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不同类型基质对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析寡糖和多糖的影响
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作者 张子豪 王君巧 聂少平 《食品科学》 北大核心 2025年第14期225-237,共13页
本实验研究二元基质(氨基-4-羟基苯甲酸(amino-4-hydroxybenzoic acid,AHB)/2,5-二羟基苯甲酸(2,5-dihydroxybenzoic acid,DHB)、3-羟基香豆素(3-hydroxycoumarin,3-HC)/DHB)、离子液体基质(N,N-二甲基苯胺/DHB、2-(对羟基苯偶氮)苯甲酸... 本实验研究二元基质(氨基-4-羟基苯甲酸(amino-4-hydroxybenzoic acid,AHB)/2,5-二羟基苯甲酸(2,5-dihydroxybenzoic acid,DHB)、3-羟基香豆素(3-hydroxycoumarin,3-HC)/DHB)、离子液体基质(N,N-二甲基苯胺/DHB、2-(对羟基苯偶氮)苯甲酸/1,1,3,3-四甲基胍(1,1,3,3-tetramethylguanidine,TMG)、4-羟基香豆酸/TMG、2,4,6-三羟基苯乙酮(2,4,6-trihydroxyacetophenone,THAP)/TMG、N-甲基苯胺(N-methylaniline,NMA)/DHB)和反应性基质(3-肼基苯甲酸(3-hydrazylbenzoic acid,3-HBA)/DHB、6-肼烟酸(6-hydrazine niacin,HYNIC)/DHB、2-肼吡啶(2-hydrazopyridine,2-HPM))对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测麦芽八糖、半乳糖醛酸三糖和Dextran T6效果的影响,并与3种固体基质对比(DHB、THAP、α-氰基-4-羟基肉桂酸)。以麦芽八糖为例,研究各基质溶剂对检测寡糖效果的影响,针对反应性基质还研究了溶剂、反应时间、反应温度对衍生化率的影响。结果表明,对于麦芽八糖,3类基质均具有较理想的检测效果,谱图重现性好、质谱峰强度增加。对于反应性基质,其衍生化的反应温度至少为65℃,其中2-HPM在各条件下均具有高衍生效率((96.28±0.28)%),且能在较短时间(15 min)内完成衍生化反应,但是衍生化寡糖的信噪比(RSN)不高,而3-HBA/DHB和HYNIC/DHB衍生化寡糖的RSN高,但是衍生化效率较低,且反应时间至少需要60 min。此外,寡糖浓度对衍生化效率影响显著,当浓度低于108 fmol/L,衍生化寡糖信号很低或未被检测到。当THAP及3-HBA/DHB为基质时,其半乳糖醛酸三糖的质谱信号显著高于其余基质类型;对于Dextran T6,二元基质和离子液体基质的检测效果较优,其中AHB/DHB、3-HC/DHB、THAP/TMG、NMA/DHB为基质具有更广的分子质量测定范围,最高均可检测聚合度为36的多糖质谱峰。本实验系统研究不同类型基质对MALDI-TOF-MS检测3种不同类型碳水化合物效果的影响,研究结果可为碳水化合物的分析鉴定提供参考依据。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 基质 寡糖 多糖
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱结合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌的应用
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作者 张肖 蔡辉 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第2期168-173,共6页
目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌的应用。方法 收集2023年1-12月苏州市第九人民医院检验科血培养仪报警时间<48 h、单一病原菌感染的无菌体液阳性标... 目的 探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌的应用。方法 收集2023年1-12月苏州市第九人民医院检验科血培养仪报警时间<48 h、单一病原菌感染的无菌体液阳性标本(血液、胸腹水、胆汁、脑脊液)共284份。所有标本均通过比浊仪进行菌液浓度检测,利用MALDI-TOF MS技术,根据病原菌浓度对应的分值快速评估鉴定结果的可靠性。结果 使用MALDI-TOF MS进行菌种鉴定时,各菌种可信结果的最低菌液浓度如下:大肠埃希菌3.0 mcf(1 mcf=3×10^(8) CFU/mL),肺炎克雷伯菌2.0 mcf,金黄色葡萄球菌3.0 mcf,粪肠球菌3.5 mcf,念珠菌3.5 mcf。VITEK 2 鉴定、常规MALDI-TOF MS 鉴定与MALDI-TOF MS直接鉴定进行对比:常规MALDI-TOF MS鉴定与VITEK 鉴定结果一致的有282份;MALDI-TOF MS直接鉴定>1.7的有272份,灵敏度为95.8% (272/284)。三种鉴定法得到的鉴定结果差异无统计学意义(χ^(2)=2.09,P=0.55)。结论 MALDI-TOF MS技术联合血清分离胶促凝管法及比浊仪直接鉴定无菌体液病原菌,是病原菌鉴定的可靠创新技术,优点为快速准确,为临床尽快提供病原学的检出依据,具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 比浊法 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 快速鉴定 无菌体液 病原菌
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半夏炮制过程中毒性凝集素蛋白的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析 被引量:1
