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敲低长链非编码RNA AFAP1-AS1抑制TPC-1甲状腺乳头状癌细胞上皮间质转化及其侵袭和迁移 被引量:5
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作者 范慧洁 董其娟 +4 位作者 于江红 殷璐 孙晓菲 杨雪 张闻宇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期54-60,共7页
目的检测甲状腺乳头状癌组织长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白丝相关蛋白1反义RNA1(AFAP1-AS1)的表达,敲低TPC-1甲状腺乳头状癌细胞AFAP1-AS1,研究其对TPC-1细胞上皮间质转化(EMT)的影响及相关分子机制。方法采用实时定量PCR检测60例甲状... 目的检测甲状腺乳头状癌组织长链非编码RNA(lncRNA)肌动蛋白丝相关蛋白1反义RNA1(AFAP1-AS1)的表达,敲低TPC-1甲状腺乳头状癌细胞AFAP1-AS1,研究其对TPC-1细胞上皮间质转化(EMT)的影响及相关分子机制。方法采用实时定量PCR检测60例甲状腺乳头状癌组织lncRNA AFAP1-AS1表达;利用RNA干扰技术(RNAi)敲低TPC-1甲状腺乳头状癌细胞AFAP1-AS1,设置AFAP1-AS1敲低(shAFAP1-AS1)组和阴性对照RNA(shNC)组及未转染的TPC-1细胞为对照组。通过集落形成实验检测TPC-1细胞集落形成能力、 TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力,划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;通过实时定量PCR检测敲低AFAP1-AS1后,细胞上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、β联蛋白(β-catenin)、锌指转录因子snail2的mRNA水平, Western blot法检测其蛋白水平。结果与癌旁组比较,甲状腺乳头状癌组中AFAP1-AS1 mRNA表达水平显著增加;敲低AFAP1-AS1后, TPC-1细胞的集落形成能力、侵袭和迁移能力均显著降低;与shNC组和对照组相比,敲低AFAP1-AS1后,细胞snail2、 vimentin和β-catenin的mRNA和蛋白表达显著降低,而E-cadherin的mRNA和蛋白表达显著增加。结论 lncRNA AFAP1-AS1在甲状腺乳头状癌组织高表达,敲低TPC-1细胞AFAP1-AS1后,癌细胞的集落形成能力、侵袭和迁移能力显著下调,可能与抑制细胞EMT过程有关。 展开更多
关键词 甲状腺乳头 长链非编码RNA(lncRNA) 肌动蛋白丝相关蛋白1反义RNA1(AFAP1-AS1) tpc-1细胞 上皮间质转化(EMT) 集落形成实验 细胞侵袭 细胞迁移
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lncRNA PCED1B-AS1通过靶向FUS调控MAPK信号通路并影响甲状腺乳头状癌细胞生物学功能
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作者 许晶晶 张峰源 +3 位作者 李家政 李眯 梁嘉辉 陈盛霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2022-2030,共9页
目的:探讨长链非编码RNA PCED1B反义链1(long noncoding RNA PCED1B antisense strand 1,lncRNA PCED1B-AS1)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡的影响及作用机制。方法:体外培养人PTC细胞,R... 目的:探讨长链非编码RNA PCED1B反义链1(long noncoding RNA PCED1B antisense strand 1,lncRNA PCED1B-AS1)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡的影响及作用机制。方法:体外培养人PTC细胞,RT-qPCR检测PCED1B-AS1和肉瘤融合蛋白(fused in sarcoma,FUS)的表达情况;Transwell检测敲减/过表达PCED1B-AS1与FUS对PTC细胞迁移与侵袭的影响;CCK-8和平板克隆实验分析敲减PCED1B-AS1或过表达FUS对PTC细胞增殖的影响;流式细胞术测定敲减PCED1B-AS1对PTC细胞凋亡的影响;生物信息学和RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)实验确定PCED1B-AS1和FUS的靶向结合;荧光原位杂交实验验证PCED1B-AS1和FUS是否存在共定位;Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated pro⁃tein kinase,MAPK)信号通路相关蛋白的表达。结果:(1)与正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1相比,PTC细胞PCED1BAS1表达水平显著升高,FUS表达水平显著降低(P<0.05);(2)敲减PCED1B-AS1与过表达FUS均抑制细胞迁移、侵袭和增殖,促进细胞凋亡(P<0.05);(3)生物信息学分析和RIP验证了PCED1B-AS1与FUS存在靶向结合(P<0.05);(4)PCED1B-AS1和FUS在细胞质中存在共定位;(5)抑制PCED1B-AS1降低MAPK家族蛋白p-ERK1/2、p-JNK和p-P38水平(P<0.05)。结论:lncRNA PCED1B-AS1可抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移与侵袭,促进其凋亡,其机制可能与FUS的表达及MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 甲状腺乳头癌细胞 长链非编码RNA PCED1B反义链1 肉瘤融合蛋白 MAPK信号通路
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昆布多糖对人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1生长信号转导的影响 被引量:5
