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猪生长激素促分泌素受体基因真核表达载体的构建及鉴定
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作者 石琳 蔺帅 +2 位作者 周东庆 孙艳君 王志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期43-46,共4页
本试验旨在构建猪生长激素促分泌素受体(pGHS-R)真核表达系统,并瞬时转染人源胚胎肾细胞(HEK293T)观察其表达情况。以猪基因组为模板,通过剪接重叠延伸聚合酶链式反应(SOE-PCR)克隆出pGHS-R的编码区序列,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中... 本试验旨在构建猪生长激素促分泌素受体(pGHS-R)真核表达系统,并瞬时转染人源胚胎肾细胞(HEK293T)观察其表达情况。以猪基因组为模板,通过剪接重叠延伸聚合酶链式反应(SOE-PCR)克隆出pGHS-R的编码区序列,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/pGHS-R,酶切鉴定并测序,加myc标签,瞬时转染HEK293T细胞,用Western blotting鉴定该重组质粒是否能在真核细胞中表达相应的目的蛋白。结果显示,本试验成功扩增出pGHS-R编码序列,酶切和测序结果表明pcDNA3.1(+)-myc/pGHS-R构建正确,Western blotting方法证实转染的该质粒能在HEK293T细胞中正确表达目的蛋白。结果表明,本试验成功构建了pGHS-R真核表达载体,并正确表达蛋白,为进一步研究GHS-R的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 生长激素促分泌素受体 真核表达 剪接重叠延伸聚合酶链式反应 人源胚胎肾细胞
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贵州半细毛羊促生长激素分泌素受体基因SNPs筛查与变异分析 被引量:1
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作者 张琼娣 宋德荣 +5 位作者 周大荣 彭华 刘若余 吴蕊汝 江兴美 吴萍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期189-193,共5页
通过研究促生长激素分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)基因多态性,为贵州半细毛羊选种选育提供进一步的分子生物学依据。试验选取36只贵州半细毛羊构建DNA池,设计1对引物扩增其GHSR基因第2外显子及第1、2内含子部... 通过研究促生长激素分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)基因多态性,为贵州半细毛羊选种选育提供进一步的分子生物学依据。试验选取36只贵州半细毛羊构建DNA池,设计1对引物扩增其GHSR基因第2外显子及第1、2内含子部分序列并进行双向测序,对SNPs位点等位基因频率进行估算,利用在线生物信息学软件分析SNPs位点对GHSR基因RNA二级结构的影响。结果发现,在贵州半细毛羊GHSR基因中筛选到2个SNPs:T70G和G229A,均为同义突变,SNPs位点导致GHSR基因mRNA二级结构发生变化。GHSR基因多态性可能影响贵州半细毛羊的生长。 展开更多
关键词 贵州半细毛羊 生长激素分泌素受体基因 SNP DNA池
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9种WADA禁用生长激素释放肽和生长激素促分泌素的HPLC-MS/MS检测及尿中稳定性研究 被引量:3
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作者 申利 杨辛兰 +4 位作者 张力思 河春姬 周鑫淼 徐友宣 闫宽 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期420-426,共7页
