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绵羊大肠埃希菌生物被膜形成及相关基因的检测
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作者 柴迎锦 邬琴 +5 位作者 顾晓晓 郭强强 周霞 韩猛立 张星星 黄新 《动物医学进展》 北大核心 2019年第11期36-39,共4页
检测绵羊大肠埃希菌中的XJ10生物被膜(biofilm,BF)形成情况并确定与BF形成相关基因的携带情况。采用96孔聚苯乙烯微孔板培养XJ10观察BF的形态和测定OD值分析XJ10BF在不同的时间段形成的情况,采用PCR方法检测BF 12种形成相关基因的分布... 检测绵羊大肠埃希菌中的XJ10生物被膜(biofilm,BF)形成情况并确定与BF形成相关基因的携带情况。采用96孔聚苯乙烯微孔板培养XJ10观察BF的形态和测定OD值分析XJ10BF在不同的时间段形成的情况,采用PCR方法检测BF 12种形成相关基因的分布情况。结果表明,在37℃,BF的OD值从2 h开始逐渐升高,24 h左右接近最高峰,维持至36 h后,OD值开始缓慢下降,直至72 h仍维持较高水平,在整个检测时间段内XJ10BF OD值显著高于对照组,且差异显著(P<0.05);6 h时BF形成初具形态,8 h^10 h呈现不完整的网格结构,12 h时BF形成较明显的网状结构,24 h^36 h形成有序的较为密集的网格结构,48 h后网状结构开始解离和脱落。同时在XJ10中检测到了其中8种与BF形成相关的基因,测序结果与GenBank公布的相应序列同源性为97.2%以上。试验表明XJ10具有形成BF的能力,但形成能力较弱,且携带8个与BF形成相关的基因。 展开更多
关键词 绵羊大肠埃希菌 生物被 生物被膜形成相关基因
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致羔羊脑炎粪肠球菌生物被膜形成能力及相关基因检测研究 被引量:5
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作者 孔静雅 郭强强 +3 位作者 孔科委 李劼 周霞 齐亚银 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第3期679-685,共7页
为观察致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05株生物被膜(BF)的形成能力并检测致羔羊脑炎粪肠球菌BF形成相关基因的携带情况,本研究以XJ05为研究对象,运用96孔板建立不同时间BF模型,染色后酶标仪测定D595nm值,并用倒置显微镜观察BF形态。同时检测11株... 为观察致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05株生物被膜(BF)的形成能力并检测致羔羊脑炎粪肠球菌BF形成相关基因的携带情况,本研究以XJ05为研究对象,运用96孔板建立不同时间BF模型,染色后酶标仪测定D595nm值,并用倒置显微镜观察BF形态。同时检测11株菌中与BF形成相关基因(gelE、esp、ace、asa1、asa373、efaA、ef0591、ef3314、ahrc、eep)的携带情况,并对相关基因片段做同源性分析。结果显示,在不同时间段XJ05株BF的生成量与空白对照组相比差异显著(P<0.05),24h时D595nm值最高且与其他各个时间段相比均差异显著(P<0.05)。显微镜下观察6h时BF初具规模,可见散落的网状结构,12~24h矩阵网格结构明显,24h时形成高度有序的网格结构,24h后网状结构逐渐脱落,BF开始降解。11株菌中10种相关基因的携带情况不同,有6株携带8种基因,1株携带7种基因,1株携带6种基因,1株携带2种基因,有2株未检测到10种基因的任何一种。检出的基因片段同源性均在93.3%~100.0%之间。结果表明,XJ05株能形成完整的BF,11株分离的致羔羊脑炎粪肠球菌中有9株携带部分与BF形成相关的基因。 展开更多
关键词 粪肠球菌 生物被 生物被相关基因 同源性分析
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绵羊脑炎单增李斯特菌生物膜形成及相关基因的检测 被引量:4