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作者 高文仓 杨波 庞德湘 《辽宁中医杂志》 CAS 2022年第4期145-149,共5页
目的探讨昆布多糖对人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1生长信号转导影响研究。方法选用TPC-1人乳头状甲状腺癌细胞株,分别采用相应药物进行处理。采用噻唑兰(MTT)染色法检测昆布多糖对TPC-1细胞生长的抑制作用,采用流式细胞术分析昆布多糖对TP... 目的探讨昆布多糖对人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1生长信号转导影响研究。方法选用TPC-1人乳头状甲状腺癌细胞株,分别采用相应药物进行处理。采用噻唑兰(MTT)染色法检测昆布多糖对TPC-1细胞生长的抑制作用,采用流式细胞术分析昆布多糖对TPC-1细胞凋亡及细胞周期比例的影响,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组TPC-1细胞促甲状腺素受体(TSHR)、磷脂酶C-β3(PLC-β3)、蛋白激酶Cα(PKCα)蛋白表达水平。结果干预24h、48h、72h后,与对照组比较,昆布多糖0.4 g/L、0.8 g/L、1.6 g/L、2.0 g/L组TPC-1细胞生长抑制率较高,且昆布多糖0.4 g/L组<0.8 g/L组<1.6 g/L组及2.0 g/L组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,昆布多糖0.4 g/L、0.8 g/L、1.6 g/L组TPC-1细胞凋亡率较高,G2/M期细胞比例较高,且昆布多糖0.4 g/L组<0.8 g/L组<1.6 g/L组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,昆布多糖0.4 g/L、0.8 g/L、1.6 g/L组TSHR、PLC-β3、PKCα蛋白表达水平较低,且昆布多糖0.4 g/L组>0.8 g/L组>1.6 g/L组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论昆布多糖能剂量依赖性抑制人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1生长,使细胞阻滞于G2期,促进细胞凋亡,其作用可能与抑制TSHR-PLC-β3-PKCα生长信号通路转导有关。 展开更多
关键词 昆布多糖 乳头甲状腺癌细胞tpc-1 细胞生长信号通路 甲状腺素受体
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Torin2对人甲状腺乳头状癌细胞株生物学行为影响的研究
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作者 孙洪莉 魏枫 +3 位作者 梁书卿 王晓艳 郑朦 李冉浩 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期22-27,共6页
目的探索一种新的二代哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂9-(6-氨基-3-吡啶基)-1-[3-(三氟甲基)苯基]苯并[H]-1,6-萘啶-2(1H)-酮(Torin2)对人甲状腺乳头状癌(PTC)细胞生物学行为的影响,以期为临床靶向治疗PTC提供新的理论依据。方法对... 目的探索一种新的二代哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂9-(6-氨基-3-吡啶基)-1-[3-(三氟甲基)苯基]苯并[H]-1,6-萘啶-2(1H)-酮(Torin2)对人甲状腺乳头状癌(PTC)细胞生物学行为的影响,以期为临床靶向治疗PTC提供新的理论依据。方法对人PCT的TPC-1细胞株和正常甲状腺Nthy-ori-3细胞株运用不同浓度Torin2,分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期、凋亡情况,划痕愈合实验分析细胞迁移能力。结果 (1)与用药前相比,Nthy-ori-3细胞株均无明显变化;(2)各浓度(100、200、400 nmol/L)Torin2作用于TPC-1细胞24、48、72 h后,细胞增殖抑制率上升,差异有统计学意义(P<0.001),且随作用时间延长(24、48、72 h)和浓度增加,对细胞增殖抑制作用增强;(3)各浓度(100、200、400 nmol/L)Torin2作用于TPC-1细胞24、48 h后,G1期细胞比例逐渐增加,S期细胞比例逐渐下降,且具有时间和浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.001);(4)各浓度(100、200、400 nmol/L)Torin2作用于TPC-1细胞24、48 h后,细胞的凋亡率亦上升,呈现浓度依赖效应,差异有统计学意义(P<0.001);(5)各浓度(100、200、400 nmol/L)Torin2均可抑制TPC-1细胞的迁移,且随浓度的增加抑制能力越强,差异有统计学意义(P<0.001)。结论 Torin2可抑制TPC-1细胞的增殖及迁移、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡,并随着Torin2浓度的增加和作用时间延长而增强。 展开更多
关键词 Torin2 甲状腺乳头状癌细胞株tpc-1 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡 迁移
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雌二醇促进甲状腺乳头状癌细胞生长 被引量:11
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作者 沈美萍 侯大卫 +1 位作者 刘翠萍 武正炎 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期853-856,860,共5页