目的:选取世界反兴奋剂机构(WADA)禁用的7种生长激素释放肽(GHRP-1,GHRP-2,GHRP-4,GHRP-5,GHRP-6,Hexarelin和Alexamorelin)和2种生长激素促分泌素(Anamorelin和Ipamorelin)为研究对象,建立人尿中的HPLC-MS/MS检测方法,进行稳定性实验... 目的:选取世界反兴奋剂机构(WADA)禁用的7种生长激素释放肽(GHRP-1,GHRP-2,GHRP-4,GHRP-5,GHRP-6,Hexarelin和Alexamorelin)和2种生长激素促分泌素(Anamorelin和Ipamorelin)为研究对象,建立人尿中的HPLC-MS/MS检测方法,进行稳定性实验。方法:使用Oasis?WCX固相提取小柱(1cc,30mg)对尿样进行化学前处理,尿样加入内标后离心,取1m L加入小柱,依次用5%NH4OH和20%CH3CN清洗后,用含2%甲酸的水/乙腈(1/3)洗脱液洗脱,35℃氮气流下吹干,复溶后进样于LC-MS/MS。使用1290/6470液相色谱质谱仪和Zorbax 300SB-C18色谱柱进行定性分析,流动相采用含0.2%甲酸的水/乙腈体系。结果:检测限根据不同物质分布在0.01~0.5 ng/m L(S/N>3)。回收率分布在40%~76%之间,日内精密度和日间精密度均小于15%,尿中基质无明显干扰。室温,冷藏条件储存和反复冻融对Anamorelin、GHRP-2、GHRP-4和GHRP-5有明显影响。结论:建立了尿中9种生长激素释放肽和生长激素促分泌素的HPLC-MS/MS检测方法,方法简单,特异性、灵敏度均可满足WADA实验室国际标准和技术文件要求。现已应用于我实验室的常规检测。尿样在传送、检测及实验室长期保存过程中应尽量避免反复冻融。 展开更多
关键词 禁用物质 生长激素释放肽 生长激素分泌素 固相提取 反复冻融
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功能性腹泻脾虚证模型大鼠结肠生长激素促释放激素受体表达的变化 被引量:6
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作者 邱娟娟 唐旭东 +4 位作者 朱彤 万嘉嘉 邱阳 王凤云 郭慧淑 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期171-174,I0004,共5页
目的:观察功能性腹泻脾虚证模型大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体(GHSR)表达的变化,探讨发病机制。方法:高乳糖饲料喂养及小平台站立制备功能性腹泻脾虚证大鼠模型,观察大鼠的一般状态变化及粪便情况。免疫组织化学法,蛋白质印迹(Wes... 目的:观察功能性腹泻脾虚证模型大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体(GHSR)表达的变化,探讨发病机制。方法:高乳糖饲料喂养及小平台站立制备功能性腹泻脾虚证大鼠模型,观察大鼠的一般状态变化及粪便情况。免疫组织化学法,蛋白质印迹(Western blotting)和荧光定量PCR(Real-time PCR)检测大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体的表达情况。结果:功能性腹泻脾虚的模型大鼠出现精神乏力、消瘦及便溏等现象;免疫组织化学结果显示模型组生长激素促释放激素受体的蛋白表达较正常组表达降低;蛋白质印迹结果显示模型组生长激素促释放激素受体的蛋白表达较正常组表达有差异且有统计学意义(P<0.01);荧光定量PCR结果显示模型组生长激素促释放激素受体mRNA的表达较正常组表达有差异且有统计学意义(P<0.01)。结论:成功构建功能性腹泻脾虚证大鼠模型。功能性腹泻脾虚证大鼠结肠组织生长激素促释放激素受体表达下降。推断生长激素促释放激素受体可能与功能性腹泻脾虚证有相关性。 展开更多
关键词 功能性腹泻脾虚证 大鼠 结肠 生长激素释放激素受体
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血清促生长激素释放激素受体配体与多囊卵巢综合征的相关性分析 被引量:3
5
作者 徐琳 陈子江 +3 位作者 游力 祁秀娟 王来城 石玉华 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期584-587,共4页
目的:探讨血清促生长激素释放激素受体配体(Ghrelin)水平在多囊卵巢综合征(PCOS)中的意义。方法:选择我院PCOS患者48例作为研究对象(PCOS组),同期选择非PCOS患者40例作为对照(对照组),根据体重指数(IBM)将PCOS组、对照组患者分别分为肥... 目的:探讨血清促生长激素释放激素受体配体(Ghrelin)水平在多囊卵巢综合征(PCOS)中的意义。方法:选择我院PCOS患者48例作为研究对象(PCOS组),同期选择非PCOS患者40例作为对照(对照组),根据体重指数(IBM)将PCOS组、对照组患者分别分为肥胖与非肥胖,根据稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)将PCOS组及全部患者分为胰岛素抵抗(IR)与非IR。测定血清Ghrelin水平及内分泌代谢指标。结果:血清Ghrelin水平PCOS组低于对照组(P<0.05);肥胖组低于非肥胖组(P<0.05);非肥胖组低于非肥胖对照组(P<0.05);IR组低于非IR组(P<0.05)。血清Ghrelin水平与BMI、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR呈负相关(P<0.01,P<0.05,P<0.05),与胰岛素敏感指数(ISI)呈正相关(P<0.O5)。结论:PCOS患者存在血清低Ghrelin水平,Ghrelin水平与BMI、IR程度呈负相关。Ghrelin可能与PCOS的肥胖发生有相关性。血清Ghrelin检测可能作为预测PCOS患者IR的一个指标。 展开更多
