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贵州半细毛羊促生长激素分泌素受体基因SNPs筛查与变异分析 被引量:1
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作者 张琼娣 宋德荣 +5 位作者 周大荣 彭华 刘若余 吴蕊汝 江兴美 吴萍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期189-193,共5页
通过研究促生长激素分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)基因多态性,为贵州半细毛羊选种选育提供进一步的分子生物学依据。试验选取36只贵州半细毛羊构建DNA池,设计1对引物扩增其GHSR基因第2外显子及第1、2内含子部... 通过研究促生长激素分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)基因多态性,为贵州半细毛羊选种选育提供进一步的分子生物学依据。试验选取36只贵州半细毛羊构建DNA池,设计1对引物扩增其GHSR基因第2外显子及第1、2内含子部分序列并进行双向测序,对SNPs位点等位基因频率进行估算,利用在线生物信息学软件分析SNPs位点对GHSR基因RNA二级结构的影响。结果发现,在贵州半细毛羊GHSR基因中筛选到2个SNPs:T70G和G229A,均为同义突变,SNPs位点导致GHSR基因mRNA二级结构发生变化。GHSR基因多态性可能影响贵州半细毛羊的生长。 展开更多
关键词 贵州半细毛羊 生长激素分泌素受体基因 SNP DNA池
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猪生长激素促分泌素受体基因真核表达载体的构建及鉴定
2
作者 石琳 蔺帅 +2 位作者 周东庆 孙艳君 王志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期43-46,共4页
本试验旨在构建猪生长激素促分泌素受体(pGHS-R)真核表达系统,并瞬时转染人源胚胎肾细胞(HEK293T)观察其表达情况。以猪基因组为模板,通过剪接重叠延伸聚合酶链式反应(SOE-PCR)克隆出pGHS-R的编码区序列,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中... 本试验旨在构建猪生长激素促分泌素受体(pGHS-R)真核表达系统,并瞬时转染人源胚胎肾细胞(HEK293T)观察其表达情况。以猪基因组为模板,通过剪接重叠延伸聚合酶链式反应(SOE-PCR)克隆出pGHS-R的编码区序列,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/pGHS-R,酶切鉴定并测序,加myc标签,瞬时转染HEK293T细胞,用Western blotting鉴定该重组质粒是否能在真核细胞中表达相应的目的蛋白。结果显示,本试验成功扩增出pGHS-R编码序列,酶切和测序结果表明pcDNA3.1(+)-myc/pGHS-R构建正确,Western blotting方法证实转染的该质粒能在HEK293T细胞中正确表达目的蛋白。结果表明,本试验成功构建了pGHS-R真核表达载体,并正确表达蛋白,为进一步研究GHS-R的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 生长激素分泌素受体 真核表达 剪接重叠延伸聚合酶链式反应 人源胚胎肾细胞
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翘嘴鲌生长激素受体1基因内含子1、2中微卫星多态性及与生长性状的关联分析 被引量:3
3
作者 刘士力 李飞 +5 位作者 贾永义 郑建波 迟美丽 程顺 卞玉玲 顾志敏 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期22-27,共6页
本研究检测了120尾同批繁殖、同塘养殖的12月龄翘嘴鲌(Culter alburnus Basilewsky)生长激素受体1(Growth hormone receptor 1,ghr1)基因内含子1、2的8个微卫星位点的基因型,分析了ghr1基因内含子1、2微卫星多态性与生长性能的相关性,... 本研究检测了120尾同批繁殖、同塘养殖的12月龄翘嘴鲌(Culter alburnus Basilewsky)生长激素受体1(Growth hormone receptor 1,ghr1)基因内含子1、2的8个微卫星位点的基因型,分析了ghr1基因内含子1、2微卫星多态性与生长性能的相关性,为进一步研究其生物学功能及分子标记辅助育种奠定基础。结果表明:7个微卫星位点具有多态性,微卫星标记平均等位基因数12.714,平均有效等位基因数5.839,平均期望杂合度0.625,平均观测杂合度0.535,平均多态信息含量0.608;除了ghr1-6和ghr1-7属于低度多态性位点(PIC<0.25),另有5个属于高度多态性位点(PIC>0.5)。关联分析结果显示:ghr1-3位点中257/259型个体的体长和体质量均高于其他基因型,其体质量与245/261和259/259差异不显著(P>0.05),但显著高于另外5种基因型(P<0.05)。翘嘴鲌ghr1-3多态性与生长性状存在关联,可作为翘嘴鲌生长的候选辅助标记,有助于翘嘴鲌遗传资源的评价、鉴定和保护利用等分子生物学研究。 展开更多
关键词 翘嘴鲌 生长激素受体1基因 微卫星 生长性状 性状关联
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胰腺β细胞生长激素受体基因敲除对STZ诱发1型糖尿病小鼠的影响
