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SARS-CoV S1蛋白在甲醇营养型酵母中表达及鉴定被引量：1: 1; 作者何仰东姜曼 +1 位作者倪兵吴玉章《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第18期1837-1840,共4页; 目的获得保持生物学活性、易于纯化、高产量的严重急性呼吸道综合征冠状病毒(severe acute resp iratorysyndrom coronavirus,SARS-CoV)S1蛋白,以便进一步研究S1蛋白及其抗体的功能。方法将SARS-CoV S1基因重组入酵母表达载体pMETαA,... 展开更多; 关键词 SARS-COV S1蛋白真核表达系统甲醇营养型酵母; 在线阅读下载PDF 职称材料

人胰岛素样生长因子Ⅱ在甲醇营养型酵母P.pastoris中的表达、分泌和性质研究被引量：1: 2; 作者李旌军黄秉仁《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期893-898,共6页; 为获得ＩＧＦ－Ⅱ的高效表达，构建了其多拷贝、分泌型表达载体：含有５个串联的ＩＧＦ－Ⅱ表达单元；由受甲醇诱导的醇氧化酶启动子控制表达；利用啤酒酵母α因子的前导肽引导分泌．线形化表达载体转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ蛋白酶缺陷... 展开更多; 关键词甲醇营养型酵母分泌 IGF-Ⅱ 表达性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

毕赤酵母外源基因表达系统研究进展被引量：8: 3; 作者杜中军朱水芳 +1 位作者黄文胜翟衡《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第4期7-11,共5页; 巴斯德毕赤酵母Pichiapastoris外源基因表达系统已经成功表达了很多胞间型和胞内型蛋白质。与酿酒酵母Saccharomycesceresiviae相比 ,该系统所具有的很多优势使其应用越来越广泛。有关研究主要涉及以下几个方面 :宿主菌株、表达载体、... 展开更多; 关键词毕赤酵母外源基因表达系统研究进展甲醇营养型酵母; 在线阅读下载PDF 职称材料

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA在P.pastoris酵母菌中的表达和鉴定: 4; 作者何诚唐辉滨 +2 位作者田昱宋后燕朱运松《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第5期547-552,共6页; 将编码３７９个氨基酸残基的ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ插入到含ＡＯＸ１启动子和ＰＨＯ１分泌信号肽序列的甲醇营养型酵母载体中，构建成表达质粒ｐＹＩＳ－１．表达质粒转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ甲醇营养型酵母细胞，筛选Ｈｉｓ＋Ｍｕｔ－表... 展开更多; 关键词甲醇营养型酵母表达寡糖链 PAI-1; 在线阅读下载PDF 职称材料

人TRAIL在毕氏酵母表达系统中的表达: 5; 作者王梁华焦炳华《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第5期420-424,共5页; 目的在甲醇营养型酵母（Ｐｉｃｈｉａ）中，表达人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（ＴＲＡＩＬ）分子。方法将可溶性ＴＲＡＩＬ基因片段插入酵母表达载体ｐＩＣ３．５，经氯化锂转化酵母ＧＳ１１５，甲醇诱导表达，５ｄ后用... 展开更多; 关键词甲醇营养型酵母 TRAIL 毕氏酵母表达系位表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白过程的代谢特性被引量：2: 6; 作者王舒郑志永 +5 位作者詹晓北史仲平高敏杰刘立明金坚李华钟《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期11-17,共7页; 分析了重组甲醇营养型毕赤酵母在5L多参数自控发酵罐上生产人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白(HSA-IL-2)的发酵过程。在使用多种在线传感器和离线检测参数的基础上,应用相关性分析的方法将细胞生长的关键酶(乙醇氧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱... 展开更多; 关键词重组甲醇营养型毕赤酵母在线测量酶活分析相关性分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人可溶性凋亡素-2配体在Pichia系统中的表达被引量：2: 7; 作者王梁华朱玉平 +3 位作者娄永华彭燕冯煜焦炳华《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期248-251,共4页; 目的 :在甲醇营养型酵母 (Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL ,凋亡素 - 2配体 )分子。方法 :人可溶性 TRAIL编码基因片段插入 p IC 3.5酵母表达载体 ,氯化锂转化酵母 GS115株 ,甲醇诱导表达 5 ... 展开更多; 关键词重组人可溶性凋亡素-2 Pichia表达系统细胞毒甲醇营养型酵母; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SARS-CoV S1蛋白在甲醇营养型酵母中表达及鉴定被引量：1: 1; 作者何仰东姜曼倪兵吴玉章; 机构第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第18期1837-1840,共4页; 基金国家重点基础研究发展规划资助项目("973"项目)(2003CB514108); 文摘目的获得保持生物学活性、易于纯化、高产量的严重急性呼吸道综合征冠状病毒(severe acute resp iratorysyndrom coronavirus,SARS-CoV)S1蛋白,以便进一步研究S1蛋白及其抗体的功能。