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布鲁菌半胱氨酸水解酶在甲硫氨酸循环中的催化活性研究
被引量：
1
1
作者
徐达
吴小卡
+6 位作者
荆雅玮
左佳坤
米荣升
黄燕
陈兆国
王成明
韩先干
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期697-702,共6页
[目的]细菌的sah H基因编码S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(Sah H),该酶参与细菌的甲硫氨酸循环(AMC),调控细菌的多种生理功能。[方法]通过构建重组表达质粒p ET28a-Bru-sah H和p ET28a-Pse-sah H,分别表达布鲁菌(Brucella abortus)S2308株...
[目的]细菌的sah H基因编码S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(Sah H),该酶参与细菌的甲硫氨酸循环(AMC),调控细菌的多种生理功能。[方法]通过构建重组表达质粒p ET28a-Bru-sah H和p ET28a-Pse-sah H,分别表达布鲁菌(Brucella abortus)S2308株和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)PAO1株的Sah H重组蛋白Bru-Sah H和Pse-Sah H。将纯化后的Bru-Sah H、Pse-Sah H以及我们前期表达纯化的禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)的Pfs和Lux S蛋白,分别在体外催化S-腺苷同型半胱氨酸(SAH),通过对产物同型半胱氨酸(HCY)的浓度测定,评价不同重组蛋白的催化活性,并对催化底物时产生的自诱导分子2(AI-2)活性进行检测。[结果]Bru-Sah H和Pse-Sah H分别催化1 mmol·L-1SAH生成38和47μmol·L-1HCY,而APEC的Pfs和Lux S蛋白能催化相同浓度的SAH产生401μmol·L-1HCY。运用哈维弧菌BB170检测上述底物的AI-2活性,结果表明只有同时采用AEPC的Pfs和Lux S蛋白催化SAH,才能形成有活性的AI-2分子,而Bru-Sah H和Pce-Sah H均不能催化SAH形成活性AI-2分子。[结论]Bru-Sah H能催化SAH生成HCY,为进一步研究sah H在布鲁菌感染过程中的作用提供依据。
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关键词
布鲁菌
甲硫氨酸循环
S-腺苷同型半胱氨酸水解酶
催化活性
信号分子AI-2
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职称材料
题名
布鲁菌半胱氨酸水解酶在甲硫氨酸循环中的催化活性研究
被引量：
1
1
作者
徐达
吴小卡
荆雅玮
左佳坤
米荣升
黄燕
陈兆国
王成明
韩先干
机构
中国农业科学院上海兽医研究所
扬州大学兽医学院
奥本大学兽医学院
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期697-702,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31572546
31370045)
国家农产品质量安全风险评估计划项目(GJFP201700703)
文摘
[目的]细菌的sah H基因编码S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(Sah H),该酶参与细菌的甲硫氨酸循环(AMC),调控细菌的多种生理功能。[方法]通过构建重组表达质粒p ET28a-Bru-sah H和p ET28a-Pse-sah H,分别表达布鲁菌(Brucella abortus)S2308株和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)PAO1株的Sah H重组蛋白Bru-Sah H和Pse-Sah H。将纯化后的Bru-Sah H、Pse-Sah H以及我们前期表达纯化的禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)的Pfs和Lux S蛋白,分别在体外催化S-腺苷同型半胱氨酸(SAH),通过对产物同型半胱氨酸(HCY)的浓度测定,评价不同重组蛋白的催化活性,并对催化底物时产生的自诱导分子2(AI-2)活性进行检测。[结果]Bru-Sah H和Pse-Sah H分别催化1 mmol·L-1SAH生成38和47μmol·L-1HCY,而APEC的Pfs和Lux S蛋白能催化相同浓度的SAH产生401μmol·L-1HCY。运用哈维弧菌BB170检测上述底物的AI-2活性,结果表明只有同时采用AEPC的Pfs和Lux S蛋白催化SAH,才能形成有活性的AI-2分子,而Bru-Sah H和Pce-Sah H均不能催化SAH形成活性AI-2分子。[结论]Bru-Sah H能催化SAH生成HCY,为进一步研究sah H在布鲁菌感染过程中的作用提供依据。
关键词
布鲁菌
甲硫氨酸循环
S-腺苷同型半胱氨酸水解酶
催化活性
信号分子AI-2
Keywords
Brucella abortus
activated methionine cycle
S-adenosylhomocysteine hydrolase （SahH）
catalytic activity
autoinducer-2
分类号
Q343.1 [生物学—遗传学]
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
布鲁菌半胱氨酸水解酶在甲硫氨酸循环中的催化活性研究
徐达
吴小卡
荆雅玮
左佳坤
米荣升
黄燕
陈兆国
王成明
韩先干
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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