关键词 生长激素释放激素受体配体 多囊卵巢综合征 肥胖 胰岛素抵抗
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建鲤生长激素促泌素受体2(GHSR2s)基因序列、转录变体和GHSRs表达分析
6
作者 李红霞 李建林 +5 位作者 唐永凯 俞菊华 阮瑞霞 魏可鹏 夏正龙 董在杰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期6-14,共9页
应用RT-PCR及PCR分离到鲤鱼2个jlGHSR2s基因,jlGHSR2a和2b,分别编码366,367个氨基酸,相似性高达98%,和金鱼、斑马鱼GHSR2的相似性高达95%。jlGHSR2s基因的内含子位于起始密码子793 bp后,2a和2b内含子的长度和序列均存在明显差异。试验... 应用RT-PCR及PCR分离到鲤鱼2个jlGHSR2s基因,jlGHSR2a和2b,分别编码366,367个氨基酸,相似性高达98%,和金鱼、斑马鱼GHSR2的相似性高达95%。jlGHSR2s基因的内含子位于起始密码子793 bp后,2a和2b内含子的长度和序列均存在明显差异。试验首次发现了jlGHSR2a的转录变体(Variant)jlGHSR2a',由选择性剪切靠近内含子的57 bp外显子1和保留靠近外显子2的28 bp内含子构成,编码350个氨基酸,缺失最后2个跨膜区,剪切序列两端碱基为CT-AC。荧光定量RT-PCR结果表明,jlGHSRs在脑和精巢表达量最高,1s在检测的组织均有表达,但2s在其他组织表达量很少。jlGHSRs的转录变体1s'和2a'的表达量与1s和2s有一定的正相关性,但1s/1s'在各组织不一致,比值最高出现在肝脏,其次是肌肉、肠和脑,精巢和卵巢最低。生长对脑中jlGHS-R1s的表达量没有显著影响,但生长慢的个体肝和肠中jlGHSR1s的表达量比生长快的高,1s/1s'也有明显升高;肌肉中则相反,1s/1s'在雄鱼肌肉中减小明显。饥饿使雌鱼脑、雌鱼前肠和雌雄鱼后肠jlGHSR1s的表达量显著降低,对其余组织中的表达则不显著。生长快慢或饥饿对脑中jlGHSR2s的表达量均没有显著影响。结果表明,jlGHSR1s的表达量与生长有明显的相关性。 展开更多
关键词 建鲤 生长激素泌素受体 转录变体 表达
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生长激素释放肽(ghrelin)促生长作用和应用前景 被引量:2
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作者 来景辉 范红结 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1085-1088,共4页
生长激素释放肽(ghrelin)是在大鼠和人胃内发现的,是一种生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的内源性配体。ghrelin与位于垂体、下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能... 生长激素释放肽(ghrelin)是在大鼠和人胃内发现的,是一种生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)的内源性配体。ghrelin与位于垂体、下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能和能量代谢等作用。本文对ghrelin的结构、分布、生物学功能的近期研究成果及畜牧业上的应用前景进行综述,以期为相关添加剂的研究和开发提供依据。 展开更多
关键词 生长激素释放肽 生长激素促分泌素受体 生物学功能
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原发性肝癌组织生长激素受体的表达 被引量:3
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作者 刘建平 区庆嘉 +2 位作者 卢汉平 高锦辉 褚中华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期34-35,共2页
