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构象结构对于顺式-1,3-双甲基环己烷二级加氧反应影响的理论研究
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作者 沈宇豪 田泽民 +2 位作者 李伟 纪亦轩 颜应文 《高等学校化学学报》 北大核心 2025年第3期97-110,共14页
采用DLPNO-CCSD(T)/CBS//B3LYP/6-311++G(d,p)量子化学方法计算了顺式-1,3-双甲基环己烷自由基低温二级加氧反应的反应物、生成物和过渡态的分子结构、振动频率和单点能,构建了详细的反应势能面.基于过渡态理论,获得了主要基元反应的高... 采用DLPNO-CCSD(T)/CBS//B3LYP/6-311++G(d,p)量子化学方法计算了顺式-1,3-双甲基环己烷自由基低温二级加氧反应的反应物、生成物和过渡态的分子结构、振动频率和单点能,构建了详细的反应势能面.基于过渡态理论,获得了主要基元反应的高压极限速率常数.结果表明,支链结构有利于过氧化氢过氧自由基(OOQOOH)的氢转移反应,其中,1,5-氢转移反应最占优势,与其直接裂解生成酮基化合物(KHP)+OH路径形成竞争关系.双过氧化氢自由基P(OOH)_(2)由OOQOOH经氢转移反应生成,主要裂解路径为环醚反应,其能垒因支链有增加趋势.基于RRKM/主方程方法获得的依压力变化的速率常数结果表明,压力对上述反应的速率常数影响较小. 展开更多
关键词 顺式-1 3-双甲基环己烷 构象分析 二级加氧 转移反应 环醚反应 速率常数
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益气活血方调控METTL3/HAND2/TGF-β1信号轴对冠心病气虚血瘀证大鼠的影响
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作者 荆晓朔 张少辉 +3 位作者 汪顺伟 肖清玄 欧颖 李亮 《中国中医药信息杂志》 CAS 2025年第1期98-105,共8页
目的观察益气活血方调控METTL3/HAND2/TGF-β1信号轴对冠心病气虚血瘀证大鼠的影响。方法将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和西药(单硝酸异山梨酯)组,每组12只。除假手术组外,其余各组采用左冠状动脉前降支结扎... 目的观察益气活血方调控METTL3/HAND2/TGF-β1信号轴对冠心病气虚血瘀证大鼠的影响。方法将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、益气活血方组和西药(单硝酸异山梨酯)组,每组12只。除假手术组外,其余各组采用左冠状动脉前降支结扎结合游泳力竭法制备冠心病气虚血瘀证大鼠模型。造模结束后,益气活血方组及西药组灌胃干预28d。观察大鼠一般状况,采集心电图,超声心动图检测大鼠心功能,血液流变学检测血瘀程度,HE染色观察心肌组织形态,免疫组化法检测心肌组织甲基化转移酶3(METTL3)、转化生长因子(TGF)-β1、Smad2、Smad3表达,RT-PCR和Western blot检测心肌组织METTL3、心脏神经嵴衍生物表达蛋白2(HAND2)、TGF-β1、Smad2、Smad3mRNA和蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠出现精神萎靡、行动迟缓、嗜睡、体质量降低等气虚表现,心电图ST段显著抬高,左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)下降(P<0.01),左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)、左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVEDs)升高(P<0.01),红细胞聚集指数、卡松黏度及全血黏度升高(P<0.01);心肌细胞肿大、坏死,心肌纤维排列紊乱,心肌组织有炎性细胞浸润,心肌组织METTL3、TGF-β1、Smad2、Smad3mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01),HAND2 mRNA和蛋白表达均降低(P<0.01)。与模型组比较,益气活血方组和西药组大鼠精神状态明显改善,心电图ST段明显回落,LVEF、LVFS升高(P<0.01),LVEDV、LVESV、LVEDd、LVEDs下降(P<0.05,P<0.01),红细胞聚集指数、卡松黏度及全血黏度下降(P<0.01);心肌纤维排列整齐,心肌细胞结构及形态改善,炎性细胞浸润减少,心肌组织METTL3、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),HAND2mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论益气活血方能减轻冠心病气虚血瘀证大鼠心肌组织病理损伤,提高心功能,抑制炎症反应,其作用机制可能与调控METTL3/HAND2/TGF-β1信号轴有关。 展开更多
关键词 益气活血方 冠心病 气虚血瘀证 甲基转移3 心脏神经嵴衍生物表达蛋白2 TGF-β1/Smads通路 病证结合 大鼠
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白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p的原核细胞表达及鉴定 被引量:6
