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细胞因子调节垂体MtT/S细胞中人生长激素基因启动子的活性
1
作者
龚凤英
邓洁英
+2 位作者
朱惠娟
潘慧
张殿喜
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期146-150,共5页
目的:探讨细胞因子白介素-11(IL-11)、睫状神经营养因子(CNTF)和转化生长因子(TGF-β)对大鼠垂体MtT/S细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其与垂体特异性转录因子Pit-1蛋白的关系。方法:采用荧光素酶报告基因的方法。首先建立...
目的:探讨细胞因子白介素-11(IL-11)、睫状神经营养因子(CNTF)和转化生长因子(TGF-β)对大鼠垂体MtT/S细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其与垂体特异性转录因子Pit-1蛋白的关系。方法:采用荧光素酶报告基因的方法。首先建立含hGH基因启动子(-484～30 bp)和荧光素酶融合基因的稳定转化MtT/S细胞系,然后用细胞因子刺激,检测细胞培养液和细胞裂解液中GH的含量,反映它们对GH分泌和合成的影响;检测MtT/S细胞内荧光素酶的变化,说明细胞因子对hGH基因启动子活性的作用。将Pit-1蛋白表达质粒(pcDNA-pit-1-cDNA)单独转染或与Pit-1反义寡核苷酸(Pit-1OND)共转染于稳定转化的MtT/S细胞中,观察加入细胞因子后荧光素酶的变化,探讨细胞因子的作用与Pit-1蛋白的关系。结果:IL-11(20 nmol/L)、CNTF(10 nmol/L)能刺激大鼠垂体MtT/S细胞中GH的分泌和合成,增强MtT/S细胞中荧光素酶的表达,分别增加到对照组的134%、122%。TGF-β(5 nmol/L)能减少GH的分泌和合成,抑制荧光素酶的表达到对照组的72%。Pit-1蛋白过表达和表达被抑制对细胞因子的调节作用没有影响。结论:IL-11、CNTF和TGF-β通过调节大鼠垂体MtT/S细胞中hGH基因启动子活性影响GH的合成,Pit-1蛋白可能不参与这一调节作用。
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关键词
细胞因子
生长激素基因启动子
MTT/S细胞
Pit-1蛋白
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职称材料
白细胞介素1β促进GH_3细胞中人生长激素基因表达的机制
2
作者
龚凤英
邓洁英
+1 位作者
史轶蘩
张殿喜
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期255-262,共8页
目的研究白细胞介素1β(IL-1β)对大鼠垂体GH3细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其可能的调节机制。方法采用荧光素酶报告基因方法。建立含hGH基因启动子(-484～30bp)和荧光素酶融合基因的稳定转染GH3细胞株,然后加入IL-1β...
目的研究白细胞介素1β(IL-1β)对大鼠垂体GH3细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其可能的调节机制。方法采用荧光素酶报告基因方法。建立含hGH基因启动子(-484～30bp)和荧光素酶融合基因的稳定转染GH3细胞株,然后加入IL-1β或IL-1β与胞内信号转导途径的抑制剂,通过检测细胞培养液和细胞裂解液中GH的含量以及GH3细胞内荧光素酶的变化,反映IL-1β对GH分泌、合成、hGH基因启动子活性的影响及可能的作用机制。结果IL-1β(10～104U/ml)均能刺激大鼠垂体GH3细胞中GH的分泌和合成,102～104U/ml的IL-1β还能剂量依赖性地增加细胞中荧光素酶的表达熏最高达对照组的161%;在胞内信号转导抑制剂中,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂PD98059(40μmol/L)和p38MAPK抑制剂SB203580(5μmol/L)均能完全阻断IL-1β促进GH3细胞中荧光素酶表达的作用,磷脂酰肌醇3激酶(PI3-K)抑制剂LY294002(10μmol/L)能部分抑制IL-1β的促进作用;Pit-1蛋白过表达和表达被抑制对IL-1β的促进作用没有影响;在含不同长度hGH基因启动子序列的质粒中,IL-1β促进GH3细胞中hGH基因启动子活性的关键序列在-196～-132bp之间。结论IL-1β能增强垂体GH3细胞中hGH基因的启动子的活性,此作用可能需要激活细胞内依赖MAPK。
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关键词
白细胞介素1Β
生长激素基因启动子
GH3细胞
荧光素酶
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职称材料
题名
细胞因子调节垂体MtT/S细胞中人生长激素基因启动子的活性
1