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作者 邬琴 闫圆圆 +5 位作者 王振 梁淋渊 郑婷婷 孔科委 王熙楚 周霞 《动物医学进展》 北大核心 2016年第7期13-16,共4页
为了检测绵羊脑炎李斯特菌生物膜形成情况并确定生物膜形成相关基因在该菌中的分布情况,采用结晶紫染色结合测定OD值的方法观察羊脑炎李斯特菌生物膜在不同时间段形成情况,并应用分子生物学方法检测生物膜形成相关基因(flaA、recA、relA... 为了检测绵羊脑炎李斯特菌生物膜形成情况并确定生物膜形成相关基因在该菌中的分布情况,采用结晶紫染色结合测定OD值的方法观察羊脑炎李斯特菌生物膜在不同时间段形成情况,并应用分子生物学方法检测生物膜形成相关基因(flaA、recA、relA、prfA、yneA、agrA、luxS、degU、motB、sigB、hpt)在该菌中的分布情况。结果表明,在37℃,绵羊脑炎李斯特菌生物膜在2h^8h的OD值与0h和对照组对比差异显著(P<0.05),9h^48hOD值呈平稳趋势,与对照组比较差异显著(P<0.05)。2h开始生物膜初具形态,呈现散落的网格结构,2h^6h矩阵网格结构明显,6h^8h形成高度有序的网格结构,9h^48h依然具备生物膜网状结构特征,但个别网状结构脱落。11种生物膜相关基因在绵羊脑炎李斯特菌中的检测结果为阳性,测序结果与GenBank公布的相应序列同源性为87.22%~99.29%。结果表明2h^6h生物膜进入黏附期和生长期,6h^8h进入成熟稳定阶段,9h^48h逐渐进入播散期;LM90携带11种与生物膜形成相关的基因。 展开更多
关键词 绵羊脑炎李斯特菌 生物 相关基因
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食品中金黄色葡萄球菌生物被膜形成基因分析及影响因素研究 被引量:11
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作者 马伊萨兰 张荣 +4 位作者 王洪志 赵燕英 陈娟 刘骥 唐俊妮 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第15期129-133,139,共6页
分析金黄色葡萄球菌食品分离菌株生物被膜形成相关基因,研究茶多酚和乳酸链球菌素(Nisin)对不同菌株生长及生物被膜形成的影响。以实验室保存的16株金黄色葡萄球菌食品分离菌株为研究对象,采用聚合酶链式反应(PCR)检测14种生物被膜形成... 分析金黄色葡萄球菌食品分离菌株生物被膜形成相关基因,研究茶多酚和乳酸链球菌素(Nisin)对不同菌株生长及生物被膜形成的影响。以实验室保存的16株金黄色葡萄球菌食品分离菌株为研究对象,采用聚合酶链式反应(PCR)检测14种生物被膜形成相关基因;通过微孔板法研究不同浓度茶多酚和Nisin对不同菌株生长的抑制作用,确定最小抑菌浓度(MIC);在此基础上进一步研究茶多酚和Nisin对生物被膜形成能力影响。结果表明:14种生物被膜形成相关基因中有10种被检出,其中cna、ebp S、fib和ica AD基因检出率为100%,sas C为87.5%、fnb A为68.75%、sas G为68.75%、clf B为68.75%、eno为62.5%,ica BC为56.25%;16株菌株中均不携带bbp、bap、clf A和fnb B基因。16株菌株均能形成生物被膜,但形成能力有差异,其中F23、F44、F58、F64、F71、F86、F107和F109等8株菌株为被膜强形成菌株,F7、F19、F40、F46、F60、F99、F101、F106等8株菌株为被膜弱形成菌株。茶多酚和Nisin对16株金黄色葡萄球菌食品分离菌株的MIC范围分别为0.1~0.2 g/L和0.125~1 g/L,茶多酚和Nisin在1/2MIC和1/4MIC浓度下对生物被膜形成抑制作用明显(p<0.05),且茶多酚抑制效果强于Nisin。本研究结果为食品中金黄色葡萄球菌生物被膜形成控制具有参考意义。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 生物被膜形成相关基因 最小抑菌浓度 茶多酚 乳酸链球菌素
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单增李斯特菌膜裂解相关基因缺失突变株的构建及生物学特性鉴定 被引量:9
