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实时生物分子相互作用分析技术用于链霉亲和素-生物素化抗体的层层组装研究 被引量:5
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作者 裴仁军 崔小强 +1 位作者 杨秀荣 汪尔康 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第2期195-198,共4页
使用生物分子相互作用分析 ( Biomolecular interaction analysis,BIA)技术实时监测了在链霉亲和素表面层层组装亲和素 -生物素化抗体多层膜的过程 ,结果表明 ,通过链霉亲和素与生物素之间的强亲和作用 ,能够在表面形成均一的多层膜 ,... 使用生物分子相互作用分析 ( Biomolecular interaction analysis,BIA)技术实时监测了在链霉亲和素表面层层组装亲和素 -生物素化抗体多层膜的过程 ,结果表明 ,通过链霉亲和素与生物素之间的强亲和作用 ,能够在表面形成均一的多层膜 ,并用实时 BIA技术求得了每层蛋白质的表面浓度 .对于生物素化抗体 ,单层吸附表面浓度为 1 .32 ng/mm2 ;对于链霉亲和素 ,单层吸附表面浓度为 2 .93ng/mm2 . 展开更多
关键词 表面等离子体子共振 层层组装 亲和 生物化抗体 生物分子相互作用分析技术 亲和作用力
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生物素-链霉亲和素技术一步法检测淋球菌抗原的研究 被引量:5
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作者 沈建根 朱永良 董玉娥 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2000年第6期250-252,共3页
目的 :建立一种灵敏、快速诊断淋球菌感染的酶免疫测定法。方法 :检测淋球菌抗原的生物素 -链霉亲和素酶联免疫一步法。结果 :36例临床淋球菌标本中淋球菌抗原含量 1 0 8.47± 5 1 .39μg/ L ,阳性率 97.2 % ,显著高于非淋球菌标本... 目的 :建立一种灵敏、快速诊断淋球菌感染的酶免疫测定法。方法 :检测淋球菌抗原的生物素 -链霉亲和素酶联免疫一步法。结果 :36例临床淋球菌标本中淋球菌抗原含量 1 0 8.47± 5 1 .39μg/ L ,阳性率 97.2 % ,显著高于非淋球菌标本的 4.71± 2 .1 3μg/ L ,阳性率 0 % (P均 <0 .0 1 ) ,本法检测灵敏度 0 .6 2 5 μg/ L,特异性 1 0 0 % ,敏感性 97.2 %。结论 :该法可作为灵敏、快速诊断淋球菌的新的辅助方法。 展开更多
关键词 淋病奈瑟氏球菌 单克降抗体 生物-亲和
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生物素-链霉亲和素-过氧化物酶法快速诊断呼吸道合胞病毒感染 被引量:2
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作者 项哨 朱圣禾 陶明方 《浙江医科大学学报》 CSCD 1998年第2期62-64,87,共4页
目的:建立检测下呼吸道感染婴幼儿粘膜细胞呼吸道合胞病毒(RSV)抗原的方法。方法:以生物素标记兔抗RSV抗体,鼻咽部粘膜细胞涂片与该抗体作用后加链霉亲和素-过氧化物酶反应,二氨基联苯胺显色,显微镜下观察结果。结果:RSV抗原总... 目的:建立检测下呼吸道感染婴幼儿粘膜细胞呼吸道合胞病毒(RSV)抗原的方法。方法:以生物素标记兔抗RSV抗体,鼻咽部粘膜细胞涂片与该抗体作用后加链霉亲和素-过氧化物酶反应,二氨基联苯胺显色,显微镜下观察结果。结果:RSV抗原总阳性率为41.6%,临床典型和可疑病例抗原检出率分别为47.9%和44.9%,临床不典型者阳性率12.5%(X2=7.9,P<0.05)。阳性标本中细胞着成棕色,易与阴性标本相区别。结论:本法简便、快速,具有一定敏感性和特异性,适合于基层推广应用。 展开更多
关键词 生物 亲和 过氧化物酶法 呼吸道 RSV
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利用生物素链霉亲和素放大酶联免疫方法检测猪肉中莱克多巴胺残留 被引量:10
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作者 高翔 张燕 樊明涛 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2009年第3期108-111,共4页
