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甲型副伤寒沙门氏菌cdtB亚基的原核表达及对巨噬细胞IL-6、IL-8、TNF-α分泌的影响 被引量：2
1
作者 陈鸿鹄 吴圆圆 +1 位作者 占利 梅玲玲 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期535-538,546,共5页
目的研究甲型副伤寒沙门氏菌感染过程中,cdtB对宿主巨噬细胞分泌促炎细胞因子的影响。NF-κB信号通路阻断剂对cdtB诱导的巨噬细胞分泌细胞因子的影响。方法对甲型副伤寒沙门氏菌cdtB亚基进行原核表达,制备并模型纯化重组蛋白,建立其刺激... 目的研究甲型副伤寒沙门氏菌感染过程中,cdtB对宿主巨噬细胞分泌促炎细胞因子的影响。NF-κB信号通路阻断剂对cdtB诱导的巨噬细胞分泌细胞因子的影响。方法对甲型副伤寒沙门氏菌cdtB亚基进行原核表达,制备并模型纯化重组蛋白,建立其刺激人THP-1巨噬细胞模型,ELISA检测THP-1分泌IL-6,IL-8和TNF-α等细胞因子。在共培养体系中加入NF-κB信号通路阻断剂,ELISA检测THP-1分泌IL-6,IL-8和TNF-α等细胞因子。结果成功构建甲型副伤寒沙门氏菌cdtB原核表达系统,表达并纯化重组cdtB蛋白,与空白对照相比,受到cdtB刺激的THP-1细胞上清中的IL-6,IL-8和TNF-α浓度显著上升,而在THP-1细胞培养基中加入NF-κB信号通路阻断剂SN50可以显著抑制重组cdtB诱导的IL-6、IL-8、TNF-α分泌。结论甲型副伤寒沙门氏菌cdtB能够通过NF-κB信号通路诱导巨噬细胞分泌IL-6、IL-8和TNF-α,在甲型副伤寒相关的炎症反应中发挥促进作用。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门氏菌 cdtB 细胞因子 巨噬细胞
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进境鱼粉中甲型副伤寒沙门氏菌的分离与鉴定 被引量：2
2
作者 孔繁德 龚艳清 陈信忠 《福建畜牧兽医》 2002年第z1期44-45,共2页
本文通过对一批进口红鱼粉的检测,检出沙门氏菌,继续进行血清学鉴定为甲型副伤寒沙门氏菌。通过动物回归试验,其致病性很强。药敏试验发现菌必治、先锋霉素V、环丙沙星和氟哌酸对该菌呈高度敏感。由于该菌为人畜共患致病菌,所以对该批... 本文通过对一批进口红鱼粉的检测,检出沙门氏菌,继续进行血清学鉴定为甲型副伤寒沙门氏菌。通过动物回归试验,其致病性很强。药敏试验发现菌必治、先锋霉素V、环丙沙星和氟哌酸对该菌呈高度敏感。由于该菌为人畜共患致病菌,所以对该批鱼粉进行了无害化处理。 展开更多
关键词 鱼粉 甲型副伤寒沙门氏菌 分离鉴定
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不同介质中甲型副伤寒沙门氏菌的热失活特性 被引量：8
3
作者 张佩佩 牛会敏 +3 位作者 李苗云 赵改名 崔文明 孙灵霞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第14期58-63,共6页
研究甲型副伤寒沙门氏菌在不同介质中热失活规律,对接种10~8 CFU/g甲型副伤寒沙门氏菌的不同介质进行55、63、72℃热处理,测定处理后样品中甲型副伤寒沙门氏菌的菌体浓度。应用Dose Resp模型拟合在3种温度下志贺氏菌的动力学模型,用D值(... 研究甲型副伤寒沙门氏菌在不同介质中热失活规律,对接种10~8 CFU/g甲型副伤寒沙门氏菌的不同介质进行55、63、72℃热处理,测定处理后样品中甲型副伤寒沙门氏菌的菌体浓度。应用Dose Resp模型拟合在3种温度下志贺氏菌的动力学模型,用D值(decimal reduction time)表示甲型副伤寒沙门氏菌在不同介质中的耐热情况。结果表明:甲型副伤寒沙门氏菌的热失活曲线运用Dose Resp模型拟合较好,相关系数均在0.97以上。甲型副伤寒沙门氏菌在不同介质中的D值不同,在蛋白质和脂肪含量较高的灌肠肥瘦肉1∶1(m/m)中D值较大,相对耐热。55℃条件下热处理25.0 min,63℃热处理2.03 min,72℃热处理0.31 min后,一般肉制品中甲型副伤寒沙门氏菌均能被杀死。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门氏菌 热失活 动力学模型 D值