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作者 黄益曼 李春晖 +5 位作者 柏家辉 陆颖洁 李添 董志颖 苏越 郭寅龙 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期226-236,共11页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)受灵敏度和重复性的影响,对完整蛋白的定量分析存在困难。本研究采用纤维素纳米晶体(CNC)辅助MALDI-TOF MS,结合内标法定量分析半夏炮制过程中半夏凝集素(PTL),通过优化CNC辅助样本制备的时长和比例,以麦胚凝集素(TVL)为内标,直接分析不同炮制程度半夏各炮制品及其浸泡上清液中PTL含量。结果表明,CNC辅助MALDI样本制备有效提升了MALDI-TOF MS定量分析的线性和重复性。随着炮制时间的延长,姜半夏、清半夏和法半夏炮制品的PTL含量逐渐下降,浸泡上清液中PTL含量逐渐上升。其中,由于pH值的改变,法半夏炮制品浸泡上清液中PTL含量呈先上升后下降的趋势。此外,将该方法应用于不同饮片生产企业的多批次半夏炮制品饮片中,均未检出PTL。该方法操作简便,可有效分析半夏炮制过程中PTL含量的变化,为研究半夏炮制过程对PTL的影响提供了参考。 展开更多
关键词 半夏 炮制方法 半夏凝集素(PTL) 纤维素纳米晶体(CNC) 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在李斯特菌检测和鉴定中的应用 被引量:17
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作者 龚艳清 陈信忠 +3 位作者 杨俊萍 郭书林 马群飞 石椿丽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第6期209-214,共6页
为建立食品中各种李斯特菌的快速检测和鉴定方法,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对单增李斯特菌、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔斯李斯特菌和格氏李斯特菌5种李斯特菌进行检测,并与传统的生化鉴定方法(VITEK... 为建立食品中各种李斯特菌的快速检测和鉴定方法,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对单增李斯特菌、绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌、威尔斯李斯特菌和格氏李斯特菌5种李斯特菌进行检测,并与传统的生化鉴定方法(VITEK 2)和聚合酶链式反应(PCR)方法检测结果进行比较;用不同培养基和不同培养时间培养的单增李斯特菌对该方法进行检测,还对60份人工感染5种李斯特菌的食品样品分别进行MALDI-TOF-MS、PCR以及传统生化方法的检测和鉴定。结果表明:MALDI-TOF-MS能够快速、可靠地区分上述5种李斯特菌,而且具有很好的稳定性和重复性,在检测时间、重复性和准确性方面的总体表现优于传统生化鉴定方法。MALDI-TOF-MS技术适用于对李斯特菌等食源性病原菌进行高通量、低成本的快速鉴定。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 李斯特菌 检测 鉴定
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沙门菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱方法研究 被引量:14
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作者 赵剑虹 高艳 +6 位作者 李书明 张士尧 王恒伟 顾琳 韩庆华 焦洋 陈倩 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期705-709,共5页
目的优化基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法对沙门菌鉴定的条件,研究不同前处理方法对MALDI靶板污染情况,建立安全高效的检测沙门菌的方法。方法应用MALDI-TOF-MS法对4株沙门菌标准菌株进行不同培养条件、样品前处理方... 目的优化基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法对沙门菌鉴定的条件,研究不同前处理方法对MALDI靶板污染情况,建立安全高效的检测沙门菌的方法。方法应用MALDI-TOF-MS法对4株沙门菌标准菌株进行不同培养条件、样品前处理方式检验,确立优化的鉴定程序,对不同处理方式下MALDI靶板进行检测,采用优化的前处理方法对33株腹泻病人粪便标本中分离的沙门菌进行数据采集和图谱比对,所得鉴定结果与常规血清学分型结果比较。结果不同前处理方法、不同的培养基上沙门菌标准菌株均准确鉴定为沙门菌。33株沙门菌用MALDI-TOF-MS方法全部准确鉴定为沙门菌属,19株沙门菌在种的鉴定水平上与血清分型结果完全一致,14株沙门菌在种的鉴定水平上与血清分型结果不一致。不同前处理方法的MALDI靶板上均未发现细菌生长。结论 MALDI-TOF-MS方法能快速、简便、安全、准确鉴定属水平沙门菌,是一种有效的沙门菌检测鉴定的手段。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) 沙门菌 鉴定
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应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌对厄他培南的水解能力 被引量:7
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作者 李媛睿 刘婧娴 +2 位作者 俞静 陈峰 刘瑛 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期608-613,共6页
