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甲基单胞菌M ethy lomonas sp.GYJ3的生长特性及产甲烷单加氧酶特性 被引量:1
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作者 吴炬 李永泉 +2 位作者 冯建军 花立民 吴应文 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期72-77,共6页
研究了甲基单胞菌 Methylomonas sp.GYJ3发酵培养过程中生长特征和产酶特征 ,结果表明该菌株在生长过程中产酸 ,通过控制发酵过程中 p H可提高细胞的生长密度 ,其生长周期较摇床发酵短 .细胞中甲烷单加氧酶产生于细胞的对数生长期 ,在 7... 研究了甲基单胞菌 Methylomonas sp.GYJ3发酵培养过程中生长特征和产酶特征 ,结果表明该菌株在生长过程中产酸 ,通过控制发酵过程中 p H可提高细胞的生长密度 ,其生长周期较摇床发酵短 .细胞中甲烷单加氧酶产生于细胞的对数生长期 ,在 70 h以后甲烷单加氧酶活性不再增加 ,最高活性为 3.97nmol环氧丙烷 / min· mg干细胞 .同时研究了细菌生长过程中甲烷的利用 ,结果表明每克甲烷的消耗可产生 0 .69g细胞干重 .考察了 Cu2 +浓度对细胞产生可溶性甲烷单加氧酶和颗粒性甲烷单加氧酶的影响 .并由此建立了 GYJ3菌的连续发酵动力学模型 . 展开更多
关键词 甲烷利用细菌 甲基单胞菌 甲烷单加氧酶 发酵
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甲基单胞菌Methylomonas sp.GYJ3中甲烷单加氧酶还原酶组分的纯化和性质 被引量:3
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作者 沈润南 马清泉 +2 位作者 尉迟力 李树本 陈勇 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第4期432-437,共6页
Metylomonassp.GYJ3菌的甲烷单加氧酶(MMO)粗酶提取液经DEAE-SepharoseCL-6B阴离子交换层析、SephadexG-100凝胶过滤层析和DEAE-TSKgelHPLC分离纯化出MMO还... Metylomonassp.GYJ3菌的甲烷单加氧酶(MMO)粗酶提取液经DEAE-SepharoseCL-6B阴离子交换层析、SephadexG-100凝胶过滤层析和DEAE-TSKgelHPLC分离纯化出MMO还原酶组分.经HPLC分析,纯度大于95%,纯化倍数为4.4,加入至MMO羟基化酶和调节蛋白B的体系中表现比活为228nmol环氧丙烷每分钟毫克蛋白.SDS-PAGE电泳表明还原酶由一种亚基组成,分子量42kD.ICP-AES测定还原酶的Fe含量为1.83molFe每mol蛋白.UV-Vis光谱表明还原酶除280nm蛋白质特征峰外在460nm有最大吸收峰,且A280nm/A460nm为2.50,与其它黄素一铁硫蛋白相似,推测还原酶可能含一个FAD辅基和Fe2S2中心.在厌氧条件下,还原酶能够和NADH作用,UV-Vis光谱分析表明还原酶460nm处特征吸收峰消失,说明在MMO催化过程中还原酶接受NADH的电子.DEAE-SepharoseCL-6B阴离子交换层析分离出调节蛋白B,部分纯化的调节蛋白B的分子量大约在20kD,它能够提高MMO比活性40倍,MMO还原酶和调节蛋白B单独存在时不具有MMO? 展开更多
关键词 甲基单胞菌 甲烷单加氧酶 还原酶 纯化
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甲基单胞菌Methylomonas sp.GYJ3中甲烷单加氧酶羟基化酶组分的纯化和性质 被引量:3
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作者 沈润南 尉迟力 +2 位作者 马清泉 李树本 华绍峰 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第3期337-343,共7页
Methylomonassp.GYJ3菌株中经DEAE-SepharoseCL-6B阴离子交换层析和SephacrylS300凝胶层析分离纯化出甲烷加氧酶羟基化酶组分.经HPLC分析,纯度大于90%,分子量为240kD,纯化倍数为3.9,比活为225nmol环氧丙烷每分钟毫克蛋白.SDS-P... Methylomonassp.GYJ3菌株中经DEAE-SepharoseCL-6B阴离子交换层析和SephacrylS300凝胶层析分离纯化出甲烷加氧酶羟基化酶组分.经HPLC分析,纯度大于90%,分子量为240kD,纯化倍数为3.9,比活为225nmol环氧丙烷每分钟毫克蛋白.SDS-PAGE表明,羟基化酶由三个亚基组成,亚基分子量为56、43、27kD.ICPAES测定羟基化酶的Fe含量为2.1molFe每摩尔蛋白.HPLC法用于甲烷单加氧酶羟基化酶组分的纯化,纯化的羟基化酶组分比活为541nmol(环氧丙烷)每分钟毫克蛋白,是两步LC法纯化的羟基化酶的两倍,Fe含量为3.78molFe每摩尔蛋白.催化性质研究表明羟基化酶能够被化学还原剂还原为还原态羟基化酶,还原态的羟基化酶单独存在时表现出MMO活性,说明它是MMO活性中心,天然态的羟基化酶单独存在时无MMO活性,加入粗酶液中MMO活性明显增加,说明GYJ3菌中MMO是一个复合酶系. 展开更多
