花生电压依赖性阴离子通道基因(AhVDAC)的克隆及在果针向地性反应中表达分析 被引量：1

1

作者 李海芬 魏浩 +6 位作者 温世杰 鲁清 刘浩 李少雄 洪彦彬 陈小平 梁炫强 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1558-1565,共8页

为研究电压依赖性阴离子通道基因(AhVDAC)与花生果针向地性生长的相关性,本研究克隆了花生AhVDAC基因全长cDNA序列,并对其编码蛋白结构、亚细胞定位、原核表达蛋白及其在果针向地性反应过程的表达特性进行分析。结果表明,AhVDAC基因含有... 为研究电压依赖性阴离子通道基因(AhVDAC)与花生果针向地性生长的相关性,本研究克隆了花生AhVDAC基因全长cDNA序列,并对其编码蛋白结构、亚细胞定位、原核表达蛋白及其在果针向地性反应过程的表达特性进行分析。结果表明,AhVDAC基因含有831 bp的开放阅读框,编码一个含有276个氨基酸、分子量大小为29.7 kD、pI值为6.38的蛋白。亚细胞定位分析结果显示,AhVDAC基因主要定位在细胞质。构建了pPROEXHTa-AhVDAC原核表达载体,诱导及分离纯化了37 kD的AhVDAC纯化蛋白。采用RT-PCR对花生果针入土前不同发育时期AhVDAC的表达进行分析发现,AhVDAC基因表达量在果针发育的第2天最高,随后逐渐下降后维持在较低的表达水平。通过对离体培养的花生果针施加外源CaCl_(2)和LaCl_(3)发现,CaCl_(2)明显促进花生果针向地性弯曲和AhVDAC的表达,而LaCl_(3)则减缓果针弯曲和AhVDAC的表达,推测Ca^(2+)的积累可能促进了AhVDAC的表达,并通过生物膜上AhVDAC的运输对Ca^(2+)进行不对称分布,从而使得花生果针改变生长方向,发生向地性弯曲。 展开更多

关键词 花生 果针 电压依赖性阴离子通道基因(ahvdac) 克隆 基因表达

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大鼠电压依赖性阴离子通道1的基因克隆与序列分析

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作者 伦永志 李达 +3 位作者 赵益敏 肖付诚 孙武平 周士胜 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期998-1000,共3页

目的克隆大鼠电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)基因,并应用生物信息学方法进行分析。方法以提取的大鼠心肌组织总RNA为模板,RT-PCR扩增获得VDAC1基因片段,连接到pMD19-T克隆载体并测序鉴定。应用生物信息学方法分析VDAC1基因的序列同源性... 目的克隆大鼠电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)基因,并应用生物信息学方法进行分析。方法以提取的大鼠心肌组织总RNA为模板,RT-PCR扩增获得VDAC1基因片段,连接到pMD19-T克隆载体并测序鉴定。应用生物信息学方法分析VDAC1基因的序列同源性与结构特征。结果成功克隆了大鼠VDAC1基因,与人、牛、小鼠、兔和猪的VDAC1基因具有高度同源性,同源性分别为90.0%、90.6%、96.0%、91.1%和91.0%。VDAC1在体外哺乳动物网状细胞中的半寿期为30h,无卷曲螺旋结构,但有6个亲水区,在225～247aa具有真核细胞线粒体外膜孔道蛋白家族特征性模序结构。结论成功克隆了大鼠VDAC1基因,并应用生物信息学技术进行序列分析,为进一步研究其生物学功能及其在2型糖尿病发病机制中的作用提供了依据和线索。 展开更多

关键词 电压依赖性阴离子通道1 2型糖尿病 基因克隆 生物信息学

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白藜芦醇对抗线粒体电压依赖性阴离子通道介导心肌损伤作用的研究 被引量：6

3

作者 廖章萍 章志玲 +4 位作者 邹逢琳 尹淑华 刘丹 汤蕾 何明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期477-481,共5页

