11个甲型血友病家系FⅧ基因的RFLPs连锁分析 被引量：2

1

作者 金春莲 孙开来 +4 位作者 张学 姜莉 娄毅 李秀玲 贺文萍 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1992年第S1期53-57,共5页

应用Southern印迹杂交方法和PCR新技术,对东北地区11个甲型血友病家系检测FⅧ基因内的Bcl Ⅰ和Xba Ⅰ位点的RFLPs和基因外Stl4/Taq I RFLPs,分析了FⅧ基因的连锁状况,7名肯定携带者中4名能提供多态信息,4名可疑携带者之中2名可确定为缺... 应用Southern印迹杂交方法和PCR新技术,对东北地区11个甲型血友病家系检测FⅧ基因内的Bcl Ⅰ和Xba Ⅰ位点的RFLPs和基因外Stl4/Taq I RFLPs,分析了FⅧ基因的连锁状况,7名肯定携带者中4名能提供多态信息,4名可疑携带者之中2名可确定为缺陷FⅧ基因的携带者,1名可确定为正常FⅧ基因。为婚姻、生育指导和产前基因诊断提供依据。进一步明确了应用PCR技术联合进行多个位点的RFLPs连锁分析进行甲型血友病基因诊断的可行性及优越性。 展开更多

关键词 甲型血友病 FⅧ基因 限制性片段长度多态性

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甲型血友病产前诊断——应用DNA聚合酶链反应(PCR)进行家系RFLP连锁分析 被引量：2

2

作者 卞美璐 吴冠芸 +4 位作者 马生林 刘敬忠 黄尚志 高艳娥 黄国宁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期102-107,共6页

应用PCR技术分析了7个甲型血友病家系,对其中4例做了产前基因诊断。基因诊断的方法选择应是:首先采用PCR法扩增所需的特异DNA片段,随之用Bcll的RFLPs分析;对BclI不能诊断的标本进一步用XbaI的RFLPs分析;对XbaI不能诊断的标本进行其他DN... 应用PCR技术分析了7个甲型血友病家系,对其中4例做了产前基因诊断。基因诊断的方法选择应是:首先采用PCR法扩增所需的特异DNA片段,随之用Bcll的RFLPs分析;对BclI不能诊断的标本进一步用XbaI的RFLPs分析;对XbaI不能诊断的标本进行其他DNA探针的Southern印迹杂交分析,诊断率可达85％。 展开更多

关键词 甲型血友病 产前诊断 聚合酶链反应

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应用PCR-RFLPs进行甲型血友病的产前基因诊断 被引量：1

3

作者 金春莲 林常坤 +5 位作者 姜力 张学 张鸣镝 孙开来 廖洁 池兴荷 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1993年第S1期5-8,共4页

应用PCR—RHLPs技术,检测FⅧ基因内18外显子3′侧BCl 1位点和内含子22xba Ⅰ位点的RFLPs,分析缺陷FⅧ基因的连锁状况,在东北地区首次完成2例甲型血友病家系的产前基因诊断。

关键词 甲型血友病 聚合酶链式反应 产前基因诊断

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甲型血友病产前基因诊断(简报) 被引量：1

4

作者 沈岩 吴冠芸 +6 位作者 王申五 高庆生 忻星 孙念怙 凤云 吴玉珍 宁阳 《中国医学科学院学报》 CAS 1987年第2期151-151,共1页

甲型血友病是一种最为常见的遗传性凝血疾病,由于血浆中缺乏第8因子所致.患者常因出血不止或继发病症而夭折,目前除输血或直接输第8因子外尚无其它好的治疗手段。因此进行血友病产前基因诊断,杜绝患儿出生对提高我国人口素质具有十分重... 甲型血友病是一种最为常见的遗传性凝血疾病,由于血浆中缺乏第8因子所致.患者常因出血不止或继发病症而夭折,目前除输血或直接输第8因子外尚无其它好的治疗手段。因此进行血友病产前基因诊断,杜绝患儿出生对提高我国人口素质具有十分重要的意义。国外于1985年用克隆的第8因子基因为探针进行了甲型血友病产前基因诊断,国内目前尚无成功经验.作者使用克隆的第8因子基因为探针,进行了血友病基因携带者的探测,并成功地完成了国内第一例甲型血友病产前基因诊断.甲型血友病患者某男,29岁。 展开更多