目的应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测产KPC-2、NDM-1、VIM-2、IMP-1与IMP-4型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌水解厄他培南的能力。方法收集2009年6月-2013年12月上海交通大学医学院附属新华医院各种临床标本中分离的... 目的应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测产KPC-2、NDM-1、VIM-2、IMP-1与IMP-4型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌水解厄他培南的能力。方法收集2009年6月-2013年12月上海交通大学医学院附属新华医院各种临床标本中分离的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE),用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶的表型筛选,用PCR扩增方法检测其碳青霉烯酶基因,并经测序确认。应用MALDI-TOF MS进行厄他培南水解预试验以确定最适厄他培南浓度及孵育时间,随后采用预试验中的最适条件,应用MALDI-TOF MS检测CRE水解厄他培南的能力。结果 108株CRE中,有102株改良Hodge试验阳性,其中90株产KPC-2、4株产NDM-1、3株产VIM-2、2株产IMP-1、2株产IMP-4、1株同时产KPC-2和IMP-4型碳青霉烯酶,且在2 h内均能水解厄他培南;另外6株CRE改良Hodge试验阴性,未检测出上述碳青霉烯酶基因,且不水解厄他培南。结论临床微生物实验室应用MALDI-TOF MS能够快速准确检测CRE水解厄他培南的能力,筛查产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,为临床早期合理使用碳青霉烯类抗生素提供依据。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 产碳青霉烯酶 肠杆菌科细菌 厄他培南 水解能力
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采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱快速检测产KPC大肠埃希菌ST131和ST405分型的研究 被引量:6
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作者 黄永禄 李佳萍 +3 位作者 顾丹霞 林晓伟 吕火烊 张嵘 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期460-464,共5页
目的采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速检测产KPC大肠埃希菌ST131、ST405,并对该方法的可行性进行评价。方法收集浙江省人民医院临床分离46株大肠埃希菌,扩增blaKPC耐药基因,采用多位点序列分型方法(MLST)进行分... 目的采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速检测产KPC大肠埃希菌ST131、ST405,并对该方法的可行性进行评价。方法收集浙江省人民医院临床分离46株大肠埃希菌,扩增blaKPC耐药基因,采用多位点序列分型方法(MLST)进行分型。MALDI-TOF MS对大肠埃希菌进行鉴定并对不同克隆的峰图进行主成分分析和算法统计,获得分型区分的特征峰。结果 46株KPC型大肠埃希菌均携带KPC-2耐药基因,MLST方法检测到2种ST型,分别为ST131和ST405。主成分分析图显示ST131和ST405可分为2簇,其中2株ST131和3株ST405分类错误。ClinProTools软件4种算法结果基本相似,方法特异度和灵敏度分别为93.27%和97.92%。用于区分ST131和ST405的特征峰主要为8 331.84、4 166.44、4 860.21和2 783.66 Da。这4个峰区分具有统计学意义,有较高准确性。结论采用MALDI-TOF MS可快速区分产KPC大肠埃希菌ST131和ST405,具有操作简单、耗时短、区分灵敏度和特异度高以及成本低等优点,能用于大肠埃希菌克隆分型研究。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 大肠埃希菌 多位点序列分型 质谱分型 ST131 ST405
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MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术直接鉴定阳性血培养病原菌的应用评估 被引量:11
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作者 秦娟秀 黄芊 +3 位作者 高倩倩 谢乙慧 李敏 张灏旻 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期546-551,共6页
