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番茄褪绿病毒的研究进展
1
作者 魏莹 李治文 +4 位作者 严婉荣 吉训聪 罗激光 陈绵才 王会芳 《中国蔬菜》 北大核心 2025年第6期31-38,共8页
番茄是全球三大贸易蔬菜之一,在国际蔬菜贸易中占有重要地位。番茄病毒病是番茄生产中常见且危害严重的病害之一,发病后无法治愈。番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)由粉虱科(Aleyrodidae)介体昆虫以半持久非循环型方式传播。... 番茄是全球三大贸易蔬菜之一,在国际蔬菜贸易中占有重要地位。番茄病毒病是番茄生产中常见且危害严重的病害之一,发病后无法治愈。番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)由粉虱科(Aleyrodidae)介体昆虫以半持久非循环型方式传播。感染病毒的番茄植株表现为叶片黄化、脉间褪绿、叶缘卷曲、发育受阻等症状,严重影响番茄产量和品质。本文综述了近年来关于番茄褪绿病毒(ToCV)的研究进展,对病毒的分布特征、寄主范围、分类及粒子特性、传播途径及特性、基因组结构及功能、常用检测方法以及防治策略等方面进行了讨论,并提出了ToCV研究过程中亟待解决的一些问题,旨在为未来开展ToCV相关研究提供参考。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 基因功能 防治方法
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番茄褪绿病毒外壳蛋白多克隆抗体的制备和应用
2
作者 伍维兰 聂三妹 +5 位作者 张坤 鲁洲 李战彪 季英华 郭灵芳 章松柏 《湖北农业科学》 2025年第2期197-201,213,共6页
为建立番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)的快速检测技术,通过RT-PCR技术克隆病毒的主要外壳蛋白(Coat protein,CP)基因,利用Gateway技术将其重组至原核表达载体中,转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中诱导表达,将纯... 为建立番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)的快速检测技术,通过RT-PCR技术克隆病毒的主要外壳蛋白(Coat protein,CP)基因,利用Gateway技术将其重组至原核表达载体中,转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中诱导表达,将纯化后的CP作为抗原免疫日本大耳兔制备ToCV CP多克隆抗体。间接ELISA显示ToCV CP多克隆抗体的效价为1∶12 800;Western blot和田间试验结果显示多克隆抗体有很好的特异性和灵敏度。ToCV CP多克隆抗体可用于田间ToCV的检测。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒(tocv) 外壳蛋白(CP) 原核表达 多克隆抗体 制备
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多毛番茄DCL、AGO和RDR基因家族全基因组鉴定及其对番茄褪绿病毒感染和非生物胁迫响应的分析
3
作者 康忱 田哲娟 +4 位作者 高亢 郝玲玉 刘伟 李亚栋 吴志明 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期1-17,共17页
对多毛番茄全基因组的Dicer-like(DCL)、Argonaute(AGO)和RNA依赖性RNA聚合酶(RDR)基因家族进行生物信息学和表达模式分析,为深入研究DCL、AGO和RDR基因家族在多毛番茄响应非生物胁迫和病毒感染过程中的功能提供参考。以拟南芥DCL、AGO... 对多毛番茄全基因组的Dicer-like(DCL)、Argonaute(AGO)和RNA依赖性RNA聚合酶(RDR)基因家族进行生物信息学和表达模式分析,为深入研究DCL、AGO和RDR基因家族在多毛番茄响应非生物胁迫和病毒感染过程中的功能提供参考。以拟南芥DCL、AGO和RDR基因为参考序列,利用本地Perl语言和Pfam、SMART等软件检索多毛番茄LA1777基因组并确定多毛番茄DCL、AGO和RDR基因家族成员。通过ExPASy、GSDS 2.0、MEGA、Tbtools、SWISS-MODEL等工具对多毛番茄DCL、AGO和RDR家族基因进行生物信息学分析。根据非生物胁迫、番茄褪绿病毒(ToCV)处理和实时荧光定量PCR技术分析该类基因的表达模式。从多毛番茄中鉴定得到7个ShDCL、15个ShAGO和6个ShRDR基因,分别分布在第5,7,6条染色体上,其编码的蛋白与其他植物DCL、AGO和RDR结构相似,均含有该家族特有的保守结构域。系统发育分析表明,这些基因被分为4个亚组,与普通番茄之间具有较高的结构和功能相似性。ShDCL2a、ShDCL2c、ShDCL3、ShDCL4、ShAGO1b、ShAGO3、ShAGO4b、ShAGO5、ShAGO7、ShAGO10a、ShAGO10b、ShRDR1、ShRDR2、ShRDR3a、ShRDR6a和ShRDR6b在多种非生物胁迫和ToCV感染后显著上调表达,推测这些基因在非生物胁迫和病毒侵染过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 多毛番茄 DCL AGO RDR 非生物胁迫 番茄褪绿病毒(tocv)
