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题名猪生长激素cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达
被引量：4
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作者
白俊杰
叶星
李新辉
简清
罗建仁
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机构
中国水产科学研究院珠江水产研究所热带亚热带鱼类选育与养殖农业部重点开放实验室
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出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期99-102,共4页
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基金
农业部"九五"重点渔业科技项目 !(95 B 96 0 2 0 8 0 2 )
中国水产科学研究院重点基金! (99 0 8 0 2 )资助项目
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文摘
用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从猪脑垂体总RNA中扩增出编码猪生长激素 (GH)成熟肽基因序列 ,定向克隆至质粒pUC18。序列分析表明 ,克隆的猪GHcDNA长 5 73bp ,不含信号肽序列 ,并在该序列之前加入一起始密码子ATG。将猪GHcDNA定向克隆至原核表达载体pBV2 2 0 ,构建成重组猪GH基因表达载体pBVpGH7。SDS PAGE和薄层扫描分析表明 :经 42℃诱导 ,pBVpGH7在大肠杆菌中可表达一分子量约 2 2 0 0 0的特异蛋白 ,表达量约占细胞总蛋白的 2 0 .5 %。
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关键词
猪
生长激素cdna
基因克隆
大肠杆菌表达
鱼用饲料添加剂
促生长作用
RT-PCR
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Keywords
porcine GH cdna, gene cloning, E. coli expression
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分类号
S963.73
[农业科学—水产养殖]
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名水貂生长激素cDNA的克隆与序列分析
被引量：3
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作者
尚丹
刘维全
孙绍光
王吉贵
李全
张丽
朱宝成
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机构
河北大学生命科学学院
中国农业大学生物学院
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出处
《特产研究》
2005年第2期1-4,共4页
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文摘
从水貂脑垂体中分离提取总RNA,经过RT-PCR分别扩增出水貂生长激素前体肽和成熟肽cDNA。PCR产物经凝胶回收纯化,克隆到载体pGEM-T,然后转化感受态细胞DH5α。在含X-galI、PTG的LB(Amp+)平板上筛选阳性克隆,提取质粒作限制性酶切鉴定后,对目的片段进行测序。结果表明,RT-PCR扩增出的2个cDNA片段碱基数分别为713bp和780bp,用DNAsis2.5软件进行分析表明,此扩增序列与GenBank中发表的水貂生长激素cDNA100%相同。前体肽编码区由651bp组成,编码216个氨基酸,包括长度为29个氨基酸的信号肽;成熟肽的开放阅读框全长564bp,编码187个氨基酸,分子量约为21kDa。通过Blast比对,分析了与人、马、牛、猪、山羊、绵羊、猫、狗、大鼠和小鼠生长激素核苷酸序列的同源性。
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关键词
水貂
生长激素cdna
克隆
序列分析
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Keywords
mink
growth hormone cdna
cloning
sequence analysis
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分类号
Q75
[生物学—分子生物学]
S865.22
[农业科学—野生动物驯养]
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