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心康冲剂含药血清调控GAS5-miR21对心肌成纤维细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 刘蓉芳 郭冰 +2 位作者 余意 李园 王敏 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第9期102-109,共8页
目的 观察心康冲剂含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响,基于GAS5-miR-21探讨其抑制CFs增殖的作用机制。方法 取SD乳鼠心肌,差速贴壁法分离CFs,采用血管紧张素Ⅱ诱导CFs增殖,在转染微小RNA-21(miR-21)过表达慢... 目的 观察心康冲剂含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响,基于GAS5-miR-21探讨其抑制CFs增殖的作用机制。方法 取SD乳鼠心肌,差速贴壁法分离CFs,采用血管紧张素Ⅱ诱导CFs增殖,在转染微小RNA-21(miR-21)过表达慢病毒、生长阻滞特异性转录本5(GAS5)沉默慢病毒后,分别用心康冲剂含药血清干预24 h。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,RT-qPCR检测GAS5、miR-2l、磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)mRNA表达,Western blot检测PTEN、Akt、周期蛋白D1(Cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组CFs细胞活力增强,G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,α-SMA阳性表达升高,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达降低,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,心康冲剂组CFs细胞活力减弱,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,α-SMA阳性表达降低,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达升高,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达降低;mi R-21过表达组和GAS5沉默组CFs细胞活力增强,G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,α-SMA阳性表达升高,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达降低,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-21过表达组、GAS5沉默组比较,miR-21过表达+心康冲剂组、GAS5沉默+心康冲剂组CFs细胞活力减弱,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,α-SMA阳性表达降低,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达升高,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 心康冲剂含药血清可抑制沉默GAS5所致miR-21、Akt表达升高,对抗过表达miR-21所致GAS5和PTEN表达降低,抑制CFs增殖周期,促进GAS5发挥“分子海绵”作用,改善血管紧张素Ⅱ诱导的CFs过度增殖。 展开更多
关键词 心肌纤维化 细胞周期 心康冲剂 生长阻滞特异转录5 微小RNA-21 心肌成纤维细胞
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结肠癌中MEG3和GAS5的表达及与预后的关系 被引量:7
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作者 司君利 孟菲菲 +2 位作者 崔京远 亓玉琴 吴健婷 《中国现代普通外科进展》 CAS 2017年第9期673-676,共4页
目的:检测长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)、生长特异抑制物5(GAS5)在结肠癌组织中的表达水平,分析GAS5与细胞周期蛋白P21、E2F1的相关性以探讨其作用机制。方法:收集2014年12月--2015年12月结肠癌患者手术切除标本(包括癌组... 目的:检测长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)、生长特异抑制物5(GAS5)在结肠癌组织中的表达水平,分析GAS5与细胞周期蛋白P21、E2F1的相关性以探讨其作用机制。方法:收集2014年12月--2015年12月结肠癌患者手术切除标本(包括癌组织及对应的远端正常组织)。qRT-PCR检测63例结肠癌中MEG3、GAS5的表达,并分析其与临床病理参数的关系。Western blot法检测结肠癌中P21蛋白、E2F1蛋白的表达水平,并分析其与GAS5的相关性。结果:(1)结肠癌组织中MEG3的表达水平(7.76±1.38)显著低于正常组织(9.52±1.31),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)结肠癌组织中GAS5的表达水平(3.98±1.15)显著低于正常组织(6.21±1.33),差异有统计学意义(P<0.05)。(3)在结肠癌组织(r=-0.627,P=0.000)及远端正常组织(r=-0.807,P=0.000)中,P21与E2F1的表达呈负相关。GAS5的相对表达水平与P21存在正相关(r=0.410,P=0.001),与E2F1存在负相关(r=-0.366,P=0.003)。(4)MEG3、GAS5高表达者较低表达者中位生存期明显延长(P<0.05)。结论:MEG3、GAS5在结肠癌中表达降低,表明其扮演抑癌基因的角色,P21和E2F1是GAS5发挥抑癌作用的重要靶点,检测MEG3、GAS5的表达水平对结肠癌预后有潜在价值。 展开更多