为探讨重组人生长激素 (rhGH)在肝癌患者中的适用问题 ,采用放射配体法对 32例原发性肝癌 (HCC)组织进行了生长激素受体 (GHR)的检测。结果在 2 8例HCC组织检测到GHR ,GHR受体结合容量 (RT)为 (18 430 0± 4 16 33)fmol/mg蛋白 ,平... 为探讨重组人生长激素 (rhGH)在肝癌患者中的适用问题 ,采用放射配体法对 32例原发性肝癌 (HCC)组织进行了生长激素受体 (GHR)的检测。结果在 2 8例HCC组织检测到GHR ,GHR受体结合容量 (RT)为 (18 430 0± 4 16 33)fmol/mg蛋白 ,平衡解离常数 (Kd)为 (0 6 432± 0 196 1)nmol/L ,与正常肝组织相比 ,其RT降低 (P <0 0 5 ) ,Kd无显著性改变 (P >0 0 5 ) ;HCC组织GHR的结合容量与肿瘤大小呈负相关 ,而与肿瘤分化程度、患者是否合并肝硬化无明显相关 ;有 4例肝癌组织未检测到GHR存在。研究提示 :大多数原发性肝癌组织仍表达低水平GHR ,在其功能未明的情况下 ,rhGH在肝癌患者中的使用应慎重。 展开更多
关键词 生长激素 重组 生长受体 肝肿瘤
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GH与EGFR受体后信号交联在GH促进青春期大鼠生长板软骨细胞增殖中的作用 被引量:2
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作者 潘思年 张成喜 +3 位作者 李燕虹 马华梅 朱顺叶 杜敏联 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期2246-2252,共7页
目的:观察促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)处理后青春期大鼠生长板体外培养的软骨细胞内是否存在生长激素(GH)与表皮生长因子受体(EGFR)之间的信号交联(cross-talk)。方法:3周龄雌性SD大鼠开始注射GnRHa至7周龄;随后分离培养5-8只大鼠... 目的:观察促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)处理后青春期大鼠生长板体外培养的软骨细胞内是否存在生长激素(GH)与表皮生长因子受体(EGFR)之间的信号交联(cross-talk)。方法:3周龄雌性SD大鼠开始注射GnRHa至7周龄;随后分离培养5-8只大鼠胫骨生长板软骨细胞,在GH作用前分别加入JAK2阻断剂AG490(1nmol/L、10nmol/L和100nmol/L)、EGFR酪氨酸激酶阻断剂AG1478(0.1nmol/L、1nmol/L和10nmol/L)和表皮生长因子(EGF)中和抗体(0.1mg/L、1mg/L和10mg/L);采用四氮甲基唑蓝(MTT)以及免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA),观察不同阻断剂对软骨细胞增殖的影响;采用Western blotting检测软骨细胞p-ERK1/2及p-EGFR的表达。结果:GH作用后具有浓度依赖性地促进软骨细胞增殖和增加p-ERK1/2及p-EGFR水平的作用,100μg/L时作用最为明显。AG490及AG1478几乎能完全抑制GH促进软骨细胞增殖和激活ERK1/2及EGFR的作用。而EGF中和抗体仅能部分抑制GH的作用。结论:GH通过激活JAK2而激活其下游的ERK通路,实现其直接促细胞增殖效应。GH亦能通过激活EGFR及其信号转导通路促进细胞增殖效应,表明GH通路和EGF通路间存在相互作用。 展开更多
关键词 生长激素 性腺激素释放激素 受体 表皮生长因子 骨骺生长
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生长激素释放肽及其生物学效应 被引量:1
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作者 来景辉 范红结 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第11期66-69,共4页
生长激素释放肽(Ghrelin)是一种在动物体内广泛存在的生长激素促分泌素受体(GHSR)的内源性配体,Ghrelin与位于下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能及能量代谢等作用。文章就Ghrelin的结构、分布、生... 生长激素释放肽(Ghrelin)是一种在动物体内广泛存在的生长激素促分泌素受体(GHSR)的内源性配体,Ghrelin与位于下丘脑的GHSR结合后,具有促进生长激素释放、增加食欲、调节消化系统功能及能量代谢等作用。文章就Ghrelin的结构、分布、生物学效应及在畜牧业上的应用前景等方面进行综述,以期促进Ghrelin的进一步深入研究。 展开更多
关键词 GHRELIN 生长激素分泌素 生物学效应 展望
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大鼠体外循环后肝功能障碍与生长激素抵抗的关系 被引量:1
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作者 安永 肖颖彬 《中国全科医学》 CAS CSCD 2007年第10期798-801,共4页