关键词 基因诊断 甲型血友病 携带者

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中国人FⅧ基因内XbaI多态性研究与甲型血友病基因诊断

5

作者 沈岩 吴冠芸 +10 位作者 刘毅 王申五 刘敬忠 姜先华 龙桂芳 梁荣 金琪 孙念怙 王凤云 吴玉珍 宁阳 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期281-285,共5页

本文研究了中国人FⅧ基因22内含子中限制酶XbaⅠ的多态性。在83个中国人的79条无遗传关系的X染色体中,该多态性位点出现的频率为0.56,提供的多态性信息量为0.49。利用RFLP法,分析了17个甲型血友病家系,其中14个家系可以用此RFLPs进行基... 本文研究了中国人FⅧ基因22内含子中限制酶XbaⅠ的多态性。在83个中国人的79条无遗传关系的X染色体中,该多态性位点出现的频率为0.56,提供的多态性信息量为0.49。利用RFLP法,分析了17个甲型血友病家系,其中14个家系可以用此RFLPs进行基因诊断。认为核RFLPs作为FⅧ基因内的多态性遗传标志,在甲型血友病基因携带者检出和胎儿出生前诊断中具有重要的应用价值。 展开更多

关键词 甲型血友病 基因诊断 多态性

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应用St14(DXS52)位点VNTR多态进行甲型血友病基因诊断 被引量：1

6

作者 宋军 金春莲 +4 位作者 林长坤 姜莉 董文翰 张学 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期554-556,共3页

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增４２例东北地区正常人Ｓｔ１４（ＤＸＳ５２）位点ＶＮＴＲ多态，共检出８种等位基因片段。最长扩增片段为２．４ｋｂ。频率最高的扩增片段为７００ｂｐ，约占５０％。检测的女性杂合子率较高。利用此Ｖ... 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增４２例东北地区正常人Ｓｔ１４（ＤＸＳ５２）位点ＶＮＴＲ多态，共检出８种等位基因片段。最长扩增片段为２．４ｋｂ。频率最高的扩增片段为７００ｂｐ，约占５０％。检测的女性杂合子率较高。利用此ＶＮＴＲ多态作为遗传标记，对３个甲型血友病家系进行了基因连锁分析，在一个家系中确定了一名女性为正常人，非携带者；在另二个家系中各检出一名男性胎儿患者。 展开更多

关键词 血友病 甲型血友病 基因诊断 VNTR PCR

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复制缺陷型腺病毒载体介导的人凝血因子Ⅷ基因在体内外的高效转移和表达 被引量：3

