IgA肾病患者肾组织内电压依赖性Ca^(2+)通道和高通透性Ca^(2+)激活钾通道mRNA的表达 被引量：1

1

作者 栗明 蒋更如 +1 位作者 陈敏怡 刘秀英 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1281-1284,共4页

目的观察IgA肾病(IgAN)患者肾组织内电压依赖性Ca2+通道(VOCC)和高通透性Ca2+激活钾通道(BKCa)mRNA表达情况,以评价VOCC和BKCa通道mRNA表达与IgAN患者肾脏病理损害的相关性。方法提取对照组(n=11)和IgAN患者(n=25)肾组织总RNA,以RT-PCR... 目的观察IgA肾病(IgAN)患者肾组织内电压依赖性Ca2+通道(VOCC)和高通透性Ca2+激活钾通道(BKCa)mRNA表达情况,以评价VOCC和BKCa通道mRNA表达与IgAN患者肾脏病理损害的相关性。方法提取对照组(n=11)和IgAN患者(n=25)肾组织总RNA,以RT-PCR方法检测VOCC和BKCa mRNA表达量,同时将IgAN患者肾活检组织的一部分进行病理诊断和病理损害评分,病理损害评分采用Katafuchi半定量法。结果与对照组比较,IgAN患者肾组织内VOCC和BKCa mRNA的表达均呈显著增高(P<0.05);IgAN患者肾组织内VOCC mRNA表达与病理损害总积分、肾小球系膜细胞增生程度均呈正相关(r=0.6962,P<0.01;r=0.4220,P<0.05),而与肾小球系膜基质增多和肾小球硬化程度无相关性(P>0.05);IgAN患者肾组织内BKCa mRNA表达与病理损害总积分呈正相关(r=0.5582,P<0.05),而与肾小球系膜细胞增生程度、肾小球系膜基质增多以及肾小球硬化程度均无相关性(均P>0.05)。结论IgAN患者肾组织内VOCC和BKCa mRNA表达异常,两种通道蛋白的mRNA表达异常与肾小球组织病理损害总积分呈一定程度正相关,提示IgAN患者肾组织内VOCC和BKCa的表达情况,可作为IgA肾病进展与否的指标。 展开更多

关键词 IGA肾病 肾组织 病理损害 电压依赖性Ca^2+通道 高通透性Ca^2+激活钾通道

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电压依赖性钙通道α2δ-1亚基在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏中的表达变化

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作者 李红 万朝权 +1 位作者 张创强 赵国栋 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期259-264,共6页

目的：观察背根神经节电压依赖性钙通道α2δ-1蛋白在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠术后痛觉过敏中表达的变化。方法：体重180~220 g雄性SD大鼠64只,采用随机数字法分为8组（n=8）：对照组（C组）;瑞芬太尼组（R组）;切口痛组（I组）;瑞芬太... 目的：观察背根神经节电压依赖性钙通道α2δ-1蛋白在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠术后痛觉过敏中表达的变化。方法：体重180~220 g雄性SD大鼠64只,采用随机数字法分为8组（n=8）：对照组（C组）;瑞芬太尼组（R组）;切口痛组（I组）;瑞芬太尼＋切口痛组（M组）;切口痛＋鞘内注射NS组（E组）;切口痛＋瑞芬太尼＋NS组（F组）;切口痛＋瑞芬太尼＋Cavα2δ-1错义寡聚核苷酸组（G组）;切口痛＋瑞芬太尼＋Cavα2δ-1反义寡聚核苷酸组（H组）。瑞芬太尼颈部皮下输注剂量为80μg/kg（1 ml）,输注时间30 min;切口痛模型为右后足掌切口,深达肌肉层;鞘内分别注射NS、Cavα2δ-1错义寡聚核苷酸、Cavα2δ-1反义寡聚核苷酸。C、R、I和M组为实验1部分,E、F、G和H组为实验2部分。各组大鼠适应环境两天,于手术前48 h、24 h（T-2、T-1）,手术后6 h,24 h,48 h（T0-2）分别使用热辐射刺激仪和von Frey纤维丝进行热刺激缩足潜伏期（PWL）和机械刺激缩足阈值（PWT）测定。实验2大鼠分别于造模后6 h及24 h痛敏测定结束后进行鞘内注射。实验1和实验2痛敏测定完成后,取L4-6节段背根神经节,采用Western blot免疫印迹杂交法测定Cavα2δ-1蛋白的表达。结果：实验1：I组、R组和M组的术后各时段PWL、PWT均较C组降低,且M组较I组进一步降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;M组背根神经节Cavα2δ-1蛋白表达水平较其余各组均高,差异有统计学意义（P〈0.05）。实验2：E组、F组、G组和H组的术后各时段PWL、PWT均降低,且F组、G组在T1-2较H组进一步降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;H组背根神经节Cavα2δ-1蛋白表达水平较F组、G组降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：背根神经节Cavα2δ-1蛋白可能参与瑞芬太尼诱发切口痛大鼠的术后痛觉过敏的形成;鞘内注射Cavα2δ-1-反义寡聚核苷酸能延缓切口痛大鼠的术后痛敏。 展开更多