目的探讨大鼠体外循环(CPB)后肝功能障碍与生长激素(GH)抵抗的关系。方法建立大鼠CPB模型,分为GH预处理大鼠(GH组,15只)和CPB对照大鼠(CPB组,15只),按照CPB后不同时间点检测血清GH、生长激素结合蛋白(GHBP)、内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子(... 目的探讨大鼠体外循环(CPB)后肝功能障碍与生长激素(GH)抵抗的关系。方法建立大鼠CPB模型,分为GH预处理大鼠(GH组,15只)和CPB对照大鼠(CPB组,15只),按照CPB后不同时间点检测血清GH、生长激素结合蛋白(GHBP)、内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、肝功能及前清蛋白,采用RT-PCR法检测肝组织生长激素受体(GHR)mRNA。结果CPB后CPB对照组、GH预处理组LPS、TNF-α浓度较CPB前显著升高,且肝组织GHRmRNA的表达明显减少,肝功能损害明显;GH组同时相点血清LPS和TNF-α浓度均较CPB组显著降低(P<0.05或P<0.01),GH组血清GHBP以及肝组织GHRmRNA的表达均较CPB组显著增加(P<0.05或P<0.01),肝功能损害明显减轻。GHBP、GHRmRNA变化趋势与黄疸程度、LPS、TNF-α水平呈负相关(P<0.01)、与PA呈正相关(P<0.01)。结论CPB术后早期肝功能已受到损害,GH/GHR轴存在明显下调,其原因可能与炎症递质血症引起的GHR表达受抑有关,并可进一步加重炎症递质血症,是介导CPB肝脏病理生理改变的重要因素,GH预处理可减轻CPB时炎症递质血症,上调GH/GHR轴可明显改善肝功能。 展开更多
关键词 体外循环 肝功能不全 内毒素类 肿瘤坏死因子-α 生长激素 受体 生长 大鼠
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Ghrelin对大鼠消化间期胃肠肌电活动的影响及其受体在消化道的分布特征 被引量:2
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作者 王燕 董蕾 +3 位作者 邹百仓 史海涛 姜炅 宋亚华 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期186-190,共5页
目的探讨ghrelin对大鼠消化间期复合肌电活动(IMC)的影响及其机制。方法采用免疫组织化学和图像分析方法观察ghrelin受体(生长激素促分泌素受体,GHS-R)在大鼠消化道的分布特征;采用多导生理记录仪监测大鼠消化间期IMC,观察静脉给予ghre... 目的探讨ghrelin对大鼠消化间期复合肌电活动(IMC)的影响及其机制。方法采用免疫组织化学和图像分析方法观察ghrelin受体(生长激素促分泌素受体,GHS-R)在大鼠消化道的分布特征;采用多导生理记录仪监测大鼠消化间期IMC,观察静脉给予ghrelin对胃肠IMC的影响;采用放射免疫法测定静脉给予ghrelin前后,IMC不同时相的血浆胃动素浓度。结果①GHS-R在胃肠道的肠肌丛和黏膜下丛有表达,胃腺体均有GHS-R免疫强阳性广泛表达,在肠腺体的阳性表达较少。②静脉给予ghrelin促进胃肠IMC,IMC周期缩短,Ⅲ相时程缩短,Ⅲ相占IMC周期百分比无显著性改变;静脉注射ghrelin后,血浆胃动素周期性波动规律不受影响,各相应时相胃动素浓度与ghrelin作用前比较无显著性差异。结论 GHS-R主要分布于大鼠消化道的肠肌丛和黏膜下丛,在胃腺体有免疫强阳性表达,在小肠腺有少量阳性表达。Ghrelin可促进胃肠运动,此作用与胃动素没有明显关系。 展开更多
关键词 GHRELIN 生长激素促分泌素受体 胃肠运动 胃动素 消化间期复合肌电活动
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Ghrelin及其受体和酰基化酶在羔羊不同组织的表达差异研究
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作者 赵红琼 王琴 +4 位作者 徐新明 付强 史慧君 侯宇 杨阳 《动物医学进展》 北大核心 2018年第2期49-54,共6页