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作者 孔倩倩 廖红 +3 位作者 李芳秋 马春芳 史利宁 胡毓安 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期919-921,930,共4页
目的原核细胞表达白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p,鉴定重组蛋白质的抗原性。方法用比对软件对白念珠菌H3K4甲基转移酶与其他物种甲基转移酶进行比对。选择与人类无同源性的抗原特异性片段,以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板... 目的原核细胞表达白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p,鉴定重组蛋白质的抗原性。方法用比对软件对白念珠菌H3K4甲基转移酶与其他物种甲基转移酶进行比对。选择与人类无同源性的抗原特异性片段,以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板,PCR扩增Set1-208p的编码基因,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白质表达。用抗His标签的单克隆抗体鉴定融合蛋白,并用确诊侵袭性白念珠菌感染(IC)患者血清进行抗原性鉴定。结果成功克隆了白念珠菌抗原特异性H3K4甲基转移酶片段Set1-208p基因并诱导表达,获得了纯化的重组肽段,所得蛋白质分子量(Mr)约为29 000,带有His标签,经western blot鉴定,诱导的重组蛋白可与IC患者血清特异性反应。结论成功诱导表达了具有良好抗原反应性的Set1-208p重组蛋白质,为建立相应的抗原、抗体ELISA检测方法提供基础。 展开更多
关键词 白念珠菌 H3K4甲基转移 基因克隆 原核细胞表达
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178例肝细胞癌患者DNA甲基转移酶3A基因rs1550117位点多态性检测及意义
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作者 徐峰 叶青 +1 位作者 王静 杨永红 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第44期72-74,共3页
目的探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)基因rs1550117位点多态性与肝细胞癌发生的关系。方法采用Sequenom Mass Array质谱阵列技术,检测天津汉族人群178例肝细胞癌患者(观察组)及188例健康人(对照组)DNMT3A基因rs1550117位点多态性。结果观察... 目的探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)基因rs1550117位点多态性与肝细胞癌发生的关系。方法采用Sequenom Mass Array质谱阵列技术,检测天津汉族人群178例肝细胞癌患者(观察组)及188例健康人(对照组)DNMT3A基因rs1550117位点多态性。结果观察组DNMT3A基因rs1550117位点基因型AA、AG、GG频率分别为4.5%、36.0%、59.5%,等位基因G、A频率分别为81.3%、18.7%;对照组基因型AA、AG、GG频率分别为3.2%、29.4%、67.4%,等位基因G、A频率分别为83.8%、16.2%;两组比较P均>0.05。结论 DNMT3A基因rs1550117位点多态性与肝细胞癌的发生无明显关系。 展开更多
关键词 肝细胞癌 DNA甲基转移3A 基因位点多态性
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全反式维甲酸促神经干细胞分化中DNA甲基转移酶1和乙酰化组蛋白H3的表达
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作者 宣爱国 龙大宏 +2 位作者 王智明 陈艳 张文娟 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期922-925,共4页
目的:探讨全反式维甲酸体外促神经干细胞分化为神经元过程中DNA甲基转移酶1和乙酰化组蛋白H3的表达变化。方法:0.5、1.0和4μmol/L全反式维甲酸诱导体外培养的鼠胚神经干细胞,免疫荧光检测NeuN和DAPI,计算各组NeuN/DAPI的比值... 目的:探讨全反式维甲酸体外促神经干细胞分化为神经元过程中DNA甲基转移酶1和乙酰化组蛋白H3的表达变化。方法:0.5、1.0和4μmol/L全反式维甲酸诱导体外培养的鼠胚神经干细胞,免疫荧光检测NeuN和DAPI,计算各组NeuN/DAPI的比值,免疫印迹检测DNA甲基转移酶1以及乙酰化组蛋白H3表达水平。结果:免疫荧光结果显示给药组NeuN/DAPI比值显著高于对照组。药物浓度在1和4μmol/L时,DNA甲基转移酶1表达水平与对照组相比均显著降低,且有剂量依赖性;而在4μmol/L时,组蛋白H3乙酰化水平较对照组有显著增强。结论:全反式维甲酸促进神经干细胞向神经元的分化可能与DNA甲基转移酶1的表达抑制和组蛋白乙酰化水平增加有关。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 神经干细胞 DNA甲基转移1 乙酰化组蛋白H3