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作者 江玲丽 高有领 +4 位作者 周向阳 白帆 方春 钱国英 方维焕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期779-788,共10页
拟探明单核细胞增多性李斯特菌(单增李斯特菌)分离株M7可能的低致病力机制。利用SOE-PCR及同源重组法构建M7膜裂解相关基因hly及plcB单缺失(M7-Δhly和M7-ΔplcB)及双缺失突变株(M7-Δhly/plcB),比较它们与亲本株的生物学特性差异。结... 拟探明单核细胞增多性李斯特菌(单增李斯特菌)分离株M7可能的低致病力机制。利用SOE-PCR及同源重组法构建M7膜裂解相关基因hly及plcB单缺失(M7-Δhly和M7-ΔplcB)及双缺失突变株(M7-Δhly/plcB),比较它们与亲本株的生物学特性差异。结果如下:PCR及反转录PCR表明突变株构建成功。突变株M7-Δhly和M7-Δhly/plcB因hly缺失致其溶血活性丧失。plcB缺失突变株M7-ΔplcB和M7-Δhly/plcB无可见溶脂活性。单缺失突变株M7-ΔplcB、M7-Δhly与M7具有相似的细胞黏附及增殖能力(P>0.05)。MOI为1 000时,双缺失突变株M7-Δhly/plcB对Caco-2细胞毒性最低(11.10%),M7-Δhly次之(23.53%)(P<0.05)。空斑试验表明菌株M7和M7-ΔplcB仅能在无庆大霉素培养基中形成空斑。hly及plcB缺失致单增李斯特菌对免疫抑制小鼠毒力降低。单增李斯特菌M7低致病力可能与hly及plcB的高水平表达有关,致细菌对宿主细胞毒性增强而从细胞内逸出,使其不能躲避宿主免疫系统而被清除。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 裂解相关基因 细胞毒性 生物学特性
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铜绿假单胞菌临床分离株生物膜、群体感应相关基因及耐药性分析 被引量:9
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作者 税剑 邹明祥 +3 位作者 王海晨 李军 刘文恩 晏群 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第4期254-257,共4页
目的研究临床分离铜绿假单胞菌生物膜形成能力、群体感应相关基因携带情况与耐药性间的关系。方法结晶紫染色法半定量分析94株铜绿假单胞菌生物膜形成能力,K-B法测定菌株的耐药性,PCR检测菌株的群体感应相关基因lasI、lasR、rhlI、rhlR... 目的研究临床分离铜绿假单胞菌生物膜形成能力、群体感应相关基因携带情况与耐药性间的关系。方法结晶紫染色法半定量分析94株铜绿假单胞菌生物膜形成能力,K-B法测定菌株的耐药性,PCR检测菌株的群体感应相关基因lasI、lasR、rhlI、rhlR,分析不同生物膜形成能力铜绿假单胞菌的耐药性差异及群体感应相关基因携带情况对生物膜形成的影响。结果所测94株铜绿假单胞菌中有89株(94.7%)具有成膜能力,其中成膜能力弱阳性22株(23.4%),成膜能力阳性44株(46.8%),成膜能力强阳性23株(24.5%)。不同成膜能力铜绿假单胞菌对阿米卡星、妥布霉素、庆大霉素的耐药率不同(P<0.05),其中成膜能力强阳性菌株对阿米卡星的耐药率高于成膜能力阳性和弱阳性菌株(P<0.05),对妥布霉素、庆大霉素的耐药率高于弱阳性菌株(P<0.05)。所测94株铜绿假单胞菌有91株携带lasI、lasR、rhlI、rhlR基因,2株lasR基因缺失,1株lasI、lasR、rhlI、rhlR基因缺失。lasR基因缺陷型菌株以及lasI、lasR、rhlI、rhlR基因缺陷型菌株成膜能力阴性,对常规抗菌药物敏感。结论绝大多数铜绿假单胞菌临床分离株具有较强的生物膜形成能力,铜绿假单胞菌耐药性与生物膜形成能力具有一定的相关性,群体感应相关基因影响生物膜形成。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 生物 耐药性 群体感应相关基因
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食品中克罗诺杆菌分离菌株生物被膜形成、耐药性及毒力基因检测 被引量:12