方法将SARS-CoV S1基因重组入酵母表达载体pMETαA,经过酶切和测序鉴定后,通过电穿孔法将重组质粒S1-pMETαA转化入宿主酵母菌株PMAD11,使其在甲醇的诱导下表达目的蛋白。最后用覆盖分析法对重组转化子初步分析,SDS-PAGE和W esntern b lotting法鉴定目的蛋白的表达和特异性。结果酶切鉴定和测序结果证实了S1基因成功地克隆到pMETαA载体中;覆盖分析、SDS-PAGE和免疫印迹法证实S1基因得到正确的表达。结论利用酵母表达系统,成功地克隆和表达了SARS-CoV S1蛋白,为进一步纯化该蛋白和研究其功能奠定了基础。; 关键词 SARS-COV S1蛋白真核表达系统甲醇营养型酵母; Keywords SARS-CoV S1 protein eukaryotic expression system yeast p.methanolica; 分类号 R373.1 [医药卫生—病原生物学] R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人胰岛素样生长因子Ⅱ在甲醇营养型酵母P.pastoris中的表达、分泌和性质研究被引量：1: 2; 作者李旌军黄秉仁; 机构中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期893-898,共6页; 文摘为获得ＩＧＦ－Ⅱ的高效表达，构建了其多拷贝、分泌型表达载体：含有５个串联的ＩＧＦ－Ⅱ表达单元；由受甲醇诱导的醇氧化酶启动子控制表达；利用啤酒酵母α因子的前导肽引导分泌．线形化表达载体转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ蛋白酶缺陷型菌株后，筛选到有ＩＧＦ－Ⅱ表达和分泌的阳性转化子；进一步优化表达、培养条件后，ＩＧＦ－Ⅱ在高密度发酵上清中的产量可达６０ｍｇ／Ｌ．对Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ产生的ｒｈＩＧＦ－Ⅱ的性质分析表明，其具有正确的分子量，Ｎ端和较好的生物活性．; 关键词甲醇营养型酵母分泌 IGF-Ⅱ 表达性质; Keywords Insulin like growth factor Ⅱ(IGF Ⅱ),P.pastoris,High level expression,Secretion; 分类号 Q578 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名毕赤酵母外源基因表达系统研究进展被引量：8: 3; 作者杜中军朱水芳黄文胜翟衡; 机构山东农业大学园艺学院国家动植物检疫实验所; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第4期7-11,共5页; 文摘巴斯德毕赤酵母Pichiapastoris外源基因表达系统已经成功表达了很多胞间型和胞内型蛋白质。与酿酒酵母Saccharomycesceresiviae相比 ,该系统所具有的很多优势使其应用越来越广泛。有关研究主要涉及以下几个方面 :宿主菌株、表达载体、转化方法、外源基因整合、外源蛋白糖基化和高密度发酵培养等。; 关键词毕赤酵母外源基因表达系统研究进展甲醇营养型酵母; Keywords Methylotrophic yeasts Pichia pastoris Expression system; 分类号 Q344.13 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA在P.pastoris酵母菌中的表达和鉴定: 4; 作者何诚唐辉滨田昱宋后燕朱运松; 机构上海医科大学分子遗传学研究室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第5期547-552,共6页; 文摘将编码３７９个氨基酸残基的ＰＡＩ－１ｃＤＮＡ插入到含ＡＯＸ１启动子和ＰＨＯ１分泌信号肽序列的甲醇营养型酵母载体中，构建成表达质粒ｐＹＩＳ－１．表达质粒转化Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ甲醇营养型酵母细胞，筛选Ｈｉｓ＋Ｍｕｔ－表型的转化子，经低密度摇瓶培养，１％甲醇诱导表达７ｄ后，培液经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，ＰＡＩ－１生物活性测定和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实表达出分子量为４３～５１ｋＤ的４条ＰＡＩ－１条带．表达的ＰＡＩ－１能有效地分泌到培液中，占培液总蛋白的２６％左右，达４ｍｇ／Ｌ培液；其比活性为１．１６×１０４ＡＵ／ｍｇ．; 关键词甲醇营养型酵母表达寡糖链 PAI-1; Keywords Methylotrophic yeast Type 1 plasminogen activator inhibitor Expression Oligosaccharide chain; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人TRAIL在毕氏酵母表达系统中的表达: 5; 作者王梁华焦炳华; 机构第二军医大学基础部卫生毒理学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第5期420-424,共5页; 文摘目的在甲醇营养型酵母（Ｐｉｃｈｉａ）中，表达人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（ＴＲＡＩＬ）分子。方法将可溶性ＴＲＡＩＬ基因片段插入酵母表达载体ｐＩＣ３．５，经氯化锂转化酵母ＧＳ１１５，甲醇诱导表达，５ｄ后用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ进行分析，并用Ｌ９２９细胞测定其活性。