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DNA甲基化转移酶3A调控心肌成纤维细胞活化过程中胶原的表达
6
作者 代晨 陶辉 +1 位作者 石开虎 徐盛松 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第12期1237-1241,共5页
目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试... 目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试剂分为5组:DNMT3A组(CFs转染重组的DNMT3A基因过表达质粒)、空载体组(CFs转染p EGFP-C3空载体质粒)、DNMT3A siRNA组(CFs转染小干扰DNMT3A siRNA)、DNMT3A siRNA NC组(CFs转染DNMT3A siRNA NC空载体质粒)、空白对照组(CFs不作转染处理)。ELISA检测空白对照组、DNMT3A组、DNMT3A siRNA组细胞上清液胶原变化。qRT-PCR检测5组相关mRNA的表达,Western blot法检测除DNMT3A siRNA NC组外其余4组CFs中ColⅠ、ColⅢ和DNMT3a蛋白的表达及CCK8法检测4组细胞的增殖活性。结果 DNMT3A组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原明显高于空白对照组(P<0.05),DNMT3A siRNA组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量明显低于空白对照组(P<0.05)。DNMT3A组的ColⅠ、ColⅢ及DNMT3A表达量较空白对照组、空载体组明显升高(P<0.05),而DNMT3A siRNA组明显低于空白对照组及空载体组(P<0.05)。DNMT3A组细胞活力(2.087±0.317)明显高于空载体组(1.063±0.223)、空白对照组(1.082±0.207),差异有统计学意义(P<0.05); DNMT3A siRNA组(0.463±0.087)明显低于空载体组、空白对照组(P<0.05)。结论 DNMT3A可以促进CFs的活化增殖,并且能够增加胶原的表达,从而对心肌纤维化产生促进作用。 展开更多
关键词 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 DNA甲基转移3A 增殖 ColⅠ ColⅢ
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甲基转移酶3基因对前列腺癌细胞c-Myc、EGFR、Bcl-2表达的影响及其机制 被引量:3
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作者 李显永 赵晖 +3 位作者 梁勇 程阳 韩登俊 官润云 《山东医药》 CAS 2021年第32期20-23,共4页
目的观察甲基转移酶3(METTL3)基因对前列腺癌细胞系PC-3、DU145中肿瘤相关蛋白c-Myc、EGFR、Bcl-2表达的影响,并探讨相关作用机制。方法运用RNA干扰技术合成METTL3 siRNA-1400、阴性siRNA。将PC-3、DU145细胞分别分为空白对照组、阴性... 目的观察甲基转移酶3(METTL3)基因对前列腺癌细胞系PC-3、DU145中肿瘤相关蛋白c-Myc、EGFR、Bcl-2表达的影响,并探讨相关作用机制。方法运用RNA干扰技术合成METTL3 siRNA-1400、阴性siRNA。将PC-3、DU145细胞分别分为空白对照组、阴性对照组、实验组,空白对照组不做特殊处理,阴性对照组转染阴性对照siRNA,实验组转染METTL3 siRNA-1400。采用Western blotting法检测各组细胞中的肿瘤相关蛋白c-Myc、EGFR、Bcl-2,Dolt blotting法检测各组细胞RNA的N6-甲基腺苷(m6A)修饰水平。结果PC-3细胞、DU145细胞的实验组c-Myc、EGFR、Bcl-2蛋白表达均低于空白对照组、阴性对照组(P均<0.01)。PC-3细胞、DU145细胞的实验组RNA m6A修饰水平均低于空白对照组和阴性对照组(P均<0.01)。结论沉默前列腺癌PC-3、DU145细胞中METTL3基因可抑制肿瘤相关蛋白c-Myc、EGFR、Bcl-2的表达,其机制可能与METTL3参与RNA的m6A修饰有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 甲基转移3 m6A修饰 C-MYC蛋白 EGFR蛋白 BCL-2蛋白
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miR-200b-3p与DNA甲基转移酶-3a在骨关节炎软骨细胞中的表达及作用机制 被引量:5
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作者 商安全 王微微 +2 位作者 陆文英 胡丽庆 李冬 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第8期617-623,共7页