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作者 罗梦幽 柯旭泽 +3 位作者 贺苏皖 付成平 罗玲 唐俊妮 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第4期106-111,共6页
研究食品中克罗诺杆菌分离菌株的生物被膜形成、耐药性以及携带毒力基因情况。在成都市周边农贸市场和路边小摊采集食品样品129份,采用DFI阪崎肠杆菌显色培养基分离克罗诺杆菌;通过16S rRNA序列比对分析鉴定分离菌株;采用试管法和微孔... 研究食品中克罗诺杆菌分离菌株的生物被膜形成、耐药性以及携带毒力基因情况。在成都市周边农贸市场和路边小摊采集食品样品129份,采用DFI阪崎肠杆菌显色培养基分离克罗诺杆菌;通过16S rRNA序列比对分析鉴定分离菌株;采用试管法和微孔板法分析菌株生物被膜形成能力,同时研究温度对细菌成膜能力影响;采用纸片法检测分离菌株对18种抗生素的耐药性;采用PCR方法检测分离菌株携带cpa、hly、sip和omp X毒力基因情况。结果发现从129份食品样本中共检出克罗诺杆菌43株,检出率为33.3%。43株克罗诺杆菌食品分离菌株的成膜率为90.7%,并且温度对细菌成膜影响明显。四种毒力基因中,omp X检出率为100%; cpa检出率为13.9%; hly检出率为11.6%; sip基因未检出。耐药表型检测发现43株克罗诺杆菌食品分离菌株对青霉素、克林霉素、万古霉素、苯唑西林和杆菌肽B的耐药率为100%,对利福平的耐药率达97.7%;对红霉素的耐药率为7%;对环丙沙星、庆大霉素、四环素、氯霉素、亚胺培南、磺胺甲恶挫、呋喃妥因、头孢西丁、链霉素、阿米卡星、氧氟沙星等100%敏感。本研究表明克罗诺杆菌食品分离菌株具有较好的形成生物被膜能力,对常见的抗生素耐药率较高,并且分离菌株携带一定的毒力基因,对食品安全造成潜在威胁。 展开更多
关键词 克罗诺杆菌 食品分离菌株 生物被形成 耐药性 毒力基因
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水稻白叶枯病菌在离体培养条件下生物膜形成的检测 被引量:7
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作者 傅本重 吴茂森 +1 位作者 陈华民 何晨阳 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期47-50,共4页
分析了不同培养和测试条件(塑料和玻璃表面、培养时间、培养温度和培养基)对水稻白叶枯病菌(Xan-thomonas oryzaepv.oryzae,Xoo)生物膜形成的影响,并测定了不同地区来源的Xoo野生型菌株、基因缺失突变体的生物膜形成。结果表明,在聚苯... 分析了不同培养和测试条件(塑料和玻璃表面、培养时间、培养温度和培养基)对水稻白叶枯病菌(Xan-thomonas oryzaepv.oryzae,Xoo)生物膜形成的影响,并测定了不同地区来源的Xoo野生型菌株、基因缺失突变体的生物膜形成。结果表明,在聚苯乙烯表面生长、用M210培养基在23℃下静止培养24 h是Xoo生物膜形成比较适宜的条件;不同地区来源的菌株生物膜形成能力不同;鞭毛相关基因fleQxoo、fliExoo和rbfCxoo以及H2O2降解调控基因oxyRxoo的缺失突变均影响生物膜形成。 展开更多
关键词 水稻白叶枯病菌 生物形成 静止培养 基因突变 检测
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植物乳杆菌HE-1由AI-2/LuxS介导的群体感应与生物膜形成关系的研究 被引量:8
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作者 张腾 田建军 +2 位作者 李梓媛 贾原博 贺银凤 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期130-132,136,共4页