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番茄褪绿病毒病高效综合防治技术 被引量：2
4
作者 闫宇翔 刘运堂 《河南农业》 2024年第17期53-53,共1页
番茄褪绿病毒病是近年在驻马店市发生较为严重的病毒病之一。该病发生严重时可导致番茄减产10%~40%,严重影响栽培效益。因此,相关部门根据多年田间经验研究出高效综合防治技术,供种植户参考。一、主要症状(一)苗期症状通常情况下,感染... 番茄褪绿病毒病是近年在驻马店市发生较为严重的病毒病之一。该病发生严重时可导致番茄减产10%~40%,严重影响栽培效益。因此,相关部门根据多年田间经验研究出高效综合防治技术,供种植户参考。一、主要症状(一)苗期症状通常情况下,感染病毒的番茄苗于定植后15 d会出现症状,即顶部叶片黄化、下部成熟叶片叶脉间轻微褪绿,可导致植株发育迟滞矮小。 展开更多
关键词 叶片黄化 栽培效益 综合防治技术 番茄苗 成熟叶片 褪绿 番茄褪绿病毒病 种植户
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番茄褪绿病毒病综合防治技术 被引量：1
5
作者 郭凯 《农业工程技术》 2024年第33期67-68,共2页
番茄褪绿病毒病早期症状类似于缺素症,若不及时有效防治,会造成番茄产量下降,甚至绝收。该文介绍了山东省沂水县番茄褪绿病毒病的发生症状与发病规律,总结了该病的综合防控技术,旨在为生产实践提供参考。
关键词 番茄褪绿病毒病 防治技术 发病规律
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宁夏银川地区复合侵染番茄5种病毒的分子鉴定 被引量：1
6
作者 王涵 高艳明 +1 位作者 李建设 郜雅欣 《甘肃农业大学学报》 北大核心 2025年第2期172-178,共7页
【目的】检测与鉴定宁夏地区侵害番茄的病毒病种类。【方法】在宁夏银川地区采集叶子表现为整体变脆、卷曲、畸形、变黄、出现明显叶脉等症状的番茄叶片共121份,用已报道的8对引物进行RT-PCR/PCR扩增,并对产物测序结合分析。【结果】宁... 【目的】检测与鉴定宁夏地区侵害番茄的病毒病种类。【方法】在宁夏银川地区采集叶子表现为整体变脆、卷曲、畸形、变黄、出现明显叶脉等症状的番茄叶片共121份,用已报道的8对引物进行RT-PCR/PCR扩增,并对产物测序结合分析。【结果】宁夏银川地区番茄植株存在多种病毒复合侵染情况,复合侵染样品占总样品数量的94.21%,占阳性样品的95.80%,其中3种病毒复合侵染的样本数量最多,ToCV+ToMV+TSWV复合侵染病毒为当地优势毒源;在宁夏地区首次检出单一样品复合侵染5种番茄病毒,分别为番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)、南方番茄病毒(southern tomato virus,STV)、番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus,TSWV)、番茄斑驳花叶病毒(tomato mottle mosaic virus,ToMMV)和番茄褪绿病毒(tomato chlorosis virus,ToCV),根据以上病毒的部分基因序列构建进化树,分析结果表明他们的分离物序列分别与已报道的核苷酸序列的一致性均在99%以上。故宁夏银川地区番茄受ToMV、STV、TSWV、ToMMV和ToCV 5种病毒复合侵染,其中ToMMV为首次在宁夏银川地区检出。【结论】宁夏地区番茄病毒病复合侵染现象在田间普遍发生且爆发严重,本研究为宁夏地区番茄病毒病的诊断、预警与综合防控提供科学依据。 展开更多
关键词 番茄病毒病 番茄花叶病毒 南方番茄病毒 番茄斑萎病毒 番茄斑驳花叶病毒 番茄褪绿病毒 复合侵染
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警惕番茄褪绿病毒在我国的传播和危害 被引量：43
7
作者 周涛 杨普云 +3 位作者 赵汝娜 师迎春 原锴 范在丰 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期196-199,共4页
