功能性腹泻脾虚证模型大鼠结肠生长激素促释放激素受体表达的变化 被引量：6

1

作者 邱娟娟 唐旭东 +4 位作者 朱彤 万嘉嘉 邱阳 王凤云 郭慧淑 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期171-174,I0004,共5页

目的:观察功能性腹泻脾虚证模型大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体(GHSR)表达的变化,探讨发病机制。方法:高乳糖饲料喂养及小平台站立制备功能性腹泻脾虚证大鼠模型,观察大鼠的一般状态变化及粪便情况。免疫组织化学法,蛋白质印迹(Wes... 目的:观察功能性腹泻脾虚证模型大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体(GHSR)表达的变化,探讨发病机制。方法:高乳糖饲料喂养及小平台站立制备功能性腹泻脾虚证大鼠模型,观察大鼠的一般状态变化及粪便情况。免疫组织化学法,蛋白质印迹(Western blotting)和荧光定量PCR(Real-time PCR)检测大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体的表达情况。结果:功能性腹泻脾虚的模型大鼠出现精神乏力、消瘦及便溏等现象;免疫组织化学结果显示模型组生长激素促释放激素受体的蛋白表达较正常组表达降低;蛋白质印迹结果显示模型组生长激素促释放激素受体的蛋白表达较正常组表达有差异且有统计学意义(P<0.01);荧光定量PCR结果显示模型组生长激素促释放激素受体mRNA的表达较正常组表达有差异且有统计学意义(P<0.01)。结论:成功构建功能性腹泻脾虚证大鼠模型。功能性腹泻脾虚证大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体表达下降。推断生长激素促释放激素受体可能与功能性腹泻脾虚证有相关性。 展开更多

关键词 功能性腹泻脾虚证 大鼠 结肠 生长激素促释放激素受体

在线阅读 下载PDF 职称材料

血清促生长激素释放激素受体配体与多囊卵巢综合征的相关性分析 被引量：3

2

作者 徐琳 陈子江 +3 位作者 游力 祁秀娟 王来城 石玉华 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期584-587,共4页

目的:探讨血清促生长激素释放激素受体配体(Ghrelin)水平在多囊卵巢综合征(PCOS)中的意义。方法:选择我院PCOS患者48例作为研究对象(PCOS组),同期选择非PCOS患者40例作为对照(对照组),根据体重指数(IBM)将PCOS组、对照组患者分别分为肥... 目的:探讨血清促生长激素释放激素受体配体(Ghrelin)水平在多囊卵巢综合征(PCOS)中的意义。方法:选择我院PCOS患者48例作为研究对象(PCOS组),同期选择非PCOS患者40例作为对照(对照组),根据体重指数(IBM)将PCOS组、对照组患者分别分为肥胖与非肥胖,根据稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)将PCOS组及全部患者分为胰岛素抵抗(IR)与非IR。测定血清Ghrelin水平及内分泌代谢指标。结果:血清Ghrelin水平PCOS组低于对照组(P<0.05);肥胖组低于非肥胖组(P<0.05);非肥胖组低于非肥胖对照组(P<0.05);IR组低于非IR组(P<0.05)。血清Ghrelin水平与BMI、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR呈负相关(P<0.01,P<0.05,P<0.05),与胰岛素敏感指数(ISI)呈正相关(P<0.O5)。结论:PCOS患者存在血清低Ghrelin水平,Ghrelin水平与BMI、IR程度呈负相关。Ghrelin可能与PCOS的肥胖发生有相关性。血清Ghrelin检测可能作为预测PCOS患者IR的一个指标。 展开更多

关键词 促生长激素释放激素受体配体 多囊卵巢综合征 肥胖 胰岛素抵抗

在线阅读 下载PDF 职称材料

人生长激素释放激素受体剪接变异体1型对人肝癌细胞HepG2增殖的影响 被引量：3

3

作者 林玉茵 陈文生 +3 位作者 郭晓兰 谭茵 贺小松 戴建威 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期474-478,共5页