关键词 结肠癌 长链非编码RNA 母系表达基因3 生长特异抑制5 预后
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TALENs编辑绵羊成纤维细胞FGF 5基因 被引量:3
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作者 皮文辉 周平 +5 位作者 王立民 唐红 郭延华 张译元 刘守仁 王新华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期704-710,共7页
类转录激活因子效应物(Transcription activator-like effector,TALE)已经成为基因组编辑和基因转录调控的有效工具,在多个物种的基因组中实现特定位点的删除、插入和突变。针对绵羊成纤维细胞生长因子5(Fibroblast growth factor 5,FG... 类转录激活因子效应物(Transcription activator-like effector,TALE)已经成为基因组编辑和基因转录调控的有效工具,在多个物种的基因组中实现特定位点的删除、插入和突变。针对绵羊成纤维细胞生长因子5(Fibroblast growth factor 5,FGF5)基因起始密码子ATG位点,设计构建TALENs(Transcription activator-like effector nucleases,TALENs)。通过比较分析正常培养和基因组编辑处理的绵羊成纤维细胞,电转TALENs组合,Surveyor突变检测,筛选获得1对有效的TALENs。有限稀释细胞传代培养,PCR扩增FGF5基因片段,经PAGE检测筛选发生突变的细胞,测序确认FGF5基因ATG位点产生缺失突变细胞。获得具有编辑活性的TALENs,为该基因的定点编辑奠定基础。Surveyor检测和测序结果表明,在绵羊FGF5基因ATG起始密码子上游104碱基位点,存在1个G/C单核苷酸多态。 展开更多
关键词 转录激活因子效应核酸酶 基因组编辑 成纤维细胞生长因子5基因 单核苷酸多态 绵羊
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LncRNAGAS5在缺血性脑卒中的表达及临床价值 被引量:1
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作者 杨挲挲 韩鹏飞 +3 位作者 赵乐 李梦真 查江杰 程铭 《中国实用医药》 2023年第19期17-20,共4页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)生长阻滞特异转录物5(GAS5)在缺血性脑卒中(IS)患者血清中的表达及临床价值。方法选取90例IS患者作为病例组,按照IS严重程度分为轻度组、中度组、重度组,每组30例;另选取同期健康体检者45例作为健康对照... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)生长阻滞特异转录物5(GAS5)在缺血性脑卒中(IS)患者血清中的表达及临床价值。方法选取90例IS患者作为病例组,按照IS严重程度分为轻度组、中度组、重度组,每组30例;另选取同期健康体检者45例作为健康对照组。收集血清标本,提取总RNA,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定逆转录LncRNA GAS5,分析IS患者LncRNA GAS5相对表达水平与美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性以及LncRNA GAS5对IS的诊断效能。结果qRT-PCR结果表明:LncRNA GAS5在健康对照组以及轻度组、中度组、重度组中的表达水平分别为(1.12±0.97)、(2.17±1.16)、(3.20±1.24)、(5.07±1.97),轻度组、中度组、中度组LncRNA GAS5表达水平高于健康对照组,且重度组LncRNA GAS5表达水平高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组,差异均具有统计学意义(P<0.001)。经Pearson相关性分析表明,病例组患者LncRNA GAS5相对表达水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.63,P<0.01)。通过受试者工作特征(ROC)曲线分析,LncRNA GAS5的曲线下面积(AUC)为0.893(0.836~0.950),灵敏度为93.3%,特异度为68.9%,截断值为1.18。结论IS患者与健康体检者取新鲜血清检测后发现,LncRNA GAS5表达在IS患者血清中出现明显升高,且患者病情越严重表达水平越高,因此可以将LncRNA GAS5表达水平作为IS的辅助生物诊断指标。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 生长阻滞特异转录物5 缺血性脑卒中 实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应
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宫颈癌组织lncRNA GAS5、miR-205表达变化及其与患者临床病理特征的关系 被引量:8
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作者 李秀艳 郭丽 +1 位作者 卜琦 王玉梅 《山东医药》 CAS 2019年第31期70-73,共4页