番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)侵染番茄引起番茄褪绿病毒病。发病植株下部叶片黄化、脉间褪绿、边缘轻微卷曲,叶片光合作用显著降低,果实变小,产量和品质明显下降。该病毒最早于1998年在美国佛罗里达州发现,随后在世界多... 番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)侵染番茄引起番茄褪绿病毒病。发病植株下部叶片黄化、脉间褪绿、边缘轻微卷曲,叶片光合作用显著降低,果实变小,产量和品质明显下降。该病毒最早于1998年在美国佛罗里达州发现,随后在世界多地陆续报道。我国首先于2004年在台湾报道,2013年又在北京和山东发现并鉴定了该病毒,同时在辣椒上检测到该病毒。ToCV属于长线形病毒科(Closteroviridae)毛形病毒属(Crinivirus)成员,基因组为二分体正义单链RNA,由粉虱传播。经初步调查和检测,ToCV在我国北京、山东、河北、天津等省市相继发生,给当地番茄生产造成了严重危害。ToCV传播迅速,成为我国番茄生产中又一重要病毒,防控形势严峻。基于以上原因,建议有关部门立即采取相应预防和防治措施,组织开展相关研究和攻关,控制该病毒在我国的传播和危害。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 脉间褪绿 粉虱 防治措施
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天津地区番茄褪绿病毒的分子检测和鉴定 被引量：36
8
作者 高利利 孙国珍 +4 位作者 王勇 高苇 张春祥 张安胜 竺晓平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期211-215,共5页
为明确2014年夏天在天津番茄种植区采集到疑似感染番茄褪绿病毒的番茄样品的侵染病原,利用To CV外壳蛋白和热激蛋白的特异引物进行反转录PCR(RT-PCR)检测,分别扩增得到特异核苷酸片段。序列分析表明,HSP70核苷酸序列与已登录的番茄褪绿... 为明确2014年夏天在天津番茄种植区采集到疑似感染番茄褪绿病毒的番茄样品的侵染病原,利用To CV外壳蛋白和热激蛋白的特异引物进行反转录PCR(RT-PCR)检测,分别扩增得到特异核苷酸片段。序列分析表明,HSP70核苷酸序列与已登录的番茄褪绿病毒日本分离物Tochigi(AB513442)相似性为99.5%,CP氨基酸和核苷酸序列与已登录的番茄褪绿病毒日本分离物Tochigi(AB513443)相似性分别为99.2%和99.3%,表明天津地区的番茄受到To CV侵染,且天津与日本To CV分离物序列相似性最高。由于调查地区番茄黄化曲叶病毒发生普遍,针对To CV阳性样品利用TYLCV特异性引物进行了分子检测,扩增产物序列与TYLCV以色列株系分离物的相似性均在99.0%以上,表明2种病毒在田间发生复合侵染,该研究首次明确天津地区的番茄受到To CV侵染和To CV与TYLCV的复合侵染。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 番茄黄化曲叶病毒 复合侵染 分子检测
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侵染番茄的番茄褪绿病毒山东泰安分离物的分子鉴定和序列分析 被引量：18
9
作者 赵黎明 李刚 +3 位作者 刘永杰 刘永光 孙国珍 竺晓平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期34-39,共6页
2012年秋季,在山东泰安番茄主要种植区中采集到叶片褪绿,叶脉颜色变深的疑似番茄褪绿病毒病和番茄侵染性褪绿病毒病的番茄样品。利用番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)的特异引物ToCV1/ToCV2和番茄侵染性褪绿病毒(Tomato infec... 2012年秋季,在山东泰安番茄主要种植区中采集到叶片褪绿,叶脉颜色变深的疑似番茄褪绿病毒病和番茄侵染性褪绿病毒病的番茄样品。利用番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)的特异引物ToCV1/ToCV2和番茄侵染性褪绿病毒(Tomato infectious chlorosis virus,TICV)的特异引物TICV1/TICV2分别对样品进行扩增,最后仅得到利用引物ToCV1/ToCV2扩增的101bp的核苷酸序列,对该核苷酸序列克隆并测序。序列比对表明,山东泰安地区分离物与已登录的番茄褪绿病毒(ToCV)分离物相似性都在99%以上。随后,对山东泰安种植区ToCV番茄分离物进行外壳蛋白(CP)及热激蛋白(HSP70)序列的扩增、克隆和测序(GenBank登录号KC812620/KC812625),经NCBI BLAST比对发现,目的序列与番茄褪绿病毒日本番茄分离物ToCV-Japan/Tochigi(GenBank登录号AB513442/AB513443)相似性最高为99%,同属于毛型病毒属的番茄褪绿病毒,这是首次明确山东地区番茄受到番茄褪绿病毒的侵染。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 RT-PCR 检测 HSP70 CP 序列分析