目的比较MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术直接鉴定血培养阳性病... 目的比较MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术直接鉴定血培养阳性病原菌的有效性。方法收集上海交通大学医学院附属仁济医院2016年4-6月血培养仪报警的非重复血培养瓶138个,以传统培养鉴定的方法为金标准,同时采用以上两种前处理方法处理阳性标本,再进行MALDI-TOF MS鉴定。结果本次共收集非重复的血培养阳性标本138份,排除6个假阳性血瓶,鉴定出的病原菌包括革兰阴性菌70株(53.03%)、革兰阳性菌57株(43.18%)、真菌3株和2例复数菌。MALDI Sepsityper^(TM)Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法的血培养快速鉴定病原菌准确率分别为91.67%和84.09%,种鉴定准确率分别为83.33%和61.36%。两种前处理方法处理后,革兰阴性菌的准确率分别为98.57%和95.71%,革兰阳性菌的准确率分别为87.72%和78.59%,两者鉴定所需时间为40 min/样本和25 min/样本。结论虽然MALDI Sepsityper^(TM)Kit比血清分离胶促凝管法鉴定准确率稍高但两者差异无统计学意义(91.67%对84.09%,P>0.05),与MALDI Sepsityper^(TM) Kit相比,血清分离胶促凝管法是一种快速、易获得、低廉的MALDI-TOF MS直接鉴定血培养病原菌的前处理方法。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MALDI Sepsityper^TM KIT 血清分离胶促凝管法 血培养 病原菌
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法测定大蒜寡糖和多糖分子质量分布 被引量:9
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作者 黄雪松 阎凤超 吴建中 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第2期146-149,共4页
研究大蒜多糖的分子质量分布,探索获得适宜于结构研究的不同分子质量分布的大蒜多糖样品的方法。利用不同体积量的丙酮和乙醇为沉淀剂,得到一系列不同分子质量的大蒜多糖样品,并利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法... 研究大蒜多糖的分子质量分布,探索获得适宜于结构研究的不同分子质量分布的大蒜多糖样品的方法。利用不同体积量的丙酮和乙醇为沉淀剂,得到一系列不同分子质量的大蒜多糖样品,并利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法测定各样品的分子质量分布。结果表明,不同体积量的丙酮与乙醇分解沉淀所获得的样品中都含有低聚糖和多糖,糖的分子质量分布在362~2811u之间;丙酮对大蒜多糖的沉淀能力比乙醇好,3倍体积丙酮的多糖提取液所获得样品中低聚糖的含量高于4倍体积的乙醇。因此,通过调整丙酮或乙醇的的比例可得到不同分子质量分布的大蒜寡糖、多糖。 展开更多
关键词 大蒜 寡糖 多糖 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 分子质量分布
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应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测载脂蛋白E基因多态性 被引量:4
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作者 欧雪玲 赵方 +2 位作者 许传超 伍新尧 区敬华 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期564-567,共4页
【目的】应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测人类载脂蛋白E(apoE)基因的多态性。【方法】用PCR扩增出含apoE两个单核苷酸多态性(SNPs)位点(334T/C和472C/T)的DNA片段作为模板,经延伸反应,产物纯化后利用MALDI-TOFMS进行检测... 【目的】应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测人类载脂蛋白E(apoE)基因的多态性。【方法】用PCR扩增出含apoE两个单核苷酸多态性(SNPs)位点(334T/C和472C/T)的DNA片段作为模板,经延伸反应,产物纯化后利用MALDI-TOFMS进行检测。从而确定样本apoE基因型。【结果】应用本技术对50例广东地区无关个体进行apoE基因多态性检测,共检出3种常见的apoE基因型,其中以apoEΣ3/3型最多,占总数的74.00%;等位基因频率分布以ε3(87.00%)最高。【结论】本实验建立的基于MALDI-TOFMS与引物延伸技术检测apoE基因多态性的方法,具有快速、准确和可靠的特点。 展开更多
关键词 APOE基因 载脂蛋白E基因多态性 MS 常见 检出 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 单核苷酸多态性 MALDI-TOF DNA片段 SNP
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测蛋白质分子量的优化研究(英文) 被引量:4
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作者 胡炜 付强 +4 位作者 周洁 朱平川 蒙冰 张明 李杨瑞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期14-17,共4页
【目的】研究采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测蛋白质分子量的优化条件。【方法】选择3种不同的基质检测牛血清白蛋白(BSA)的分子量,在选定最佳基质化合物的基础上,通过改变样品蛋白质的浓度,以获得高质量... 【目的】研究采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测蛋白质分子量的优化条件。【方法】选择3种不同的基质检测牛血清白蛋白(BSA)的分子量,在选定最佳基质化合物的基础上,通过改变样品蛋白质的浓度,以获得高质量的质谱峰图,确定蛋白质样品的最小和最优检测量。【结果】1μg蛋白质样品与10mg/mL含0.1%乙酸(TFA)和50%乙腈(ACN)的芥子酸(SA)基质水溶液混合检测分子量,可产生最高质量的MALDI-TOF-MS峰图,同时蛋白质样品最小检测量应不少于500ng。【结论】MALDI-TOF-MS技术操作简单、分析快速、灵敏度高,是一种检测蛋白质分子量的可靠方法;研究结果确定了获得最优化质谱峰的最佳组合,这是从高度复杂的蛋白质样品测定准确分子量的必备条件。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 蛋白质 分子量 优化