目的探讨mi R-200b-3p靶向DNMT3A对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法 RT-PCR法检测mi R-200b-3p,DNMT3A,MMPs和COLⅡ在正常软骨组织和骨关节炎软骨组织中的表达;采用双荧光素酶和western bolt验证mi R-200b-3p和DNMT3A之间的靶... 目的探讨mi R-200b-3p靶向DNMT3A对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法 RT-PCR法检测mi R-200b-3p,DNMT3A,MMPs和COLⅡ在正常软骨组织和骨关节炎软骨组织中的表达;采用双荧光素酶和western bolt验证mi R-200b-3p和DNMT3A之间的靶向关系;构建过表达的mi R-200b-3p和DNMT3A真核细胞载体;q RT-PCR和western bolt检测MMPs和COLⅡm RNA及蛋白质在稳定转染的软骨细胞中的表达;通过细胞活力测定(MTS法)、团块培养、Hoechst 33342染色法评估细胞的增殖与凋亡情况。结果 q RT-PCR法及western bolt结果显示,mi R-200b-3p和COLⅡ在骨关节炎软骨组织中呈低表达,而DNMT3A和MMPs呈高表达;双荧光素酶和western bolt证实mi R-200b-3p和DNMT3A之间存在靶向关系;MTS法、团块培养及Hoechst 33342染色法结果证实,在mi R-200b-3p过表达的软骨细胞中,DNMT3A和MMPs的表达水平明显下调,COLⅡ的表达水平则明显上调,且细胞的生存能力增强,凋亡率降低(P均<0.05);在过表达DNMT3A的软骨细胞中,MMPs的表达水平明显上调,COLⅡ的表达水平明显下调,且细胞的生存能力减弱,凋亡率增加(P均<0.05)。结论 mi R-200b-3p可以抑制MMPs分泌和促进COLⅡ合成,并且可以通过抑制DNMT3A的表达来增强骨关节炎软骨细胞的生长与增殖。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞 miR-200b-3p DNA甲基转移-3a
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m^(6)A甲基化转移酶3在糖尿病性白内障发病中的作用机制 被引量:2
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作者 陈思 叶巍 +4 位作者 唐韵 王文喆 葛轶睿 王雪莹 黄振平 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期1250-1259,共10页
目的:探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)甲基化转移酶3(METTL3)在糖尿病性白内障发病中的作用机制。方法:用低糖和高糖培养基培养人晶状体上皮细胞系(SRA01/04)24h后,采用RT-qPCR和Western blot实验检测细胞的上皮-间质转分... 目的:探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)甲基化转移酶3(METTL3)在糖尿病性白内障发病中的作用机制。方法:用低糖和高糖培养基培养人晶状体上皮细胞系(SRA01/04)24h后,采用RT-qPCR和Western blot实验检测细胞的上皮-间质转分化(EMT)指标:E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、紧密连接蛋白1(ZO-1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的变化情况;transwell和划痕实验检测细胞迁移能力。采用免疫荧光染色检测人晶状体前囊膜组织中METTL3的表达量及定位,m^(6)A dot blot实验检测在低糖和高糖培养基中培养24h细胞的m^(6)A甲基化水平,RT-qPCR和Western blot实验检测细胞中METTL3的RNA和蛋白表达量。加入METTL3抑制剂的培养基中培养24h的细胞,RT-qPCR和Western blot实验检测EMT指标的变化情况;m^(6)A dot blot实验检测细胞m^(6)A甲基化水平;Transwell和划痕实验检测细胞迁移能力。免疫荧光染色检测细胞中转化生成因子β(TGFβ1)的表达;RT-qPCR和Western blot实验检测细胞中的TGFβ1和SNAIL的表达量。结果:与低糖条件相比,高糖条件能够促进细胞EMT的发生,促进METTL3的表达和上调了细胞总RNA的m^(6)A甲基化水平(P<0.05)。高糖能够促进细胞的迁移能力。糖尿病性白内障患者晶状体前囊膜中METTL3表达较单纯年龄相关性白内障患者增高。与高糖+DMSO组相比,加入METTL3抑制剂STM2457,能够抑制细胞的EMT发生,抑制TGFβ1和SNAIL的表达,抑制细胞总RNA的m^(6)A甲基化水平(均P<0.05)。加入METTL3抑制剂STM2457后细胞迁移能力较高糖+DMSO组降低。结论:m^(6)A甲基化转移酶METTL3通过激活TGFβ1/SNAIL通路促进了在高糖条件下人晶状体上皮细胞的EMT发生从而诱导糖尿病性白内障的发生。 展开更多
关键词 糖尿病性白内障 甲基转移3(mettl3) N6-甲基腺嘌呤(m^(6)A) 上皮-间质转分化
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甲基转移酶样蛋白3与肿瘤关系的研究进展
