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TMEM16A钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的表达及其电生理特性研究被引量：6: 1; 作者郝峰白雪松 +6 位作者鞠晓红方芳藏雨轩朱杭飞向国艳张雲乔袁忠海《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1633-1639,共7页; 目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效... 展开更多; 关键词跨膜蛋白16A 钙激活氯离子通道膜片钳术 Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

玉郎伞多糖通过调控Caveolin-1表达对脂多糖诱导的甲状腺滤泡上皮细胞炎症损伤和凋亡的影响被引量：4: 2; 作者辛思源杨志新 +2 位作者柳金英刘慧郭建恩《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第14期1759-1765,1772,共8页; 目的探讨玉郎伞多糖(YLSPS)对脂多糖(LPS)诱导的人甲状腺滤泡上皮细胞炎症损伤和凋亡的影响及作用机制。方法不同浓度的YLSPS处理LPS诱导的人甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori3-1后,转染Caveolin-1过表达载体至Nthy-ori3-1细胞;酶联免疫吸附... 展开更多; 关键词玉郎伞多糖 CAVEOLIN-1 甲状腺滤泡上皮细胞炎症细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

正常人和自身免疫性甲状腺疾病患者甲状腺细胞对碘致抗原表达的不同敏感性被引量：1: 3; 作者刘东方邓华聪 +3 位作者许改平雄波侯平程伟《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第22期2272-2275,共4页; 目的探讨碘对体外培养的G raves病(GD)、桥本甲状腺炎(HT)、正常人甲状腺滤泡上皮细胞(TEC)抗原表达的影响。方法分离培养正常、GD和HT TEC,给予不同浓度NaI干预,免疫组化检测各组TEC CD54、HLA-DR表达的水平,流式细胞仪检测各组细胞CD8... 展开更多; 关键词自身免疫性甲状腺疾病甲状腺滤泡上皮细胞碘 IL-1β 表面抗原; 在线阅读下载PDF 职称材料

ANO1稳定转染细胞模型的构建及生理特性: 4; 作者徐连秀狄文慧 +4 位作者吴明达刘雪莹王国庆胡江郝峰《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期52-57,共6页; 为了构建稳定转染钙激活氯离子通道(CaCCs)细胞模型并研究其生理特性,本试验采用脂质体转染和抗生素筛选获取共表达阴离子通道1(ANO1)蛋白和黄色荧光蛋白双突变体(YFP-H148Q/I152L)的Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞;用倒置荧光显微... 展开更多; 关键词阴离子通道1 细胞模型膜片钳大鼠甲状腺滤泡上皮细胞钙激活氯离子通道; 在线阅读下载PDF 职称材料

pEGFP-N1脂质体转染方法的优化及其应用被引量：5: 5; 作者李凤娥向国艳 +4 位作者孔繁利郝峰杨紫嫣郑岩方芳《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期612-616,I0004,共6页; 目的:应用脂质体介导的转染方法将pEGFP-N1转染入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中,并获得较佳的优化方案,阐明该优化条件在转染其他目的基因时的适用性。方法:分别选取不同配比的质粒和脂质体,将pEGFP-N1转入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮... 展开更多; 关键词脂质体 PEGFP-N1 转染甲状腺滤泡上皮细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TMEM16A钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的表达及其电生理特性研究被引量：6: 1; 作者郝峰白雪松鞠晓红方芳藏雨轩朱杭飞向国艳张雲乔袁忠海; 机构吉林医药学院生物化学检验教研室吉林医药学院营养教研室吉林医药学院病原教研室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1633-1639,共7页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.81202031) 吉林省教育厅基金资助课题(No.2013-351 +2 种基金 No.2009-510) 吉林医药学院大学生科研基金资助课题(吉医学科字[2012]第12号); 文摘目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效率和表达效果,杀稻瘟菌素(blasticidin)进行抗生素筛选,获取稳定表达TMEM16A的FRT细胞株。RT-PCR和免疫荧光检测TMEM16A于FRT细胞的表达情况;倒置荧光显微镜下观察TMEM16A在FRT细胞中的表达和定位;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFPH148Q/I152L检测TMEM16A钙激活氯离子通道的功能。