本研究从AI-2/LuxS群体感应出发,研究植物乳杆菌HE-1的AI-2信号分子生成与生物膜形成的关系,同时对luxS基因进行扩增,从分子生物学角度验证菌株HE-1的AI-2信号分子产生。研究使用生物发光的方法检测植物乳杆菌HE-1不同培养时间AI-2的产... 本研究从AI-2/LuxS群体感应出发,研究植物乳杆菌HE-1的AI-2信号分子生成与生物膜形成的关系,同时对luxS基因进行扩增,从分子生物学角度验证菌株HE-1的AI-2信号分子产生。研究使用生物发光的方法检测植物乳杆菌HE-1不同培养时间AI-2的产生量;使用微孔板法确定不同时间点生物膜的生成量;之后使用PCR的方法扩增其luxS基因片段,对扩增片段进行同源性和系统发育分析。结果显示植物乳杆菌HE-1的生物膜生成时间和生成量与AI-2信号分子的产生时间和产生量非常吻合,luxS基因成功扩增,同源性分析显示植物乳杆菌HE-1与已知植物乳杆菌luxS基因同源性高达99%以上。分析实验结果得出植物乳杆菌HE-1生物膜生成与AI-2/LuxS群体感应系统二者之间有密切的关系,并且luxS基因的扩增成功和同源性分析从分子生物学上验证了植物乳杆菌HE-1具有产生AI-2信号分子的关键基因。 展开更多
关键词 AI-2 LuxS群体感应 生物形成 luxS基因扩增及同源性分析
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副溶血性弧菌生物被膜动态形成机制的转录组分析 被引量:3
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作者 李安琪 石成龙 +4 位作者 钱森和 王洲 赵世光 刘艳 薛正莲 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第2期146-155,共10页
为探究副溶血性弧菌生物被膜形成机制,在菌株生理特性分析的基础上,结合转录组测序技术,对生物被膜形成过程中的基因表达调控规律进行探究。实验测定了2株被膜差异菌株(ATCC 17802和VP-0)的胞外多糖、胞外蛋白、信号分子AI-2、细胞渗透... 为探究副溶血性弧菌生物被膜形成机制,在菌株生理特性分析的基础上,结合转录组测序技术,对生物被膜形成过程中的基因表达调控规律进行探究。实验测定了2株被膜差异菌株(ATCC 17802和VP-0)的胞外多糖、胞外蛋白、信号分子AI-2、细胞渗透性和生物被膜微观形态等生理指标,研究被膜差异菌株的动态形成过程。结果显示:供试菌株生物被膜形成过程,0~12 h为可逆黏附阶段,12~48 h为不可逆黏附和微菌落形成阶段,48~72 h为成熟阶段,72~144 h为解离阶段。ATCC 17802胞外多糖和蛋白在生物被膜成熟期分泌量分别是VP-0的1.67倍和2.3倍,在生物被膜形成过程中信号分子含量相差不显著(P>0.05),激光共聚焦显微镜显示ATCC 17802呈现更聚集状态。根据转录组测序结果分析可知,3个处理组(72 h vs 8 h、48 h vs 8 h和72 h vs 48 h)分别鉴别出802、1061个和267个显著性差异表达基因,其中分别有506、655个和96个差异基因下调,296、406个和171个差异基因上调。这些差异主要体现在能量代谢、鞭毛系统、转运系统等与生物被膜形成有关的方面。本实验详细划分了副溶血性弧菌生物被膜的形成阶段,也为生物被膜动态调控中的基因调控过程提供了理论基础。 展开更多
关键词 生物被形成 群体感应 副溶血性弧菌 转录组 差异表达基因
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食源性金黄色葡萄球菌粘附素基因的检测及蛋白酶K和DNase Ⅰ对菌株被膜形成的影响 被引量:2
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作者 马伊萨兰 余博旸 +2 位作者 陈娟 刘骥 唐俊妮 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第17期185-189,266,共6页
本研究以实验室保存的17株金黄色葡萄球菌食品分离菌株为研究对象,通过提取细菌DNA,采用PCR检测14种粘附素基因的分布情况,随后采用试管法和微孔板法对细菌成膜能力进行检测,进一步研究蛋白酶K和DNaseⅠ对生物被膜形成能力的影响。结果... 本研究以实验室保存的17株金黄色葡萄球菌食品分离菌株为研究对象,通过提取细菌DNA,采用PCR检测14种粘附素基因的分布情况,随后采用试管法和微孔板法对细菌成膜能力进行检测,进一步研究蛋白酶K和DNaseⅠ对生物被膜形成能力的影响。