4
作者 任国君 孙杰 +5 位作者 申风娟 史春红 于涛 姜如娇 吴英杰 孙捷 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期753-756,I0002,共5页
目的:利用胰腺β细胞组织特异性生长激素受体(GHR)基因敲除小鼠结合链脲佐菌素(STZ)诱导1型糖尿病模型,从基因水平研究胰腺β细胞GHR缺失对1型糖尿病的影响。方法:实验小鼠分4组,包括LLc对照组[胰腺β细胞特异敲除GHR小鼠(βGHRKO,LLc)... 目的:利用胰腺β细胞组织特异性生长激素受体(GHR)基因敲除小鼠结合链脲佐菌素(STZ)诱导1型糖尿病模型,从基因水平研究胰腺β细胞GHR缺失对1型糖尿病的影响。方法:实验小鼠分4组,包括LLc对照组[胰腺β细胞特异敲除GHR小鼠(βGHRKO,LLc)、LL对照组[含有GHR等位基因纯合子小鼠(LL)]、LLc STZ组及LL STZ组(LLc小鼠和LL小鼠分别给予STZ注射造模),小鼠餐后血糖≥25mmol·L-1为造模成功。对小鼠进行葡萄糖耐量实验(GTT)、小鼠胰腺组织HE染色和免疫组织化学检测。结果:STZ注射后,LL STZ组和LLc STZ组小鼠血糖出现上升趋势,16d后达到1型糖尿病诊断标准。GTT,LL STZ组和LLc STZ组小鼠血糖值分别较LL对照组和LLc对照组小鼠血糖值明显升高(P<0.05),HE染色,与LL对照组比较,LLc对照组小鼠胰岛形态及结构无明显变化;LL STZ和LLc STZ组小鼠胰岛萎缩,β细胞数量明显减少。免疫组织化学检测,LL STZ组较LL对照组小鼠胰岛素分泌显著减少,LLc STZ组较LLc对照组小鼠胰岛素分泌显著减少。结论:在STZ诱导1型糖尿病条件下,胰腺β细胞GHR基因敲除对1型糖尿病小鼠血糖及β细胞功能无明显影响。 展开更多
关键词 生长激素 生长激素受体 糖尿病 1 胰岛素分泌细胞 基因敲除 疾病模型 动物
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人生长激素释放激素受体剪接变异体1型对人肝癌细胞HepG2增殖的影响 被引量:3
5
作者 林玉茵 陈文生 +3 位作者 郭晓兰 谭茵 贺小松 戴建威 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期474-478,共5页
目的:探讨人生长激素释放激素受体剪接变异体1型(GHRHR SV1)对肝癌细胞系HepG2增殖的影响,阐明GHRHR SV1对人肿瘤细胞的促增殖作用。方法:将GHRHR SV1真核表达载体导入HepG2细胞建立HepG2-SV1细胞系。设计对照组(野生型HepG2)、空载质粒... 目的:探讨人生长激素释放激素受体剪接变异体1型(GHRHR SV1)对肝癌细胞系HepG2增殖的影响,阐明GHRHR SV1对人肿瘤细胞的促增殖作用。方法:将GHRHR SV1真核表达载体导入HepG2细胞建立HepG2-SV1细胞系。设计对照组(野生型HepG2)、空载质粒组(HepG2-pCDNA 3.0细胞系)和干扰组(HepG2-SV1细胞系)。采用PCR和Western blotting法鉴定HepG2-SV1细胞系,CCK-8法检测各组细胞的增殖率,克隆形成实验检测各组细胞的单克隆形成率,细胞划痕实验检测细胞的迁移率。结果:PCR与Western blotting法检测,构建的HepG2-SV1细胞系能稳定表达GHRHR SV1;CCK-8法检测,干扰组HepG2-SV1细胞系的增殖率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05);克隆形成实验,干扰组HepG2-SV1细胞系的单克隆形成率约为空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系的3.5倍(P<0.05);细胞划痕实验,所构建的干扰组HepG2-SV1细胞系的迁移率高于空载质粒组HepG2-pcDNA3.0细胞系(P<0.05)。结论:GHRHR SV1能促进HepG2细胞的增殖。 展开更多
关键词 生长激素释放激素受体剪接变异体1型 HEPG2细胞 细胞增殖 克隆形成率 迁移率
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生长激素受体基因多态性与特发性矮小遗传易感性的关系 被引量:12
6
作者 于意 王伟 +6 位作者 王莹 黄嶶 董治亚 滕月春 倪继红 肖园 王德芬 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期932-936,共5页
目的探讨人生长激素受体(GHR)基因的单核苷酸多态性(SNP)与中国汉族人群特发性矮小(ISS)遗传易感性的关系。方法采用病例对照法,在199例ISS患儿(ISS组)和469名身高正常成人(对照组)中,对GHR基因16个SNP位点进行基因分型和比较,筛查阳性... 目的探讨人生长激素受体(GHR)基因的单核苷酸多态性(SNP)与中国汉族人群特发性矮小(ISS)遗传易感性的关系。方法采用病例对照法,在199例ISS患儿(ISS组)和469名身高正常成人(对照组)中,对GHR基因16个SNP位点进行基因分型和比较,筛查阳性SNP位点(特异基因型频率差异有统计学意义),分析阳性SNP位点基因型与ISS发病风险及血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)等相关临床变量的关系。结果在ISS组和对照组中,发现3个阳性SNP位点rs6182(P=0.027)、rs4410646(P=0.01)和rs10044169(P=0.024)。①rs6182(G/T):在T显性模式下,TT和GT基因型的ISS发病风险降低(OR=0.624,95%CI:0.402~0.969,P=0.021)。②rs4410646(A/C):在C显性模式下AA基因型的ISS发病风险降低(OR=0.674,95%CI:0.475~0.958,P=0.016);该位点的多因素Logistics回归分析显示,以CC基因型为参照,血清IGF-1与基因型AA(OR=1.011,95%CI:1.002~1.020,P=0.018... 展开更多