采用real-time PCR检测生长激素释放肽(Ghrelin)及其受体(GHS-R)和酰基化转移酶(GOAT)在羔羊下丘脑、垂体、瘤胃、皱胃底、皱胃窦、十二指肠、空肠、回肠、心、肝、脾、肾、胰腺、睾丸的mRNA表达水平。结果显示,Ghrelin、GHS-R和GOAT m... 采用real-time PCR检测生长激素释放肽(Ghrelin)及其受体(GHS-R)和酰基化转移酶(GOAT)在羔羊下丘脑、垂体、瘤胃、皱胃底、皱胃窦、十二指肠、空肠、回肠、心、肝、脾、肾、胰腺、睾丸的mRNA表达水平。结果显示,Ghrelin、GHS-R和GOAT mRNA在羔羊各组织中均有表达,其中Ghrelin mRNA主要表达于皱胃底(P<0.01),其次是十二指肠和胰腺(P<0.05);GHS-R mRNA主要表达于垂体(P<0.01),其次是下丘脑(P<0.05);GOAT mRNA在皱胃底和睾丸的表达水平相对较高,均显著高于其他组织(P<0.05)。研究结果表明,Ghrelin系统在反刍动物组织中广泛分布,Ghrelin可能与GHS-R和GOAT共同参与协调羔羊生长调控、摄食等功能的调节作用,为进一步研究反刍动物体内Ghrelin的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 羔羊 生长激素释放肽 生长激素促分泌素受体 Ghrelin酰基化转移酶 实时荧光定量PCR
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生长素的发现及研究进展 被引量:7
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作者 CHEN Chen 孙强 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期131-136,共6页
生长素(ghrelin)及其受体的发现使内分泌代谢调节的研究取得了明显的进展。除对生长激素轴的影响,生长素对机体多系统的调节作用越来越引起人们关注。而其细胞及分子机制的研究及可能的临床试用是目前研究的重点。本文简述了该系统的发... 生长素(ghrelin)及其受体的发现使内分泌代谢调节的研究取得了明显的进展。除对生长激素轴的影响,生长素对机体多系统的调节作用越来越引起人们关注。而其细胞及分子机制的研究及可能的临床试用是目前研究的重点。本文简述了该系统的发现、发展及进一步研究的方向。 展开更多
关键词 生长 生长激素促分泌素受体 生长激素分泌素 代谢 心血管 肿瘤
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慢性肾功能不全大鼠下丘脑、胃肠道ghrelin及其受体表达变化 被引量:10
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作者 付荣国 袁浩铮 +4 位作者 王莉 葛蘅 张军 宁启兰 张富军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期96-99,共4页
目的观察慢性肾功能不全(CRF)大鼠下丘脑、胃底和十二指肠组织脑肠肽ghrelin及其生长激素促分泌素受体(GHS-R)在蛋白和mRNA水平上的表达变化。方法 SD大鼠随机分为假手术组和CRF组,其中采用5/6肾切除制作CRF大鼠模型,造模成功后采用免... 目的观察慢性肾功能不全(CRF)大鼠下丘脑、胃底和十二指肠组织脑肠肽ghrelin及其生长激素促分泌素受体(GHS-R)在蛋白和mRNA水平上的表达变化。方法 SD大鼠随机分为假手术组和CRF组,其中采用5/6肾切除制作CRF大鼠模型,造模成功后采用免疫组织化学法和实时定量-PCR法检测两组大鼠下丘脑、胃底和十二指肠组织ghrelin基因及其受体GHS-R在蛋白和mRNA水平上的表达变化。结果与假手术组相比较,下丘脑、胃底、十二指肠ghrelin和GHS-R的表达变化在mRNA和蛋白水平表现分别为:下丘脑组织ghrelin和GHS-R的表达减少,其中ghrelin表达减少更明显;胃底组织ghrelin和GHS-R的表达显著增加,P<0.01;而在十二指肠组织,ghrelin的表达无明显变化,但GHS-R的产生却明显减少。结论 ghrelin及其受体GHS-R在胃肠中枢及外周组织不同部位的表达差异可能是CRF大鼠出现胃肠动力障碍的病理学基础之一。 展开更多
关键词 慢性肾功能不全 下丘脑 胃肠道 GHRELIN 激素分泌素受体
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尼罗罗非鱼ghrelin基因的多态性及其与生长性状相关SNP位点的筛选 被引量:9
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作者 王春晓 卢迈新 +7 位作者 高风英 刘志刚 曹建萌 朱华平 可小丽 王淼 叶星 叶卫 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期50-57,共8页