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作者 熊磊 李显永 +2 位作者 张楠 李同海 朗磊 《山东医药》 CAS 2020年第10期83-86,共4页
目前已经发现上百种转录后RNA的修饰方式,其中N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核mRNA最为常见的一种修饰方式。研究表明,m6A一种动态可逆的RNA甲基化修饰方式,由甲基转移酶复合体(METTL3、METTL14、WTAP)、去甲基转移酶(FTO、ALKBH5)、结合蛋白(... 目前已经发现上百种转录后RNA的修饰方式,其中N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核mRNA最为常见的一种修饰方式。研究表明,m6A一种动态可逆的RNA甲基化修饰方式,由甲基转移酶复合体(METTL3、METTL14、WTAP)、去甲基转移酶(FTO、ALKBH5)、结合蛋白(YTHDF1、YTHDF2、YTHDF3、YTHDC1、YTHDC2)等协同调控。甲基转移酶样蛋白3(METTL3)具备独立或与其他甲基转移酶共同催化RNA的m6A修饰形成的能力,是影响m6A修饰水平至关重要的酶。近年研究表明,METTL3依靠催化m6A修饰途径或者直接与翻译起始因子作用影响肿瘤基因的翻译水平,进而调控肿瘤相关蛋白的表达,影响肿瘤细胞的增殖、侵袭、分化等生物学行为,在不同肿瘤中发挥促癌或抑癌的双重作用。此外,METTL3也是肿瘤治疗的一个有效分子靶点。 展开更多
关键词 甲基转移样蛋白3 N6-甲基腺嘌呤 肿瘤基因
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IHC联合数据库分析METTL3在非小细胞肺癌中的表达及预后价值
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作者 黄丽云 黄启涛 +2 位作者 颜淑梅 冯沿芬 符鉴昌 《华夏医学》 2024年第6期40-50,共11页
目的探讨甲基转移酶样蛋白3(METTL3)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,以及其与临床病理参数、预后的关系。方法本研究基于IHC检测联合多源数据库分析METTL3在NSCLC中的表达水平及其与临床病理参数和预后的关系。结果METTL3在NSCLC中普遍... 目的探讨甲基转移酶样蛋白3(METTL3)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,以及其与临床病理参数、预后的关系。方法本研究基于IHC检测联合多源数据库分析METTL3在NSCLC中的表达水平及其与临床病理参数和预后的关系。结果METTL3在NSCLC中普遍表达升高,且与肿瘤N分型和TNM分期密切相关(P<0.05)。METTL3高表达的NSCLC患者总生存期(OS)和无病生存期(DFS)显著短于低表达患者,差异有统计学意义(P<0.001)。针对不同临床分级指标进行生存分析发现,METTL3高表达与TNMⅠ、TNMⅡ期患者和无淋巴结转移(N0)患者的生存期缩短显著相关(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,METTL3高表达为NSCLC患者预后不良的独立预测因子(P<0.05)。结论METTL3高表达可促进NSCLC发生发展,增加患者(尤其是早期)不良预后的风险,METTL3具有作为NSCLC预后预测及治疗靶点的潜能。 展开更多
关键词 甲基转移样蛋白3 非小细胞肺癌 表达 预后
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Saccharomy cescerevisiae氨基转移酶基因ARO8克隆及对3甲硫基丙醇合成的影响 被引量:3
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作者 刘丽 尹胜 +2 位作者 梁婧如 王成涛 赵吉兴 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期132-135,139,共5页
酿酒酵母可通过艾希利(Ehrlich)途径将L-蛋氨酸转化为3-甲硫基丙醇等食品风味成分,本文研究了氨基转移酶及其基因在Ehrlich途径及3-甲硫基丙醇合成代谢的调控作用。从Saccharomyces cerevisiae S288C克隆氨基转移酶ARO8基因,并基于酿酒... 酿酒酵母可通过艾希利(Ehrlich)途径将L-蛋氨酸转化为3-甲硫基丙醇等食品风味成分,本文研究了氨基转移酶及其基因在Ehrlich途径及3-甲硫基丙醇合成代谢的调控作用。从Saccharomyces cerevisiae S288C克隆氨基转移酶ARO8基因,并基于酿酒酵母-大肠杆菌穿梭型表达载体pYES-pgk,构建重组质粒表达载体pYES-pgk-ARO8,PEG/LiAc转化法将其导入S.cerevisiae S288C。结果表明,克隆的ARO8基因全长1503bp,与NCBI GenBank中酿酒酵母芳香族氨基转移酶Ⅰ编码基因ARO8的序列相似度为100%;构建的ARO8基因过表达工程菌S.cerevisiae AR8,其氨基转移酶活力为187U/mL,较野生型S288C菌株的酶活性提高1.63倍;工程菌AR8的摇瓶发酵3-甲硫基丙醇产量为0.76g/L,较野生型S288C提高28.8%。表明氨基转移酶Aro8p及其ARO8基因在S.cerevisiae 3-甲硫基丙醇合成代谢中发挥重要作用,增强其ARO8基因表达,有助于提高3-甲硫基丙醇的产量。 展开更多