目的:探讨人生长激素释放激素受体剪接变异体1型(GHRHR SV1)对肝癌细胞系HepG2增殖的影响,阐明GHRHR SV1对人肿瘤细胞的促增殖作用。方法:将GHRHR SV1真核表达载体导入HepG2细胞建立HepG2-SV1细胞系。设计对照组(野生型HepG2)、空载质粒... 目的:探讨人生长激素释放激素受体剪接变异体1型(GHRHR SV1)对肝癌细胞系HepG2增殖的影响,阐明GHRHR SV1对人肿瘤细胞的促增殖作用。方法:将GHRHR SV1真核表达载体导入HepG2细胞建立HepG2-SV1细胞系。设计对照组(野生型HepG2)、空载质粒组(HepG2-pCDNA 3.0细胞系)和干扰组(HepG2-SV1细胞系)。采用PCR和Western blotting法鉴定HepG2-SV1细胞系,CCK-8法检测各组细胞的增殖率,克隆形成实验检测各组细胞的单克隆形成率,细胞划痕实验检测细胞的迁移率。结果:PCR与Western blotting法检测,构建的HepG2-SV1细胞系能稳定表达GHRHR SV1;CCK-8法检测,干扰组HepG2-SV1细胞系的增殖率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05);克隆形成实验,干扰组HepG2-SV1细胞系的单克隆形成率约为空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系的3.5倍(P<0.05);细胞划痕实验,所构建的干扰组HepG2-SV1细胞系的迁移率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05)。结论:GHRHR SV1能促进HepG2细胞的增殖。 展开更多

关键词 人生长激素释放激素受体剪接变异体1型 HEPG2细胞 细胞增殖 克隆形成率 迁移率

在线阅读 下载PDF 职称材料

五指山小型猪生长激素释放激素受体基因的cDNA克隆及序列分析 被引量：2

4

作者 张艳 郑心力 +2 位作者 王峰 孙瑞萍 谭树义 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第27期12981-12983,共3页

[目的]克隆五指山小型猪生长激素释放激素(GHRH)受体基因的cDNA,并对其进行序列分析。[方法]以五指山小型猪耳组织提取的基因组RNA为模板,根据已报道的猪GHRHR cDNA序列设计3对引物,用RT-PCR方法进行cDNA扩增。PCR产物经回收纯化后,与pM... [目的]克隆五指山小型猪生长激素释放激素(GHRH)受体基因的cDNA,并对其进行序列分析。[方法]以五指山小型猪耳组织提取的基因组RNA为模板,根据已报道的猪GHRHR cDNA序列设计3对引物,用RT-PCR方法进行cDNA扩增。PCR产物经回收纯化后,与pMD18-T连接并转化大肠杆菌DH5α,转化产物经PCR和双酶切鉴定后筛选出阳性克隆,阳性克隆经LB液体培养基培养鉴定后测序。[结果]成功获得了五指山小型猪GHRH受体基因的cDNA,该片段长1 577 bp,编码423个氨基酸。BLAST分析结果表明,该片段与猪GHRH受体基因仅有23个碱基的差异,同源性为98%;而两者GHRH受体基因均由423个氨基酸组成,序列同源性为96%。[结论]该研究为进一步揭示五指山小型猪的矮小机理提供了理论依据。 展开更多

关键词 五指山小型猪 生长激素释放激素受体 CDNA克隆 序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

鱼类生长激素释放肽及其受体的研究进展 被引量：1

5

作者 冯科 张桂蓉 +1 位作者 魏开建 熊邦喜 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第3期497-501,513,共6页