关键词 特发性矮小 生长激素受体 单核苷酸多态性 胰岛素样生长因子1 遗传易感性
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抗生长激素受体单克隆抗体的功能特点
7
作者 杨艳红 付志玲 +7 位作者 刘禹 兰海楠 张辉 吴旻 马思慧 李雨萌 李雁强 郑鑫 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期25-28,共4页
生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)属于Ⅰ类细胞因子受体,是调节机体后天生长的主要因子,并介导了生长激素(growth hormone,GH)所调节的多种代谢与合成功能。GHR单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)一直是研究这种受体的一种... 生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)属于Ⅰ类细胞因子受体,是调节机体后天生长的主要因子,并介导了生长激素(growth hormone,GH)所调节的多种代谢与合成功能。GHR单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)一直是研究这种受体的一种很好的工具,对1H2、1A9、2C3和mAb263这4种抗GHR mAb进行分析描述可知,1A9可以与受体结合,但是不能促进垂体切除鼠增长;2C3可以促进垂体切除鼠生长,然而这种作用会在GH存在的情况下受到抑制;mAb263作为一种受体激活剂抗体,不仅能与受体结合,同时还能够诱导受体发生与GH刺激相近但是不一致的受体构象变化,起到模拟GH的作用。 展开更多
关键词 生长激素受体 生长激素 单克隆抗体 亚域1
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胰岛素样生长因子结合蛋白-3与甲状腺激素受体α1的相互作用及其对甲状腺激素应答性基因转录的调节 被引量:1
8
作者 裘佳 马晓骊 +2 位作者 王欣 陈虹 黄秉仁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期156-161,222,共7页
目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)与甲状腺激素受体α1(TRα1)之间的相互作用,及其对甲状腺激素应答性基因转录作用的调节。方法采用谷胱甘肽-S-转移酶拉下实验、免疫共沉淀以及荧光共振能量转移实验检测IGFBP-3与TRα1之... 目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)与甲状腺激素受体α1(TRα1)之间的相互作用,及其对甲状腺激素应答性基因转录作用的调节。方法采用谷胱甘肽-S-转移酶拉下实验、免疫共沉淀以及荧光共振能量转移实验检测IGFBP-3与TRα1之间的相互作用;激光共聚焦显微镜观察两种蛋白在细胞中的分布;采用双萤光素酶实验检测过表达IGFBP-3对甲状腺素T3激活的生长激素启动子的影响。结果谷胱甘肽-S-转移酶拉下实验、免疫共沉淀以及荧光共振能量转移实验结果证明IGFBP-3与TRα1在体内和体外都可以相互作用,激光共聚焦显微镜观察IGFBP-3和TRα1可以共定位于HEK-293细胞的细胞核。通过双萤光素酶实验检测到过表达IGFBP-3可以抑制甲状腺激素对生长激素启动子的激活作用(P<0.01)。结论 IGFBP-3通过与TRα1相互作用抑制甲状腺激素应答性基因的转录,为IG-FBP-3在核内发挥胰岛素样生长因子非依赖的作用提供了新的实验依据。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子结合蛋白-3 甲状腺激素受体α1 三碘甲状腺原氨酸 生长激素启动子
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半胱胺对羊毛生长及皮肤中GH受体、IGF-1和IGF-1型受体基因表达的影响 被引量:7
9
作者 贾斌 赵茹茜 +2 位作者 剡根强 雒秋江 陈杰 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期80-84,共5页