7

作者 姜志龙 卢健 陈诗书 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期36-41,共6页

为了构建含人凝血因子Ⅷ基因的重组腺病毒载体系统，首先构建了含ＦⅧ（Ｂ结构域缺失型）的载体质粒ｐＡｄ－ｈＦⅧ和插入内含子结构的ｐＡｄＩ－ｈＦⅧ，经脂质体介导，证明两质粒的目的基因均能在ＣＯＳ－７细胞中表达有凝血活性的Ｆ... 为了构建含人凝血因子Ⅷ基因的重组腺病毒载体系统，首先构建了含ＦⅧ（Ｂ结构域缺失型）的载体质粒ｐＡｄ－ｈＦⅧ和插入内含子结构的ｐＡｄＩ－ｈＦⅧ，经脂质体介导，证明两质粒的目的基因均能在ＣＯＳ－７细胞中表达有凝血活性的ＦⅧ因子，其中经纯化的载体质粒ｐＡｄ－ｈＦⅧ与ｐＢＨＧ１０经脂质体介导，共转染至２９３包装细胞，经同源重组和Ｅ１蛋白反式互补，形成Ｅ１／Ｅ３缺失型重组腺病毒载体颗粒Ａｄ－ｈＦⅧ．ＰＣＲ检则到病理２９３培养液上清的病毒ＤＮＡ中具有目的基因扩增片段，证明病毒ＤＮＡ含有ＦⅧ基因．经扩增、纯化、滴度测定，用于感染离体细胞ＣＯＳ－７、Ａ５４９、Ｌ９２９、２９３．证实该病毒能在上述细胞中高效转移和表达目的基因，其表达量具有一定范围内的剂量依赖性．ＣＯＳ－７细胞中，ＭＯＩ＞１０００时，有细胞毒效应，表达量反而下降．经耳缘静脉注射Ａｄ－ｈＦⅧ至家兔后，１～４周能测到一定水平的ＦⅧ蛋白，１周内升至最高峰．免疫组化研究表明感染的离体细胞和家兔肝等组织均有ＦⅧ表达，其中肝脏表达最高． 展开更多

关键词 腺病毒载体 人凝血因子Ⅷ 基因治疗 甲型血友病

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东北地区健康汉族人群FⅧ基因内含子13(CA)n多态分布的研究 被引量：1

8

作者 林长坤 金春莲 +1 位作者 王敏 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期337-338,共2页

目的 :探讨东北地区健康人群FⅧ基因内含子 13的二核苷酸CA重复多态分布 ,为甲型血友病基因诊断提供依据。方法 :应用同位素 (α 3 2 PdCTP)掺入的PCR方法检测无遗传关系的健康汉族个体 44例 ,男 3例 ,女41例 ,总计 85条X染色体。结果 ... 目的 :探讨东北地区健康人群FⅧ基因内含子 13的二核苷酸CA重复多态分布 ,为甲型血友病基因诊断提供依据。方法 :应用同位素 (α 3 2 PdCTP)掺入的PCR方法检测无遗传关系的健康汉族个体 44例 ,男 3例 ,女41例 ,总计 85条X染色体。结果 :检出 7种不同长度的等位基因片段 ,其长度在 130～ 15 0bP之间 ,从最短片段开始 ,依次为A ,B ,C ,D ,E ,F ,G。各等位基因频率为 :A :0 .0 2 35 ,B :0 .76 47,C :0 .0 2 35 ,D :0 .0 471,E :0 .0 70 6 ,F :0 .0 5 88,G :0 .0 118。计算可提供信息量为 40 .16 % ,实际检测到的杂合子率为 39.0 2 % (16 /4 1)。结论 :FⅧ基因内含子 13(CA) 展开更多

关键词 甲型血友病 FⅧ基因 内含子13 CA重复多态 血友病

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Nijmegen测定法的简化及其在凝血因子抑制物检测中的应用 被引量：1

9

作者 郑卫东 曾淑燕 范小斌 《实用医学杂志》 CAS 2005年第13期1475-1477,共3页

目的:探讨简化的Nijmegen法在诊断获得性凝血因子抑制物中的临床价值。方法:通过APTT测定、APTT交叉试验、APTT孵育交叉试验以及FVⅢ:C活性、FIX:C活性测定对可疑患者进行初步诊断;采用简化的Nijmegen法对4例初步诊断存在凝血因子抑制... 目的:探讨简化的Nijmegen法在诊断获得性凝血因子抑制物中的临床价值。方法:通过APTT测定、APTT交叉试验、APTT孵育交叉试验以及FVⅢ:C活性、FIX:C活性测定对可疑患者进行初步诊断;采用简化的Nijmegen法对4例初步诊断存在凝血因子抑制物的患者进行抑制物的定量测定。结果:4例患者APTT均延长;APTT交叉试验和APTT孵育交叉试验结果:加1/10正常血浆及等量正常血浆均不能使延长的APTT恢复正常,而且加入等量正常血浆的APTT随着孵育时间的延长而逐渐延长;4例患者中有1例为甲型血友病并发FVⅢ抑制物,其血浆FVⅢ:C活性及FVⅢ抑制物的测定结果分别为1.0%和320BU/mL;2例为获得性甲型血友病患者,其血浆FVⅢ:C分别为0.6%和1.3%,其血浆FVⅢ抑制物分别为92BU/mL和192BU/mL;另外1例为乙型血友病并发FIX抑制物,其血浆FIX:C活性及FIX抑制物的测定结果分别为1.2%和100BU/mL。结论:简化的Nijmegen法适合于对血友病患者或者获得性血友病患者产生凝血因子抑制物的分析评价;对凝血因子抑制物的检测有利于患者的诊断、治疗及预后判断。 展开更多