目的从细胞水平探讨白藜芦醇抗心肌损伤保护作用机制,明确其与线粒体电压依赖性阴离子通道(VDAC)的关系。方法以pFLAG质粒为载体,构建VDAC1真核表达载体pFLAG-VDAC1。H9c2心肌细胞随机分为5组,Control组、缺氧/复氧(A/R)组、白藜芦醇组... 目的从细胞水平探讨白藜芦醇抗心肌损伤保护作用机制,明确其与线粒体电压依赖性阴离子通道(VDAC)的关系。方法以pFLAG质粒为载体,构建VDAC1真核表达载体pFLAG-VDAC1。H9c2心肌细胞随机分为5组,Control组、缺氧/复氧(A/R)组、白藜芦醇组、pFLAG-VDAC1-白藜芦醇组和pFLAG-白藜芦醇组。Western blot法测定VDAC1的蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,生化自动分析仪测定LDH、CPK活性,线粒体肿胀实验检测线粒体通透性转换孔道(mPTP)的开放。结果 A/R处理后,VDAC1表达上调,细胞存活率下降,LDH和CPK活性增高,mPTP开放;而白藜芦醇则能抑制VDAC1的上调,并降低mPTP开放程度,对抗A/R损伤;但VDAC1高表达的pFLAG-VDAC1-白藜芦醇组则可取消白藜芦醇的心肌保护作用。结论白藜芦醇抗A/R损伤作用与VDAC1密切相关,其可通过下调VDAC1从而防止mPTP的开放,保护心肌细胞。 展开更多

关键词 白藜芦醇 线粒体 线粒体通透性转换孔道 电压依赖性阴离子通道 缺氧复氧 心肌细胞

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电压依赖性阴离子通道在线粒体依赖性细胞凋亡中作用的研究进展 被引量：5

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作者 杨渊 钟才高 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期211-215,共5页

电压依赖性阴离子通道(VDAC)是线粒体外膜上含量极为丰富的孔状蛋白,是细胞内代谢物分子进出线粒体的必经通道,VDAC的功能状态与线粒体的代谢和功能关系十分密切。VDAC的异常通常会引发线粒体功能紊乱,导致ATP水平或转膜电位下降、细胞... 电压依赖性阴离子通道(VDAC)是线粒体外膜上含量极为丰富的孔状蛋白,是细胞内代谢物分子进出线粒体的必经通道,VDAC的功能状态与线粒体的代谢和功能关系十分密切。VDAC的异常通常会引发线粒体功能紊乱,导致ATP水平或转膜电位下降、细胞色素c释放等凋亡程序的启动。VDAC可与许多物质相互作用而发挥诱导细胞凋亡或抑制细胞凋亡的效应,从而在线粒体依赖性细胞凋亡途径中有着十分重要的作用。VDAC对细胞凋亡的影响机制可应用于药物治疗靶点、外源化学物毒性机制的研究,因此,VDAC的作用是近年来外源化学物所致细胞凋亡机制研究领域中的热点问题。 展开更多

关键词 电压依赖性阴离子通道 线粒体 细胞凋亡 毒性作用

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线粒体外膜电压依赖性阴离子通道与心力衰竭 被引量：1

5

作者 谢渡江 陈锐华 江时森 《医学研究生学报》 CAS 2003年第1期48-50,共3页

心力衰竭是各种心血管疾病发展的终末阶段 ,在其发展过程中 ,心功能不断恶化。目前 ,对心力衰竭中与心功能恶化有关的细胞和分子机制仍不十分清楚。多数学者认为心肌细胞能量代谢障碍及凋亡 (即程度性死亡 )是可能的机制 ,也是近年来的... 心力衰竭是各种心血管疾病发展的终末阶段 ,在其发展过程中 ,心功能不断恶化。目前 ,对心力衰竭中与心功能恶化有关的细胞和分子机制仍不十分清楚。多数学者认为心肌细胞能量代谢障碍及凋亡 (即程度性死亡 )是可能的机制 ,也是近年来的研究热点。电压依赖性阴离子通道 (VDAC)是位于心肌线粒体外膜上的一种蛋白 ,其在能量代谢及细胞凋亡过程中的作用已引起广泛重视。 展开更多

关键词 电压依赖性阴离子通道 心力衰竭 线粒体穿孔蛋白 VPAC 能量代谢 细胞凋亡

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常压高浓度氧下调电压依赖性阴离子通道蛋白对脑缺血-再灌注损伤大鼠的保护作用 被引量：1