关键词 瑞芬太尼 痛觉过敏 电压依赖性钙通道α2δ-1 背根神经节 反义寡聚核苷酸

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大鼠电压依赖性阴离子通道1的基因克隆与序列分析

3

作者 伦永志 李达 +3 位作者 赵益敏 肖付诚 孙武平 周士胜 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期998-1000,共3页

目的克隆大鼠电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)基因,并应用生物信息学方法进行分析。方法以提取的大鼠心肌组织总RNA为模板,RT-PCR扩增获得VDAC1基因片段,连接到pMD19-T克隆载体并测序鉴定。应用生物信息学方法分析VDAC1基因的序列同源性... 目的克隆大鼠电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)基因,并应用生物信息学方法进行分析。方法以提取的大鼠心肌组织总RNA为模板,RT-PCR扩增获得VDAC1基因片段,连接到pMD19-T克隆载体并测序鉴定。应用生物信息学方法分析VDAC1基因的序列同源性与结构特征。结果成功克隆了大鼠VDAC1基因,与人、牛、小鼠、兔和猪的VDAC1基因具有高度同源性,同源性分别为90.0%、90.6%、96.0%、91.1%和91.0%。VDAC1在体外哺乳动物网状细胞中的半寿期为30h,无卷曲螺旋结构,但有6个亲水区,在225～247aa具有真核细胞线粒体外膜孔道蛋白家族特征性模序结构。结论成功克隆了大鼠VDAC1基因,并应用生物信息学技术进行序列分析,为进一步研究其生物学功能及其在2型糖尿病发病机制中的作用提供了依据和线索。 展开更多

关键词 电压依赖性阴离子通道1 2型糖尿病 基因克隆 生物信息学

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KCNQ2通道蛋白温度敏感性研究

4

作者 余方 王云翠 +3 位作者 刘燕兰 刘万红 彭碧文 何小华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2049-2049,共1页

关键词 通道蛋白 KCNQ2 温度敏感性 神经元兴奋性 突变型 真核表达载体 显微镜检测 转染 电压依赖性 钾离子通道

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细胞外pH值对KCNQ2/3钾离子通道的调节

5

作者 贾庆忠 王川 +2 位作者 杜肖娜 李芳 张海林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期82-87,共6页

目的　研究细胞外pH值改变对KCNQ2 /3钾离子通道的调节。方法　用体外转录法将KCNQ2 /3钾离子通道的mRNA,微注射于爪蟾卵母细胞中,表达KCNQ2 /3电流。用双电极电压钳方法 (TEVC)观察细胞外pH值对KCNQ2 /3通道的调节。结果　细胞外pH减小... 目的　研究细胞外pH值改变对KCNQ2 /3钾离子通道的调节。方法　用体外转录法将KCNQ2 /3钾离子通道的mRNA,微注射于爪蟾卵母细胞中,表达KCNQ2 /3电流。用双电极电压钳方法 (TEVC)观察细胞外pH值对KCNQ2 /3通道的调节。结果　细胞外pH减小,抑制KCNQ2 /3电流,影响激活电压,而且这种调节有一定的电压和浓度依赖性。在阈电压附近 -60mV、pH 6 8时对KCNQ2 /3通道的影响最明显。pH值改变还会调节通道开放时程,影响通道激活时间常数。结论　在维持神经细胞静息电位、调节神经兴奋性方面起重要作用的KCNQ2 /3通道,受细胞外pH值调节,这种调节作用可能在神经细胞生理性兴奋和病理性变化中如:惊厥、癫痫、休克有重要意义。 展开更多