目的:探讨雌激素对甲状腺癌细胞生长的影响及其作用机制。方法:采用原代细胞培养获得甲状腺乳头状癌细胞,用不同浓度的β-雌二醇与甲状腺乳头状癌细胞共培养,4-甲基偶氮四唑蓝(MTT)法观察甲状腺癌细胞增殖情况,流式细胞仪DNA定量法分析... 目的:探讨雌激素对甲状腺癌细胞生长的影响及其作用机制。方法:采用原代细胞培养获得甲状腺乳头状癌细胞,用不同浓度的β-雌二醇与甲状腺乳头状癌细胞共培养,4-甲基偶氮四唑蓝(MTT)法观察甲状腺癌细胞增殖情况,流式细胞仪DNA定量法分析雌二醇对甲状腺癌细胞细胞周期的影响,半定量RT-PCR法测定雌激素对甲状腺癌细胞CyclinD1mRNA表达的影响。结果:β-雌二醇刺激甲状腺乳头状癌细胞的增殖,并具有时间和浓度依赖性(P<0.05);β-雌二醇刺激甲状腺癌细胞后G0-G1细胞的比例减少,S期细胞增加(P<0.05);CyclinD1mRNA的表达升高(P<0.05)。结论:雌二醇促进甲状腺癌细胞从G1期向S期的转化而促进甲状腺癌细胞生长。 展开更多
关键词 甲状腺乳头癌细胞 Β-雌二醇 CYCLIND1
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姜黄素对甲状腺乳头状癌TPC?1细胞侵袭和迁移的影响 被引量:8
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作者 孙丽静 房辉 +6 位作者 杨莹 王路广 王向楠 南欣雨 于敬坤 郝向波 吴明昊 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第2期126-131,共6页
目的姜黄素对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞株TPC-1的侵袭和迁移影响研究较少。文中旨在探究姜黄素对PTC TPC-1细胞侵袭和迁移的影响,并探讨可能的机制。方法将TPC-1细胞制成单细胞悬液,分别给予含不同姜黄素浓度的培养基干预分为:0μmol/L组... 目的姜黄素对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞株TPC-1的侵袭和迁移影响研究较少。文中旨在探究姜黄素对PTC TPC-1细胞侵袭和迁移的影响,并探讨可能的机制。方法将TPC-1细胞制成单细胞悬液,分别给予含不同姜黄素浓度的培养基干预分为:0μmol/L组(DMSO溶剂)以及10、20、40、60、80、100μmol/L组。CCK8法检测各组细胞存活率的抑制效应;采用划痕和Transwell实验检测姜黄素对TPC-1细胞迁移和侵袭的影响;采用RT-PCR和Western blot方法检测各组细胞葡萄糖转运蛋白1(Glut1)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)mRNA及蛋白的表达水平。结果各组间细胞存活率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。24 h后,0、10、20、40μmol/L组细胞迁徙力分别为:[(0.842±0.096)、(0.911±0.049)、(0.926±0.107)、(1.076±0.093)mm],两两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);48 h后,组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。0、10、20、40μmol/L组迁移的细胞数量分别为196、142、57和17个/100倍视野,两两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。各组间Glut1和MT1-MMP mRNA及蛋白的相对表达量组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素具有抑制PTC TPC-1细胞侵袭和迁移能力,可能与降低Glut1和MT1-MMP蛋白表达有关。 展开更多
关键词 姜黄素 甲状腺乳头 tpc-1 细胞 侵袭 迁移 葡萄糖转运蛋白1 膜型基质金属蛋白酶-1
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长链非编码RNA CCAT1对人乳头状甲状腺癌侵袭和迁移能力的影响 被引量:7
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作者 刘丽云 龚健 +2 位作者 徐晋珩 张志勇 崔永兴 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第7期81-86,共6页
目的检测长链非编码RNA CCAT1在人乳头状甲状腺癌中的表达,并观察下调表达CCAT1对人乳头状甲状腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法检测人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1及人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1中CCAT1的水平,在TPC-1细胞中转染CCAT1 ... 目的检测长链非编码RNA CCAT1在人乳头状甲状腺癌中的表达,并观察下调表达CCAT1对人乳头状甲状腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法检测人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1及人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1中CCAT1的水平,在TPC-1细胞中转染CCAT1 siRNA质粒,利用Transwell小室及划痕实验观察下调表达CCAT1对细胞侵袭和迁移能力的影响,通过Western blot检测BRAF、MUC15、RKIP蛋白的变化。结果人乳头状甲状腺癌细胞TPC-1中CCAT1的水平明显高于人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1;在TPC-1细胞中下调表达CCAT1后能够明显抑制细胞的侵袭和迁移能力;Transwell侵袭实验和迁移实验显示下调表达CCAT1组TPC-1细胞的穿膜数与对照组比较明显减少。划痕实验中下调表达CCAT1后细胞间距较对照组明显增大,提示细胞运动能力减弱。同时下调表达CCAT1可明显降低细胞中BRAF、MUC15的表达,增高RKIP蛋白的表达。结论人乳头状甲状腺癌中长链非编码RNA CCAT1较正常甲状腺细胞明显升高;在乳头状甲状腺癌中下调表达CCAT1可抑制细胞的侵袭、迁移运动能力,并且可能通过影响BRAF、MUC15、RKIP蛋白的表达发挥上述功能。 展开更多
关键词 长链非编码 SIRNA CCAT1 乳头甲状腺 tpc-1 Nthy-ori 3-1 细胞侵袭 细胞迁移
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