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甲型副伤寒沙门氏菌蛋白指纹图谱的建立
4
作者 李晓庆 黄文方 +4 位作者 刘华 杨永长 肖代雯 闫慧 罗春丽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期576-579,共4页
目的:利用表面增强激光解析电离飞行时间质谱建立甲型副伤寒沙门氏菌蛋白指纹图谱。方法:收集临床中分离获得的甲型副伤寒沙门氏菌36株,同时采集对照菌96株,对所收集的细菌利用16S rDNA测序技术进行分子生物学验证鉴定。利用表面增强激... 目的:利用表面增强激光解析电离飞行时间质谱建立甲型副伤寒沙门氏菌蛋白指纹图谱。方法:收集临床中分离获得的甲型副伤寒沙门氏菌36株,同时采集对照菌96株,对所收集的细菌利用16S rDNA测序技术进行分子生物学验证鉴定。利用表面增强激光解析电离飞行时间质谱检测细菌蛋白,ProteinChip和Biomarker Wizard软件自动采集数据,将结果用BioMarker Patterns软件建立分类树鉴定模型,并进行盲法验证。结果:在相对分子质量(Mr)3 000～20 000范围内,捕获104个蛋白峰,其中90个蛋白峰差异有统计学意义(P<0.01),择优选出质荷比(M/Z)为10 061.7的蛋白峰建立甲型副伤寒沙门氏菌的分类树模型,甲型副伤寒沙门氏菌诊断的灵敏度和特异度通过盲法验证为100%。结论:采用SELDI-TOF MS技术建立的甲型副伤寒沙门氏菌的分类树诊断模型,可用于该菌的快速鉴定。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门氏菌 SELDI—TOF—MS 蛋白指纹图谱
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益生菌饮料改善甲型副伤寒沙门氏菌诱导小鼠腹泻作用研究 被引量：1
5
作者 薛玉玲 袁庆彬 +3 位作者 冯丽莉 张栋 康志远 王世杰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第15期98-101,共4页
考察嗜酸乳杆菌和动物双歧杆菌乳亚种益生菌饮料对甲型副伤寒沙门氏菌诱导的腹泻改善效果,并探究其作用机制。饲喂腹泻模型小鼠益生菌饮料原液,观察益生菌饮料对腹泻改善情况;饲喂正常小鼠沙门氏菌和益生菌饮料混合液,观察小鼠腹泻情况... 考察嗜酸乳杆菌和动物双歧杆菌乳亚种益生菌饮料对甲型副伤寒沙门氏菌诱导的腹泻改善效果,并探究其作用机制。饲喂腹泻模型小鼠益生菌饮料原液,观察益生菌饮料对腹泻改善情况;饲喂正常小鼠沙门氏菌和益生菌饮料混合液,观察小鼠腹泻情况,检测粪便中的乳杆菌和双歧杆菌的数量,探究益生菌的竞争抑制作用;饲喂正常小鼠益生菌饮料以及菌粉,检测粪便及胃肠道组织内的乳杆菌和双歧杆菌的数量,探究益生菌的定植作用。结果显示,饲喂益生菌饮料原液的实验组腹泻模型小鼠1 d后腹泻停止,较对照小组恢复快;饲喂沙门氏菌和益生菌饮料混合液,小鼠没有出现水样便和腹泻,且5 d后的粪便中益生菌数量与对照组相近;小鼠肠道内的乳杆菌和双歧杆菌的数目均随着饲喂益生菌饮料以及菌粉时间的延长呈上升趋势。综上,益生菌饮料基于益生菌可通过竞争抑制、定植肠道等作用,改善由甲型副伤寒沙门氏菌引起的小鼠腹泻症状,对肠道起到保护作用。 展开更多