罗米丽×中国美利奴 (新疆军垦型) 杂交一代断奶母羔 214只, 随机分成两组, 在日粮中分别添加 3 5 (试验组) 和 0g·kg-1 (对照组) 生长调节剂CT2000 (半胱胺盐酸盐), 实验期为 120d。于试验前和试验结束时称重, 采毛和皮肤样... 罗米丽×中国美利奴 (新疆军垦型) 杂交一代断奶母羔 214只, 随机分成两组, 在日粮中分别添加 3 5 (试验组) 和 0g·kg-1 (对照组) 生长调节剂CT2000 (半胱胺盐酸盐), 实验期为 120d。于试验前和试验结束时称重, 采毛和皮肤样品, 测定母羔生长速度, 羊毛长度、细度、强度、弯曲度和羊毛油汗颜色, 并用反转录多聚酶链式反应 (RT PCR) 方法, 定量分析绵羊皮肤中生长激素受体 (GHR)、胰岛素样生长因子 1 (IGF 1) 和胰岛素样生长因子 1型受体(IGF 1R)mRNA的相对丰度。实验结果显示, 与对照组相比较, 试验组平均日增重提高 12 77% (P<0 01), 羊毛平均日增长提高 24 01% (P<0 01), 羊毛纤维直径平均日增长提高 217 31% (P<0 01), 羊毛纤维强度没有显著的差异(P>0 05), 羊毛油汗颜色和羊毛弯曲度的正常百分率显著提高 (P<0 05); 皮肤中GHRmRNA表达量增加 110 57%(P<0 01), IGF 1、IGF 1RmRNA表达量无明显变化。结果表明, 半胱胺 (CT2000 ) 能够显著提高羔羊生长性能, 促进羊毛生长, 其机制可能与提高皮肤中GHR水平有关。 展开更多
关键词 半胱胺 绵羊 羊毛 生长激素受体 胰岛素样生长因子1 胰岛素样生长因子1受体
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生长激素释放肽(ghrelin)促生长作用和应用前景 被引量:2
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作者 来景辉 范红结 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1085-1088,共4页
生长激素释放肽(ghrelin)是在大鼠和人胃内发现的,是一种生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的内源性配体。ghrelin与位于垂体、下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能... 生长激素释放肽(ghrelin)是在大鼠和人胃内发现的,是一种生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的内源性配体。ghrelin与位于垂体、下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能和能量代谢等作用。本文对ghrelin的结构、分布、生物学功能的近期研究成果及畜牧业上的应用前景进行综述,以期为相关添加剂的研究和开发提供依据。 展开更多
关键词 生长激素释放肽 生长激素分泌素受体 生物学功能
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内毒素、TNF-α及IL-6在诱导生长激素不敏感中的作用 被引量:5
11
作者 王平 李宁 黎介寿 《肠外与肠内营养》 CAS 2001年第4期215-220,共6页
目的 :在受体和受体后水平探讨内毒素 (LPS)、TNF α及IL 6在诱导生长激素不敏感中的作用。 方法 :采用雄性SD大鼠 ,分别静注LPS、TNF α及IL 6 ,不同时相处死大鼠。应用RT PCR法测定肝组织IGF 1、GHR和SOCS 3mRNA的表达 ;应用放射免... 目的 :在受体和受体后水平探讨内毒素 (LPS)、TNF α及IL 6在诱导生长激素不敏感中的作用。 方法 :采用雄性SD大鼠 ,分别静注LPS、TNF α及IL 6 ,不同时相处死大鼠。应用RT PCR法测定肝组织IGF 1、GHR和SOCS 3mRNA的表达 ;应用放射免疫法测定血清GH水平 ;应用酶联免疫吸附法测定血清TNF α和IL 6水平。 结果 :静注LPS后 ,各时间点血清GH水平与对照组无明显差异 ,血清TNF α和IL 6迅速升高 ,但TNF α很快即恢复至正常水平。肝组织IGF 1和GHRmRNA的表达分别在注射LPS后 12h和 8h下调最多。正常大鼠肝组织SOCS 3mRNA微弱表达 ,但在注射LPS后立即上调 ,在 1h时即上升了 7.84倍 ,线性回归分析显示IL 6水平与SOCS 3mRNA的表达呈高度正相关。静注TNF α后 ,肝组织SOCS 3mRNA的表达无明显变化 ,但可明显下调GHRmRNA的表达。静注IL 6后 ,肝组织GHRmRNA的表达无明显变化 ,但SOCS 3mRNA的表达却明显上调。 结论 :静注LPS可以诱导生长激素的不敏感 ,在受体水平与GHRmRNA的表达下调有关 ,在受体后水平与SOCS 3mRNA的表达上调有关。体内LPS的生物活性主要是由TNF α和IL 6介导的 ,TNF α和IL 6分别在受体和受体后水平发挥作用 ,但TNF α的作用具有滞后性。 展开更多
关键词 生长激素不敏感 生长激素受体 胰岛素样生长因子1 细胞因子信号抑制子 基因表达 内毒素 TNF-Α IL-6 腹腔感染
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亮氨酸改善盲肠结扎穿孔小鼠生长激素抵抗
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作者 高学金 王新颖 +4 位作者 田锋 万晓 雷秋成 李宁 黎介寿 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2015年第2期112-115,共4页