以酶联免疫方法为基础,结合生物素-链霉亲和素系统的放大作用,建立直接竞争生物素链霉亲和素放大酶联免疫(BA-ELISA)检测方法,并将其用于猪肉肌肉组织中莱克多巴胺残留的检测,方法灵敏度(IC50)为(0.3±0.05)ng/mL,样品检出限为(0.3&... 以酶联免疫方法为基础,结合生物素-链霉亲和素系统的放大作用,建立直接竞争生物素链霉亲和素放大酶联免疫(BA-ELISA)检测方法,并将其用于猪肉肌肉组织中莱克多巴胺残留的检测,方法灵敏度(IC50)为(0.3±0.05)ng/mL,样品检出限为(0.3±0.1)ng/kg,平均加标回收率在84%以上。 展开更多
关键词 莱克多巴胺 生物-亲和 BA-ELISA
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基于生物素化纳米抗体的果蔬中百草枯超灵敏免疫检测方法研究 被引量:1
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作者 张咏仪 杨金易 +5 位作者 曾道平 徐振林 王弘 田元新 孙远明 沈玉栋 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1959-1964,共6页
通过纳米抗体活性口袋生物素化修饰实现识别活性提升,并以生物素化纳米抗体(Biotin-Nb2-12)作为识别元件,结合生物素-多聚辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(polyHRP-SA)亲和识别信号系统,建立了检测果蔬中百草枯的生物素-链霉亲和素酶联... 通过纳米抗体活性口袋生物素化修饰实现识别活性提升,并以生物素化纳米抗体(Biotin-Nb2-12)作为识别元件,结合生物素-多聚辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(polyHRP-SA)亲和识别信号系统,建立了检测果蔬中百草枯的生物素-链霉亲和素酶联免疫分析方法(BA-ELISA)。经多参数系统优化,所建方法的检出限(LOD)达0.58 pg/mL,半数抑制浓度(IC_(50))为14.1 pg/mL,线性范围为1.7~116.2 pg/mL,且与功能及结构类似物无显著交叉反应。相比传统间接竞争酶联免疫分析方法(icELISA),该法的IC_(50)提高了85倍,抗体消耗量降低至1/8,在大白菜和雪梨样品中的平均加标回收率为94.5%~116%,可用于果蔬中百草枯的痕量检测。 展开更多
关键词 百草枯 生物化纳米抗体 生物-亲和 酶联免疫分析 大白菜
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核酸适配体筛选中单链DNA制备方法的研究进展
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作者 顾华杰 蔡涵 +7 位作者 李雨欣 沈家明 陈锦辉 陈耔含 朱召娣 王璐君 杨倩倩 杨皓宇 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第19期215-227,共13页
核酸适配体是人工合成的短链核酸,作为分子识别元件,能够与各类靶标物质高特异性、高亲和力的结合,分为单链DNA和RNA两种类型。其中单链DNA适配体由于其稳定性比RNA适配体更好而更受欢迎,因此得到广泛应用。核酸适配体筛选通常是通过配... 核酸适配体是人工合成的短链核酸,作为分子识别元件,能够与各类靶标物质高特异性、高亲和力的结合,分为单链DNA和RNA两种类型。其中单链DNA适配体由于其稳定性比RNA适配体更好而更受欢迎,因此得到广泛应用。核酸适配体筛选通常是通过配体指数富集系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)实现的,筛选能否成功在很大程度上取决于其最关键的单链制备步骤,即将双链DNA转化为相应的单链DNA。目前,存在许多方法可以制备单链DNA,包括热变性法、生物素-链霉亲和素亲和分离法、变性胶电泳分离法、核酸外切酶消化法、不对称聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法等。本文在总结文献报道的基础上,具体阐述了各种单链DNA制备方法的原理、优缺点及近5年的应用情况,并对这些单链DNA制备方法进行了比较和展望,以期能为成功筛选各类靶标的核酸适配体提供参考。 展开更多
关键词 核酸适配体 DNA制备 热变性法 生物素-链霉亲和素亲和分离法 变性胶电泳分离法 核酸外切酶消化法 不对称聚合酶式反应
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5,5'-二硫代双(琥珀酰亚氨基-2-硝基苯甲酸)功能化的SERS纳米探针在免疫检验中的应用 被引量:1
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作者 陈雷 薛向欣 +3 位作者 崔运成 韩晓霞 徐蔚青 赵冰 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1505-1510,共6页