关键词 甲基单胞菌 甲烷单加氧酶 羟基化酶
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甲基单胞菌GYJ3催化环氧丙烷的半连续合成 被引量:2
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作者 辛嘉英 崔俊儒 +2 位作者 陈建波 李树本 夏春谷 《分子催化》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期206-210,共5页
利用含有甲烷单加氧酶 (MMO)的甲烷氧化细菌整细胞催化丙烯环氧化制取环氧丙烷 ,其产物抑制和辅酶 NADH消耗是反应难以连续进行的主要原因 .采用甲烷再生 NADH,研究了丙烯和甲烷共氧化和产物环氧丙烷积累对甲基单胞菌 GYJ3的环氧化活性... 利用含有甲烷单加氧酶 (MMO)的甲烷氧化细菌整细胞催化丙烯环氧化制取环氧丙烷 ,其产物抑制和辅酶 NADH消耗是反应难以连续进行的主要原因 .采用甲烷再生 NADH,研究了丙烯和甲烷共氧化和产物环氧丙烷积累对甲基单胞菌 GYJ3的环氧化活性的影响 ,并考察了在具有产物连续收集系统的两段式生物反应器中用细胞悬浮液半连续生产环氧丙烷的可行性 .将再生和环氧化过程分开进行 ,以减小甲烷和丙烯的竞争抑制 .通过连续抽提产物环氧丙烷 ,克服了产物抑制 .该半连续过程分别在不同的温度下共进行了 70 h,产生环氧丙烷438μm 展开更多
关键词 环氧丙烷 甲基单胞菌GYJ3 甲烷单加氧酶 半连续合成 催化合成 丙烯 环氧化 催化剂
原文传递
质粒研究与载体构建
5
《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第7期21-24,共4页
922365 甲基营养细菌中新质粒的鉴别[英]/Brenner,V.…∥Antonie Leeuwenhoek J.Microbiol.-1991,60(1).-43~48[译自DBA,1991,10(25),91-14504] 从50种甲基营养菌菌株(其中30种来自土壤)中筛选质粒DNA。用碱性清除溶菌物法从专性甲基... 922365 甲基营养细菌中新质粒的鉴别[英]/Brenner,V.…∥Antonie Leeuwenhoek J.Microbiol.-1991,60(1).-43~48[译自DBA,1991,10(25),91-14504] 从50种甲基营养菌菌株(其中30种来自土壤)中筛选质粒DNA。用碱性清除溶菌物法从专性甲基营养型甲基单胞菌属(Methylomonas sp.)菌株R103a中分离出36kb质粒pIH36,并构建了其限制性图谱。检测了甲基杆菌属(Methylobacterium)桃红色色素的兼性甲基营养菌中的4种质粒;菌株R15d中的质粒plB200(200kb)和pIB14(14kb),菌株M17中的pWU14(14kb) 展开更多
关键词 甲基营养菌 载体构建 限制性图谱 甲基单胞菌 启动子调控 报道基因 甲基杆菌属 Brenner 多克隆位点 基因表达载体
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能源上的应用
6
《生物技术通报》 CAS CSCD 1991年第11期101-105,共5页
关键词 甲烷八叠球菌 混合培养物 甲烷细菌 膜生物反应器 甲烷发酵 丁酸梭菌 废水处理过程 城市污泥 硫杆菌属 甲基单胞菌
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化工上的应用
7
《生物技术通报》 CAS CSCD 1989年第3期95-97,共3页
关键词 亚砷酸盐 甲基单胞菌 动力学模型 固定化细胞 膜生物反应器 芽抱杆菌 脱氢酶活性 慧斌 氧化过程 野油菜黄单胞菌
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化工上的应用
8
《生物技术通报》 CAS CSCD 1990年第6期110-112,共3页
将产生烃类产物的一个生物纯的微生物菌株接种到含各种营养源的液体培养基中,在有通气搅拌的条件下,将该菌在液体培养基中好气培养,培养物至少以气态产生0.1nl/h的烃产物.从液相或气相中回收产物.(郭殿瑞)
关键词 微生物转化 液体培养基 微生物菌株 生烃 培养物 门多萨假单胞菌 微生物学方法 化学产率 甲基单胞菌 营养源
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