为了研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)生长激素促分泌素基因(ghrelin)的多态性及其与生长的相关性,研究以两个尼罗罗非鱼群体(快长群体和基础群体)的DNA样本各40份为模板,通过PCR扩增和测序获得ghrelin基因序列。通过Dnasp v5和ME... 为了研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)生长激素促分泌素基因(ghrelin)的多态性及其与生长的相关性,研究以两个尼罗罗非鱼群体(快长群体和基础群体)的DNA样本各40份为模板,通过PCR扩增和测序获得ghrelin基因序列。通过Dnasp v5和MEGA 5.0分析序列多态性、筛选有效SNP位点;采用Snapshot法对两个群体子代ghrelin基因中SNP位点进行基因分型,然后分析SNP位点基因型与生长性状的相关性。结果表明,快长群体ghrelin基因中的单核苷酸变异位点数(S)比基础群体要少,而核苷酸多态性(Pi)和平均核苷酸差异数(K)要略高于基础群体。共筛得3个有效SNP位点(S1、S2和S3),均分布于第1个内含子中。遗传结构分析表明,3个SNP位点在两个群体的子代中均为低度多态性位点(PIC<0.25),但处于Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);快长群体子代中3个SNP位点的观测杂合度、期望杂合度和多态信息含量等遗传多样性参数均小于基础群体子代的相应值,3个SNP位点的遗传多样性参数、基因型和基因频率在同一群体中高度一致,SNP位点之间完全连锁。两个群体子代中3个SNP位点处的优势基因型相同,但快长群体子代中优势基因型频率要明显大于基础群体子代中相应基因型频率。对两个群体子代的生长性状与SNP基因型进行关联性分析的结果表明,尼罗罗非鱼个体的多项生长指标(体重、体长、体高、头长和尾柄高等)在不同基因型中存在显著差异(S1:GG>AG,S2:TT>AT,S3:AA>AT)(P<0.05)。D1双倍型(S1:GG,S2:TT,S3:AA)所对应的尼罗罗非鱼个体的多项生长指标(体重、体长、体高、头长和尾柄高等)显著高于D2双倍型(S1:AG,S2:AT,S3:AT)。以上结果表明,尼罗罗非鱼ghrelin基因3个SNP位点完全连锁,D1双倍型与快长性状密切相关,可作为尼罗罗非鱼分子标记辅助育种的候选标记。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 生长激素分泌素基因 单核苷酸多态性位点 生长性状
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Ghrelin对采食和分泌调节作用的研究进展 被引量:2
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作者 耿春银 杨连玉 +1 位作者 张敏 严昌国 《饲料工业》 2008年第19期10-13,共4页
Ghrelin是从鼠和人的胃中分离得到的一种生长激素释放激素受体天然的内源性配体,它由28个氨基酸残基组成,且氮端第三位丝氨酸发生了辛酰基化,Ghrelin具有广泛的生物学功能,包括调控动物采食、调节生长激素释放、调节胃肠功能及调节能量... Ghrelin是从鼠和人的胃中分离得到的一种生长激素释放激素受体天然的内源性配体,它由28个氨基酸残基组成,且氮端第三位丝氨酸发生了辛酰基化,Ghrelin具有广泛的生物学功能,包括调控动物采食、调节生长激素释放、调节胃肠功能及调节能量平衡等,对Ghrelin的研究具有重要的理论意义和广阔的应用前景,文中综述了Ghrelin对采食及对其分泌调节作用的研究进展。 展开更多
关键词 GHRELIN 生长激素 生长激素分泌素 综述
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慢病毒介导的GHSR1a shRNA对结直肠癌细胞生长的影响 被引量:3
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作者 刘岸 黄成钢 徐佳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1227-1234,共8页
目的:构建生长激素促泌素受体1a(growth hormone secretagogue receptor 1a,GHSR1a)基因短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,感染人结直肠癌细胞系SW480,观察沉默GHSR1a基因对SW480细胞生长的影响,并探讨其作用机制。方... 目的:构建生长激素促泌素受体1a(growth hormone secretagogue receptor 1a,GHSR1a)基因短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,感染人结直肠癌细胞系SW480,观察沉默GHSR1a基因对SW480细胞生长的影响,并探讨其作用机制。方法:构建特异性靶向GHSR1a基因的shRNA慢病毒表达载体和阴性对照序列慢病毒载体;建立稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞、阴性对照细胞(NC)及空白对照细胞(BC),RTPCR检测GHSR1a的mRNA在细胞中的表达;通过Western blot技术检测细胞中GHSR1a、ghrelin、PTEN、p-AKT及p53蛋白的水平;CCK-8法测定GHSR1a shRNA对SW480细胞活力的影响;建立裸鼠结直肠癌皮下移植瘤模型,实验结束后处死裸鼠并测量各组裸鼠肿瘤重量;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和PTEN的阳性表达。