结果表明:17株菌株均携带clf B基因,检出率为100%,均不携带bap,bbp和clf A基因,有13株菌扩增出ica BC基因(76.5%),12株均扩增出cna基因(70.6%),11株菌扩增出eno基因(64.7%),10株菌分别扩增出fib和ica AD基因(58.8%),9株菌扩增出fnb A基因(52.9%),4株菌分别扩增出sas C,sas G和ebp S基因(23.5%),2株菌扩增出fnb B基因(11.8%)。试管法和微孔板法观察到17株菌株均有生物被膜形成,但不同菌株的被膜形成能力有差异,10号和30号菌株被膜形成能力显著强于其它15株菌(p<0.05)。在细菌生长过程中,蛋白酶K、DNaseⅠ以及两种酶的联合处理发现蛋白酶K和DNaseⅠ处理组细菌生物被膜形成能力明显低于对照未处理组(p<0.05),并且蛋白酶K对金黄色葡萄球菌生物被膜形成的抑制效果比DNaseⅠ好,但是两种酶联合处理效果与对照组差异不显著(p>0.05)。本研究旨在为食源性金黄色葡萄球菌生物被膜的形成与控制策略提供基础数据。 展开更多
关键词 食源性金黄色葡萄球菌 生物被形成 粘附素相关基因 蛋白酶K DNASE I
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幽门螺杆菌生物膜的形成致病性及其耐药性 被引量:2
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作者 周杰挺 谷海瀛 《浙江临床医学》 2020年第2期304-306,共3页
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种革兰氏阴性,微需氧的人类病原体,目前已证实Hp感染与多种胃十二指肠慢性疾病密切相关,包括慢性活动性胃炎,消化性溃疡,萎缩性胃炎,黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤和胃癌.据报道,世界上超过一半... 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种革兰氏阴性,微需氧的人类病原体,目前已证实Hp感染与多种胃十二指肠慢性疾病密切相关,包括慢性活动性胃炎,消化性溃疡,萎缩性胃炎,黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤和胃癌.据报道,世界上超过一半的人口受Hp感染,在发展中国家年龄>50岁的人群中Hp感染率高达80%[1],这给公众健康带来了巨大的负担.自20世纪80年代发现Hp以来,对于Hp的研究主要集中在浮游态和非附着的生长方式上;然而,越来越多的证据表明Hp可以以一种被称为生物膜的表面附着方式呈群落生长,这种生长模式有助于病原微生物在恶劣环境中的存活及抵抗抗生素的干预治疗和宿主免疫系统的反应,从而延长感染时间,导致慢性感染[2].目前,关于Hp生物膜的研究仍处于早期阶段,其形成及其在致病中发挥的作用尚不明确,因此,本篇综述将介绍近年来关于Hp生物膜形成相关分子机制及其生物膜致病作用的最新研究进展. 展开更多
关键词 慢性活动性胃炎 萎缩性胃炎 相关淋巴组织 宿主免疫系统 胃十二指肠 生物形成 幽门螺杆菌 消化性溃疡
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抗菌肽Temprine-La(FS)抑制耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌生物被膜形成的研究 被引量:1
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作者 张欣 潘晨浩 +6 位作者 赵瑞利 姜轩 赵洋 马吉飞 于恩远 李留安 张振洲 《天津农学院学报》 CAS 2021年第1期24-33,共10页
为了探究抗菌肽Temprine-La(FS)对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP)生物被膜形成的影响,本试验以Temprine-La为基序进行氨基酸改造合成新的抗菌肽T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(S)、RGD-T-La(FS)以提高抗菌活性。通过微量稀释法测定多肽... 