关键词 酿酒酵母 3-甲硫基丙醇氨基 转移基因 AR08基因 表达
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半导体聚合物量子点-亚甲基蓝荧光能量转移体系测定水中Bi^(3+) 被引量:2
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作者 刘义章 孙军勇 +2 位作者 王磊 周凯 巩振虎 《发光学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1353-1358,共6页
基于半导体聚合物量子点和亚甲基蓝间的荧光共振能量转移构筑了一种铋离子荧光探针。亚甲蓝通过静电作用吸附到半导体聚合物量子点表面使其荧光发生猝灭。铋离子存在时,由于它与半导体聚合物量子点的结合力强于亚甲蓝,使体系的能量转移... 基于半导体聚合物量子点和亚甲基蓝间的荧光共振能量转移构筑了一种铋离子荧光探针。亚甲蓝通过静电作用吸附到半导体聚合物量子点表面使其荧光发生猝灭。铋离子存在时,由于它与半导体聚合物量子点的结合力强于亚甲蓝,使体系的能量转移得到抑制,荧光恢复。在最优化条件下,线性范围为0~0.5%mol/L(R=0.995 5),最低检出限为16 nmol/L。该方法成功用于湖水中的Bi3+测定,结果令人满意。 展开更多
关键词 半导体聚合物量子点(Pdots) 甲基蓝(MB) 荧光共振能量转移 BI^3+
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测定食品中呋喃它酮代谢物3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮的酶联免疫吸附法 被引量:7
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作者 宋娟 王玉珍 邓安平 《食品安全质量检测学报》 CAS 2012年第2期77-81,共5页
目的 建立以多克隆抗体为基础的测定食品中呋喃它酮代谢物3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮(AMOZ)的间接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA).方法 以4-甲酰基苯氧基乙酸(4-FPA)为修饰剂,合成AMOZ半抗原衍生物,并使其分别与牛血清蛋白(BSA)和卵... 目的 建立以多克隆抗体为基础的测定食品中呋喃它酮代谢物3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮(AMOZ)的间接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA).方法 以4-甲酰基苯氧基乙酸(4-FPA)为修饰剂,合成AMOZ半抗原衍生物,并使其分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)交联制备得到免疫原和包被抗原,经免疫动物(兔),获得抗NPAMOZ(AMOZ与衍生化试剂2-硝基苯甲醛所形成的结合物)的多克隆抗体.用酶联免疫分析法测定AMOZ(以NPAMOZ形式).结果 在包被抗原为2.5 ng/mL,抗体为1:300 000稀释,酶标二抗为1:10000稀释的优化条件下,ELISA测定AMOZ(以NPAMOZ形式)的IC50值(标准曲线中吸光度抑制至最大吸光度值50%时所对应的待测物浓度)为1.86 ng/mL.抗体与呋喃它酮的交叉反应率较高(70.7%),与AMOZ的交叉反应率仅为0.32%,与其余三种硝基呋喃抗生素及它们的代谢物以及其它八种药物的交叉反应率很小(<0.01%),表明抗体的特异性高.四种市售的肉样(鱼肉、虾肉、鸡肉、猪肝)用作加标实验,加标浓度分别为0.5、1.0和5.0 ng/g,加标样品经衍生化处理后用ELISA测定,回收率为75.6%~112.2%,批间相对标准偏差(RSD)为8.3%~17.5%.结论 本法具有高灵敏性和高特特异性,能用于动物产品中AMOZ的检测. 展开更多
关键词 硝基呋喃 呋喃它酮 5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷酮 多克隆抗体 联免疫吸附分析法
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正丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸离子液体介导在呕吐毒素酶联免疫检测中的应用研究 被引量:1
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作者 邵景东 李鲁宁 +2 位作者 孙秀兰 李在均 姚卫蓉 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期324-326,共3页