生长激素释放肽(Ghrelin)是生长激素促分泌素受体(Growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的一种内源性配体,主要在胃肠道内产生。目前不少鱼类的Ghrelin基因和氨基酸序列已经确定。鱼类Ghrelin能促进生长激素(GH)、促黄体释放激素... 生长激素释放肽(Ghrelin)是生长激素促分泌素受体(Growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的一种内源性配体,主要在胃肠道内产生。目前不少鱼类的Ghrelin基因和氨基酸序列已经确定。鱼类Ghrelin能促进生长激素(GH)、促黄体释放激素(LH)的分泌,并参与摄食调节,表明Ghrelin是一种具有多种生理活性的多肽。综述了鱼类Ghrelin及其受体的结构和分布,并对其调控机理进行了简要介绍,最后论述了Ghrelin在鱼类中的生理功能,旨在为Ghrelin在鱼类营养生理学及内分泌生理学中的研究提供参考。 展开更多

关键词 鱼类 生长激素释放肽(Ghrelin) 受体 结构与组织分布 生理功能

在线阅读 下载PDF 职称材料

生长激素释放激素受体激动剂MR409对db/db小鼠糖尿病肾病作用的研究 被引量：3

6

作者 唐琪 蔡瑞平 +3 位作者 薛锐泽 刘月阳 姚阳 周明生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1076-1083,共8页

目的:探讨人工合成的生长激素释放激素受体激动剂MR409对db/db小鼠糖尿病肾病和肾脏纤维化的影响。方法:将db/db小鼠随机分为模型组和MR409治疗组,野生型小鼠为对照组,每组10只。MR409治疗组小鼠隔天皮下给予MR409(每只15µg),对照... 目的:探讨人工合成的生长激素释放激素受体激动剂MR409对db/db小鼠糖尿病肾病和肾脏纤维化的影响。方法:将db/db小鼠随机分为模型组和MR409治疗组,野生型小鼠为对照组,每组10只。MR409治疗组小鼠隔天皮下给予MR409(每只15µg),对照组和模型组小鼠隔天皮下给予等量溶剂对照,干预8周。取第8周末小鼠血清和尿液进行生化指标检测,HE、PAS、Masson和天狼星红染色用于评价肾损伤和肾纤维化程度,二氢乙啶(DHE)荧光染色检测评价肾脏中活性氧的含量,Western blot检测肾脏纤维化以及氧化应激相关蛋白的表达。结果:与db/db小鼠相比,MR409治疗可显著降低db/db小鼠尿蛋白/肌酐比、血清中胆固醇和甘油三脂含量以及肾间质纤维化和肾小球硬化面积(P<0.05),MR409还可显著降低肾脏中活性氧水平及NADPH氧化酶亚基p22phox和gp91phox、纤连蛋白(FN)和转化生长因子β1(TGFβ1)蛋白的表达量(P<0.05)。结论:生长激素释放激素受体激动剂MR409能有效减轻db/db小鼠糖尿病肾损伤,其机制可能与降低氧化应激和肾纤维化有关。 展开更多

关键词 生长激素释放激素受体激动剂 糖尿病肾病 氧化应激 肾脏纤维化

在线阅读 下载PDF 职称材料

生长激素释放多肽通过与生长激素释放因子不同的受体起作用 被引量：1

7

作者 郭春远 刘传弟 +4 位作者 盛树力 高林 陈雁江 刘延津 胡晓愚 《首都医学院学报》 1990年第4期289-294,共6页

用固相法合成了生长激素释放因子(GRF),生长激素释放多肤(GHRP)和生长激素释放抑制因子(GRF-AN,D-Arg2-GRF44),并检测了多肽的生物学活性。结果表明1.GRF和GHRP在体内外均可刺激人垂体生长激素(GH)分泌。2.GRF和GHRP体外灌流时均可刺激... 用固相法合成了生长激素释放因子(GRF),生长激素释放多肤(GHRP)和生长激素释放抑制因子(GRF-AN,D-Arg2-GRF44),并检测了多肽的生物学活性。结果表明1.GRF和GHRP在体内外均可刺激人垂体生长激素(GH)分泌。2.GRF和GHRP体外灌流时均可刺激牛垂体GH分泌。3.GHRP可促进大鼠生长发育。4.GRF-AN可抑制由GRF兴奋的人和动物垂体GH释放,但有较强的选择性,GRF-AN不抑制由GHRP兴奋的GH释放。表明,GRF和GHRP均可兴奋垂体GH分泌,但二者的机制有本质上的区别。 展开更多