6

作者 师文娟 戚智锋 刘克建 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第1期42-46,共5页

目的观察常压高浓度氧治疗(normobaric hyperoxia,NBO)对脑缺血-再灌注大鼠电压依赖性阴离子通道蛋白(voltage-dependent anion channel,VDAC)以及凋亡蛋白细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)和活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase-3)的影响... 目的观察常压高浓度氧治疗(normobaric hyperoxia,NBO)对脑缺血-再灌注大鼠电压依赖性阴离子通道蛋白(voltage-dependent anion channel,VDAC)以及凋亡蛋白细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)和活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase-3)的影响,初步探讨其作用机制。方法将15只健康成年雄性SD大鼠(280~320 g)采用数字表法分为3组:假手术组(Sham)、正常氧浓度组(Normoxia)和NBO组,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,模型大鼠缺血1.5 h,再灌注24 h。Sham组和Normoxia组大鼠术后呼吸普通空气,NBO组大鼠术后至再灌注前呼吸100%常压氧气。采用Western blotting方法,检测脑缺血半影区VDAC、Cyt C和cleaved caspase-3蛋白的表达变化。结果 1)与Sham组相比,Normoxia组缺血侧半影区VDAC显著升高(P<0.05);与Normoxia组相比,NBO组缺血侧半影区VDAC显著降低(P<0.05);2)与Normoxia组相比,NBO组缺血侧半影区凋亡蛋白Cyt C和cleaved caspase-3显著减少(P<0.05)。结论 NBO治疗可能通过调节缺血侧半影区电压依赖性阴离子通道蛋白VDAC的表达来抑制脑缺血诱发的细胞凋亡,从而实现脑神经保护作用。 展开更多

关键词 脑缺血-再灌注 常压高浓度氧 电压依赖性阴离子通道蛋白 凋亡

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线粒体电压依赖性阴离子通道在心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用

7

作者 廖章萍 章志玲 +3 位作者 李娟 邹逢琳 尹淑华 何明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1115-1120,共6页

目的:探讨线粒体电压依赖性阴离子通道(VDAC)在H9c2心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤中的作用及机制。方法:以pSUPER质粒为载体,构建shRNA VDAC1质粒。H9c2细胞随机分为5组:control组、缺氧/复氧(A/R)组、缺氧预处理(APC)组、pSUPER-VDAC1-A/... 目的:探讨线粒体电压依赖性阴离子通道(VDAC)在H9c2心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤中的作用及机制。方法:以pSUPER质粒为载体,构建shRNA VDAC1质粒。H9c2细胞随机分为5组:control组、缺氧/复氧(A/R)组、缺氧预处理(APC)组、pSUPER-VDAC1-A/R组和pSUPER-A/R组。Western blotting法测定VDAC1的蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,生化自动分析仪测定乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸磷酸激酶(CPK)活性,流式细胞仪法检测线粒体膜电位。结果:A/R处理后,VDAC1表达上调,细胞存活率下降,LDH和CPK活性增高,线粒体膜电位崩溃;而APC则能抑制VDAC1的上调,并对抗A/R损伤;与APC相似,通过RNA干扰下调VDAC1后,亦能有效保护心肌细胞,维持线粒体膜电位,提高细胞存活率。结论:下调VDAC1可有效对抗A/R损伤引起的线粒体通透性转换孔道的开放,维持线粒体膜电位,保护心肌细胞。 展开更多

关键词 电压依赖性阴离子通道 线粒体通透性转换孔道 缺氧/复氧 心肌细胞

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线粒体电压依赖性阴离子通道1在阿尔茨海默病发生机制中的作用 被引量：3

8

作者 奚用勇 蒋与刚 卢豪 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期318-320,F0003,共4页

线粒体电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)是存在于线粒体外膜上的一系列孔道蛋白,其亚型之一VDAC1参与线粒体通透性转换(MPT)孔道的功能发挥,调控阳离子、阴离子、ATP、无机磷酸盐以及其他代谢产物进出线粒... 线粒体电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)是存在于线粒体外膜上的一系列孔道蛋白,其亚型之一VDAC1参与线粒体通透性转换(MPT)孔道的功能发挥,调控阳离子、阴离子、ATP、无机磷酸盐以及其他代谢产物进出线粒体。研究发现,随着阿尔茨海默病(AD)的发生发展,VDAC1蛋白表达水平提高,且其与β-淀粉样蛋白(Aβ)及磷酸化tau蛋白相互作用,干扰ATP/ADP、蛋白质等代谢产物的转运。现就VDAC1的结构、特性以及在AD发病中的机制作一综述。 展开更多

关键词 线粒体电压依赖性阴离子通道1 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 磷酸化TAU蛋白