关键词 检测 获得性凝血因子抑制物 测定法 血友病患者 APTT 交叉试验 VⅢ:C 初步诊断 测定结果 甲型血友病 乙型血友病 临床价值 可疑患者 活性测定 定量测定 试验结果 孵育时间 分析评价 预后判断 FIX 血浆 延长 mL 等量 并发

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安徽人F Ⅷ基因内及其旁侧RFLPs的研究

10

作者 杨善志 章晓琳 +5 位作者 杨辉 徐彬 许岳慷 朱霖 张旭 叶文虎 《安徽医科大学学报》 CAS 1997年第5期545-547,共3页

研究若干不相关安徽人个体的四个凝血因子Ⅷ（ＦⅧ）基因内限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰｓ）（ＢｃｌⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＸｂａⅠ、ＭｓｐⅠ）及四个基因旁侧的ＲＦＬＰｓ（ＢｓｔｘⅠ、ＰｓｔⅠ、ＭｓｐⅠ和ＡｃⅠ）。ＢｃｌⅠ／Ｈｉ... 研究若干不相关安徽人个体的四个凝血因子Ⅷ（ＦⅧ）基因内限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰｓ）（ＢｃｌⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＸｂａⅠ、ＭｓｐⅠ）及四个基因旁侧的ＲＦＬＰｓ（ＢｓｔｘⅠ、ＰｓｔⅠ、ＭｓｐⅠ和ＡｃⅠ）。ＢｃｌⅠ／ＨｉｎｄⅢ、ＸｂａⅠ、ＭｓｐⅠ基因内多态位点的杂合子频率分别为０．２３、０．４２、０．４９６。在接近内含子２２处，发现了两个额外的ＸｂａⅠ多态位点。在基因旁侧，应用ＢｓｔｘⅠ和ＰｓｔⅠ发现安徽人ＤＸＳ１１５区存在ＲＦＬＰｓ，但未见ＭｓｐⅠ及ＡｃｃⅠ的ＲＦＬＰｓ。此外，在ＢｃｌⅠ、ＸｂａⅠ、ＭｓｐⅠ位点间存在不同程度的连锁不平衡现象。主题词甲型血友病；限制性片段长度多态性； 展开更多

关键词 甲型血友病 凝血因子 Ⅷ基因 RFLPS

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人凝血因子Ⅷ遗传工程研究进展

11

作者 成国祥 陈竺 《生物技术通报》 CAS CSCD 1995年第5期1-3,共3页

早在一千七百多年前,人们就认识到甲型血友病是一种出血性絮乱。直到1937年才证实FⅧ在血友病发病中起关键作用。然而有关FⅧ的详细生化特征和结构特征在最近的10年才搞清楚。 治疗甲型血友病主要采取多次输入从人血浆中浓缩的FⅧ。虽... 早在一千七百多年前,人们就认识到甲型血友病是一种出血性絮乱。直到1937年才证实FⅧ在血友病发病中起关键作用。然而有关FⅧ的详细生化特征和结构特征在最近的10年才搞清楚。 治疗甲型血友病主要采取多次输入从人血浆中浓缩的FⅧ。虽然这种替代治疗能有效地控制阵发性出血,但还存在如下严重问题。首先,患者有感染病毒性疾病如病毒性肝炎和艾滋病的危险。通过增加灭活病毒步骤以及运用单克隆抗体进一步纯化FⅧ已显著降低了患者感染病毒的危险。然而这一制备FⅧ的过程却提高了成本,从而使治疗费用大为增加。其次,由于血浆FⅧ存在时间的限制,患者需要经常地预防性治疗。这种治疗法能导致关节慢性出血,组织损伤。此外,频繁地静脉输入FⅧ。 展开更多

