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生长激素受体敲低状态下棕榈酸通过线粒体途径加重肝细胞凋亡
被引量：
4
1
作者
王蕴婷
郑晓雅
+3 位作者
陈月
钱文杰
伍询
任伟
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第21期2366-2374,共9页
目的研究生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)敲低后棕榈酸(palmitic acid,PA)增加肝细胞的脂质沉积及其机制。方法构建稳定低表达GHR的永生化肝L02细胞株,用不同浓度PA(0、75、150、300μmol/L)和不同时间(12、24、48 h)处理细...
目的研究生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)敲低后棕榈酸(palmitic acid,PA)增加肝细胞的脂质沉积及其机制。方法构建稳定低表达GHR的永生化肝L02细胞株,用不同浓度PA(0、75、150、300μmol/L)和不同时间(12、24、48 h)处理细胞,检测细胞活力。将实验分为GHR敲低(shRNAGHR)组和空载病毒(Vector)组,分别给予PA干预,油红“O”、BODIPY荧光染色观察细胞内脂质沉积;流式细胞仪检测细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;JC-1检测线粒体膜电位的变化;MitoSox荧光检测线粒体内ROS水平,Western blot检测经典线粒体凋亡通路相关蛋白表达;靶向线粒体抗氧化剂MitoTEMPO预处理细胞,观察PA诱导的ROS水平变化及凋亡情况。结果PA抑制L02细胞存活率并呈浓度依赖性。与对照组相比,150μmol/L PA处理细胞12、24、48 h,GHR敲低组细胞内ROS水平以及线粒体内ROS水平显著升高,细胞凋亡增加。油红“O”、BODIPY荧光染色均证实GHR敲低组细胞在相同PA刺激下更易发生脂质聚集。GHR敲低组细胞线粒体凋亡通路相关蛋白细胞色素c、Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase3、PARP蛋白水平显著高于Vector组。差异均具有统计学意义(P<0.05)。采用靶向线粒体抗氧化剂MitoTEMPO预处理细胞后,敲低组肝L02细胞凋亡有明显改善。结论生长激素受体敲低状态下会加重肝细胞脂质沉积和肝细胞凋亡,PA通过线粒体/ROS途径发挥重要作用。
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关键词
生长激素受体敲低
线粒体
活性氧
细胞凋亡
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职称材料
题名
生长激素受体敲低状态下棕榈酸通过线粒体途径加重肝细胞凋亡
被引量：
4
1
作者
王蕴婷
郑晓雅
陈月
钱文杰
伍询
任伟
机构
重庆医科大学附属第一医院内分泌内科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第21期2366-2374,共9页
文摘
目的研究生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)敲低后棕榈酸(palmitic acid,PA)增加肝细胞的脂质沉积及其机制。方法构建稳定低表达GHR的永生化肝L02细胞株,用不同浓度PA(0、75、150、300μmol/L)和不同时间(12、24、48 h)处理细胞,检测细胞活力。将实验分为GHR敲低(shRNAGHR)组和空载病毒(Vector)组,分别给予PA干预,油红“O”、BODIPY荧光染色观察细胞内脂质沉积;流式细胞仪检测细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;JC-1检测线粒体膜电位的变化;MitoSox荧光检测线粒体内ROS水平,Western blot检测经典线粒体凋亡通路相关蛋白表达;靶向线粒体抗氧化剂MitoTEMPO预处理细胞,观察PA诱导的ROS水平变化及凋亡情况。结果PA抑制L02细胞存活率并呈浓度依赖性。与对照组相比,150μmol/L PA处理细胞12、24、48 h,GHR敲低组细胞内ROS水平以及线粒体内ROS水平显著升高,细胞凋亡增加。油红“O”、BODIPY荧光染色均证实GHR敲低组细胞在相同PA刺激下更易发生脂质聚集。GHR敲低组细胞线粒体凋亡通路相关蛋白细胞色素c、Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase3、PARP蛋白水平显著高于Vector组。差异均具有统计学意义(P<0.05)。采用靶向线粒体抗氧化剂MitoTEMPO预处理细胞后,敲低组肝L02细胞凋亡有明显改善。结论生长激素受体敲低状态下会加重肝细胞脂质沉积和肝细胞凋亡,PA通过线粒体/ROS途径发挥重要作用。
关键词
生长激素受体敲低
线粒体
活性氧
细胞凋亡
Keywords
growth hormone receptor knockdown
mitochondria
reactive oxygen species
apoptosis
分类号
R347.511 [医药卫生—基础医学]
R363.21 [医药卫生—病理学]
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作者
出处
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1
生长激素受体敲低状态下棕榈酸通过线粒体途径加重肝细胞凋亡
王蕴婷
郑晓雅
陈月
钱文杰
伍询
任伟
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
4
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