为了探究抗菌肽Temprine-La(FS)对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP)生物被膜形成的影响,本试验以Temprine-La为基序进行氨基酸改造合成新的抗菌肽T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(S)、RGD-T-La(FS)以提高抗菌活性。通过微量稀释法测定多肽对MRSP生物被膜的最小抑菌浓度(MBIC);结晶紫染色法(CV)检测多肽对MRSP生物被膜形成能力的影响;XTT法检测多肽对MRSP生物被膜代谢活性的影响、多肽对MRSP生物被膜胞外多糖含量的影响;扫描电镜(SEM)检测多肽对MRSP生物被膜形成的影响;荧光定量PCR法(q-PCR)分析多肽对MRSP生物被膜相关基因转录水平的影响。结果显示,T-La(S)、RGD-T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(FS)对MRSP的MBIC分别为:31.3、15.6、7.8、15.6μg/mL;结晶紫染色法(CV)表明T-La(S)、RGD-T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(FS)对MRSP生物被膜形成有抑制作用;扫描电镜(SEM)结果显示多肽使MRSP生物被膜中细胞外基质大量减少,菌体裸露在物体表面;多肽可以显著降低MRSP生物被膜的代谢活性,抑制被膜菌的粘附作用;多肽能有效抑制MRSP生物被膜合成胞外多糖;荧光定量PCR结果表明,多肽作用后能够降低MRSP生物被膜相关基因的转录水平。因此,多肽主要通过影响生物被膜相关基因转录水平和阻断胞外多糖的合成与分泌来抑制MRSP生物被膜的形成。 展开更多
关键词 抗菌肽Temprine-La(FS) 耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP) 生物被 相关基因
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替加环素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜的清除作用 被引量:1
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作者 袁春妹 张能华 +3 位作者 傅跃青 陈兴英 金烨 沈晓华 《浙江临床医学》 2021年第12期1717-1720,共4页
目的探讨不同浓度替加环素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)生物膜的清除作用及其机制,为临床治疗及院感防控提供新思路。方法微量肉汤稀释法检测替加环素对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)和最低生物被膜清除浓度(MBEC),结晶紫染色法检测亚... 目的探讨不同浓度替加环素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)生物膜的清除作用及其机制,为临床治疗及院感防控提供新思路。方法微量肉汤稀释法检测替加环素对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)和最低生物被膜清除浓度(MBEC),结晶紫染色法检测亚抑菌浓度替加环素及亚生物膜清除浓度替加环素对MRSA生物膜的作用,RT-PCR法检测分析不同浓度替加环素作用下MRSA生物膜形成量与生物膜相关基因之间的相关性。结果亚抑菌浓度的替加环素(1/8、1/4、1/2、1MIC)对MRSA作用下可显著抑制MRSA体外生物膜形成,所有检测的菌株在亚抑菌浓度的替加环素作用下的生物膜形成能力均降低。亚生物膜清除浓度的替加环素对膜有微弱的消除作用,1/2、1/4、1/8MBEC替加环素的消除作用没有差异性(P>0.05)。生物膜形成量和其基因表达量存在一定的相关性。结论亚抑菌浓度、亚生物膜清除浓度的替加环素均可抑制MRSA生物膜的形成,菌株间存在差异性,不同浓度替加环素作用下产生的生物膜量有所不同,抑制比例也不同,生物膜形成量和其特定基因表达量存在一定的相关性。不同浓度替加环素作用于MRSA生物膜的机制比较复杂。 展开更多
关键词 替加环素 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 生物 生物相关基因
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