目的探讨宫颈癌组织长链非编码RNA(lncRNA)生长阻滞特异性抑制物5(GAS5)、微小RNA-205(miR-205)表达变化及其临床意义。方法选择宫颈癌患者93例,取手术切除的宫颈癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR法检测lncRNA GAS5、m... 目的探讨宫颈癌组织长链非编码RNA(lncRNA)生长阻滞特异性抑制物5(GAS5)、微小RNA-205(miR-205)表达变化及其临床意义。方法选择宫颈癌患者93例,取手术切除的宫颈癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR法检测lncRNA GAS5、miR-205表达。比较宫颈癌组织与癌旁正常组织lncRNA GAS5、miR-205表达,分析宫颈癌组织lncRNA GAS5表达与miR-205表达的关系以及二者表达与患者临床病理特征的关系。结果宫颈癌组织lncRNA GAS5相对表达量明显低于癌旁正常组织,miR-205相对表达量明显高于癌旁正常组织(P均<0.05)。Pearson相关分析显示,宫颈癌组织lncRNA GAS5相对表达量与miR-205相对表达量呈负相关关系(r=-0.473,P<0.05)。宫颈癌组织lncRNA GAS5相对表达量与肿瘤直径、FIGO分期及淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者年龄、组织分化程度、肿瘤浸润深度无关(P均>0.05);miR-205相对表达量与FIGO分期、淋巴结转移、肿瘤浸润深度有关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、组织分化程度无关(P均>0.05)。结论宫颈癌组织lncRNA GAS5表达下调、miR-205表达上调,二者共同参与宫颈癌形成和恶性进展。lncRNA GAS5、miR-205有可能成为宫颈癌筛查的生物标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 长链非编码RNA生长阻滞特异性抑制5 微小RNA-205 临床病理特征
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胃癌组织lncRNA MEG3、GAS5表达变化及其与患者临床病理特征和预后的关系 被引量:9
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作者 徐瀚斌 章由贤 +2 位作者 刘放 高晓慧 朱以祥 《山东医药》 CAS 2019年第10期6-9,共4页
目的观察胃癌组织长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)、生长特异抑制物5(GAS5)表达变化,并分析其表达变化与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择胃癌组织及其癌旁正常组织各73例份,采用real-time PCR法检测MEG3、GAS5表达。... 目的观察胃癌组织长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)、生长特异抑制物5(GAS5)表达变化,并分析其表达变化与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择胃癌组织及其癌旁正常组织各73例份,采用real-time PCR法检测MEG3、GAS5表达。以胃癌组织MEG3、GAS5相对表达量的均值为临界值,高于临界值作为高表达,低于或等于临界值作为低表达。分析胃癌组织MEG3、GAS5表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果胃癌组织MEG3、GAS5相对表达量均明显低于癌旁正常组织(P均<0.05)。胃癌组织MEG3、GAS5表达均与肿瘤组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。MEG3高表达者36例、低表达者37例,GAS5高表达者38例、低表达者35例。MEG3、GAS5高表达者术后生存率和生存时间均明显高于MEG3、GAS5低表达者(P均<0.05)。结论胃癌组织MEG3、GAS5低表达,其低表达与胃癌进展和患者预后不良有关。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA 母系表达基因3 生长特异抑制5 临床病理特征 预后
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基于GAS5/miR-21介导的细胞增殖探讨心康冲剂抗心力衰竭大鼠心肌纤维化的作用机制 被引量:2
7
作者 刘蓉芳 郭冰 +2 位作者 余意 李园 王敏 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第11期114-119,共6页
目的基于GAS5/miR-21探讨心康冲剂抗心力衰竭大鼠心肌纤维化的作用机制。方法46只SD大鼠选取6只作为正常组,剩余40只通过腹腔注射阿霉素(2 mg/mL)诱导慢性心力衰竭并分为模型组、缬沙坦组及心康冲剂组。心康冲剂组予心康冲剂0.5g/kg灌胃... 目的基于GAS5/miR-21探讨心康冲剂抗心力衰竭大鼠心肌纤维化的作用机制。方法46只SD大鼠选取6只作为正常组,剩余40只通过腹腔注射阿霉素(2 mg/mL)诱导慢性心力衰竭并分为模型组、缬沙坦组及心康冲剂组。心康冲剂组予心康冲剂0.5g/kg灌胃,缬沙坦组予缬沙坦0.03g/kg灌胃,正常组和模型组予等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续4周。心脏彩超检测大鼠心功能,ELISA检测血清Ⅰ型胶原(ColⅠ)和基质金属蛋白酶9(MMP9)含量,HE和Masson染色观察左心室病理变化,免疫荧光染色检测左心室α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,qRT-PCR检测磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)、生长阻滞特异性转录本5(GAS5)、miR-21基因表达,Westernblot检测PTEN、Akt、周期蛋白D1(CyclinD1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)表达。