关键词 人凝血因子Ⅷ 甲型血友病 转基因动物 基因治疗 工程研究 真核细胞 表达系统 特异性表达 内含子 氨基酸

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凝血因子及其他血浆蛋白的研究与生产

12

作者 丁广治 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1994年第2期125-131,共7页

自1948年第一次报道用硫酸铵盐析法从血浆中分离到白蛋白和球蛋白以来,已经有100多年的历史了。1946年Cohn报道了一种低温乙醇法(Cohn 6法),在低温条件下,改变乙醇浓度、离子强度和pH值,使血浆蛋白逐步分离,得到5个组份,从而开创了血浆... 自1948年第一次报道用硫酸铵盐析法从血浆中分离到白蛋白和球蛋白以来,已经有100多年的历史了。1946年Cohn报道了一种低温乙醇法(Cohn 6法),在低温条件下,改变乙醇浓度、离子强度和pH值,使血浆蛋白逐步分离,得到5个组份,从而开创了血浆分层的新纪元。Pool 1965年报道了血浆冷沉淀物含有凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性,为甲型血友病治疗开辟了途径。70～80年代。 展开更多

关键词 硫酸铵盐析法 血浆蛋白 低温乙醇法 凝血因子 甲型血友病 冷沉淀物 离子强度 凝血活性 离子交换柱 组份

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产业合作简讯

13

作者 王璋瑜 《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第8期21-22,共2页

加州的 Advanced Tissue Science(ATS)与 Cell Genesys Inc.达成一项合作协议,将共同开发全厚度皮肤代替物。协议中,ATS 的皮肤组织工程技术和 Cell Genesys 的广泛型表皮皮肤细胞将被结合应用。一旦制成普遍适用型全厚度皮肤替代物,今... 加州的 Advanced Tissue Science(ATS)与 Cell Genesys Inc.达成一项合作协议,将共同开发全厚度皮肤代替物。协议中,ATS 的皮肤组织工程技术和 Cell Genesys 的广泛型表皮皮肤细胞将被结合应用。一旦制成普遍适用型全厚度皮肤替代物,今后就不必从烧伤病人身上移植其它部位的皮肤。 展开更多

关键词 皮肤组织工程 皮肤细胞 烧伤病人 代替物 泛型 第八因子 疫苗佐剂 表皮层 MILES 甲型血友病

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遗传学

14

《中国医学文摘(基础医学)》 CSCD 1992年第2期65-67,共3页

对祖籍为广东省汉族的35个甲型血友病家系的38名患者和部分正常家庭成员,系统研究了第Ⅷ凝血因子基因内Be1Ⅰ、XbaⅠ和Bg1Ⅰ位点RFLP的分布频率及其它的联合应用时在甲型血友病连锁分析中的有效率。多态性位点BclⅠ和xbaⅠ的阳性率分别... 对祖籍为广东省汉族的35个甲型血友病家系的38名患者和部分正常家庭成员,系统研究了第Ⅷ凝血因子基因内Be1Ⅰ、XbaⅠ和Bg1Ⅰ位点RFLP的分布频率及其它的联合应用时在甲型血友病连锁分析中的有效率。多态性位点BclⅠ和xbaⅠ的阳性率分别为63.5%和43.5%,它们的杂合子频率分别为。 展开更多

关键词 遗传学 甲型血友病 第Ⅷ凝血因子基因

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