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番茄果实特异性LYC-B干扰载体的构建及在不同颜色果实中的表达特异性验证
被引量：
3
1
作者
王巧丽
梁燕
+3 位作者
张振才
李翠
李云洲
王玲慧
《中国蔬菜》
北大核心
2014年第5期11-18,共8页
为了研究番茄LYC-B 干扰对类胡萝卜素合成主要酶和主要代谢产物的影响,构建了果实特异性的番茄红素β- 环化酶LYC-B 干扰载体,并验证了其在不同颜色番茄果实中的有效性.依据X13437.1 扩增番茄果实特异启动子E8,构建了果实特异性载体E8-p...
为了研究番茄LYC-B 干扰对类胡萝卜素合成主要酶和主要代谢产物的影响,构建了果实特异性的番茄红素β- 环化酶LYC-B 干扰载体,并验证了其在不同颜色番茄果实中的有效性.依据X13437.1 扩增番茄果实特异启动子E8,构建了果实特异性载体E8-pBI121,其在粉色、红色、绿色和紫色的番茄果实中均能表达.依据X86452.1 扩增番茄LYC-B 从61～861bp 间长度为801 bp 的片段LYC-B1 和从 480～781 bp 间长度为302 bp 的片段 LYC-B2,构建了以CaMV 35S 为启动子的LYC-B干扰表达载体pBI121-B1B2,以E8 替换CaMV 35S,构建了果实特异性干扰载体E8-pBI121-B1B2.采用农杆菌注射法分别侵染番茄叶片和果实,GUS 染色显示,pBI121-B1B2 在叶片、果实和种子中均表达,E8-pBI121-B1B2 只在果实和种子中表达.
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关键词
番茄
类胡萝卜素
e
8
启动子
CaMV35S
启动子
GUS染色
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职称材料
牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因果实特异表达载体的构建及意义
2
作者
戴海燕
王华
+1 位作者
文少敏
解娜
《山东医药》
CAS
北大核心
2011年第31期22-24,共3页
目的构建含牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因的番茄果实特异表达载体,并提高抗原基因的表达量和免疫原性,为其在番茄果实内表达和研制有效的转基因植物牙周炎疫苗奠定基础。方法通过PCR获得番茄果实特异表达启动子E8的核心序列片段(约1.1...
目的构建含牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因的番茄果实特异表达载体,并提高抗原基因的表达量和免疫原性,为其在番茄果实内表达和研制有效的转基因植物牙周炎疫苗奠定基础。方法通过PCR获得番茄果实特异表达启动子E8的核心序列片段(约1.11 kb),同时合成通过柔性接头连接的霍乱毒素B亚基(Cholera Tox-in B Subunit,CTB)和牙龈卟啉单胞菌菌毛FimA(266-337)(约600 bp)序列的基因片段,利用重叠区扩增基因拼接法将两基因片段连接,得到重组片段E8-CTB-FimA(266-337),双酶切E8-CTB-FimA(266-337)片段和植物表达载体pBI121,酶切产物连接后,获得重组载体pBI E8-CTB-FimA(266-337),利用酶切方法和测序方法对pBIE8-CTB-FimA(266-337)进行鉴定。结果基因测序及酶切结果表明特异表达载体已成功构建。结论本研究成功构建了含牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因的番茄果实特异表达载体;该载体可用于转基因植物牙周炎疫苗的研制。
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关键词
牙龈卟啉单胞菌
番茄果实特异启动子e8
菌毛蛋白
霍乱毒素B亚基
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职称材料
酵母SAMDC基因表达载体构建以及农杆菌介导转化番茄的研究
被引量：
3
3
作者
丁淑丽
李建勇
+2 位作者
邹宜静
卢钢
曹家树
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期621-627,共7页
SAMDC(腺苷甲硫氨酸脱羧酶)是参与植物多胺合成的一个关键酶.通过GenBank上已经发表的序列,设计两对引物,分别以酵母基因组DNA和番茄基因组DNA为模板克隆出SAMDC基因和E8启动子.构建了以CaMV35S和E8为启动子的两个SAMDC基因植物表达载体...
SAMDC(腺苷甲硫氨酸脱羧酶)是参与植物多胺合成的一个关键酶.通过GenBank上已经发表的序列,设计两对引物,分别以酵母基因组DNA和番茄基因组DNA为模板克隆出SAMDC基因和E8启动子.构建了以CaMV35S和E8为启动子的两个SAMDC基因植物表达载体,酶切分子鉴定后,经农杆菌介导以叶盘法转入番茄中,获得了转基因植株.经PCR检测和X-Gluc组织化学染色检测,目的基因已经成功转入番茄中.为研究多胺在番茄中代谢活性以及SAMDC基因对番茄抗逆性和番茄果色的影响提供了研究基础.