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侵染甜椒的番茄褪绿病毒的分子鉴定 被引量：30
10
作者 赵汝娜 王蓉 +4 位作者 师迎春 张桂娟 原锴 范在丰 周涛 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期128-130,共3页
番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)是一种由粉虱传播的RNA病毒,可以侵染番茄和辣椒等常见蔬菜,已在世界多地造成严重危害。2012年在北京市大兴区调查蔬菜病毒病时发现保护地栽培的甜椒植株表现脉间褪绿症状,且植株上烟粉虱数量... 番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)是一种由粉虱传播的RNA病毒,可以侵染番茄和辣椒等常见蔬菜,已在世界多地造成严重危害。2012年在北京市大兴区调查蔬菜病毒病时发现保护地栽培的甜椒植株表现脉间褪绿症状,且植株上烟粉虱数量多,初步推测为ToCV危害。通过提取显症样品总RNA,利用ToCV特异性引物进行反转录PCR,扩增得到463bp的目标条带。通过测序和核苷酸序列比对分析,表明该序列与国外已报道的ToCV HSP70h(the heat shock protein 70homolog,热激蛋白70家族)基因序列相似性为99%。这是对ToCV在我国侵染甜椒的首次报道。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 甜椒
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番茄褪绿病毒与番茄黄化曲叶病毒复合侵染的分子鉴定 被引量：39
11
作者 赵黎明 李刚 +3 位作者 刘永光 国家进 魏家鹏 竺晓平 《中国蔬菜》 北大核心 2014年第12期15-20,共6页
2013年秋季,在山东寿光设施番茄植株上采集到叶片脉间褪绿黄化、叶片边缘卷曲、叶片皱缩,后期叶片变厚、变脆,并伴随着植株矮化的疑似番茄褪绿病毒和番茄黄化曲叶病毒复合侵染的样本。分别利用番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,To ... 2013年秋季,在山东寿光设施番茄植株上采集到叶片脉间褪绿黄化、叶片边缘卷曲、叶片皱缩,后期叶片变厚、变脆,并伴随着植株矮化的疑似番茄褪绿病毒和番茄黄化曲叶病毒复合侵染的样本。分别利用番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,To CV)外壳蛋白基因(CP)序列引物CP-F/CP-R和番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)特异引物TY1-R/TY1-F、TY2-R/TY2-F、TY3-R/TY3-F对其进行检测、扩增,分别得到774bp(Gen Bank登录号KC709510)和2781bp(Gen Bank登录号KJ546418)的核苷酸序列。经序列测序后表明,KC709510与Gen Bank已登录的番茄褪绿病毒To CV-BJ(KC311375)分离物相似性为99.6%,KJ546418与Gen Bank已登录的番茄黄化曲叶病毒TYLCV-SDWF-L7(KC999850)分离物相似性为99.6%。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 番茄黄化曲叶病毒 RT-PCR检测 复合侵染
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河南番茄褪绿病毒的分子鉴定 被引量：21
12
作者 胡京昂 万秀娟 +3 位作者 李自娟 黄文 李武高 应芳卿 《中国蔬菜》 北大核心 2015年第12期25-28,共4页
2014年在河南省郑州、济源、新郑、中牟、扶沟等地发现大量保护地番茄植株的叶脉间出现褪绿症状,疑似由番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,To CV)侵染引起。以这5个地区的番茄病叶为样本提取总RNA,利用ToCV HSP70h(Heat shock protei... 2014年在河南省郑州、济源、新郑、中牟、扶沟等地发现大量保护地番茄植株的叶脉间出现褪绿症状,疑似由番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,To CV)侵染引起。以这5个地区的番茄病叶为样本提取总RNA,利用ToCV HSP70h(Heat shock protein 70 homolog,热激蛋白70家族)基因的特异引物对样本进行RT-PCR检测,均扩增出约460bp大小的目的条带。PCR产物测序和序列分析结果表明,该序列与国际上报道的ToCV HSP70h的序列相似性达到99%以上,表明ToCV是为害河南省番茄产区造成褪绿症状的主要病原之一。 展开更多