以5,5'-二硫代双(琥珀酰亚氨基-2-硝基苯甲酸)(DSNB)分子作为偶联剂将蛋白质结合在金纳米粒子表面,既保持了蛋白质的生物活性,同时DSNB分子又具有较高的表面增强拉曼散射(SERS)活性,可作为蛋白质定量分析的探针分子.选用生物素与亲... 以5,5'-二硫代双(琥珀酰亚氨基-2-硝基苯甲酸)(DSNB)分子作为偶联剂将蛋白质结合在金纳米粒子表面,既保持了蛋白质的生物活性,同时DSNB分子又具有较高的表面增强拉曼散射(SERS)活性,可作为蛋白质定量分析的探针分子.选用生物素与亲和素的特异性识别以及抗原抗体的免疫识别2个生物反应体系,将SERS纳米探针固定在蛋白质检测芯片上.以硅片为蛋白质检测载体,利用硅片在520 cm-1处的拉曼特征峰为内标,对人Ig G抗体进行定量分析.结果表明,该探针对人Ig G抗体检测的最低浓度可以达到5 pg/m L. 展开更多
关键词 表面增强拉曼散射 免疫检验 纳米探针 生物 亲和
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水产品中孔雀石绿BA-ELISA检测方法的建立及应用 被引量:5
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作者 杨光昕 苏悦 +5 位作者 李冰莲 孔聪 黄宣运 张璇 于慧娟 韩峰 《中国渔业质量与标准》 2019年第4期30-35,共6页
建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生... 建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生物素化抗体的稀释倍数均为1∶ 2 000,封闭液为1%明胶,抗原抗体反应时间为 60 min ,缓冲液的pH值为7.0,盐离子强度为0.1 mol/L。在此条件下,该方法的线性范围为0.05~20.00 ng/mL,检出限(LOD)为0.037 μg/kg,回收率为83.5%~115.0%,变异系数( CV )为4.53%~13.80%。将该方法用于实际样品的分析检测,检测结果与LC/MS相比,具有较好的相关性。上述结果表明,本实验建立的方法灵敏度高,特异性和稳定性较好,可用于水产品中MG的分析筛查。 展开更多
关键词 孔雀石绿 水产品 生物-亲和 酶联免疫吸附法
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基于磁性纳米颗粒和金纳米粒子构建DNA电化学生物传感技术 被引量:3
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作者 王小兰 郑静 +3 位作者 陈琛 汤亚泥 张帆 何品刚 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期477-480,共4页
本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测。该传感技术中,探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素,巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用,生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs... 本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测。该传感技术中,探针DNA的两端分别标记了巯基和生物素,巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用,生物素用于与磁性纳米颗粒(MNPs)表面修饰的链酶亲和素作用以达到富集的目的,之后利用SPCE进行电化学检测。无目标DNA存在时,双标记DNA保持茎环结构,使得生物素分子很难和MNPs上的亲和素接触。一旦加入目标DNA,茎环结构打开,生物素得以与MNPs上的链霉亲和素发生特异性结合,形成的复合物(MNPs-DNA-AuNPs)通过磁性富集到SPCE表面,从而获得AuNPs的电化学信号。该DNA电化学生物传感对单碱基错配有良好的分辨能力,完全互补DNA的检出限为8.0×10-13 mol/L。 展开更多
关键词 本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测.该传感技术中 探针DNA的两端分别标记了巯基和生物 巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用 生物用于与磁性纳米颗粒(MNPs)表面修饰的亲和作用以达到富集的目的 之后利用SPCE进行电化学检测.无目标DNA存在时 双标记DNA保持茎环结构 使得生物分子很难和MNPs上的亲和接触.一旦加入目标DNA 茎环结构打开 生物得以与MNPs上的亲和发生特异性结合 形成的复合物(MNPs-DNA-AuNPs)通过磁性富集到SPCE表面 从而获得AuNPs的电化学信号.该DNA电化学生物传感对单碱基错配有良好的分辨能力 完全互补DNA的检出限为8 0×10-13 mol L.