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关键词
SAMDC基因
e
8
启动子
番茄
载体构建
农杆菌介导
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职称材料
题名
番茄果实特异性LYC-B干扰载体的构建及在不同颜色果实中的表达特异性验证
被引量：
3
1
作者
王巧丽
梁燕
张振才
李翠
李云洲
王玲慧
机构
西北农林科技大学园艺学院
出处
《中国蔬菜》
北大核心
2014年第5期11-18,共8页
基金
陕西省科技统筹创新工程计划项目(2011KTCL02-03)
西北农林科技大学农业科技推广基金项目(TGZX2012-02)
文摘
为了研究番茄LYC-B 干扰对类胡萝卜素合成主要酶和主要代谢产物的影响,构建了果实特异性的番茄红素β- 环化酶LYC-B 干扰载体,并验证了其在不同颜色番茄果实中的有效性.依据X13437.1 扩增番茄果实特异启动子E8,构建了果实特异性载体E8-pBI121,其在粉色、红色、绿色和紫色的番茄果实中均能表达.依据X86452.1 扩增番茄LYC-B 从61～861bp 间长度为801 bp 的片段LYC-B1 和从 480～781 bp 间长度为302 bp 的片段 LYC-B2,构建了以CaMV 35S 为启动子的LYC-B干扰表达载体pBI121-B1B2,以E8 替换CaMV 35S,构建了果实特异性干扰载体E8-pBI121-B1B2.采用农杆菌注射法分别侵染番茄叶片和果实,GUS 染色显示,pBI121-B1B2 在叶片、果实和种子中均表达,E8-pBI121-B1B2 只在果实和种子中表达.
关键词
番茄
类胡萝卜素
e
8
启动子
CaMV35S
启动子
GUS染色
Keywords
Ch
e
rry tomato
Carot
e
noid
e
8
promot
e
r
CaMV 35S promot
e
r
GUS
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因果实特异表达载体的构建及意义
2
作者
戴海燕
王华
文少敏
解娜
机构
海南医学院口腔医学院
海南医学院海南省热带病重点实验室
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2011年第31期22-24,共3页
基金
海南省自然科学基金资助项目(807096)
文摘
目的构建含牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因的番茄果实特异表达载体,并提高抗原基因的表达量和免疫原性,为其在番茄果实内表达和研制有效的转基因植物牙周炎疫苗奠定基础。方法通过PCR获得番茄果实特异表达启动子E8的核心序列片段(约1.11 kb),同时合成通过柔性接头连接的霍乱毒素B亚基(Cholera Tox-in B Subunit,CTB)和牙龈卟啉单胞菌菌毛FimA(266-337)(约600 bp)序列的基因片段,利用重叠区扩增基因拼接法将两基因片段连接,得到重组片段E8-CTB-FimA(266-337),双酶切E8-CTB-FimA(266-337)片段和植物表达载体pBI121,酶切产物连接后,获得重组载体pBI E8-CTB-FimA(266-337),利用酶切方法和测序方法对pBIE8-CTB-FimA(266-337)进行鉴定。结果基因测序及酶切结果表明特异表达载体已成功构建。结论本研究成功构建了含牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因的番茄果实特异表达载体;该载体可用于转基因植物牙周炎疫苗的研制。
关键词
牙龈卟啉单胞菌
番茄果实特异启动子e8
菌毛蛋白
霍乱毒素B亚基
Keywords
porphyromonas ginglvalis
tomato fruit-sp
e
cific promot
e
r
e
8
firabria
e
chol
e
ra toxin B subunit
分类号
R781.4 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
酵母SAMDC基因表达载体构建以及农杆菌介导转化番茄的研究
被引量：
3
3
作者
丁淑丽
李建勇
邹宜静
卢钢
曹家树
机构
浙江大学园艺系农业部园艺作物生长发育与生物技术重点实验室
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期621-627,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(30571268)
国家高技术研究发展计划863计划资助项目(2002AA207013)
文摘
SAMDC(腺苷甲硫氨酸脱羧酶)是参与植物多胺合成的一个关键酶.通过GenBank上已经发表的序列,设计两对引物,分别以酵母基因组DNA和番茄基因组DNA为模板克隆出SAMDC基因和E8启动子.构建了以CaMV35S和E8为启动子的两个SAMDC基因植物表达载体,酶切分子鉴定后,经农杆菌介导以叶盘法转入番茄中,获得了转基因植株.经PCR检测和X-Gluc组织化学染色检测,目的基因已经成功转入番茄中.为研究多胺在番茄中代谢活性以及SAMDC基因对番茄抗逆性和番茄果色的影响提供了研究基础.
关键词
SAMDC基因
e
8
启动子
番茄
载体构建
农杆菌介导
Keywords
SAMDC g
e
n
e
e
8
promot
e
r
tomato
v
e
ctor construction
Agrobact
e
rium turn
e
faci
e
ns g
e
n
e
transformation
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
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1
番茄果实特异性LYC-B干扰载体的构建及在不同颜色果实中的表达特异性验证
王巧丽
梁燕
张振才
李翠
李云洲
王玲慧
《中国蔬菜》
北大核心
2014
3
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职称材料
2
牙龈卟啉单胞菌菌毛融合抗原基因果实特异表达载体的构建及意义
戴海燕
王华
文少敏
解娜
《山东医药》
CAS
北大核心
2011
0
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职称材料
3
酵母SAMDC基因表达载体构建以及农杆菌介导转化番茄的研究
丁淑丽
李建勇
邹宜静
卢钢
曹家树
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
3
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职称材料
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