目的:探讨盲肠结扎穿孔小鼠生长激素-胰岛素样生长因子-1(GH-IGF-1)轴的变化及亮氨酸的干预作用。方法:将40只小鼠随机分为四组,每组10只。即正常对照组(Control组)、假手术组(Sham组)、盲肠结扎穿孔等渗盐水组(CLP-N组)和盲肠结扎穿孔... 目的:探讨盲肠结扎穿孔小鼠生长激素-胰岛素样生长因子-1(GH-IGF-1)轴的变化及亮氨酸的干预作用。方法:将40只小鼠随机分为四组,每组10只。即正常对照组(Control组)、假手术组(Sham组)、盲肠结扎穿孔等渗盐水组(CLP-N组)和盲肠结扎穿孔亮氨酸组(CLP-L组)。采用盲肠结扎穿孔法制作腹腔感染模型后,CLP-N组给予等渗盐水灌胃,CLP-L组给予亮氨酸灌胃,连续7 d。第8天腹腔麻醉后取门静脉血,检测小鼠血清生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平。同时测定小鼠肝组织生长激素受体(GHR)、IGF-1、胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)和胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)mRNA表达量。结果:与Control组比,CLP-N组小鼠血清GH水平明显升高(P<0.01)、而血清IGF-1水平急剧下降(P<0.01),并且伴随着肝组织GHR和IGFBP-3 mRNA水平显著降低(P<0.01)以及IGFBP-1mRNA水平明显升高(P<0.01);而CLP-L组小鼠血清GH水平明显升高(P<0.01)、血清IGF-1水平轻微下降(P<0.05)以及肝组织GHR、IGFBP-1和IGFBP-3 mRNA水平明显升高(P<0.01)。结论:盲肠结扎穿孔小鼠存在获得性GH抵抗,亮氨酸可改善此现象。 展开更多
关键词 亮氨酸 生长激素 胰岛素样生长因子-1 生长激素受体
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类胰岛素生长因子-1受体基因突变与人长寿有关
13
作者 李潇 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1033-1033,共1页
关键词 类胰岛素生长因子 基因突变 生长因子-1 长寿 受体 生长激素 IGF-1 犹太人
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慢病毒介导的GHSR1a shRNA对结直肠癌细胞生长的影响 被引量:3
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作者 刘岸 黄成钢 徐佳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1227-1234,共8页
目的:构建生长激素促泌素受体1a(growth hormone secretagogue receptor 1a,GHSR1a)基因短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,感染人结直肠癌细胞系SW480,观察沉默GHSR1a基因对SW480细胞生长的影响,并探讨其作用机制。方... 目的:构建生长激素促泌素受体1a(growth hormone secretagogue receptor 1a,GHSR1a)基因短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,感染人结直肠癌细胞系SW480,观察沉默GHSR1a基因对SW480细胞生长的影响,并探讨其作用机制。方法:构建特异性靶向GHSR1a基因的shRNA慢病毒表达载体和阴性对照序列慢病毒载体;建立稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞、阴性对照细胞(NC)及空白对照细胞(BC),RTPCR检测GHSR1a的mRNA在细胞中的表达;通过Western blot技术检测细胞中GHSR1a、ghrelin、PTEN、p-AKT及p53蛋白的水平;CCK-8法测定GHSR1a shRNA对SW480细胞活力的影响;建立裸鼠结直肠癌皮下移植瘤模型,实验结束后处死裸鼠并测量各组裸鼠肿瘤重量;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和PTEN的阳性表达。结果:在体外实验中,GHSR1a在人结直肠癌细胞株Caco-2及SW480中的表达明显高于人正常结肠上皮细胞株NCM460的表达;成功建立了稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞;GHSR1a shRNA能明显抑制SW480细胞GHSR1a mRNA及蛋白的表达;沉默GHSR1a基因后SW480细胞活力明显减弱;与NC组相比较,GHSR1a shRNA组细胞中PTEN mRNA及蛋白水平上调,AKT磷酸化被抑制,p53的表达明显增加;在体内实验中,与NC组相比较,GHSR1a shRNA组裸鼠结直肠癌皮下移植瘤重量明显减轻,同时Ki-67表达下调,PTEN表达上调。结论:慢病毒介导的GHSR1a shRNA对体内、外人结肠癌细胞的生长有明显抑制作用,该作用可能通过上调PTEN及其下游PI3K/AKT通路实现。 展开更多
关键词 结直肠癌 GHRELIN 生长激素促泌素受体1a PTEN
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ghrelin-GHSR-1a对高糖环境下视网膜血管内皮细胞的保护作用 被引量:1
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作者 李蓉 姚国敏 +2 位作者 周凌霄 张敏 闫瑾 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第3期205-209,共5页