关键词 河南省 番茄褪绿病毒 RT-PCR 分子鉴定
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侵染广东番茄的番茄褪绿病毒分子鉴定 被引量：17
13
作者 汤亚飞 何自福 +1 位作者 佘小漫 蓝国兵 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期133-137,共5页
在广东番茄上发现一种新病害,病株表现为叶片褪绿,叶脉颜色变深及叶片增厚等症状。利用番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)HSP70基因的两对特异引物对番茄病样进行RT-PCR检测,结果表明,从所采集的6份病样中均扩增到预期大小的DN... 在广东番茄上发现一种新病害,病株表现为叶片褪绿,叶脉颜色变深及叶片增厚等症状。利用番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)HSP70基因的两对特异引物对番茄病样进行RT-PCR检测,结果表明,从所采集的6份病样中均扩增到预期大小的DNA特异片段。对其中1份样品的扩增片段进行克隆与序列分析,结果表明,扩增片段包括1个长度为1 665个核苷酸的完整病毒基因,其核苷酸序列与已报道的ToCV HSP70基因有较高的同源性,表明广东番茄受到了ToCV的侵染。但ToCV广东番茄分离物的HSP70序列与国内外已报道的各分离物的同源性均低于82%,存在较大差异,其中与塞浦路斯tomato、约旦JU_20分离物的同源性最高,为81.8%。这是ToCV在广东发生的首次报道,也是该病毒HSP70基因序列存在显著差异分离物的首次发现。 展开更多
关键词 番茄病毒病 番茄褪绿病毒 HSP70基因
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北方四省区番茄褪绿病毒的分子鉴定 被引量：13
14
作者 王翠琳 冯佳 +4 位作者 孙晓辉 王少立 赵静 刘金亮 竺晓平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期141-145,共5页
2015-2016年间,在山西省、内蒙古自治区、辽宁省、吉林省采集到疑似感染番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)的番茄植株。利用扩增ToCV外壳蛋白(coat protein,CP)和类热激蛋白(heat shock protein 70homolog,HSP70h)基因片段的两... 2015-2016年间,在山西省、内蒙古自治区、辽宁省、吉林省采集到疑似感染番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)的番茄植株。利用扩增ToCV外壳蛋白(coat protein,CP)和类热激蛋白(heat shock protein 70homolog,HSP70h)基因片段的两对特异性引物,通过RT-PCR对疑似样品进行分子检测,得到970bp和1 864bp的特异条带,经测序、比对确定为ToCV。序列分析表明,山西晋中分离物SXJZ(KX853540)的CP核苷酸序列与河南安阳分离物HNAYHX(KP264983)相似性为99.7%,内蒙古呼和浩特分离物NMHHHT(KU204709)和辽宁大连分离物LNDL(KU204707)的CP核苷酸序列与国内已报道的山东寿光分离物SDSG(KC709510)相似性分别为99.5%和99.7%,吉林长春分离物JLCC(KU306111)的CP核苷酸序列与山东聊城分离物SDLC(KC812622)的相似性为99.8%。而HSP70h核苷酸序列的相似性分析表明,山西晋中分离物SXJZ(KX853539)与日本分离物Tochigi(AB513442)相似性为99.4%,内蒙古呼和浩特分离物NMHHHT(KU204710)、辽宁大连分离物LNDL(KU204708)和吉林长春分离物JLCC(KX880384)与山东寿光分离物SDSG(KC709510)相似性分别为99.7%、99.8%和99.7%。试验结果明确了番茄褪绿病毒已蔓延传播到我国山西、内蒙古及东北地区。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 CP HSP70h RT-PCR
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警惕烟粉虱传播的番茄褪绿病毒病在我国快速扩散 被引量：25
15
作者 郑慧新 夏吉星 +1 位作者 周小毛 张友军 《中国蔬菜》 北大核心 2016年第4期22-26,共5页