关键词 电压依赖性的KCNQ2/3钾离子通道 细胞外pH值

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ERK1/2通路在4-AP诱导大鼠肺动脉收缩中的作用 被引量：6

6

作者 韩维娜 刘晔 +1 位作者 吕昌莲 朱大岭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期202-206,共5页

目的探讨细胞外信号调节激酶-1/2(ERK1/2)通路在4-氨基吡啶(4-aminopyridione,4-AP)阻断正常大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜上电压依赖性钾通道(KV)所引起的肺动脉收缩中的作用。方法取正常鼠肺动脉制作肺动脉环,分别加入4-AP(KV通道... 目的探讨细胞外信号调节激酶-1/2(ERK1/2)通路在4-氨基吡啶(4-aminopyridione,4-AP)阻断正常大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜上电压依赖性钾通道(KV)所引起的肺动脉收缩中的作用。方法取正常鼠肺动脉制作肺动脉环,分别加入4-AP(KV通道阻断剂),PD98059/U0126+4-AP,比较肺动脉收缩的变化。同时培养肺动脉平滑肌细胞进行Western blot分析4-AP对ERK1/2的影响。结果①在血管环试验中,4-AP引起的肺动脉收缩有浓度依赖性;加入20mmol.L-1PD98059或2μmol.L-1U0126可以抑制4-AP引起的肺动脉收缩。②4-AP可刺激PASMCs ERK1/2蛋白磷酸化;③U0126可抑制4-AP引起的ERK1/2蛋白磷酸化。结论ERK1/2通路参与4-AP阻断正常大鼠肺动脉平滑肌细胞膜上电压依赖性钾通道(KV)引起肺动脉收缩。 展开更多

关键词 ERK1/2 电压依赖性钾通道 肺动脉 血管环 Western BLOT

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尼莫地平对小鼠齿状回诱导型一氧化氮合酶的表达及其活性的影响 被引量：2

7

作者 张爱霞 罗春霞 +6 位作者 王玮 Liu Shu-hong 孙婧 朱新建 张书刚 LIU You-ming 朱东亚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期790-794,共5页

目的探讨阻断L型电压门控式Ca2+通道(LVGCC)对成年动物齿状回诱导型一氧化氮合酶(Induciblenitricoxidesynthase,iNOS)的表达及其活性的影响。方法通过阻塞大脑中动脉(MCAO)90min制备局灶性脑缺血动物模型。缺血前15min静脉单次注射尼... 目的探讨阻断L型电压门控式Ca2+通道(LVGCC)对成年动物齿状回诱导型一氧化氮合酶(Induciblenitricoxidesynthase,iNOS)的表达及其活性的影响。方法通过阻塞大脑中动脉(MCAO)90min制备局灶性脑缺血动物模型。缺血前15min静脉单次注射尼莫地平(2.0mg·kg-1),24h处死动物,采用RTPCR和Westernblot的方法研究尼莫地平对齿状回iNOS的mRNA和蛋白水平的影响,并测定iNOS酶活性和NO含量的变化。用LPS和TNFα诱导培养的星型胶质细胞表达iNOS,同时给予尼莫地平,培养24h后,检测各组细胞的iNOSmRNA水平和iNOS酶活性。结果与假手术组相比,MCAO后小鼠缺血侧齿状回iNOSmRNA和蛋白水平明显升高,iNOS活性增强,NOx含量增加。给予尼莫地平的动物,缺血侧齿状回无论是iNOSmRNA水平、iNOS蛋白含量,还是iNOS活性及NOx含量,与假手术组相比均显著下降。尼莫地平还可以降低培养的星型胶质细胞的mRAN水平。结论尼莫地平阻断LVGCC,可以明显下调缺血动物的齿状回和培养细胞的iNOS表达,降低iNOS的酶活性。 展开更多