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在革兰阴性杆菌对β内酰胺类抗生素耐药性检测中的应用进展 被引量:8
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作者 李媛睿 俞静 刘瑛 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期229-234,共6页
β内酰胺类抗生素是一类临床应用最为广泛的抗菌药物,它通过干扰细菌细胞壁肽聚糖的交联结构发挥杀菌作用。该类抗生素包括青霉素及其衍生物、头孢菌素、单酰胺环类和碳青霉烯类等,其中尤以碳青霉烯类抗生素的抗菌活性最强。2013年CHINE... β内酰胺类抗生素是一类临床应用最为广泛的抗菌药物,它通过干扰细菌细胞壁肽聚糖的交联结构发挥杀菌作用。该类抗生素包括青霉素及其衍生物、头孢菌素、单酰胺环类和碳青霉烯类等,其中尤以碳青霉烯类抗生素的抗菌活性最强。2013年CHINET细菌耐药性监测数据显示:肠杆菌科细菌对头孢菌素的耐药率约为20%,对碳青霉烯类抗生素的耐药率接近7%;不发酵糖革兰阴性杆菌对头孢菌素和碳青霉烯类抗生素耐药率均接近50%。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 革兰阴性杆菌 Β内酰胺类抗生素 耐药性
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基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统的血流感染致病菌早期检测 被引量:3
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作者 张可昕 胡翀 +3 位作者 陈琛 何赏 杨明 王成彬 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期17-22,共6页
目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)建立早期血流感染致病菌检测体系。方法选取大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、肺... 目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)建立早期血流感染致病菌检测体系。方法选取大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、肺炎链球菌等10种临床最常见的病原菌作为检测对象,结合多重PCR技术和Mass ARRAY iPLEX单碱基延伸技术、MALDI-TOF MS技术,模拟细菌感染血液样本建立MALDI-TOF MS细菌核酸检测体系,测定其灵敏度;选取2017年3-5月在解放军总医院急诊科收集的疑似脓毒症患者血液样本33例对该体系进行验证,并将检测结果与微生物科血培养结果进行比较。结果本研究所建立的MALDI-TOF质谱血液致病菌检测系统可同时检测分属两组的10种细菌,所有细菌样本均可见延伸峰;灵敏度为100CFU/ml;与33例临床血培养鉴定结果的阴性符合率为100%(27/27),6例血培养阳性样品中有2例为摩氏摩根菌和人葡萄球菌感染,因这两种细菌不包含在10种检测对象之内而未能通过质谱检出,其余4例血培养阳性样品与质谱检测结果的符合率为100%。结论本研究建立的MALDI-TOF质谱检测体系可从全血样本中直接检测10种临床常见血流感染致病菌,无需进行培养,与传统血培养及生化鉴定相比具有耗时短、灵敏度高、准确度高等优势,可在一定程度上满足临床早期、快速诊断血流感染致病菌的需求。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 细菌性血流感染 早期诊断
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对分枝杆菌液体培养系统菌种鉴定的临床研究 被引量:7
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作者 杜岩青 秦中华 张丽霞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期871-877,共7页
目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为... 目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为临床早期、精准治疗提供病原学依据。方法选取我院Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960分枝杆菌快速液体培养的阳性培养物为研究对象,通过不同的孵育时间、不同大小的研磨珠处理、不同的破壁方式摸索出MALDI-TOF MS对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960阳性培养物鉴定的"最优处理方法",并将所有结果与基因芯片法菌种鉴定做参照进行比对,鉴定不一致的结果通过基因测序确认。结果Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养报阳性后增加孵育时间可提高检出率及鉴定分值,同时使用0.5 mm的氧化锆珠研磨,使用超声震荡混匀处理,鉴定效果最佳。