作者
龚凤英
邓洁英
朱惠娟
潘慧
张殿喜
机构
中国医学科学院北京协和医院内分泌科卫生部内分泌重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期146-150,共5页
文摘
目的:探讨细胞因子白介素-11(IL-11)、睫状神经营养因子(CNTF)和转化生长因子(TGF-β)对大鼠垂体MtT/S细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其与垂体特异性转录因子Pit-1蛋白的关系。方法:采用荧光素酶报告基因的方法。首先建立含hGH基因启动子(-484～30 bp)和荧光素酶融合基因的稳定转化MtT/S细胞系,然后用细胞因子刺激,检测细胞培养液和细胞裂解液中GH的含量,反映它们对GH分泌和合成的影响;检测MtT/S细胞内荧光素酶的变化,说明细胞因子对hGH基因启动子活性的作用。将Pit-1蛋白表达质粒(pcDNA-pit-1-cDNA)单独转染或与Pit-1反义寡核苷酸(Pit-1OND)共转染于稳定转化的MtT/S细胞中,观察加入细胞因子后荧光素酶的变化,探讨细胞因子的作用与Pit-1蛋白的关系。结果:IL-11(20 nmol/L)、CNTF(10 nmol/L)能刺激大鼠垂体MtT/S细胞中GH的分泌和合成,增强MtT/S细胞中荧光素酶的表达,分别增加到对照组的134%、122%。TGF-β(5 nmol/L)能减少GH的分泌和合成,抑制荧光素酶的表达到对照组的72%。Pit-1蛋白过表达和表达被抑制对细胞因子的调节作用没有影响。结论:IL-11、CNTF和TGF-β通过调节大鼠垂体MtT/S细胞中hGH基因启动子活性影响GH的合成,Pit-1蛋白可能不参与这一调节作用。
关键词
细胞因子
生长激素基因启动子
MTT/S细胞
Pit-1蛋白
Keywords
Cytokine
hGH gene promoter
MTT/S cells
Pit-1 protein
分类号
R335.1 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
白细胞介素1β促进GH_3细胞中人生长激素基因表达的机制
2
作者
龚凤英
邓洁英
史轶蘩
张殿喜
机构
中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内分泌科
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期255-262,共8页
文摘
目的研究白细胞介素1β(IL-1β)对大鼠垂体GH3细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其可能的调节机制。方法采用荧光素酶报告基因方法。建立含hGH基因启动子(-484～30bp)和荧光素酶融合基因的稳定转染GH3细胞株,然后加入IL-1β或IL-1β与胞内信号转导途径的抑制剂,通过检测细胞培养液和细胞裂解液中GH的含量以及GH3细胞内荧光素酶的变化,反映IL-1β对GH分泌、合成、hGH基因启动子活性的影响及可能的作用机制。结果IL-1β(10～104U/ml)均能刺激大鼠垂体GH3细胞中GH的分泌和合成,102～104U/ml的IL-1β还能剂量依赖性地增加细胞中荧光素酶的表达熏最高达对照组的161%;在胞内信号转导抑制剂中,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂PD98059(40μmol/L)和p38MAPK抑制剂SB203580(5μmol/L)均能完全阻断IL-1β促进GH3细胞中荧光素酶表达的作用,磷脂酰肌醇3激酶(PI3-K)抑制剂LY294002(10μmol/L)能部分抑制IL-1β的促进作用;Pit-1蛋白过表达和表达被抑制对IL-1β的促进作用没有影响;在含不同长度hGH基因启动子序列的质粒中,IL-1β促进GH3细胞中hGH基因启动子活性的关键序列在-196～-132bp之间。结论IL-1β能增强垂体GH3细胞中hGH基因的启动子的活性,此作用可能需要激活细胞内依赖MAPK。
关键词
白细胞介素1Β
生长激素基因启动子
GH3细胞
荧光素酶
Keywords
interleukin-1β
human growth hormone promoter
GH_3 cell line
luciferase
分类号
R335.1 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞因子调节垂体MtT/S细胞中人生长激素基因启动子的活性
龚凤英
邓洁英
朱惠娟
潘慧
张殿喜
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
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职称材料
2
白细胞介素1β促进GH_3细胞中人生长激素基因表达的机制
龚凤英
邓洁英
史轶蘩
张殿喜
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
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