关键词 生长激素 释放多肽 释放因子 受体

在线阅读 下载PDF 职称材料

生长激素释放激素受体拮抗剂对翼状胬肉上皮细胞生长的影响及机制 被引量：3

8

作者 何倍婷 林宏亮 +2 位作者 王盛 覃泳杰 张洪洋 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第7期520-523,共4页

目的探讨生长激素释放激素受体(GHRH-R)拮抗剂对人翼状胬肉上皮细胞生长的影响及机制。方法采用原发性翼状胬肉患者术中所取的翼状胬肉头部进行组织块培养,模拟翼状胬肉生长模型,根据翼状胬肉组织的透明度和血管化程度分为静止期翼状胬... 目的探讨生长激素释放激素受体(GHRH-R)拮抗剂对人翼状胬肉上皮细胞生长的影响及机制。方法采用原发性翼状胬肉患者术中所取的翼状胬肉头部进行组织块培养,模拟翼状胬肉生长模型,根据翼状胬肉组织的透明度和血管化程度分为静止期翼状胬肉组(8例)和活动期翼状胬肉组(16例),并选取正常结膜上皮组织(6例)作为正常结膜组。此外,采用10μmol·L^(-1)GHRH-R拮抗剂MIA602作用于8例活动期翼状胬肉组的胬肉组织作为MIA602干预组。记录各组翼状胬肉上皮细胞的生长距离,并采用免疫印迹实验和免疫荧光染色检测各组GHRH-R、p-ERK1/2和Caspase-3的相对表达量。结果与正常结膜组和静止期翼状胬肉组相比,活动期翼状胬肉组翼状胬肉上皮细胞的生长速度明显加快,并且GHRH-R和p-ERK1/2表达均显著增高,Caspase-3表达明显降低(均为P<0.05)。与活动期翼状胬肉组相比,MIA-602干预组翼状胬肉上皮细胞生长速度明显变慢,GHRH-R和p-ERK1/2蛋白表达均显著降低,Caspase-3的表达显著升高(均为P<0.05)。结论阻断GHRH-R能够有效地抑制翼状胬肉的生长并促使翼状胬肉上皮细胞凋亡,其机制可能与降低细胞增殖能力和促进细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 原发性翼状胬肉 翼状胬肉上皮细胞 生长激素释放激素受体 细胞增殖 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

生长激素释放激素在垂体生长激素瘤中的作用 被引量：4

9

作者 沈烨 胡吉 +4 位作者 张玉林 王宣春 陈凤玲 刘瑜 胡仁明 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期463-466,共4页

目的探索Gsα和生长激素释放激素受体(GHRHR)基因突变和生长激素释放激素(GHRH)在生长激素瘤形成中的作用。方法对26例垂体生长激素瘤标本用ABC免疫组化法观察GHRH及其受体在垂体生长激素瘤细胞中的表达,提取组织DNA行PCR扩增并进行测... 目的探索Gsα和生长激素释放激素受体(GHRHR)基因突变和生长激素释放激素(GHRH)在生长激素瘤形成中的作用。方法对26例垂体生长激素瘤标本用ABC免疫组化法观察GHRH及其受体在垂体生长激素瘤细胞中的表达,提取组织DNA行PCR扩增并进行测序研究Gsα和GHRHR基因突变。结果免疫组化显示GHRH阳性率为15.4%,GHRHR阳性率为30.8%。2例Gsα突变在第201位,1例在第210位,总突变发生率为11.5%;2例GHRHR基因突变在第225位。结论Gsα突变是生长激素瘤发生的重要原因,GHRH在垂体瘤中阳性表达提示部分生长激素瘤可能分泌GHRH,并通过自分泌或旁分泌作用于瘤细胞,导致肿瘤的发生。 展开更多