目的观察ghrelin及其受体生长激素分泌素受体1a(GHSR-1a)在高糖环境下对视网膜血管内皮细胞的保护作用。方法将体外培养的人视网膜血管内皮细胞(HRMECs)分为对照组和高浓度葡萄糖组。对照组细胞在含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖的M199培... 目的观察ghrelin及其受体生长激素分泌素受体1a(GHSR-1a)在高糖环境下对视网膜血管内皮细胞的保护作用。方法将体外培养的人视网膜血管内皮细胞(HRMECs)分为对照组和高浓度葡萄糖组。对照组细胞在含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖的M199培养基中培养48 h,高浓度葡萄糖组细胞在含30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖的M199培养基中培养48 h,采用免疫荧光染色法检测两组细胞中GHSR-1a的表达。然后另取HRMECs随机分为5组:正常对照(NC)组、高糖(HG)组、HG+ghrelin组、HG+ghrelin+siGHSR-1a组和HG+ghrelin+NC-siGHSR-1a组,孵育48 h。NC组处理同对照组,HG组处理同高浓度葡萄糖组,HG+ghrelin组细胞在含30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖、10.0 nmol·L^(-1) ghrelin的M199培养基中培养,HG+ghrelin+siGHSR-1a组细胞先转染GHSR-1a-特异性siRNA,24 h后在含30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖和10.0 nmol·L^(-1) ghrelin的M199培养基中培养,HG+ghrelin+NC-siGHSR-1a组细胞先转染非特异性序列,24 h后在含30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖和10.0 nmol·L^(-1) ghrelin的M199培养基中培养。分别采用CCK-8和Annexin-V/FITC-PI凋亡检测试剂盒检测各组HRMECs细胞活力和细胞凋亡情况。Western blot检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果高浓度葡萄糖组的GHSR-1a表达低于对照组(P<0.05)。NC组、HG组、HG+ghrelin组、HG+ghrelin+siGHSR-1a组和HG+ghrelin+NC-siGHSR-1a组的细胞活力分别为1.00、69.87%±0.68%、92.31%±3.62%、75.98%±4.67%和90.87%±1.95%,总体比较差异有统计学意义(P<0.001);两两比较显示,除HG+ghrelin组与HG+ghrelin+NC-siGHSR-1a组的细胞活力差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组细胞活力比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。NC组、HG组、HG+ghrelin组、HG+ghrelin+siGHSR-1a组和HG+ghrelin+NC-siGHSR-1a组的细胞凋亡率分别为5.76%±0.36%、20.53%±0.38%、10.84%±0.52%、14.93%±0.18%和11.03%±0.62%,总体比较差异有统计学意义(F=468.88,P<0.001);两两比较显示,除HG+ghrelin组与HG+ghrelin+NC-siGHSR-1a组细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组细胞凋亡率比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。NC组、HG组、HG+ghrelin组、HG+ghrelin+siGHSR-1a组和HG+ghrelin+NC-siGHSR-1a组细胞的Bax蛋白和Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.17±0.03和0.64±0.05,0.75±0.04和0.14±0.02,0.38±0.04和0.49±0.08,0.56±0.04和0.33±0.07,0.40±0.06和0.46±0.09,总体比较差异均有统计学意义(均为P<0.001);两两比较显示,除HG+ghrelin组与HG+ghrelin+NC-siGHSR-1a组Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达差异均无统计学意义(均为P>0.05)外,其余各组Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论ghrelin-GHSR-1a系统对高糖环境下的HRMECs功能具有保护作用,并抑制高糖诱导的HRMECs凋亡。 展开更多
关键词 GHRELIN 生长激素分泌素受体1a 糖尿病视网膜病变 高糖 视网膜血管内皮细胞
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绵羊皮肤中GHR、IGF-1和IGF-1R基因表达的发育性变化及品种特点 被引量:19
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作者 贾斌 席继峰 +3 位作者 张苏云 赵宗胜 赵茹茜 陈杰 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1078-1082,共5页