2013～2014年连续两年对我国番茄主产区烟粉虱携带番茄褪绿病毒（ToCV）的情况进行了监测。结果发现，在2013年全国采集的16个地区烟粉虱样本中，山西运城、山西太原、山东商河、陕西杨凌、北京海淀5个地区烟粉虱携带ToCV，烟粉虱样品携... 2013～2014年连续两年对我国番茄主产区烟粉虱携带番茄褪绿病毒（ToCV）的情况进行了监测。结果发现，在2013年全国采集的16个地区烟粉虱样本中，山西运城、山西太原、山东商河、陕西杨凌、北京海淀5个地区烟粉虱携带ToCV，烟粉虱样品携带 ToCV 的带毒率均低于20%；在2014年全国采集的17个地区烟粉虱样本中，北京海淀、浙江杭州、山东商河、山西运城、陕西杨凌、内蒙古等6个地区的烟粉虱携带 ToCV，且除北京外带毒率均大于50%。山西、陕西、浙江、内蒙古地区 ToCV 的发生均为首次报道，且2014年烟粉虱田间种群带毒率明显高于2013年。番茄褪绿病毒病的快速扩散趋势需引起高度重视。 展开更多
关键词 烟粉虱 番茄褪绿病毒 检测
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番茄核体系酵母文库的构建及ToCV CP互作蛋白的筛选
16
作者 王利娜 高亢 +5 位作者 康忱 田哲娟 李亚栋 王鹏 李朝炜 吴志明 《华北农学报》 北大核心 2025年第3期34-43,共10页
旨在从cDNA文库中筛选潜在与番茄褪绿病毒(ToCV)外壳蛋白(CP)互作的蛋白,探究ToCV的侵染机制及CP在侵染过程中的功能,以应对当前越夏、秋延后番茄生产中因番茄褪绿病毒病大肆传播而致使番茄产量和品质严重受影响的状况。以感染ToCV的Mon... 旨在从cDNA文库中筛选潜在与番茄褪绿病毒(ToCV)外壳蛋白(CP)互作的蛋白,探究ToCV的侵染机制及CP在侵染过程中的功能,以应对当前越夏、秋延后番茄生产中因番茄褪绿病毒病大肆传播而致使番茄产量和品质严重受影响的状况。以感染ToCV的Moneymaker番茄品种作为试验材料,采用Gateway技术构建感染ToCV的番茄核体系酵母cDNA文库,并构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-CP(CP-BD)。以CP为诱饵蛋白,通过核体系酵母文库筛选出上百种参与多种生理过程的潜在互作蛋白,并进一步通过一对一的酵母双杂交验证以及NCBI BLAST比对确定与ToCV CP互作的相关蛋白。构建了核体系酵母文库,初级文库总克隆数为1.60×10^(7),重组率达100%,平均插入片段长度超过1000 bp;次级文库总克隆数同样为1.60×10^(7),重组率为100%,平均插入片段长度大于1000 bp,达到质量标准,满足后续酵母杂交试验的条件。由文库筛选得到的ToCV CP互作蛋白涵盖了细胞过程、生物调节、细胞物质运输等类别,其中在病毒复制和运输、侵染宿主细胞以及调节宿主细胞的代谢和细胞周期等生物过程相关的蛋白数量较多。此外,还涉及蛋白质结合、核酸结合、水解酶活性等相关蛋白,其中RNA酶最为丰富,在病毒侵染过程中发挥重要作用。最终确定了HSPs、DnaJ与TCPs等30种与ToCV CP互作的蛋白,为后续深入研究ToCV的侵染机制及CP在侵染过程中的功能奠定了良好基础。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 外壳蛋白 GATEWAY技术 酵母双杂交 核体系
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陕西杨凌番茄褪绿病毒的分子检测 被引量：7
17
作者 王志荣 李晓东 +5 位作者 朱玉 黄泽军 高建昌 国艳梅 杜永臣 王孝宣 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期81-88,共8页
近年来在陕西番茄生产区出现了一种新病害,病株表现为叶片褪绿,叶脉颜色变深及叶片增厚,果实变小发白,严重影响番茄产量及经济效益,2016年发病极为严重,部分产区甚至绝收。该病疑似由番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)引起。利... 近年来在陕西番茄生产区出现了一种新病害,病株表现为叶片褪绿,叶脉颜色变深及叶片增厚,果实变小发白,严重影响番茄产量及经济效益,2016年发病极为严重,部分产区甚至绝收。该病疑似由番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)引起。利用ToCV特异引物对感病番茄样品进行RT-PCR检测,结果从所采集的4份病样中均检测到ToCV预期大小的特异片段。对ToCV外壳蛋白CP基因和类热激蛋白HSP70h基因进行克隆与序列分析,ToCV-YL1 CP基因774个核苷酸序列与已报道的ToCVCP基因有较高的一致性,与山东青岛和山西晋中分离物同源性为100%。ToCV-YL1 HSP70h基因1 665个核苷酸序列与已报道的ToCV HSP70h基因有较高的同源性,与中国、韩国、日本、美国、希腊分离物同源性达到99%以上。研究表明ToCV已传播至陕西地区。 展开更多