呕吐毒素是食品中常见的一种真菌毒素,目前最常用的检测方法为酶联免疫检测。本文研究合成了一种水溶性离子液体正丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸,并将其应用于呕吐毒素(DON)酶联免疫检测。结果表明:当呕吐毒素酶联免疫(ELISA)体系中含有0.014... 呕吐毒素是食品中常见的一种真菌毒素,目前最常用的检测方法为酶联免疫检测。本文研究合成了一种水溶性离子液体正丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸,并将其应用于呕吐毒素(DON)酶联免疫检测。结果表明:当呕吐毒素酶联免疫(ELISA)体系中含有0.014g/mL的该离子液体时,其检测灵敏度提高了约33.92%。半数抑制浓度分别为54.95μg/kg和36.31μg/kg(前者不含离子液体)。重复测定多次,其半数抑制浓度平均值为36.85μg/kg,表明重现性较好。另外,该方法已用于啤酒和麦芽汁中DON加标测定回收率。 展开更多
关键词 离子液体 正丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸 呕吐毒素 联免疫检测
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甲基化转移酶抑制剂SGI-1027对肺腺癌细胞迁移侵袭抑制及SPG20基因甲基化调节作用观察
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作者 赵宝山 孙光蕊 +3 位作者 黄景涛 韩晓丽 梁宗英 王敏 《山东医药》 CAS 2024年第27期6-9,共4页
目的分析甲基化转移酶抑制剂SGI-1027对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力的抑制作用及痉挛性截瘫-20(SPG20)基因甲基化水平的调节作用,以探讨甲基化转移酶抑制剂对肺腺癌细胞迁移、侵袭的影响及机制。方法以不同浓度甲基化转移酶抑制剂SGI-... 目的分析甲基化转移酶抑制剂SGI-1027对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力的抑制作用及痉挛性截瘫-20(SPG20)基因甲基化水平的调节作用,以探讨甲基化转移酶抑制剂对肺腺癌细胞迁移、侵袭的影响及机制。方法以不同浓度甲基化转移酶抑制剂SGI-1027作用于肺腺癌A549细胞,MTT法测算细胞增殖活力,筛选得到SGI-1027最佳作用浓度为7.5μmol/L,作为后续实验的作用浓度。将A549细胞分为SGI-1027组和二甲基亚砜(DMSO)组,SGI-1027组培养基中加入SGI-1027培养,对照组培养基中加入DMSO培养。两组培养48 h时,采用划痕愈合实验观察细胞迁移能力,Transwell小室实验观察细胞侵袭能力;采用qRT-PCR法检测细胞DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)、SPG20 mRNA,焦磷酸测序法检测细胞SPG20基因甲基化水平,Western blotting法检测细胞DNMT3b、SPG20蛋白。结果培养48 h时,与DMSO组比较,SGI-1027组细胞迁移距离小、穿膜细胞数少(P均<0.05)。与DMSO组比较,SGI-1027组DNMT3b mRNA及蛋白相对表达量下降,SPG20 mRNA及蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。SGI-1027组SPG20基因甲基化率较DMSO组降低(P<0.05)。结论甲基化转移酶抑制剂SGI-1027可抑制肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力,降低细胞SPG20基因甲基化水平;SGI-1027可能通过下调细胞内SPG20基因甲基化水平进而抑制肺腺癌细胞的迁移、侵袭能力。 展开更多
关键词 甲基转移抑制剂 SGI-1027 甲基转移 DNA甲基转移3B 痉挛性截瘫-20 肺腺癌
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1例2-甲基3-羟基丁酰辅酶A脱氢酶缺陷症患儿的临床诊治 被引量:2
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作者 李莹莹 崔亚利 +4 位作者 王霞 戴维 蒋冬梅 张晓东 王泓 《四川生理科学杂志》 2017年第4期183-186,共4页
目的:通过对1例2-甲基3-羟基丁酰辅酶A脱氢酶缺陷症患儿的临床表现及检查结果的分析,提高对此类疾病的认识,为该病的及时诊断和治疗提供依据。方法:采用回顾性方法对我院收治的这名患儿的临床症状和体征、实验室常规检查结果、血、尿串... 目的:通过对1例2-甲基3-羟基丁酰辅酶A脱氢酶缺陷症患儿的临床表现及检查结果的分析,提高对此类疾病的认识,为该病的及时诊断和治疗提供依据。方法:采用回顾性方法对我院收治的这名患儿的临床症状和体征、实验室常规检查结果、血、尿串联质谱和气相质谱检查结果、X光胸片、彩超、头颅MR、脑电图以及诊疗情况进行回顾和分析。结果:患儿3岁,主要临床表现初期以腹泻、呕吐为主,后来出现嗜睡、意识障碍,气促、难以纠正的代谢性酸中毒等。头颅MRI显示双侧侧脑室轻度扩张,脑沟、脑裂稍增宽。脑电图检查结果为界线性幼儿期脑电图,额、中央区尖波数次发放。血串联质谱检查天冬氨酸等氨基酸升高,尿气相质谱2-甲基-3-羟基丁酸明显增高,但未发现甲基巴豆酰甘氨酸和2-甲基乙酰已酸的异常,基因检测结果为hadh2基因第4外显子p.R130C突变。结论:2-甲基3-羟基丁酰辅酶A脱氢酶缺陷症极为罕见,对有不明原因的难于纠正的代谢性酸中毒、高氨血症、或不明原因的精神萎靡、意识障碍等神经系统症状患儿应警惕该病,可送血或尿标本进行串联质谱、气相质谱及基因分析,以便早期诊断及治疗。 展开更多