采用相对定量反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,以18S rRNA作内标,研究了罗米丽(Romilly Hillys)×中国美利奴(新疆军垦型)杂交一代优质细毛羊和哈萨克粗毛羊皮肤中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰... 采用相对定量反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,以18S rRNA作内标,研究了罗米丽(Romilly Hillys)×中国美利奴(新疆军垦型)杂交一代优质细毛羊和哈萨克粗毛羊皮肤中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)mRNA发育性变化并进行了品种间比较。分别于30、60、90、135、180和255日龄称重、采毛样,并于30、90、135和255日龄采皮样。结果表明:粗毛羊和细毛羊体重、羊毛生长的发育模式没有明显的差异,30-135日龄体重迅速增加,135~255日龄增重十分缓慢;30-135日龄羊毛日增长逐渐增加,135-180日龄羊毛生长十分缓慢,而180-255日龄又上升到较高水平。粗毛羊皮肤中GHRmRNA在30~90曰龄显著增加(P〈0.05),90日龄达到高峰,此后显著下降(P〈0.05);细毛羊在135日龄时GHR mRNA极显著地升高(P〈0.01),此后又极显著地下降。粗毛羊皮肤中IGF-1、IGF-1R mRNA30—90日龄上升,90日龄之后极显著下降(P〈0.01):细毛羊皮肤中IGF—1、IGF-1R mRNA出生时较高,然后逐渐下降。品种之间比较,细毛羊GHR mRNA出现高峰晚于粗毛羊,135日龄高峰时显著地高于粗毛羊;粗毛羊IGF—1、IGF-1RmRNA在90日龄出现高峰,并极显著或显著地高于细毛羊;粗毛羊90日龄前GHR、IGF-1和IGF-1RmRNA高于细毛羊,之后低于细毛羊。结果提示:绵羊皮肤中GHR,IGF-1和IGF-1R基因表达有特定的发育模式,并存在品种差异。 展开更多
关键词 绵羊 皮肤 生长激素受体(GHR) 胰岛素样生长因子1(IGF-1) 胰岛素样生长因子1受体(JGF-1R)
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盐度调控对花鲈(Lateolabrax maculatus)生长相关基因表达的影响 被引量:4
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作者 张沛 迟美丽 +6 位作者 温海深 钱焜 倪蒙 张亚晨 黄政举 宋志飞 柴森浩 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期446-453,共8页
生长激素受体(GHR)作为GH/IGF轴的中心环节,在内分泌调控中发挥重要作用。本实验采用c DNA末端快速扩增法(RACE)技术克隆出花鲈GHR1和GHR2的c DNA全长序列。急性低盐度调控实验设为海水组、半海水组和淡水组。测定了急性低盐度调控24、4... 生长激素受体(GHR)作为GH/IGF轴的中心环节,在内分泌调控中发挥重要作用。本实验采用c DNA末端快速扩增法(RACE)技术克隆出花鲈GHR1和GHR2的c DNA全长序列。急性低盐度调控实验设为海水组、半海水组和淡水组。测定了急性低盐度调控24、48、96、144、192h后,花鲈肝脏中GHRs、IGF-1及垂体GH表达情况。结果表明,GHR1 c DNA全长序列2436bp,编码637个氨基酸;GHR2 c DNA全长序列2940bp,编码582个氨基酸。GHR1与GHR2由信号肽、胞外区、跨膜区、胞内区组成,且结构存在差异。脑、肾、鳃中GHR1表达明显高于GHR2;而在肌肉、垂体、肝脏、盲肠、胸腺、心脏中,GHR2表达明显高于GHR1。24h时,各组GHR1表达不变,GHR2、GH、IGF-1显著下降。之后,相对于海水组,淡水组和半海水组GHRs和IGF-1表达升高,而GH下降,GH与GHR负相关。据结果推测,花鲈GHR2可能为SL受体,GH/IGF轴参与低渗调控可能是通过增加GHRs,进而激活下游IGF-1表达而实现。 展开更多
关键词 花鲈 盐度 生长激素受体 生长激素 胰岛素样生长因子1
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不同断奶日龄对仔猪脾脏生长相关基因表达的影响 被引量:7
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作者 杨晶晶 李源 +2 位作者 李留安 金天明 焦小丽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第2期383-388,共6页
为研究不同断奶日龄对仔猪脾脏中生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)、胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)和胰岛素样生长因子-1受体(insulin like growth factor-1receptor,IGF-1R)基因表达的影响,试验... 为研究不同断奶日龄对仔猪脾脏中生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)、胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)和胰岛素样生长因子-1受体(insulin like growth factor-1receptor,IGF-1R)基因表达的影响,试验选取体重相近、健康的杜×长×大仔猪24头,随机分为4组(14、21、28和35日龄断奶组),每个试验组6个重复,每个重复1头仔猪,至42日龄时全部宰杀取样,用RT-PCR方法检测脾脏中上述基因的相对表达水平。结果表明,14和21日龄断奶组仔猪脾脏GHR mRNA的相对表达量显著高于35日龄断奶组(P<0.05);不同断奶日龄组仔猪脾脏中的IGF-1mRNA的相对表达量均无显著性变化(P>0.05);35日龄断奶组仔猪脾脏中IGF-1R mRNA的相对表达量显著高于28日龄断奶组(P<0.05)。结果提示,不同断奶日龄对仔猪脾脏相关生长基因表达影响的模式不同;不同断奶日龄脾脏IGF-1R mRNA的表达可能受脾脏自身局部IGF-1的调控。 展开更多