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电压依赖性阴离子通道与血液肿瘤 被引量：2

9

作者 孙晏 陈烨 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期255-261,共7页

电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)位于线粒体外膜,在高分辨原子压力显微镜下为内径(3.8×2.7)nm的环状孔道,可自身或与其它蛋白质结合形成同源或异源寡聚体,介导细胞色素C等凋亡蛋白释放,在细胞的生长... 电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)位于线粒体外膜,在高分辨原子压力显微镜下为内径(3.8×2.7)nm的环状孔道,可自身或与其它蛋白质结合形成同源或异源寡聚体,介导细胞色素C等凋亡蛋白释放,在细胞的生长和凋亡过程中发挥重要调控作用。肿瘤细胞的VDAC表达增加,并与己糖激酶(hexoki-nase,HK)结合,产生抗凋亡作用。抑制VDAC活性或使VDAC/HK分离,可减少肿瘤细胞自身保护、促进凋亡。VDAC与血液肿瘤的发生密切相关,因而成为肿瘤治疗的新靶点。随着蛋白结构序列的鉴定,VDAC成为抗肿瘤治疗的研究热点。本文就VDAC的功能、分布、调控以及在血液肿瘤的进展、作为抗癌药物作用靶点的前景进行综述。 展开更多

关键词 电压依赖性阴离子通道 血液肿瘤 多发性骨髓瘤 白血病 三氧化二砷 已糖激酶

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烟草电压依赖阴离子通道NtVDAC1.1的电子克隆及生物信息学分析 被引量：2

10

作者 武兆云 张小全 +1 位作者 杨铁钊 王红 《山东农业科学》 2015年第11期5-11,共7页

为研究电压依赖阴离子通道（VDAC）基因在烟草根系分泌有机酸的作用,进而为了解该基因的功能和应用提供基础,以拟南芥At VDAC1（NM_110994）为搜索序列,应用电子克隆技术得到一条烟草VDAC基因全长c DNA,命名为Nt VDAC1.1。生物信息学分... 为研究电压依赖阴离子通道（VDAC）基因在烟草根系分泌有机酸的作用,进而为了解该基因的功能和应用提供基础,以拟南芥At VDAC1（NM_110994）为搜索序列,应用电子克隆技术得到一条烟草VDAC基因全长c DNA,命名为Nt VDAC1.1。生物信息学分析表明该基因全长为1 018 bp,有着完整的开放阅读框,编码276个氨基酸。进化关系及同源性分析表明,Nt VDAC1.1与其他物种的VDAC有着较高的相似性,其中与茄科植物马铃薯三个膜孔蛋白有着很高的一致性（0.768-0.902）。功能分析显示,Nt VDAC1.1为膜孔蛋白,参与了阴离子的转运、阴离子转运调节和跨膜运输。二级和四级结构分析均表明,Nt VDAC1.1含有α-螺旋和β-折叠。氨基酸位点分析表明,该蛋白具有多种类型的修饰位点,其中的磷酸化位点说明该基因与信号转导有关,对阴离子通道活性具有调节作用。 展开更多

关键词 烟草 电压依赖阴离子通道 基因克隆 生物信息学分析

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超氧阴离子对牛主动脉平滑肌细胞收缩性的影响

11

作者 承伟 小山澈野 大池正宏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1215-1217,共3页

目的观察超氧阴离子对培养的牛动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响。方法原代培养牛动脉平滑肌,使用数字荧光显微镜技术测定细胞内钙,采用胶原凝胶收缩方法分析收缩性。结果超氧阴离子对高钾溶液及A-23187诱导的钙内流无明显影响(P>0.... 目的观察超氧阴离子对培养的牛动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响。方法原代培养牛动脉平滑肌,使用数字荧光显微镜技术测定细胞内钙,采用胶原凝胶收缩方法分析收缩性。结果超氧阴离子对高钾溶液及A-23187诱导的钙内流无明显影响(P>0.05),但可使凝胶收缩面积减小。超氧阴离子可使高钾诱导的胶原凝胶收缩面积从18.32%±2.11%减小至5.13%±0.45%(P<0.01),使A-23187诱导的胶原凝胶收缩面积从17.16%±1.10%减小至4.31%±0.04%(P<0.01)。结论超氧阴离子可明显抑制牛主动脉平滑肌细胞收缩性,但对电压依赖性钙通道引起的钙内流及A-23187诱导的细胞内钙变化无影响。 展开更多

关键词 动脉平滑肌细胞 收缩性 细胞内钙 超氧阴离子 钙释放激活钙通道 电压依赖性钙通道

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六价铬诱导的肝细胞线粒体依赖性凋亡中VDAC1的作用 被引量：5

12

作者 周晓昕 张玉静 +1 位作者 肖芳 钟才高 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期91-98,共8页