关键词 益生菌 腹泻 甲型副伤寒沙门氏菌 肠道菌群 定植
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甲型副伤寒沙门氏菌HmpA蛋白的表达纯化及生物学特征预测
6
作者 王磊 刘小草 +6 位作者 董雨 王雪婷 柴徵微 李吉 丁爱军 张维明 曾韦锟 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第24期131-138,共8页
目的:原核表达甲型副伤寒沙门氏菌(Salmonella paratyphi A)HmpA蛋白,并对其进行生物信息学分析,为研究副甲菌HmpA蛋白对于宿主体内一氧化氮(NO)信号通路的影响提供理论参考。方法:PCR扩增hmpA基因,亚克隆至T载体后,再构建pNdeI-hmpA表... 目的:原核表达甲型副伤寒沙门氏菌(Salmonella paratyphi A)HmpA蛋白,并对其进行生物信息学分析,为研究副甲菌HmpA蛋白对于宿主体内一氧化氮(NO)信号通路的影响提供理论参考。方法:PCR扩增hmpA基因,亚克隆至T载体后,再构建pNdeI-hmpA表达载体,转化BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDSPAGE检测蛋白表达形式,利用Histrap预装柱亲和纯化HmpA蛋白,并用Western blot鉴定,生物信息学多方法分析HmpA蛋白特征。结果:成功构建了原核表达载体pNdeI-hmpA,低温诱导时,HmpA蛋白以包涵体和可溶表达形式并存;纯化后的HmpA蛋白可被His标签抗体检测。生物信息学分析提示HmpA蛋白为亲水性蛋白;无跨膜结构域、无信号肽;蛋白二级结构主要由α螺旋与不规则卷曲构成,三级结构模型类似环状;蛋白结构域分析表明含有1个功能结构域,属于PRK13289超级家族;共有32个磷酸化位点;与沙门氏菌多个降解硝酸盐和杀伤性NO的蛋白酶或转录因子存在关联。结论:本研究成功利用基因工程技术获得了甲型副伤寒沙门氏菌HmpA蛋白,并通过生物信息学方法预测了其部分生物学特征,为后续揭示甲型副伤寒沙门氏HmpA蛋白对于宿主体内的一氧化氮信号通路的影响提供理论支持。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门氏菌 原核表达 HmpA蛋白 蛋白纯化 生物信息学分析
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随机转座子插入构建甲型副伤寒杆菌启动子文库 被引量：1
7
作者 许泽仰 洪愉 +8 位作者 冯梦蝶 毛普加 赵继华 杨洪文 宋武战 王纪爱 黄芬 井申荣 曾韦锟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期7-11,共5页
目的构建携带氯霉素乙酰转移酶(CAT)的转座子自杀性质粒,通过接合转座获得甲型副伤寒沙门氏菌(副甲)启动子文库。方法 PCR扩增CAT的基因亚克隆至pMD-18T载体,鉴定正确后酶切插入转座子自杀性质粒pSC189,获得新的转座子载体pSC-CAT,将携... 目的构建携带氯霉素乙酰转移酶(CAT)的转座子自杀性质粒,通过接合转座获得甲型副伤寒沙门氏菌(副甲)启动子文库。方法 PCR扩增CAT的基因亚克隆至pMD-18T载体,鉴定正确后酶切插入转座子自杀性质粒pSC189,获得新的转座子载体pSC-CAT,将携带pSC-CAT的供体菌与副甲受体菌进行接合转座,涂布氯霉素平板筛选转座的细菌,以随机筛选出来的细菌基因组为模板,热不对称PCR扩增插入位点侧翼序列,并进行测序、比对分析。结果筛选获得约1000个突变菌,随机挑取6个菌,转座子插入位点的上游分别对应6个可疑启动子区域。结论通过自杀性转座子载体pSC-CAT可高效获得副甲菌启动子文库,为进一步研究副甲菌基因表达与调控奠定了基础。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门氏菌 氯霉素乙酰转移酶 pSC189 接合转移转座
