达分析
陈成
王依
刘凤丽
万春雁
钱亚明
狄华涛
霍恒志
阎永齐
《西南农业学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
桑树花青素合成相关基因MnANS和MnFLS的克隆及其在番茄中过表达分析
代洁
唐清霞
曾益春
刘江
何琴
危玲
佟万红
姚永权
郑继川
李永远
刘刚
黄盖群
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2024
0
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