铬(chromium)是一种在工业生产过程中广泛使用的重金属,进入人体后可导致急慢性中毒,具有神经毒性、基因毒性、致癌性和免疫毒性。了解六价铬(hexavalent chromium,Cr(Ⅵ))的细胞毒性,进一步探究Cr(Ⅵ)的毒作用机制,可为防治Cr(Ⅵ)对人... 铬(chromium)是一种在工业生产过程中广泛使用的重金属,进入人体后可导致急慢性中毒,具有神经毒性、基因毒性、致癌性和免疫毒性。了解六价铬(hexavalent chromium,Cr(Ⅵ))的细胞毒性,进一步探究Cr(Ⅵ)的毒作用机制,可为防治Cr(Ⅵ)对人群健康的损害提供实验依据。电压依赖性阴离子通道蛋白1(voltage-dependent anion channel-1,VDAC1)参与调控线粒体外膜通透性,影响细胞凋亡;同时VDAC1也是BCL-2家族的重要结合位点,它可与BAX/BAK相互作用形成孔道,使线粒体内的凋亡相关蛋白,如细胞色素C等,进入胞浆,引起细胞凋亡。但VDAC1影响细胞凋亡的确切路径与分子机制,目前尚未完全研究清楚。使用L02人正常肝细胞作为实验对象,通过慢病毒包装法建立VDAC1低表达细胞系,检测在相同浓度Cr(Ⅵ)处理的条件下,与非染毒组相比,不同受试细胞的生存率、凋亡情况、活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)生成量、线粒体功能和凋亡诱导因子(AIF)的变化情况是否存在差异。结果表明,与VDAC1正常表达的细胞相比,VDAC1低表达组在Cr(Ⅵ)染毒的情况下,细胞生存率升高,凋亡率下降,细胞内ROS生成量减少,MPTP活性增加不明显,胞浆内细胞色素C(Cytochrome C,Cyt C)和AIF含量降低。上述研究结果表明VDAC1参与了由六价铬诱导的线粒体依赖性肝细胞凋亡,并且抑制VDAC1的表达可减轻因Cr(Ⅵ)暴露而引起的L02肝细胞损伤。 展开更多

关键词 六价铬 电压依赖性阴离子通道 线粒体通透性转换孔 凋亡

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GRP75和VDAC1在海洛因致心律失常中的作用

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作者 管雅玲 苏丽萍 +4 位作者 刘丽 季敏 庄梦婕 朱森森 蒲红伟 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第8期720-726,共7页

目的探讨葡萄糖调节蛋白75(GRP75)和电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)在海洛因致心律失常中的作用。方法基于本课题组前期获得的海洛因干预原代心肌细胞转录组数据和基因表达数据库(GEO)下载的GSE31821数据集,利用R语言筛选出共同的差异表... 目的探讨葡萄糖调节蛋白75(GRP75)和电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)在海洛因致心律失常中的作用。方法基于本课题组前期获得的海洛因干预原代心肌细胞转录组数据和基因表达数据库(GEO)下载的GSE31821数据集,利用R语言筛选出共同的差异表达基因(DEGs),对DEGs进行富集分析。利用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,使用Cytoscape软件筛选关键基因。利用HDOCK软件对关键基因进行分子对接预测,进行体内实验验证。将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、模型+7 d组、模型+14 d组、模型+21 d组,每组12只。构建海洛因成瘾大鼠模型,通过免疫组织化学染色、实时定量PCR检测心肌组织中差异基因的表达水平。结果筛选出51个DEGs,主要富集在横纹肌细胞发育、肌节、肌动蛋白结合过程等功能以及心律失常性右心室心肌病、钙信号通路、凋亡等方面。结合PPI和Cytoscape的结果,筛选出GRP75、VDAC1这2个关键基因。分子对接结果显示,GRP75与VDAC1存在相互作用关系,相互作用力强,能够形成稳定结构。免疫组织化学染色和实时定量PCR结果显示,与对照组相比,模型组大鼠GRP75、VDAC1表达水平显著升高(P<0.05),且随着海洛因干预时间的延长,GRP75、VDAC1的表达呈时间依赖性方式显著升高(P<0.05)。结论GRP75和VDAC1可能参与海洛因致心律失常的过程。 展开更多

关键词 海洛因 心律失常 葡萄糖调节蛋白75 电压依赖性阴离子通道1

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抑制铁死亡减轻敌草快引起的斑马鱼急性肾损伤的机制

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作者 欧泽金 李瀛 +6 位作者 陈诗 王梓译 何美仪 陈志成 唐侍豪 孟晓静 王致 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第8期1743-1750,共8页