本文构建了一种基于纳米粒子、茎环DNA和丝网印刷电极(SPCE)的电化学生物传感技术用于乳腺癌基因的快速、灵敏检测.该传感技术中 探针DNA的两端分别标记了巯基和生物 巯基用于与金纳米粒子(AuNPs)作用 生物用于与磁性纳米颗粒(MNPs)表面修饰的亲和作用以达到富集的目的 之后利用SPCE进行电化学检测.无目标DNA存在时 双标记DNA保持茎环结构 使得生物分子很难和MNPs上的亲和接触.一旦加入目标DNA 茎环结构打开 生物得以与MNPs上的亲和发生特异性结合 形成的复合物(MNPs-DNA-AuNPs)通过磁性富集到SPCE表面 从而获得AuNPs的电化学信号.该DNA电化学生物传感对单碱基错配有良好的分辨能力 完全互补DNA的检出限为8 0×10-13 mol L.磁性纳米颗粒 金纳米粒子 DNA 丝网印刷电极
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基于腐蚀型光纤布喇格光栅的生物传感器
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作者 周雨萌 赵春柳 郎婷婷 《光通信技术》 北大核心 2016年第2期43-45,共3页
提出了一种将光纤传感技术与生物反应放大技术相结合的方案,实现了链酶亲和素浓度的检测。该方案采用硅烷偶联的方法对光纤进行表面改性,结合生物素-亲和素反应放大系统对生物浓度信号进行放大,并采用腐蚀型光纤布喇格光栅结构作为敏感... 提出了一种将光纤传感技术与生物反应放大技术相结合的方案,实现了链酶亲和素浓度的检测。该方案采用硅烷偶联的方法对光纤进行表面改性,结合生物素-亲和素反应放大系统对生物浓度信号进行放大,并采用腐蚀型光纤布喇格光栅结构作为敏感元件将生物浓度信号转换为光信号进行表达。该传感器对目标物质具有特异性吸附能力,表明该传感器能准确识别链霉亲和素,在0mg/m L^1.0mg/m L浓度下灵敏度可达0.5452nm/mg/m L,能实现定量测量,在抗原抗体检测、蛋白质检测等领域有较好的应用前景。 展开更多
关键词 亲和 光纤布喇格光栅 生物传感器
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基于磁珠的可见光检测微阵列信号的新方法 被引量:6
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作者 郭永刚 张冠斌 +3 位作者 熊强 郭旻 邢婉丽 程京 《分析科学学报》 CAS CSCD 2007年第1期1-4,共4页
以磁珠作为标记物,提出了一种在微阵列上检测核酸的新方法。该法基于生物素同链霉亲和素的亲和作用,利用磁珠的超顺磁性和宏观可见特性,使得杂交结果可在普通的光学显微镜或放大镜下检测,甚至肉眼可见。以合成探针为对照,用参比荧光标... 以磁珠作为标记物,提出了一种在微阵列上检测核酸的新方法。该法基于生物素同链霉亲和素的亲和作用,利用磁珠的超顺磁性和宏观可见特性,使得杂交结果可在普通的光学显微镜或放大镜下检测,甚至肉眼可见。以合成探针为对照,用参比荧光标记染料Cy3标记方法,对这种新方法的检出限进行了研究,并在此基础上采用大肠杆菌16s rDNA的PCR产物作为样品,进行了细菌检测的尝试,取得了较好的实验结果。本法所得的实验结果易于观测,无需采用大型的荧光检测仪器,因而大大降低了检测成本,与其它可见光检测方法(如金胶银染等)相比,具有方便、快捷的特点。这种新方法在传染病检测和环境监测中将具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 磁珠 微阵列 亲和 生物
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国际科技资讯
12
《乳业科学与技术》 2021年第6期I0016-I0017,共2页
中国研究用核磁共振生物传感器快速检测牛乳中沙门氏菌快速、灵敏地检测食源性病原体对食品安全具有重要意义。中国研究人员研制了一套核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)生物传感器,该生物传感器基于链霉亲和素(streptavidin,S... 中国研究用核磁共振生物传感器快速检测牛乳中沙门氏菌快速、灵敏地检测食源性病原体对食品安全具有重要意义。中国研究人员研制了一套核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)生物传感器,该生物传感器基于链霉亲和素(streptavidin,SA)-生物素体系和邻羧甲基壳聚糖(O-carboxymethyl chitosan,O-CMC)靶标、元素钊(gadolinium,Gd)探针,将NMR技术、生物免疫技术与膜过滤技术相结合,快速检测牛乳中沙门氏菌。 展开更多
关键词 生物传感器 食源性病原体 科技资讯 羧甲基壳聚糖 亲和 食品安全 核磁共振 膜过滤
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