关键词 遗传代谢病 2-甲基3-羟基丁酰辅A脱氢缺陷症 串联质谱技术 气相质谱技术
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羽衣甘蓝甘油-3-磷酸酰基转移酶基因的克隆及序列分析
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作者 马慧 李丽丽 +3 位作者 祝红艳 陈丽静 钟鸣 郭志富 《中国蔬菜》 北大核心 2013年第04X期32-38,共7页
以羽衣甘蓝品种白孔雀为试验材料,通过同源克隆和RACE方法从低温诱导的羽衣甘蓝幼苗中分离得到了羽衣甘蓝甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)基因的全基因序列,采用生物学软件对该序列进行生物信息学分... 以羽衣甘蓝品种白孔雀为试验材料,通过同源克隆和RACE方法从低温诱导的羽衣甘蓝幼苗中分离得到了羽衣甘蓝甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)基因的全基因序列,采用生物学软件对该序列进行生物信息学分析。结果表明:该基因全长1558bp,推测其编码451个氨基酸,并命名为BaGPAT。序列分析发现,羽衣甘蓝BaGPAT基因推导的氨基酸与已知其他植物GPAT基因序列有54%~85%的相似性。聚类分析结果显示:羽衣甘蓝GPAT(BaGPAT)基因与拟南芥和宽叶独行菜GPAT基因亲缘关系较近。 展开更多
关键词 羽衣甘蓝 冷诱导 甘油-3-磷酸酰基转移(GPAT) 基因克隆
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相转移催化氧化法制备3-甲基-4-硝基苯甲酸
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作者 王群威 魏运洋 岳彩波 《精细石油化工》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期26-29,共4页
在水、有机相两相体系中,以四丁基溴化铵(TBAB)为相转移催化剂,用KMnO_4选择性氧化2,4-二甲基硝基苯(2,4-DMNB)制备3-甲基-4-硝基苯甲酸。考察了反应条件对产物收率的影响,当反应温度为95℃,反应时间为1h,n(2,4-DMNB):n(KMnO_4):n(TBAB)... 在水、有机相两相体系中,以四丁基溴化铵(TBAB)为相转移催化剂,用KMnO_4选择性氧化2,4-二甲基硝基苯(2,4-DMNB)制备3-甲基-4-硝基苯甲酸。考察了反应条件对产物收率的影响,当反应温度为95℃,反应时间为1h,n(2,4-DMNB):n(KMnO_4):n(TBAB)=1:2.16:0.07时,3-甲基-4-硝基苯甲酸的收率为41%。相同条件下,不加相转移催化剂主要生成4-硝基-1,3-苯二甲酸。从理论上对反应选择性进行了讨论。 展开更多
关键词 2 4-二甲基硝基苯3-甲基-4-硝基苯甲酸相转移催化剂 氧化机理
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氨甲酰化诱导的牛晶状体3-磷酸甘油醛脱氢酶和硫醇转移酶的失活(英文)
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作者 张婕 严宏 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第6期1083-1086,共4页
目的:3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是糖酵解过程中的一个关键酶,与老化和白内障发生密切相关,硫醇转移酶(TTase)可断裂晶状体蛋白质氧化形成的二硫键使硫醇化的蛋白质脱硫醇,对于维持晶状体透明性极为重要。氨甲酰化为重要的翻译后修饰。... 目的:3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是糖酵解过程中的一个关键酶,与老化和白内障发生密切相关,硫醇转移酶(TTase)可断裂晶状体蛋白质氧化形成的二硫键使硫醇化的蛋白质脱硫醇,对于维持晶状体透明性极为重要。氨甲酰化为重要的翻译后修饰。本研究观察氨甲酰化是否能诱导晶状体GAPDH和TTase的失活。方法:透明新鲜的晶状体取自2周岁健康牛,与100mmol/L氰酸钾于37℃水孵箱分别振动温育7d和12d。设透明晶状体为正常对照组。所有晶状体孵育在50mmol/LDMEM液中,然后每只晶状体去囊膜,匀浆,提取水溶性蛋白质。用分光光度计分别测量GAPDH和TTase的活性。结果:与氰酸钾孵育后GAPDH的活性与正常对照组相比显著降低(P<0.01),其中12d组与7d组相比,活性明显下降。TTase的活性在孵育7d后与对照组相比有统计学差异(P<0.05),12d组的活性与对照组相比有显著差异(P<0.01),7d组活性与12d组相比无统计学差异(P=0.19296)。结论:研究结果显示,分别与100mmol/L氰酸钾孵育7d和12d后,氨甲酰化组的GAPDH和TTase活性与对照组相比有统计学差异,证实氨甲酰化可以诱导GAPDH和TTase酶的失活,为TTase和GAPDH在白内障发病机制中的进一步研究提供了新思路。 展开更多
关键词 氨甲酰化 白内障 氰酸钾 3-磷酸甘油醛脱氢 硫醇转移
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