关键词 番茄 番茄褪绿病毒病 CP基因 HSP70h基因
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天津地区番茄褪绿病毒的分子检测与基因组部分序列分析 被引量：8
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作者 金凤媚 薛俊 +2 位作者 宋建 于海涛 段红英 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第2期23-27,共5页
为了确定天津番茄产区是否发生了番茄褪绿病毒病,了解该病毒天津分离物的主要基因是否发生变异,对该地区发生的To CV进行了分子检测,并对该病毒的外壳蛋白(CP)和热激蛋白70类似物(Hsp70h)的核苷酸和氨基酸进行了序列分析。结果表明,天... 为了确定天津番茄产区是否发生了番茄褪绿病毒病,了解该病毒天津分离物的主要基因是否发生变异,对该地区发生的To CV进行了分子检测,并对该病毒的外壳蛋白(CP)和热激蛋白70类似物(Hsp70h)的核苷酸和氨基酸进行了序列分析。结果表明,天津分离物CP蛋白的核苷酸和氨基酸序列与已报道的具有代表性的不同国家的分离物相似性均在97.3%以上。Hsp70h蛋白的核酸和氨基酸序列与已报道的具有代表性的不同国家的分离物相似性均在97.2%以上。表明CP和Hsp70h蛋白是2个最保守的蛋白。这是首次在分子水平上证明番茄褪绿病毒在天津地区为害。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 分子检测 外壳蛋白 热激蛋白70类似物 基因序列分析
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胶东半岛地区番茄褪绿病毒的快速检测与鉴定 被引量：13
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作者 李洁 李慧 +3 位作者 丁天波 张静 张传义 褚栋 《山东农业科学》 2015年第2期86-89,共4页
番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,To CV)是最近传入我国的重要植物病毒,可通过媒介昆虫烟粉虱传播。为了探索利用媒介昆虫快速、高效检测该病毒的方法,本研究对胶东半岛重要蔬菜产区青岛和烟台两地烟粉虱体内To CV进行检测与鉴定... 番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,To CV)是最近传入我国的重要植物病毒,可通过媒介昆虫烟粉虱传播。为了探索利用媒介昆虫快速、高效检测该病毒的方法,本研究对胶东半岛重要蔬菜产区青岛和烟台两地烟粉虱体内To CV进行检测与鉴定。结果表明:该地区烟粉虱种群体内均可检测到To CV,说明利用媒介昆虫烟粉虱可以快速检测该入侵病毒。 展开更多
关键词 番茄褪绿病毒 烟粉虱 检测 生物入侵
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一种基于RPA的番茄褪绿病毒检测方法 被引量：4
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作者 宋建 薛俊 +2 位作者 孙海波 王姝 金凤媚 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期168-170,184,共4页
番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)引起番茄褪绿病毒病,给番茄生产造成严重危害。开发快速准确的检测方法对该病害的防控具有重要意义。利用番茄褪绿病毒外壳蛋白(CP)基因序列,设计特异性引物,建立了ToCV的重组酶聚合酶等温扩增... 番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)引起番茄褪绿病毒病,给番茄生产造成严重危害。开发快速准确的检测方法对该病害的防控具有重要意义。利用番茄褪绿病毒外壳蛋白(CP)基因序列,设计特异性引物,建立了ToCV的重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)检测方法,同时分析了该方法的灵敏度和特异性。结果表明,建立的ToCV-RPA方法在38℃恒温下40 min可从ToCV阳性的番茄样品中扩增出246 bp的特异性条带。扩增时间短,对设备要求低,且与番茄其他病毒无交叉反应,特异性好,灵敏度可达到PCR方法的10倍,适用于ToCV的快速检测。 展开更多
关键词 番茄 番茄褪绿病毒 重组酶聚合酶等温扩增
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