关键词 生长激素瘤 生长激素释放激素 生长激素释放激素受体 Gsα

在线阅读 下载PDF 职称材料

Ghrelin:一种新发现的生长激素释放肽 被引量：1

10

作者 李奎 冯杰 许梓荣 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期279-281,共3页

Ghrelin是一种新发现的含有28个氨基酸的生长激素释放肽,为生长激素促分泌素受体(growthhormonesecretagoguereceptor,GHSR)的内源性配体。当Ghrelin与其特异性受体(GHSR)结合后会产生一系列生物学效应。Ghrelin具有刺激垂体前叶释放生... Ghrelin是一种新发现的含有28个氨基酸的生长激素释放肽,为生长激素促分泌素受体(growthhormonesecretagoguereceptor,GHSR)的内源性配体。当Ghrelin与其特异性受体(GHSR)结合后会产生一系列生物学效应。Ghrelin具有刺激垂体前叶释放生长激素、增加食欲、调节能量代谢平衡,以及促进胃酸分泌等生物学功能,其作用机制目前尚不清楚。 展开更多

关键词 生长激素释放肽 受体 生长激素 生长激素释放激素 生长抑素

在线阅读 下载PDF 职称材料

生长激素释放肽(ghrelin)促生长作用和应用前景 被引量：2

11

作者 来景辉 范红结 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1085-1088,共4页

生长激素释放肽(ghrelin)是在大鼠和人胃内发现的,是一种生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的内源性配体。ghrelin与位于垂体、下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能... 生长激素释放肽(ghrelin)是在大鼠和人胃内发现的,是一种生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的内源性配体。ghrelin与位于垂体、下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能和能量代谢等作用。本文对ghrelin的结构、分布、生物学功能的近期研究成果及畜牧业上的应用前景进行综述,以期为相关添加剂的研究和开发提供依据。 展开更多

关键词 生长激素释放肽 生长激素促分泌素受体 生物学功能

在线阅读 下载PDF 职称材料

生长激素释放肽在动物科学中的研究进展 被引量：2

12

作者 陶新 许梓荣 汪以真 《中国兽药杂志》 2002年第12期40-42,共3页

生长激素释放肽(GHRPs)是一类人工合成的促生长激素分泌素(GHS),在动物体内具有促进GH释放、刺激动物食欲、促进动物生长、提高动物生产性能和免疫水平等多方面的功能。其作用机制不同于生长激素释放激素(GHRH)。此外,GHRPs和GHRH还具... 生长激素释放肽(GHRPs)是一类人工合成的促生长激素分泌素(GHS),在动物体内具有促进GH释放、刺激动物食欲、促进动物生长、提高动物生产性能和免疫水平等多方面的功能。其作用机制不同于生长激素释放激素(GHRH)。此外,GHRPs和GHRH还具有协同作用。 展开更多

关键词 生长激素释放肽 GHRPs 结构 活性 作用位点 受体 协同作用 生长激素

在线阅读 下载PDF 职称材料

生长激素释放激素对动物胃发育的调节作用

13

作者 吴秀群 赵叶 姜俊 《饲料研究》 CAS 北大核心 2011年第2期1-3,共3页

生长激素释放激素（Ghrelin）是Kojima等（1999）在鼠和人胃内分泌细胞及下丘脑弓状核中发现的一种含有28个氨基酸残基的多肽,是生长激素促分泌素1a型受体（GHS-R1a）的天然配体,在人和动物的胃肠道内合成,主要由胃黏膜x/A样细胞分泌。