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进境鱼粉中沙门氏菌的分离与鉴定 被引量：7
8
作者 孔繁德 石椿丽 +3 位作者 龚艳清 陈信忠 徐淑菲 谢明星 《福建畜牧兽医》 2005年第1期5-6,共2页
近两年来,在厦门口岸进口鱼粉的检测中,多次检出沙门氏菌。本文通过血清学鉴定,确定该菌为甲型副伤寒沙门氏菌和鸭沙门氏 菌。动物回归试验说明其致病性很强,药敏试验发现菌必治、先锋霉素V、环丙沙星和氟哌酸对该菌高度敏感。
关键词 鱼粉 甲型副伤寒沙门氏菌 分离鉴定
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猪沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验 被引量：3
9
作者 魏静萍 《养殖与饲料》 2015年第2期16-19,共4页
从猪粪中分离引起仔猪副伤寒的病原菌并对该病原菌进行鉴定和药物敏感性测定。通过细菌培养、形态鉴定、生理生化试验、糖发酵试验,并参照《常见细菌系统鉴定手册》鉴定得到引起仔猪副伤寒的病原菌为甲型副伤寒沙门氏菌。通过药敏试验,... 从猪粪中分离引起仔猪副伤寒的病原菌并对该病原菌进行鉴定和药物敏感性测定。通过细菌培养、形态鉴定、生理生化试验、糖发酵试验,并参照《常见细菌系统鉴定手册》鉴定得到引起仔猪副伤寒的病原菌为甲型副伤寒沙门氏菌。通过药敏试验,得到该分离菌对头孢噻吩(抑菌圈24 mm)和头孢唑啉(抑菌圈18 mm)敏感性最强;最不敏感的是诺氟沙星(抑菌圈为3 mm)。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门氏菌 分离鉴定 药敏试验
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LSPA1早期基因gp22细菌双杂交诱饵载体与筛选文库的建立
10
作者 冯梦蝶 毛普加 +7 位作者 洪愉 许泽仰 赵继华 杨洪文 宋武战 黄芬 井申荣 曾韦锟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期214-219,共6页
构建细菌双杂交系统中的诱饵载体p KT25-gp22和甲型副伤寒沙门氏菌基因文库以便后续的筛选实验。PCR扩增获得gp22基因,插入p KT25构成诱饵质粒p KT25-gp22。提取甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA,经Sau3AⅠ部分酶切后连接到p UT18C质粒的Ba... 构建细菌双杂交系统中的诱饵载体p KT25-gp22和甲型副伤寒沙门氏菌基因文库以便后续的筛选实验。PCR扩增获得gp22基因,插入p KT25构成诱饵质粒p KT25-gp22。提取甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA,经Sau3AⅠ部分酶切后连接到p UT18C质粒的Bam HⅠ位点,获得基因组DNA表达文库。用化转的方法将诱饵质粒与p UT18C共转入BTH101,检测诱饵质粒自激活作用,并检测诱饵蛋白对宿主菌的毒性。将文库质粒电转至JM109感受态,PCR鉴定文库的多样性。诱饵载体p KT25-gp22无自激活报告基因的能力且对细菌的生长无毒性。所构建的副甲基因组文库覆盖基因组达8倍,满足文库筛选需要。成功构建细菌双杂交系统中诱饵载体p KT25-gp22,筛选文库质量良好,可应用于细菌双杂交实验。 展开更多
关键词 细菌双杂交 诱饵载体 基因组文库 早期基因 甲型副伤寒沙门氏菌
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