目的通过构建斑马鱼敌草快急性中毒模型,探讨铁死亡在敌草快引起的急性肾损伤的作用及分子机制。方法采用肾脏标记Tg(Eco.Tshb:EGFP)和中性粒细胞标记Tg(lyz:dsRed2)的转基因斑马鱼构建急性肾损伤模型,设置空白对照组、庆大霉素阳性对... 目的通过构建斑马鱼敌草快急性中毒模型,探讨铁死亡在敌草快引起的急性肾损伤的作用及分子机制。方法采用肾脏标记Tg(Eco.Tshb:EGFP)和中性粒细胞标记Tg(lyz:dsRed2)的转基因斑马鱼构建急性肾损伤模型,设置空白对照组、庆大霉素阳性对照组、敌草快中毒组以及铁死亡抑制剂组,检测斑马鱼肾损伤、炎症反应以及铁死亡相关指标,采用Western blotting检测电压依赖性阴离子选择性通道蛋白1(VDAC1)和线粒体铁蛋白(FTMT)的表达水平。结果敌草快引起的急性肾损伤具有明显剂量效应关系,损伤程度与暴露浓度成正比,同时诱导明显的氧化应激和炎症反应。罗丹明代谢法和HE染色发现,肾小球过滤功能随着敌草快暴露浓度增加而下降(P<0.001)。免疫荧光显示,敌草快暴露后斑马鱼肾组织铁死亡标志物GPX4和FTH1的表达水平发生明显变化,而给予铁死亡抑制剂Ferrostatin-1干预后GPX4表达上调(P=0.040),FTH1表达下调(P=0.042),罗丹明B标记葡聚糖代谢率改善(P=0.024)。敌草快暴露引起VDAC1和FTMT表达水平上调(P<0.001),应用铁死亡抑制剂和VDAC1抑制剂VBIT-12后FTMT下调尤为明显。结论铁死亡参与敌草快致急性肾损伤的分子机制,并且VDAC1和FTMT参与其中的调控机制,可能是潜在的干预靶点。 展开更多

关键词 敌草快 急性肾损伤 铁死亡 电压依赖性阴离子选择性通道蛋白1 线粒体铁蛋白

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玉米CMS-C不育系及保持系vdac基因的克隆与表达分析 被引量：1

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作者 王继玥 汪生庆 曹墨菊 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1162-1168,共7页

为了探讨玉米C胞质花粉败育的分子机制本研究利用RT-PCR技术在玉米不育系C48-2及保持系N48-2单核期花药中克隆了vdac1a和vdac1b基因。序列分析发现,C48-2和N48-2间vdac1b的序列完全一致,而vdac1a在C48-2和N48-2间存在单碱基差异。vdac1... 为了探讨玉米C胞质花粉败育的分子机制本研究利用RT-PCR技术在玉米不育系C48-2及保持系N48-2单核期花药中克隆了vdac1a和vdac1b基因。序列分析发现,C48-2和N48-2间vdac1b的序列完全一致,而vdac1a在C48-2和N48-2间存在单碱基差异。vdac1a推定蛋白质的生物信息学预测显示,相对于N48-2,C48-2编码的VDAC1a蛋白理化性质以及结构发生了变化,可能导致C48-2线粒体膜上电压依赖性阴离子通道(VDAC)关闭,活性氧(ROS)上升,线粒体渗透孔(PTP)持续开放,最终引起细胞凋亡。通过Real-Time qPCR检测了vdac1a基因在C48-2和N48-2小孢子发育的花粉母细胞时期、四分体时期、单核期以及双核期的表达情况。结果表明,相对于N48-2,花粉母细胞时期和双核期vdac1a基因在C48-2中上调表达。这些结果为进一步探索vdac1a基因差异表达与花粉败育的关系奠定基础。 展开更多

关键词 玉米 CMS-C 电压依赖性阴离子通道 差异表达

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肥城桃果实VDAC基因的克隆、生物信息学分析及蛋白诱导表达 被引量：1

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作者 衣冠帅 刘雨辰 朱树华 《山东农业科学》 2016年第4期1-7,共7页

线粒体膜通透性转换孔(MPTP)是线粒体膜上的一种蛋白复合体,在线粒体介导的程序性死亡过程中起着重要作用。电压依赖型阴离子通道蛋白(VDAC)是MPTP的重要组成蛋白,可调节其开放与关闭,但VDAC在植物体中的作用机理尚不明确。本试验通过RT... 线粒体膜通透性转换孔(MPTP)是线粒体膜上的一种蛋白复合体,在线粒体介导的程序性死亡过程中起着重要作用。电压依赖型阴离子通道蛋白(VDAC)是MPTP的重要组成蛋白,可调节其开放与关闭,但VDAC在植物体中的作用机理尚不明确。本试验通过RT-PCR结合DNA末端快速扩增(RACE)方法,克隆得到肥城桃果实线粒体VDAC基因cDNA,全长共1 225 bp,其中编码区828 bp,编码276个氨基酸;氨基酸序列比对和系统进化树分析发现,桃果实VDAC与其它植物的VDAC蛋白具有较高的一致性;体外构建了pET-30a-VDAC重组表达载体,并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达;使用镍柱纯化法,得到纯化的重组蛋白,为下一步研究桃果实VDAC蛋白的结构和功能奠定了基础。 展开更多