关键词 生长激素释放激素 胃肠道 调节作用 动物 内分泌细胞 发育 氨基酸残基 a型受体

在线阅读 下载PDF 职称材料

Ghrelin——一种新发现的生长激素释放肽

14

作者 李奎 洪作鹏 +1 位作者 冯杰 王科 《饲料博览》 2006年第1期28-30,共3页

Ghrelin是一种新发现的含有28个氨基酸的生长激素释放肽,为生长激素促分泌素受体(Growthhor-monesecretagoguereceptor,GHS-R)的内源性配体。当Ghrelin与其特异性受体(GHS-R)结合后会产生一系列生物学效应。Ghrelin具有刺激垂体前叶释... Ghrelin是一种新发现的含有28个氨基酸的生长激素释放肽,为生长激素促分泌素受体(Growthhor-monesecretagoguereceptor,GHS-R)的内源性配体。当Ghrelin与其特异性受体(GHS-R)结合后会产生一系列生物学效应。Ghrelin具有刺激垂体前叶释放生长激素、增加食欲、调节能量代谢平衡以及促进胃酸分泌等生物学功能,其作用机理目前尚不清楚。 展开更多

关键词 生长激素释放肽 受体 生长激素 生长激素释放激素 生长抑素

在线阅读 下载PDF 职称材料

生长激素相关基因突变与原发闭经的关系 被引量：2

15

作者 刘学飞 杨真荣 +3 位作者 王慧 周波 陈燕 唐艳平 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期472-474,共3页

目的探讨生长激素相关基因突变与原发闭经的关系。方法对130例确诊为原发闭经的患者和30名健康女性个体进行核型分析,并采用单链构象多态性分析(SSCP)等方法,对原发闭经患者的生长激素释放激素受体基因(GHRHR)进行检测。结果有33例原发... 目的探讨生长激素相关基因突变与原发闭经的关系。方法对130例确诊为原发闭经的患者和30名健康女性个体进行核型分析,并采用单链构象多态性分析(SSCP)等方法,对原发闭经患者的生长激素释放激素受体基因(GHRHR)进行检测。结果有33例原发闭经患者出现染色体核型异常,1例出现GHRHR基因点突变,且该突变位点在第7个外显子中。结论GHRHR基因第7个外显子的点突变可能是原发闭经的病因之一。 展开更多

关键词 原发闭经 单链构象多态性分析 生长激素 生长激素释放激素受体

在线阅读 下载PDF 职称材料

山羊生长轴各类激素及其受体基因的研究

16

作者 田璐 张春香 岳文斌 《中国牧业通讯》 2010年第7期35-36,共2页

动物生长发育调控是一个高度复杂而精细的生理过程，受多个生长调控系统的影响，其中，神经内分泌生长轴各因子（激素、受体、结合蛋白等）及其基因对动物的生长发育起着关键作用。正常情况下，下丘脑接受体内外的信息，释放促生长激素... 动物生长发育调控是一个高度复杂而精细的生理过程，受多个生长调控系统的影响，其中，神经内分泌生长轴各因子（激素、受体、结合蛋白等）及其基因对动物的生长发育起着关键作用。正常情况下，下丘脑接受体内外的信息，释放促生长激素释放激素（GHRH）和生长激素（SRIF），调节垂体生长激素（GH）的分泌，GH通过与生长激素结合蛋白（GHBP）结合而运输， 展开更多

关键词 受体基因 生长轴 类激素 生长激素释放激素 生长激素结合蛋白 神经内分泌 山羊 垂体生长激素

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用CRISPR/Cas9技术对五指山猪GHRHR基因的编辑

17

作者 王文涛 张思佳 +9 位作者 何鑫淼 陈诗怡 吴赛辉 张冬杰 陈瑶生 丛佩清 亓美玉 田明 刘娣 何祖勇 《东北农业大学学报》 北大核心 2025年第2期44-52,共9页