鉴定结果方面,液体系统报阳的420份阳性标本,基因芯片法鉴定结果为结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核菌占28.81%(121/420),9例未鉴定出,未鉴定占2.14%(9/420),错误鉴定占0.95%(4/420),总鉴定率为97.86%(411/420);采用MALDI-TOF MS质谱鉴定420份阳性标本中鉴定出419例,其中结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核占30.00%(126/420),星型奴卡菌0.48%(2/420),巴西奴卡菌占0.24%(1/420),1例未鉴定出,总鉴定率为99.76%。质谱鉴定分值≥2.0的400例占95.24%,分值在1.7~2.0的19例占4.52%,分值<1.7的1例占0.24%。结论本实验实现了Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养阳性培养物的直接质谱鉴定,缩短了培养鉴定的时间,将分枝杆菌鉴定到种水平,能区分出结核菌与非结核菌,同时也能将与分枝杆菌相似的奴卡菌鉴定出来,对临床疾病的鉴别诊断起到了积极的作用。 展开更多
关键词 Bactec^(TM)MGIT^(TM)960液体培养 基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱技术 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在动物病原菌检测中的应用 被引量:7
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作者 龚艳清 郭书林 +3 位作者 陈信忠 杨俊萍 马群飞 叶妍妍 《中国动物检疫》 CAS 2012年第2期22-25,共4页
应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对厦门口岸进口的1000多份动物及其产品的样品进行致病菌的检测和鉴定,共检出20多种致病菌,并对这些菌株同时用传统生化鉴定方法进行确认。结果表明MALDI-TOF-MS对未知细菌进... 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对厦门口岸进口的1000多份动物及其产品的样品进行致病菌的检测和鉴定,共检出20多种致病菌,并对这些菌株同时用传统生化鉴定方法进行确认。结果表明MALDI-TOF-MS对未知细菌进行鉴定,较传统方法更加快速、准确,而且可以进行高通量检测,可以广泛应用于口岸动物检疫以及微生物检验实验室的日常检验。此外,将国内分离鉴定的各种参考菌株建立的常见致病菌MALDI-TOF-MS数据库与布鲁克公司的MALDI Biotyper数据库进行病原菌鉴定的比较,结果表明,实验室自建的MALDI-TOF-MS数据库可以取得更加准确地结果。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 动物致病菌 检测
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在聚合物表征中的应用 被引量:14
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作者 王晓青 陈栓虎 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2008年第1期51-59,共9页
综述了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的基本原理,基质选择和样品制备方法、分析离子化试剂等因素对实验结果的影响,以及造成质量歧视的原因。并阐述了MALDI技术在确定聚合物相对分子质量分布,聚合物末端基团,共聚物... 综述了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的基本原理,基质选择和样品制备方法、分析离子化试剂等因素对实验结果的影响,以及造成质量歧视的原因。并阐述了MALDI技术在确定聚合物相对分子质量分布,聚合物末端基团,共聚物组成和推断反应及降解机理上的应用。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 聚合物 分子量 末端基
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定丝状真菌的影响因素分析 被引量:4
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作者 李颖 张戈 +3 位作者 杨洋 李冬雪 王贺 徐英春 《协和医学杂志》 CSCD 2020年第2期156-161,共6页
目的评估菌株培养条件、培养天数以及结果判定截断值(cut-off value,COV)3种因素对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)鉴定丝状真菌能力... 目的评估菌株培养条件、培养天数以及结果判定截断值(cut-off value,COV)3种因素对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)鉴定丝状真菌能力的影响。方法将78株受试丝状真菌分别接种到沙堡弱葡萄糖琼脂(sabouraud dextrose agar,SDA)、土豆葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)两种培养基及28、35℃两种培养温度共4种组合的培养条件下进行培养,并于培养第2、3、4、5天以及第7天对其进行MALDI-TOF MS分析,根据鉴定率的差异筛选菌株MALDI-TOF MS鉴定用最佳培养条件和培养天数;下调MALDI-TOF MS结果判定COV,分析其对MALDI-TOF MS丝状真菌鉴定率的影响。结果受试菌株在SDA和PDA两种培养基间的MALDI-TOF MS鉴定率无显著性差异(χ^2=0.467,P=0.792),但28℃培养温度下的鉴定率高于35℃培养温度(χ^2=7.195,P=0.027);培养第2、3天种水平(40.3%和34.3%)和属水平(44.8%和46.3%)鉴定率均较高;将MALDI-TOF MS种水平判定COV由>2.0下调至>1.7后,受试菌株种水平判定率显著提升(85.9%比32.1%,χ^2=40.119,P<0.01)且不增加错误鉴定率。结论丝状真菌以SDA或PDA培养基28℃培养2~3 d,并以分值>1.7作为种水平判定COV,可有效提高MALDI-TOF MS对丝状真菌的鉴定能力。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 丝状真菌 鉴定 影响因素