结果:BamHⅠ和XbaⅠ双酶切的琼脂糖凝胶电泳和测序结果表明目的基因TMEM16A成功克隆到真核表达载体pUB6/V5中;RT-PCR和免疫荧光实验结果表明经杀稻瘟菌素筛选后的FRT细胞在mRNA和蛋白水平表达TMEM16A,倒置显微镜下观察结果表明TMEM16A在FRT细胞膜上有表达;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFP-H148Q/I152L证实稳定表达于FRT细胞的TMEM16A具有经典的钙激活氯离子通道特性。结论:FRT细胞可高效表达TMEM16A。TMEM16A是钙激活氯离子通道的分子基础。; 关键词跨膜蛋白16A 钙激活氯离子通道膜片钳术 Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞; Keywords Transmembrane protein 16A Calcium-activated chloride channels Patch-clamp techniques Fischer rat thyroid follicular epithelial cells; 分类号 R363 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名玉郎伞多糖通过调控Caveolin-1表达对脂多糖诱导的甲状腺滤泡上皮细胞炎症损伤和凋亡的影响被引量：4: 2; 作者辛思源杨志新柳金英刘慧郭建恩; 机构承德医学院; 出处《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第14期1759-1765,1772,共8页; 基金河北省自然科学基金项目(编号:H2021406054) 河北省高等学校科学技术研究项目(编号:QN2020201) 河北省高等教育教学改革研究与实践项目(编号:2020GJJG595)。; 文摘目的探讨玉郎伞多糖(YLSPS)对脂多糖(LPS)诱导的人甲状腺滤泡上皮细胞炎症损伤和凋亡的影响及作用机制。方法不同浓度的YLSPS处理LPS诱导的人甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori3-1后,转染Caveolin-1过表达载体至Nthy-ori3-1细胞;酶联免疫吸附法检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Caveolin-1 mRNA表达水平,蛋白印迹(Western Blot)法检测Caveolin-1蛋白表达。YLSPS处理甲状腺炎模型小鼠,显微镜观察各组小鼠甲状腺组织形态变化。结果YLSPS可降低LPS诱导的Nthy-ori3-1细胞中IL-1β、IL-6和MCP-1水平、细胞凋亡率(P<0.05),促进细胞中Caveolin-1的mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),且具有剂量依赖性。过表达Caveolin-1也可降低LPS诱导的Nthy-ori3-1细胞中IL-1β、IL-6和MCP-1水平及细胞凋亡率。YLSPS可改善甲状腺炎模型小鼠甲状腺组织形态,降低小鼠血清中IL-1β、IL-6和MCP-1水平,促进甲状腺组织中Caveolin-1蛋白表达。结论YLSPS可抑制LPS诱导的Nthy-ori3-1细胞炎症损伤和凋亡,其作用机制与上调Caveolin-1表达有关。; 关键词玉郎伞多糖 CAVEOLIN-1 甲状腺滤泡上皮细胞炎症细胞凋亡; Keywords Yutaro polysaccharide Caveolin-1 thyroid follicular epithelial cells inflammation cell apoptosis; 分类号 R581.1 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名正常人和自身免疫性甲状腺疾病患者甲状腺细胞对碘致抗原表达的不同敏感性被引量：1: 3; 作者刘东方邓华聪许改平雄波侯平程伟; 机构重庆医科大学附属第一医院内分泌科重庆医科大学附属第二医院内分泌科重庆璧山县人民医院外科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第22期2272-2275,共4页; 基金重庆市卫生局青年人才基金资助项目(2001)~~; 文摘目的探讨碘对体外培养的G raves病(GD)、桥本甲状腺炎(HT)、正常人甲状腺滤泡上皮细胞(TEC)抗原表达的影响。方法分离培养正常、GD和HT TEC,给予不同浓度NaI干预,免疫组化检测各组TEC CD54、HLA-DR表达的水平,流式细胞仪检测各组细胞CD80水平的变化,同时放免测定培养液中细胞因子TNF-α、IL-1β水平;观察加碘前后抗原表达的变化。结果NaI可以使GD、HT患者TEC表达的CD54和HLA-DR增加HT的CD80表达增加(P<0.05),并使培养液中细胞因子TNF-α、IL-1β分泌增加(P<0.05);但NaI不能使正常TEC表达上述抗原(P>0.05)。结论CD54、CD80和HLA-DR在AITD的免疫学发病机制中起重要作用;碘可以作为一个重要的环境因子,通过与局部环境中的细胞因子及其它免疫炎症介质的协同作用间接影响作为抗原提呈细胞(antigen present cell,APC)而激活的TEC,碘不是AITD的始发因素,但在AITD的易感个体或者已有早期免疫功能紊乱的隐性患者,碘可能增加甲状腺局部细胞因子如IL-1β等分泌,使相应抗原表达上调,导致AITD的发生。; 关键词自身免疫性甲状腺疾病甲状腺滤泡上皮细胞碘 IL-1β 表面抗原; Keywords AITD thyroid cell iodide IL-1β membrane antigen; 分类号 R322.51 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ANO1稳定转染细胞模型的构建及生理特性: 4; 作者徐连秀狄文慧吴明达刘雪莹王国庆胡江郝峰; 机构吉林医药学院检验学院延边大学医学院北华大学医学技术学院吉林医药学院附属医院; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期52-57,共6页; 基金吉林省中医药科技项目(2021092) 国家自然科学基金项目(81601234) 吉林省教育厅项目(JJKH20180370KJ,JJKH20220462KJ)。