生长激素释放激素受体(GHRHR)表达于垂体细胞表面,调节垂体生长激素合成与分泌,对动物生长发育发挥重要调控作用。为深入了解GHRHR对五指山猪生长发育的影响,通过CRISPR-ctRNP体外酶切试验,筛选出切割效率达27.3%的1条gRNA用于构建CRISP... 生长激素释放激素受体(GHRHR)表达于垂体细胞表面,调节垂体生长激素合成与分泌,对动物生长发育发挥重要调控作用。为深入了解GHRHR对五指山猪生长发育的影响,通过CRISPR-ctRNP体外酶切试验,筛选出切割效率达27.3%的1条gRNA用于构建CRISPR/Cas9表达载体。转染五指山猪肾细胞后,经流式分选富集到编辑效率高达100%的细胞群体作为供体细胞,进行体细胞核移植;再将250枚克隆胚胎转移至5头代孕母猪输卵管中,最终1头代孕母猪成功妊娠,分娩3头克隆仔猪均为GHRHR双等位基因编辑个体;编辑均导致GHRHR基因产生移码突变,可导致蛋白翻译提前终止,丧失生物学功能。最终仅有1头GHRHR编辑五指山猪存活,该个体60日龄时,体质量较野生型个体平均体质量下降23.4%。研究结果在五指山猪中实现GHRHR基因高效编辑,为培养微型宠物猪及解析GHRHR的调控功能提供理论依据。 展开更多

关键词 五指山猪 生长激素释放激素受体 基因编辑猪 CRISPR/Cas9

在线阅读 下载PDF 职称材料

GH与EGFR受体后信号交联在GH促进青春期大鼠生长板软骨细胞增殖中的作用 被引量：2

18

作者 潘思年 张成喜 +3 位作者 李燕虹 马华梅 朱顺叶 杜敏联 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期2246-2252,共7页

目的:观察促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)处理后青春期大鼠生长板体外培养的软骨细胞内是否存在生长激素(GH)与表皮生长因子受体(EGFR)之间的信号交联(cross-talk)。方法:3周龄雌性SD大鼠开始注射GnRHa至7周龄;随后分离培养5-8只大鼠... 目的:观察促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)处理后青春期大鼠生长板体外培养的软骨细胞内是否存在生长激素(GH)与表皮生长因子受体(EGFR)之间的信号交联(cross-talk)。方法:3周龄雌性SD大鼠开始注射GnRHa至7周龄;随后分离培养5-8只大鼠胫骨生长板软骨细胞,在GH作用前分别加入JAK2阻断剂AG490(1nmol/L、10nmol/L和100nmol/L)、EGFR酪氨酸激酶阻断剂AG1478(0.1nmol/L、1nmol/L和10nmol/L)和表皮生长因子(EGF)中和抗体(0.1mg/L、1mg/L和10mg/L);采用四氮甲基唑蓝(MTT)以及免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA),观察不同阻断剂对软骨细胞增殖的影响;采用Western blotting检测软骨细胞p-ERK1/2及p-EGFR的表达。结果:GH作用后具有浓度依赖性地促进软骨细胞增殖和增加p-ERK1/2及p-EGFR水平的作用,100μg/L时作用最为明显。AG490及AG1478几乎能完全抑制GH促进软骨细胞增殖和激活ERK1/2及EGFR的作用。而EGF中和抗体仅能部分抑制GH的作用。结论:GH通过激活JAK2而激活其下游的ERK通路,实现其直接促细胞增殖效应。GH亦能通过激活EGFR及其信号转导通路促进细胞增殖效应,表明GH通路和EGF通路间存在相互作用。 展开更多

关键词 生长激素 促性腺激素释放激素 受体 表皮生长因子 骨骺生长板

在线阅读 下载PDF 职称材料

GHRHR-SV1抗体的制备及其蛋白在黑色素瘤细胞中的表达 被引量：2

19

作者 郭晓兰 谭茵 +2 位作者 陈文生 林玉茵 戴建威 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1237-1242,共6页