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测β-内酰胺酶的研究进展 被引量:9
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作者 余佳佳 俞静 刘瑛 《上海交通大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2017年第4期566-570,共5页
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种检测微生物的新型工具,不仅可用于微生物的快速鉴定,而且还可以检测细菌的耐药机制。产β-内酰胺酶是革兰阴性杆菌耐β-内酰胺类抗菌药物的主要耐药机制,目前利用MALDI-TOF MS快... 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种检测微生物的新型工具,不仅可用于微生物的快速鉴定,而且还可以检测细菌的耐药机制。产β-内酰胺酶是革兰阴性杆菌耐β-内酰胺类抗菌药物的主要耐药机制,目前利用MALDI-TOF MS快速检测细菌β-内酰胺酶的技术已被广泛报道,方法主要有检测β-内酰胺酶水解β-内酰胺类抗菌药物的活性,直接检测β-内酰胺酶分子、肽段或其相关蛋白以及检测β-内酰胺酶基因的单核苷酸多态性等。该文结合最新的研究成果对MALDI-TOF MS在β-内酰胺酶检测中的应用现状进行综述。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 Β-内酰胺酶 水解试验 单核苷酸多态性
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪在快速鉴定临床酵母菌中的应用 被引量:3
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作者 奚海燕 王颖 +5 位作者 黄梅 李玲慧 范明 邵海枫 王卫萍 李晓军 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第4期416-419,共4页
目的目前酵母菌的实验室检测方法往往鉴定周期长、操作繁琐、阳性率低,不能满足临床快速诊断和及时治疗的需要。文中探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrome... 目的目前酵母菌的实验室检测方法往往鉴定周期长、操作繁琐、阳性率低,不能满足临床快速诊断和及时治疗的需要。文中探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)用于快速鉴定临床分离酵母菌的可行性。方法收集南京军区南京总医院2013年7-10月自临床标本分离的非重复酵母菌120株。分别使用MALDI-TOF-MS和Vitek 2-Compact全自动微生物分析系统或API酵母菌鉴定条进行鉴定,结果不一致的菌株采用ITS基因测序验证。结果 120株酵母菌中117株(97.5%)MALDI-TOF-MS正确鉴定到种水平,2株(1.7%)未给出鉴定结果,1株(0.8%)鉴定结果不一致的菌株经ITS基因测序确认,MALDI-TOF-MS和Vitek 2-Compact/API均鉴定错误。结论 MALDI-TOF-MS可以作为一个快速、准确和价廉的工具应用于临床酵母菌的鉴定。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 临床酵母菌 快速鉴定
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测实验动物病原菌效果初探 被引量:3
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作者 邢进 刘娜 +5 位作者 冯育芳 张雪青 崔生辉 贺争鸣 赵德明 岳秉飞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期83-88,97,共7页
目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测实验动物病原菌的效果。方法使用德国Bruker Biotyper系统对40株标准菌株及384株实验动物分离菌进行鉴定。结果 Bruker Biotyper检测标准菌株和分离株的准确率分别为90. 0%... 目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测实验动物病原菌的效果。方法使用德国Bruker Biotyper系统对40株标准菌株及384株实验动物分离菌进行鉴定。结果 Bruker Biotyper检测标准菌株和分离株的准确率分别为90. 0%和80. 0%。对鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、假结核耶尔森氏菌(Yersinia pseudotuberculosis)、志贺菌(Shigella spp.)、肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)、嗜肺巴斯德杆菌Heyl生物型(Rodentibacter heylii)和支气管鲍特杆菌(Bordetella bronchiseptica)的鉴定存在偏差。结论MALDI-TOF MS方法高效、准确率高,可用于实验动物病原菌的快速鉴定。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 病原菌 细菌检测 实验动物
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