关键词 局灶性脑缺血 尼莫地平 L-型电压门控式Ca^2+通道 INOS

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尼莫地平对局灶性脑缺血诱导的成年小鼠齿状回神经元再生的影响 被引量：1

8

作者 罗春霞 张爱霞 +6 位作者 王玮 LIU Shuhong 孙婧 朱新建 张书刚 LIU Youming 朱东亚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期407-412,共6页

目的　研究L 型电压门控式Ca2+通道(L VGCC)阻断对局灶性脑缺血诱导成年动物海马齿状回神经元再生的影响。方法　成年♂C57 /BL/6小鼠行90min大脑中动脉阻塞(MCAO)手术或者假手术,进行以下三个实验:①手术后48h处死动物,经TTC染色,观察... 目的　研究L 型电压门控式Ca2+通道(L VGCC)阻断对局灶性脑缺血诱导成年动物海马齿状回神经元再生的影响。方法　成年♂C57 /BL/6小鼠行90min大脑中动脉阻塞(MCAO)手术或者假手术,进行以下三个实验:①手术后48h处死动物,经TTC染色,观察尼莫地平对梗死面积的影响;②手术后5 ~7d,动物经腹腔注射5 溴脱氧尿苷(Br dU),末次注射后24h处死动物,通过免疫组化、Fluoro Jade染色检测尼莫地平对脑缺血诱导的齿状回细胞增殖的作用,并确定细胞增殖是否依赖于海马齿状回细胞的死亡;③动物接受如前所述的BrdU注射,并于末次注射后4wk处死动物,采用免疫荧光双标记观察尼莫地平对脑缺血后新生细胞表型分化的影响。结果　小鼠经过90minMCAO后,齿状回新生神经元数目明显增多,这种缺血诱导的神经元再生并不依赖于齿状回神经细胞的死亡,采用尼莫地平阻断L VGCC则抑制了缺血后的神经元再生。结论　脑缺血后Ca2+经L VGCC内流直接促进缺血诱导的神经元再生。 展开更多

关键词 局灶性脑缺血 尼莫地平 神经元再生 L-型电压门控式Ca^2+通道

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1-磷酸鞘氨醇促进胰岛素分泌及可能机制研究 被引量：3

9

作者 赵艳丽 丁亚琴 +3 位作者 王慧 章毅 杨静 刘云峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1516-1520,共5页

目的研究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌效应及其分子机制,探索糖尿病治疗药物的作用靶点。方法使用胶原酶P消化SD大鼠胰腺,Histopaque 1077梯度离心获得胰岛,Dispase II消化得到胰岛细胞。不同... 目的研究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌效应及其分子机制,探索糖尿病治疗药物的作用靶点。方法使用胶原酶P消化SD大鼠胰腺,Histopaque 1077梯度离心获得胰岛,Dispase II消化得到胰岛细胞。不同浓度S1P(0~20μmol·L^(-1))干预,观察低糖(2.8 mmol·L^(-1))和高糖(16.7 mmol·L^(-1))条件下胰岛素分泌的变化。膜片钳技术记录β细胞电压依赖性钾通道电流(Kv电流),观察S1P干预后Kv电流的变化。钙成像技术记录β细胞内Ca^(2+)浓度,观察不同浓度S1P(0~20μmol·L^(-1))干预后细胞内的Ca2+浓度变化。结果与低糖组相比,高糖组明显刺激了胰岛素的分泌(P<0.01)。低糖条件下,S1P没有改变胰岛素分泌量(P>0.05)。高糖条件下,S1P浓度依赖性增加了胰岛素分泌量(P<0.01)。与对照组相比,S1P明显抑制了β细胞Kv电流(P<0.01)。高糖条件下,S1P浓度依赖性升高了胰岛细胞内Ca^(2+)浓度(P<0.01)。结论 S1P可能通过抑制β细胞Kv电流、升高细胞内Ca2+浓度,最终促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌。 展开更多