目的:制备生长激素释放激素受体剪接变异体1(GHRHR-SV1)抗体,并检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞中的表达情况,为后续的肿瘤机制研究奠定基础。方法:设计GHRHR-SV1基因序列,将其插入质粒pET-32a(+)中,构建pET-GHRHR-SV1重组载体,经PCR... 目的:制备生长激素释放激素受体剪接变异体1(GHRHR-SV1)抗体,并检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞中的表达情况,为后续的肿瘤机制研究奠定基础。方法:设计GHRHR-SV1基因序列,将其插入质粒pET-32a(+)中,构建pET-GHRHR-SV1重组载体,经PCR及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,分别加入0、0.5、1.0、1.5和2.0mmol·L^(-1)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG);诱导1、2、4和6h,并在37℃、30℃和25℃不同温度下进行诱导;观察目的蛋白表达的最佳IPTG浓度、时间和温度。亲和层析纯化重组蛋白,将纯化后的蛋白免疫家兔,制备兔多克隆抗体,ELISA法检测该抗体效价,Western blotting法检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞系B16-F10中的表达情况。结果:重组载体pET-GHRHR-SV1构建成功。在IPTG浓度为2.0mmol·L^(-1)时目的蛋白的表达量最高;IPTG诱导蛋白表达2h时,蛋白表达量最大;当温度为25℃时,蛋白的表达量最大。诱导表达的蛋白相对分子质量约为24 000,纯化后纯度为80%,GHRHR-SV1抗体效价为1∶1 600 000,B16-F10细胞中有GHRHR-SV1蛋白表达。结论:成功制备pETGHRHR-SV1重组载体。GHRHR-SV1蛋白在IPTG浓度为2.0mmol·L^(-1)、诱导时间为2h和温度为25℃的条件下表达最佳。成功制备了高效价的GHRHR-SV1抗体。黑色素瘤细胞系中有GHRHR-SV1蛋白表达。 展开更多

关键词 生长激素释放激素受体剪接变异体1 重组载体 重组蛋白 抗体 黑色素瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

Ghrelin及其受体和酰基化酶在羔羊不同组织的表达差异研究

20

作者 赵红琼 王琴 +4 位作者 徐新明 付强 史慧君 侯宇 杨阳 《动物医学进展》 北大核心 2018年第2期49-54,共6页

采用real-time PCR检测生长激素释放肽(Ghrelin)及其受体(GHS-R)和酰基化转移酶(GOAT)在羔羊下丘脑、垂体、瘤胃、皱胃底、皱胃窦、十二指肠、空肠、回肠、心、肝、脾、肾、胰腺、睾丸的mRNA表达水平。结果显示,Ghrelin、GHS-R和GOAT m... 采用real-time PCR检测生长激素释放肽(Ghrelin)及其受体(GHS-R)和酰基化转移酶(GOAT)在羔羊下丘脑、垂体、瘤胃、皱胃底、皱胃窦、十二指肠、空肠、回肠、心、肝、脾、肾、胰腺、睾丸的mRNA表达水平。结果显示,Ghrelin、GHS-R和GOAT mRNA在羔羊各组织中均有表达,其中Ghrelin mRNA主要表达于皱胃底(P<0.01),其次是十二指肠和胰腺(P<0.05);GHS-R mRNA主要表达于垂体(P<0.01),其次是下丘脑(P<0.05);GOAT mRNA在皱胃底和睾丸的表达水平相对较高,均显著高于其他组织(P<0.05)。研究结果表明,Ghrelin系统在反刍动物组织中广泛分布,Ghrelin可能与GHS-R和GOAT共同参与协调羔羊生长调控、摄食等功能的调节作用,为进一步研究反刍动物体内Ghrelin的生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 羔羊 生长激素释放肽 生长激素促分泌素受体 Ghrelin酰基化转移酶 实时荧光定量PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料