关键词 肥城桃 线粒体 电压依赖型阴离子通道蛋白(VDAC) 基因克隆 生物信息学分析 蛋白表达

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铁死亡途径及其相关分子泛素化修饰的研究进展 被引量：6

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作者 杨晓妍 周媛静 +1 位作者 罗秀菊 彭军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期208-212,共5页

铁死亡是细胞膜上多不饱和脂肪酸磷脂过氧化损伤引起的一种铁依赖性细胞死亡方式,涉及多条途径,包括铁稳态调节途径、胱氨酸谷氨酸反向转运体(system X-C)途径和电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)途径等。铁... 铁死亡是细胞膜上多不饱和脂肪酸磷脂过氧化损伤引起的一种铁依赖性细胞死亡方式,涉及多条途径,包括铁稳态调节途径、胱氨酸谷氨酸反向转运体(system X-C)途径和电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel,VDAC)途径等。铁死亡参与多种疾病(如心梗、脑卒中、癌症和退行性疾病等)的发生发展过程。泛素化是机体内各种蛋白分子翻译后修饰的重要形式。研究表明,通过对铁死亡途径相关分子泛素化水平的调控可调节细胞铁死亡。靶向调控铁死亡途径相关分子泛素化水平可有效促进或抑制铁死亡,有望成为治疗癌症或心脑血管疾病的新策略。该文将就铁死亡途径及其相关分子泛素化修饰的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 铁死亡 泛素化 铁代谢 细胞死亡 胱氨酸谷氨酸反向转运体 电压依赖性阴离子通道

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外泌体负载的KV11通过VDAC1和自噬机制对角膜新生血管的抑制作用

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作者 陈文倩 杜玮 于文贞 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期108-116,共9页

目的探讨外泌体(EXO)负载的抗新生血管短肽KV11在角膜新生血管(CNV)中的作用及其机制。方法利用EXO锚定肽CP05将KV11结合到血管内皮来源的EXO膜表面,形成EXO-KV11。通过Apogee纳米流式分析EXO负载KV11的效率和最佳浓度比。选取8周龄SPF... 目的探讨外泌体(EXO)负载的抗新生血管短肽KV11在角膜新生血管(CNV)中的作用及其机制。方法利用EXO锚定肽CP05将KV11结合到血管内皮来源的EXO膜表面,形成EXO-KV11。通过Apogee纳米流式分析EXO负载KV11的效率和最佳浓度比。选取8周龄SPF级健康雄性SD大鼠100只,其中10只大鼠不做任何处理,为正常对照组;其余大鼠在建立碱烧伤诱导CNV大鼠模型后,采用随机数字表法随机将大鼠分为EXO-KV11组、KV11组和生理盐水组,每组各30只。从碱烧伤后第1天开始每隔1天,各组分别结膜下注射100μl EXO-KV11(25μg)、KV11(25μg)或生理盐水。观察第1、4、7、14天时CNV的生成情况;采用荧光素心室灌注、角膜血管造影法计算CNV面积;采用苏木精-伊红染色法观察各组CNV管腔数量;采用免疫组织化学法检测角膜组织中CD31的表达分布;采用Western blot法检测电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)和内质网应激、自噬及凋亡相关蛋白的表达水平。结果Apogee流式分析确定KV11与EXO最佳浓度比为4∶1,EXO负载KV11效率高达87.5%。碱烧伤后7 d和14 d,各组CNV面积总体比较差异均有统计学意义(F=4.613、15.590,均P<0.05),其中碱烧伤后7 d,EXO-KV11组CNV面积小于KV11组和生理盐水组;碱烧伤后14 d,EXO-KV11组和KV11组CNV面积均小于生理盐水组,EXO-KV11组CNV面积小于KV11组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。角膜荧光铺片定量分析结果显示,生理盐水组、KV11组和EXO-KV11组CNV相对荧光面积分别为(8.3±1.7)%、(5.2±1.6)%和(3.4±0.7)%,总体比较差异有统计学意义(F=11.735,P<0.01),其中KV11组和生理盐水组CNV相对荧光面积均大于EXO-KV11组,生理盐水组CNV相对荧光面积大于KV11组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。碱烧伤后14 d,生理盐水组基质内可见大量新生血管管腔;KV11组基质内新生血管管腔数量较生理盐水组少;EXO-KV11组角膜结构趋于正常,少见新生血管管腔。生理盐水组角膜基质内可见大量CD31染色阳性细胞,细胞围成大小不一的管腔结构;KV11组角膜基质内CD31染色阳性细胞围成的管腔数量较生理盐水组少,EXO-KV11组管腔数量较KV11组少。EXO-KV11组、KV11组、生理盐水组和正常对照组VDAC1、蛋白质激酶R样内质网激酶(PERK)、自噬接头蛋白(SQSTM1/p62)、活化半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3)相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F=35.960、8.947、17.791、101.168,均P<0.01),其中EXO-KV11组VDAC1、PERK、p62、cleaved caspase 3相对表达量高于KV11组和生理盐水组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。各组自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)Ⅱ/LC3BⅠ蛋白相对表达量总体比较,差异无统计学意义(F=0.445,P=0.727)。结论与KV11相比,EXO-KV11可通过增加VDAC1表达、刺激PERK产生、抑制自噬流的发生等机制更有效地抑制CNV。 展开更多