关键词 断奶日龄 仔猪 脾脏 基因表达 生长激素受体 胰岛素样生长因子-1 胰岛素样生长因子-1受体
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Ghrelin对大鼠消化间期胃肠肌电活动的影响及其受体在消化道的分布特征 被引量:2
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作者 王燕 董蕾 +3 位作者 邹百仓 史海涛 姜炅 宋亚华 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期186-190,共5页
目的探讨ghrelin对大鼠消化间期复合肌电活动(IMC)的影响及其机制。方法采用免疫组织化学和图像分析方法观察ghrelin受体(生长激素促分泌素受体,GHS-R)在大鼠消化道的分布特征;采用多导生理记录仪监测大鼠消化间期IMC,观察静脉给予ghre... 目的探讨ghrelin对大鼠消化间期复合肌电活动(IMC)的影响及其机制。方法采用免疫组织化学和图像分析方法观察ghrelin受体(生长激素促分泌素受体,GHS-R)在大鼠消化道的分布特征;采用多导生理记录仪监测大鼠消化间期IMC,观察静脉给予ghrelin对胃肠IMC的影响;采用放射免疫法测定静脉给予ghrelin前后,IMC不同时相的血浆胃动素浓度。结果①GHS-R在胃肠道的肠肌丛和黏膜下丛有表达,胃腺体均有GHS-R免疫强阳性广泛表达,在肠腺体的阳性表达较少。②静脉给予ghrelin促进胃肠IMC,IMC周期缩短,Ⅲ相时程缩短,Ⅲ相占IMC周期百分比无显著性改变;静脉注射ghrelin后,血浆胃动素周期性波动规律不受影响,各相应时相胃动素浓度与ghrelin作用前比较无显著性差异。结论 GHS-R主要分布于大鼠消化道的肠肌丛和黏膜下丛,在胃腺体有免疫强阳性表达,在小肠腺有少量阳性表达。Ghrelin可促进胃肠运动,此作用与胃动素没有明显关系。 展开更多
关键词 GHRELIN 生长激素分泌素受体 胃肠运动 胃动素 消化间期复合肌电活动
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GHRHR-SV1抗体的制备及其蛋白在黑色素瘤细胞中的表达 被引量:2
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作者 郭晓兰 谭茵 +2 位作者 陈文生 林玉茵 戴建威 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1237-1242,共6页
目的:制备生长激素释放激素受体剪接变异体1(GHRHR-SV1)抗体,并检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞中的表达情况,为后续的肿瘤机制研究奠定基础。方法:设计GHRHR-SV1基因序列,将其插入质粒pET-32a(+)中,构建pET-GHRHR-SV1重组载体,经PCR... 目的:制备生长激素释放激素受体剪接变异体1(GHRHR-SV1)抗体,并检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞中的表达情况,为后续的肿瘤机制研究奠定基础。方法:设计GHRHR-SV1基因序列,将其插入质粒pET-32a(+)中,构建pET-GHRHR-SV1重组载体,经PCR及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,分别加入0、0.5、1.0、1.5和2.0mmol·L^(-1)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG);诱导1、2、4和6h,并在37℃、30℃和25℃不同温度下进行诱导;观察目的蛋白表达的最佳IPTG浓度、时间和温度。亲和层析纯化重组蛋白,将纯化后的蛋白免疫家兔,制备兔多克隆抗体,ELISA法检测该抗体效价,Western blotting法检测GHRHR-SV1蛋白在黑色素瘤细胞系B16-F10中的表达情况。结果:重组载体pET-GHRHR-SV1构建成功。在IPTG浓度为2.0mmol·L^(-1)时目的蛋白的表达量最高;IPTG诱导蛋白表达2h时,蛋白表达量最大;当温度为25℃时,蛋白的表达量最大。诱导表达的蛋白相对分子质量约为24 000,纯化后纯度为80%,GHRHR-SV1抗体效价为1∶1 600 000,B16-F10细胞中有GHRHR-SV1蛋白表达。结论:成功制备pETGHRHR-SV1重组载体。GHRHR-SV1蛋白在IPTG浓度为2.0mmol·L^(-1)、诱导时间为2h和温度为25℃的条件下表达最佳。成功制备了高效价的GHRHR-SV1抗体。黑色素瘤细胞系中有GHRHR-SV1蛋白表达。 展开更多
关键词 生长激素释放激素受体剪接变异体1 重组载体 重组蛋白 抗体 黑色素瘤
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