关键词 1-磷酸鞘氨醇 CA^2+ 胰岛素分泌 电压依赖性钾通道 SD大鼠 Β细胞

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铁死亡与肿瘤的研究进展 被引量：12

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作者 马志红 廉猛 +4 位作者 苏才丽 王茹 张红 房居高 刘红刚 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1247-1251,共5页

肿瘤发展至中晚期,预后较差,常采用以手术切除为主,术后辅以放、化疗的综合治疗。化疗药物抑癌机制主要是干预癌细胞的生长,诱导癌细胞的死亡,目前研究发现部分患者对针对细胞凋亡所研制的抗肿瘤药物出现凋亡逃逸及化疗耐受,于是设想,... 肿瘤发展至中晚期,预后较差,常采用以手术切除为主,术后辅以放、化疗的综合治疗。化疗药物抑癌机制主要是干预癌细胞的生长,诱导癌细胞的死亡,目前研究发现部分患者对针对细胞凋亡所研制的抗肿瘤药物出现凋亡逃逸及化疗耐受,于是设想,是否存在其它形式的细胞死亡,来克服肿瘤细胞耐药? 2012年在研究erastin杀死RAS突变的肿瘤细胞作用机制时发现一种铁依赖性的细胞死亡形式——铁死亡,其主要是细胞内"铁"依赖脂质氧自由基异常增高、氧化还原稳态失衡而致。该文就细胞铁死亡的定义和特点,所参与的通路及铁死亡在肿瘤演变中发挥的作用进行综述。 展开更多

关键词 肿瘤 铁死亡 Fe2+ 线粒体外膜的电压依赖性阴离子通道 谷氨酸/胱氨酸转运体 谷胱甘肽氧化还原酶 文献综述

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异莲心碱对小鼠离体气管平滑肌的舒张作用 被引量：1

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作者 刘贝贝 陈微微 +1 位作者 张雯婧 刘庆华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期920-925,共6页

目的:研究异莲心碱对高K^+预收缩小鼠离体气管平滑肌(ASM)的舒张作用及其机制。方法:利用张力换能器检测异莲心碱对高K^+诱导的ASM预收缩和Ca^(2+)内流的影响;利用膜片钳技术和钙成像系统分别检测异莲心碱对ASM细胞膜L型电压依赖性Ca^(... 目的:研究异莲心碱对高K^+预收缩小鼠离体气管平滑肌(ASM)的舒张作用及其机制。方法:利用张力换能器检测异莲心碱对高K^+诱导的ASM预收缩和Ca^(2+)内流的影响;利用膜片钳技术和钙成像系统分别检测异莲心碱对ASM细胞膜L型电压依赖性Ca^(2+)通道(LVDCC)电流以及细胞内Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]_i)的影响。结果:异莲心碱可显著舒张高K^+预收缩的ASM,且其舒张作用呈现浓度依赖性,当浓度为100μmol/L时最大舒张比达到(95.3±3.9)%。此外,利用膜片钳全细胞记录技术测量LVDCC电流,电流可被异莲心碱完全阻断;在高K^+诱导下气管平滑肌细胞中Fura-2的340/380 nm荧光比值稳定在0.63±0.10,而异莲心碱加入后比值显著下降至0.36±0.05(P<0.01);在[Ca^(2+)]_i峰点加入异莲心碱,340/380 nm荧光比值从0.74±0.02迅速降至0.42±0.05(P<0.01);异莲心碱抑制高K^+诱导的Ca^(2+)内流引起的ASM收缩。结论:异莲心碱可阻断小鼠离体气管平滑肌细胞LVDCC电流,LVDCC介导的Ca^(2+)内流停止,[Ca^(2+)]_i降低,导致ASM舒张,提示异莲心碱可能是潜在的气管舒张剂。 展开更多

关键词 异莲心碱 气管平滑肌 L型电压依赖性Ca^2+通道 舒张

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