结果在酵母细胞中表达的ＴＲＡＩＬ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析占总蛋白的５０％以上。; 关键词甲醇营养型酵母 TRAIL 毕氏酵母表达系位表达; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] Q73 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白过程的代谢特性被引量：2: 6; 作者王舒郑志永詹晓北史仲平高敏杰刘立明金坚李华钟; 机构江南大学工业生物技术教育部重点实验室; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期11-17,共7页; 基金国家自然科学基金(60604028) 国家重点基础研究发展规划项目(973)(2007CB714304) 江苏省自然科学基金(BK2006532); 文摘分析了重组甲醇营养型毕赤酵母在5L多参数自控发酵罐上生产人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白(HSA-IL-2)的发酵过程。在使用多种在线传感器和离线检测参数的基础上,应用相关性分析的方法将细胞生长的关键酶(乙醇氧化酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶)酶活和代谢特性相关联。实验结果显示,甲醇诱导后葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶的酶活分别下降了46.1%和66.8%,说明胞内代谢流发生了迁移:三羧酸循环(TCA)和磷酸戊糖途径(HMP)中代谢流通量下降,甲醇完全氧化代谢成为主要代谢流。此外,在不同控制策略下,乙醇氧化酶的酶活和重组蛋白HSA-IL-2表达量也呈现出一定的差异。高溶氧低甲醇控制方式下HSA-IL2的表达量达到27mg/L,比低溶氧高甲醇条件下的表达量高33.7%。; 关键词重组甲醇营养型毕赤酵母在线测量酶活分析相关性分析; Keywords recombinant Pichia pastoris, on-line measurement, enzyme activity analysis, correlation analysis; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人可溶性凋亡素-2配体在Pichia系统中的表达被引量：2: 7; 作者王梁华朱玉平娄永华彭燕冯煜焦炳华; 机构第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期248-251,共4页; 基金国家"九五"科技攻关计划医药生物关键技术基因工程药物"重中之重"专题! (96 -C0 2 -0 1-0 2 )资助; 文摘目的 :在甲醇营养型酵母 (Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL ,凋亡素 - 2配体 )分子。方法 :人可溶性 TRAIL编码基因片段插入 p IC 3.5酵母表达载体 ,氯化锂转化酵母 GS115株 ,甲醇诱导表达 5 d,SDS- PAGE和 Western- blotting确认表达 ,L 92 9细胞鉴定活性。结果 :发现在酵母细胞中重组表达的 TRAIL在 SDS-PAGE上占总蛋白的 5 0 %以上 ,用抗人 TRAIL多抗可以确认表达了 TRAIL重组分子 ,杀伤肿瘤细胞的比活性较原核表达后复性的 TRAIL有明显提高 ,并能诱导几株肿瘤细胞 DNA片段化 ,说明 TRAIL可能已正确折叠并形成活性必需的高级结构。结论 :在 Pichia系统中正确表达了人可溶性 TRAIL分子。; 关键词重组人可溶性凋亡素-2 Pichia表达系统细胞毒甲醇营养型酵母; Keywords ligand, apoptosis 2 Pichia pastoris expression system cytotoxicity; 分类号 R73－3 [医药卫生—肿瘤] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	SARS-CoV S1蛋白在甲醇营养型酵母中表达及鉴定	何仰东姜曼倪兵吴玉章	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人胰岛素样生长因子Ⅱ在甲醇营养型酵母P.pastoris中的表达、分泌和性质研究	李旌军黄秉仁	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1999	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	毕赤酵母外源基因表达系统研究进展	杜中军朱水芳黄文胜翟衡	《生物技术通报》 CAS CSCD	2002	8	在线阅读下载PDF 职称材料
4	Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂cDNA在P.pastoris酵母菌中的表达和鉴定	何诚唐辉滨田昱宋后燕朱运松	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1998	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人TRAIL在毕氏酵母表达系统中的表达	王梁华焦炳华	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	重组毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白过程的代谢特性	王舒郑志永詹晓北史仲平高敏杰刘立明金坚李华钟	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	重组人可溶性凋亡素-2配体在Pichia系统中的表达	王梁华朱玉平娄永华彭燕冯煜焦炳华	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	2	在线阅读下载PDF 职称材料