关键词 角膜新生血管 自噬 外泌体 纤溶酶原kringle 5 电压依赖性阴离子通道1

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长链非编码RNA-NRON对小鼠心肌梗死后细胞凋亡的作用机制研究 被引量：1

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作者 高涵 张春晶 +3 位作者 李淑艳 师岩 郭红艳 杨超 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期218-223,共6页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-NRON对小鼠心肌梗死(MI)后细胞凋亡的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分为假手术(Sham)组、MI组、MI合并注入lncRNA-NRON干扰慢病毒(MI+shNRON)组和MI合并注入NC阴性对照慢病毒(MI+NC)组。采用实时PCR检测ln... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-NRON对小鼠心肌梗死(MI)后细胞凋亡的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分为假手术(Sham)组、MI组、MI合并注入lncRNA-NRON干扰慢病毒(MI+shNRON)组和MI合并注入NC阴性对照慢病毒(MI+NC)组。采用实时PCR检测lncRNA-NRON的表达;用HE染色、TTC染色、TUNEL染色检测心肌组织病理损伤、MI面积、细胞凋亡情况;用RPIseq数据库预测lncRNA-NRON与电压依赖性阴离子通道蛋白(VDAC)的互作概率;用Western blotting检测lncRNA-NRON对VDAC蛋白表达的影响。结果lncRNA-NRON在MI组表达显著升高,特异性敲减lncRNA-NRON后,可减轻心肌组织病理损伤,减少MI面积,抑制细胞凋亡,lncRNA-NRON与VDAC的互作概率高达0.9,且lncRNA-NRON可调控VDAC的蛋白表达。结论敲减lncRNA-NRON可抑制MI后心肌损伤的发生,其机制可能是通过lncRNA-NRON与VDAC结合并抑制其表达,从而影响细胞凋亡进程。 展开更多

关键词 长链非编码RNA-NRON 心肌梗死 电压依赖性阴离子通道蛋白 细胞凋亡

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细胞凋亡与线粒体通透性转变孔的研究进展 被引量：31

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作者 沈方 沈倩 夏强 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2005年第2期191-196,共6页

线粒体通透性转变孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore,MPTP)位于线粒体内外膜之间,由多个蛋白质组成,与细胞凋亡密切相关。在多种凋亡信号如促凋亡蛋白Bax、Bad、Bid和Ca2+、活性氧类等的作用下开放,使线粒体通透性发生转变,... 线粒体通透性转变孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore,MPTP)位于线粒体内外膜之间,由多个蛋白质组成,与细胞凋亡密切相关。在多种凋亡信号如促凋亡蛋白Bax、Bad、Bid和Ca2+、活性氧类等的作用下开放,使线粒体通透性发生转变,线粒体肿胀,线粒体跨膜电位降低,线粒体呼吸链受损,ATP合成受抑制,线粒体释放凋亡诱导因子及细胞色素C,通过不同信号转导途径,激活Caspase级联反应或其他凋亡相关蛋白,使DNA断裂,产生凋亡小体,细胞凋亡。Bcl-2、Bcl-xL、环孢菌素A、米酵菌酸等则可通过不同途径对抗凋亡。通过对MPTP开放机制以及对线粒体膜钾通道和解偶联蛋白调控的研究,可能会为细胞保护提供重要依据。 展开更多

关键词 线粒体 细胞凋亡 线粒体通透性转变孔 电压依赖性阴离子通道 腺苷酸转位子 细胞保护

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