; 文摘为了构建稳定转染钙激活氯离子通道(CaCCs)细胞模型并研究其生理特性,本试验采用脂质体转染和抗生素筛选获取共表达阴离子通道1(ANO1)蛋白和黄色荧光蛋白双突变体(YFP-H148Q/I152L)的Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞;用倒置荧光显微镜观察ANO1和YFP-H148Q/I152L在FRT细胞的表达情况;用流式细胞仪检测细胞模型纯度;用荧光淬灭动力学试验检测细胞模型功能;用细胞模型或膜片钳技术研究ANO1生理特性,包括转运阴离子的特性、不同激活剂及抑制剂对ANO1的调控作用、ANO1电流受Ca^(2+)调控作用等。结果显示,倒置荧光显微镜下可观察到清晰的荧光信号;荧光淬灭动力学试验证明,此细胞模型可用于ANO1生理特性的研究;ANO1具有转运阴离子的特性;钙激活氯离子通道激活剂可以使ANO1开放且呈剂量依赖关系;钙激活氯离子通道抑制剂可抑制ANO1开放且具有剂量依赖关系;ANO1电流呈现钙依赖的特性;高浓度Ca^(2+)引起Run-down现象。结果表明,本试验成功构建ANO1细胞模型,ANO1具有经典的钙激活氯离子通道的生理特性。; 关键词阴离子通道1 细胞模型膜片钳大鼠甲状腺滤泡上皮细胞钙激活氯离子通道; Keywords anoctamin 1(ANO1) cell model patch clamp rat thyroid follicular cell calcium activated chloride channel(CaCC); 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名pEGFP-N1脂质体转染方法的优化及其应用被引量：5: 5; 作者李凤娥向国艳孔繁利郝峰杨紫嫣郑岩方芳; 机构北华大学附属医院神经二科北华大学基础医学院病理生理教研室吉林医药学院生物化学检验教研室吉林医药学院病原教研室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期612-616,I0004,共6页; 基金国家自然科学基金资助课题(812022031) 吉林省卫计委科研计划项目资助课题(2014Z103) +1 种基金 2013-351); 文摘目的:应用脂质体介导的转染方法将pEGFP-N1转染入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中,并获得较佳的优化方案,阐明该优化条件在转染其他目的基因时的适用性。方法:分别选取不同配比的质粒和脂质体,将pEGFP-N1转入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞。转染后36h,倒置荧光显微镜和流式细胞术检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况和转染效率;台盼蓝染色法检测细胞存活率,以此获得优化的转染条件。同时将pEGFP-Aquaporin2、pEGFP-Aquaporin4和pEGFP-Aquaporin5分别以上述条件转染,并获取相应优化的转染条件。结果:在质粒质量固定的条件下,随着脂质体质量的增加,其转染效率和细胞存活率升高;但是当质粒∶脂质体>1∶4时,转染效率和细胞存活率下降。在质粒和脂质体比例固定而质量增加时,其转染效率和细胞存活率下降;当质粒∶脂质体>3.2μg∶12.8μL时,转染效率降低。应用脂质体介导的方法转染pEGFP-N1和转染pEGFP-Aquaporin2、pEGFP-Aquaporin4和pEGFP-Aquaporin5时,在质粒与脂质体的配比为1∶4(3.2μg∶12.8μL)时,转染效率达最高。结论:在应用脂质体介导的目的基因转染时,pEGFP-N1优化的转染条件具有较为广泛的适用性,可用作后续目的基因高效转染优化条件。; 关键词脂质体 PEGFP-N1 转染甲状腺滤泡上皮细胞; Keywords liposome pEGFP-N1 transfection thyroid follicular epithelial cells; 分类号 R361 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	TMEM16A钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的表达及其电生理特性研究	郝峰白雪松鞠晓红方芳藏雨轩朱杭飞向国艳张雲乔袁忠海	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	玉郎伞多糖通过调控Caveolin-1表达对脂多糖诱导的甲状腺滤泡上皮细胞炎症损伤和凋亡的影响	辛思源杨志新柳金英刘慧郭建恩	《实用医学杂志》 CAS 北大核心	2022	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	正常人和自身免疫性甲状腺疾病患者甲状腺细胞对碘致抗原表达的不同敏感性	刘东方邓华聪许改平雄波侯平程伟	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	ANO1稳定转染细胞模型的构建及生理特性	徐连秀狄文慧吴明达刘雪莹王国庆胡江郝峰	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	pEGFP-N1脂质体转染方法的优化及其应用	李凤娥向国艳孔繁利郝峰杨紫嫣郑岩方芳	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2016	5	在线阅读下载PDF 职称材料