结果与正常组比较,模型组大鼠左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)降低(P<0.05),血清MMP9、ColⅠ含量增加(P<0.05),心肌细胞肿胀变性、胞浆溶解,细胞排列紊乱,可见大量蓝色胶原纤维,胶原容积分数增加(P<0.05),左心室α-SMA表达升高(P<0.05),PTEN、GAS5基因表达降低(P<0.05),miR-21表达升高(P<0.05),Akt、CDK4、CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05),PTEN蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,心康冲剂组和缬沙坦组大鼠LVEF、LVFS升高(P<0.05),血清MMP9、ColⅠ含量减少(P<0.05),心肌细胞肿胀、胞浆溶解程度相对较轻,蓝色胶原纤维较少,胶原容积分数减少(P<0.05),左心室α-SMA表达降低(P<0.05),PTEN、GAS5基因表达升高(P<0.05),miR-21表达降低(P<0.05),Akt、CDK4、CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05),PTEN蛋白表达升高(P<0.05)。结论心康冲剂可能通过调节GAS5/miR-21、PTEN/Akt及细胞周期相关蛋白表达抑制细胞增殖,降低心力衰竭大鼠心肌纤维化程度。 展开更多
关键词 心力衰竭 心肌纤维化 心康冲剂 生长阻滞特异转录5 MIR-21 细胞增殖 大鼠
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非小细胞肺癌患者血浆lncRNA-GAS5、lncRNA-CCAT1表达变化及意义
8
作者 叶兆康 吴依芬 《山东医药》 CAS 2020年第28期61-64,共4页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆长链非编码RNA-生长阻滞特异度转录因子5(lncRNA-GAS5)、长链非编码RNA-结肠癌相关转录因子1(lncRNA-CCAT1)表达变化及临床意义。方法选择80例NSCLC患者作为NSCLC组,同期选择肺部良性疾病患者50例... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆长链非编码RNA-生长阻滞特异度转录因子5(lncRNA-GAS5)、长链非编码RNA-结肠癌相关转录因子1(lncRNA-CCAT1)表达变化及临床意义。方法选择80例NSCLC患者作为NSCLC组,同期选择肺部良性疾病患者50例作为对照组。用荧光定量PCR法检测两组血浆lncRNA-GAS5、lncRNA-CCAT1表达,并分析二者表达与NSCLC患者临床病理特征的关系,用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆lncRNA-GAS5、lncRNA-CCAT1对NSCLC的诊断价值。结果与对照组比较,NSCLC组血浆lncRNA-GAS5表达低,血浆lncRNA-CCAT1表达高(P均<0.05)。血浆lncRNA-GAS5表达与NSCLC组织分化程度、TNM分期有关(P均<0.05),血浆lncRNA-CCAT1表达与NSCLC淋巴结转移、TNM分期有关(P均<0.05)。血浆lncRNA-GAS5诊断NSCLC的ROC曲线下面积(AUC)为0.756(95%CI:0.673~0.840),最佳截断值为26.71,此时灵敏度、特异度分别为0.81、0.79,准确度为0.77。血浆lncRNA-CCAT1诊断NSCLC的AUC为0.819(95%:CI 0.747~0.890),最佳截断值为13.11,此时灵敏度、特异度分别为0.85、0.82,准确度为0.81。血浆lncRNA-GAS5联合lncRNA-CCAT1诊断NSCLC的AUC为0.896(95%CI:0.841~0.951),此时灵敏度、特异度分别为0.89、0.92,准确度为0.86。结论NSCLC患者血浆lncRNA-GAS5表达低,血浆lncRNA-CCAT1表达高,二者均参与NSCLC的发生发展,且二者联合检测有助于早期诊断NSCLC。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA-生长阻滞特异转录因子5 长链非编码RNA-结肠癌相关转录因子1
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长链非编码RNA在肝纤维化发生发展中的作用研究进展 被引量:2
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作者 贾刚刚 吴承骏 +3 位作者 卢利霞 郑英 王俊科 于晓辉 《山东医药》 CAS 2022年第24期102-106,共5页
肝纤维化是指肝细胞外基质的弥漫性过度沉积与异常分布,是肝脏对慢性损伤的病理性修复反应,肝星状细胞(HSCs)的激活是其发生的重要环节。非编码RNA(ncRNA)已成为细胞信号传导和相关人类疾病的重要调节因子,长链非编码RNA(lncRNA)是一类... 肝纤维化是指肝细胞外基质的弥漫性过度沉积与异常分布,是肝脏对慢性损伤的病理性修复反应,肝星状细胞(HSCs)的激活是其发生的重要环节。非编码RNA(ncRNA)已成为细胞信号传导和相关人类疾病的重要调节因子,长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的ncRNA,过去认为其不具备蛋白编码能力,近年认为其可通过编码小肽调控细胞增殖。lncRNA参与各种器官的纤维化,包括肝脏、心脏、肺和肾脏。在肝纤维化过程中,lncRNA参与调节多种细胞生物学过程,根据作用可分为三类。大部分lncRNA发挥肝纤维化促进作用,如肺腺癌转移相关转录本1、肝纤维化相关的lncRNA1、浆细胞瘤变型异位因子1等;少部分lncRNA发挥抑制作用,如母系表达基因3、生长停滞特异转录因5等;极少数lncRNA具备促进和抑制肝纤维化发生的双重作用。 展开更多
关键词 非编码RNA 长链非编码RNA 肺腺癌转移相关转录本1 牛磺酸上调基因1 浆细胞瘤变型异位因子1 母系表达基因3 生长停滞特异转录5 肝纤维化
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