结果:在体外实验中,GHSR1a在人结直肠癌细胞株Caco-2及SW480中的表达明显高于人正常结肠上皮细胞株NCM460的表达;成功建立了稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞;GHSR1a shRNA能明显抑制SW480细胞GHSR1a mRNA及蛋白的表达;沉默GHSR1a基因后SW480细胞活力明显减弱;与NC组相比较,GHSR1a shRNA组细胞中PTEN mRNA及蛋白水平上调,AKT磷酸化被抑制,p53的表达明显增加;在体内实验中,与NC组相比较,GHSR1a shRNA组裸鼠结直肠癌皮下移植瘤重量明显减轻,同时Ki-67表达下调,PTEN表达上调。结论:慢病毒介导的GHSR1a shRNA对体内、外人结肠癌细胞的生长有明显抑制作用,该作用可能通过上调PTEN及其下游PI3K/AKT通路实现。 展开更多
关键词 结直肠癌 GHRELIN 生长激素泌素受体1a PTEN
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肥大细胞表面受体MRGPRB2介导药物引起的类过敏反应
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作者 李志清 Benjamin D.McN eil +1 位作者 Priyanka Pundir Sonya Meeke 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期662-662,共1页
MRGPRB2属于MAS-相关G蛋白偶联受体超家族,该家族在人类中只有四个基因:MrgX 1-X4。但是在小鼠得到了扩增,增加到32个基因:MrgprA 1-A22,MrgprB 1-B13,MrgprC 1-C14,and MrgprD-G。其主要表达在小鼠的背根神经节中感知伤痛觉的神经元表... MRGPRB2属于MAS-相关G蛋白偶联受体超家族,该家族在人类中只有四个基因:MrgX 1-X4。但是在小鼠得到了扩增,增加到32个基因:MrgprA 1-A22,MrgprB 1-B13,MrgprC 1-C14,and MrgprD-G。其主要表达在小鼠的背根神经节中感知伤痛觉的神经元表面。目前研究较清楚的是MrgX 1(小鼠体内的同源基因为A3,C11)主要介导了抗疟疾药氯喹引起的瘙痒反应。早在2006年,已经研究证明人类MrgX 2主要分布在肥大细胞上,其可能是基础促分泌素的受体,介导肥大细胞的活化。 展开更多
关键词 抗疟疾药 同源基因 肥大细胞 分泌素 类过敏反应 MRGPRB2 受体超家族 细胞表面受体 小鼠腹腔 重组酶
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Ghrelin对大鼠小肠转运及消化间期移行性复合肌电活动的作用及机制 被引量:17
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作者 王燕 董蕾 +2 位作者 赵平 程妍 李慧鹏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期328-332,共5页
目的探讨ghrelin对大鼠小肠转运和消化间期移行性复合肌电活动(MMC)的影响及作用机制。方法大鼠禁食24h,观察静脉给予不同剂量ghrelin对小肠转运的影响,及静脉给予ghrelin受体拮抗剂(D-Lys3)GHRP-6对ghrelin作用的影响。采用多道生理记... 目的探讨ghrelin对大鼠小肠转运和消化间期移行性复合肌电活动(MMC)的影响及作用机制。方法大鼠禁食24h,观察静脉给予不同剂量ghrelin对小肠转运的影响,及静脉给予ghrelin受体拮抗剂(D-Lys3)GHRP-6对ghrelin作用的影响。采用多道生理记录仪在大鼠清醒、禁食状态下监测消化间期MMC,观察静脉给予ghrelin对胃肠MMC的影响。分别给予阿托品、酚妥拉明、普萘洛尔、L-精氨酸及(D-Lys3)GHRP-6,探讨ghrelin对MMC的作用机制。结果静脉给予ghrelin剂量依赖性地促进小肠转运,此作用可被(D-Lys3)GHRP-6阻断。静脉给予ghrelin促进胃肠MMC。阿托品、L-精氨酸和(D-Lys3)GHRP-6不同程度地抑制ghrelin的促动力效应;酚妥拉明和普萘洛尔对ghrelin的促动力作用无显著影响。结论Ghrelin可促进胃肠运动,这可能是通过胆碱能通路起作用,与NO通路关系密切,ghrelin受体GHS-R参与其促动力作用。 展开更多
关键词 ghrclin 生长激素促分泌素受体 动力 胃动素 消化间期移行性复合肌电活动 一氧化氮
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