CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测方法的建立 被引量：3

1

作者 曾昭伟 王学谦 李会强 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第9期1675-1678,共4页

目的:建立CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法,进行方法学评价。方法:纯化卵巢癌患者腹水得到CA125抗原,制备生物素化CA125抗体,酶标板包被生物素化BSA,建立BA-ELISA反应系统。观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定... 目的:建立CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法,进行方法学评价。方法:纯化卵巢癌患者腹水得到CA125抗原,制备生物素化CA125抗体,酶标板包被生物素化BSA,建立BA-ELISA反应系统。观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定性等指标。测定卵巢癌患者以及卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,与化学发光免疫检测结果对比。结果:BA-ELISA方法灵敏度为3.18U/L,与CEA、PSA等交叉反应率低;高低浓度样品平均回收率分别为107.11%、99.96%,批内和批间变异分别为7.97%、8.04%,稳定性好。本研究与化学发光免疫检测检出结果差异无统计学意义,检测卵巢癌患者血清CA125水平,回归方程为y=-6.830+1.014x,r=0.993。检测卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,回归方程为y=1.936+0.937x,r=0.986。结论:BA-ELISA检测方法的建立在诊断卵巢癌等方面灵敏度高、特异性强,操作简便,无需昂贵仪器,适合广泛应用。 展开更多

关键词 CA-125抗原 生物素-亲和素酶联免疫法 卵巢癌 化学发光

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生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法测定甲氨蝶呤 被引量：2

2

作者 牟方祥 王恒 +4 位作者 吴红 邹德生 邹庆华 万萍 方勇飞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1044-1046,共3页

目的将生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法（BA-c ELISA）引入甲氨蝶呤血药浓度检测,建立一种快速、简便、敏感、特异的甲氨蝶呤检测方法。方法将NH2活性生物素与MTX单抗Ig G化学连接,采用亲和素-HRP酶标记系统,建立放大竞争酶联... 目的将生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法（BA-c ELISA）引入甲氨蝶呤血药浓度检测,建立一种快速、简便、敏感、特异的甲氨蝶呤检测方法。方法将NH2活性生物素与MTX单抗Ig G化学连接,采用亲和素-HRP酶标记系统,建立放大竞争酶联免疫吸附法,连续制备5批试剂盒,对试剂盒进行批内批间精密度、敏感性、特异性、准确性和稳定性进行验证,检测口服MTX的类风湿关节炎患者血清MTX浓度,并对其检测结果进行判定。结果建立的生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法测定甲氨蝶呤的方法具有很好的敏感性和特异性,检测MTX的灵敏度达到0.087 ng/m L,检测下限为0.137 ng/m L,检测线性范围为0.1~10 ng/m L;批内RSD为3.3%~8.7%,平均批内差异为6.5%,批间RSD为7.6%~9.9%,重复性教好,检测回收率为94.2%~112.8%。结论生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法检测MTX,操作简单,具有较好的灵敏度和特异性。 展开更多

关键词 甲氨蝶呤 生物素 亲和素 放大竞争酶联免疫吸附法

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圆斑酶联免疫吸附试验诊断囊虫病——生物素-亲和素酶复合物在该方法中的应用 被引量：1

3

作者 吕刚 《海南医学院学报》 CAS 1999年第4期153-155,共3页

目的：应用生物素－亲和素－酶复合物系统，建立一种繁感、特异、经济简便的囊虫病血清学诊断。方法：生物素－亲和素－酶复合物圆斑酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、滤纸血斑ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。结果：ＡＢ... 目的：应用生物素－亲和素－酶复合物系统，建立一种繁感、特异、经济简便的囊虫病血清学诊断。方法：生物素－亲和素－酶复合物圆斑酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、滤纸血斑ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。结果：ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ 诊断囊虫病，检出率（９５．９２％ ）远较圆斑酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）高８３．６７％ ，平均几何滴度（１∶２ ８０１．７３）约为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（１∶５８７．２６）的５ 倍；用该方法对４℃条件下保存３ 月的患者滤纸血斑样本进行检测，阳性率为９４．７４％ （５４／５７），无假阳性反应（０／４５）；对相同患者血清和滤纸血斑双份血样进行检测，阳性率均为９０％ （２０／２２）。结论：该方法提高了检出率，简化了采样及送样程序，适合于边远地区和用于流行病学调查。 展开更多

关键词 囊尾蚴病 诊断 生物素-亲和素-酶复合物 圆斑酶联免疫吸附试验

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基于生物素化纳米抗体的果蔬中百草枯超灵敏免疫检测方法研究 被引量：1

4

作者 张咏仪 杨金易 +5 位作者 曾道平 徐振林 王弘 田元新 孙远明 沈玉栋 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1959-1964,共6页

通过纳米抗体活性口袋生物素化修饰实现识别活性提升,并以生物素化纳米抗体(Biotin-Nb2-12)作为识别元件,结合生物素-多聚辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(polyHRP-SA)亲和识别信号系统,建立了检测果蔬中百草枯的生物素-链霉亲和素酶联... 通过纳米抗体活性口袋生物素化修饰实现识别活性提升,并以生物素化纳米抗体(Biotin-Nb2-12)作为识别元件,结合生物素-多聚辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(polyHRP-SA)亲和识别信号系统,建立了检测果蔬中百草枯的生物素-链霉亲和素酶联免疫分析方法(BA-ELISA)。经多参数系统优化,所建方法的检出限(LOD)达0.58 pg/mL,半数抑制浓度(IC_(50))为14.1 pg/mL,线性范围为1.7~116.2 pg/mL,且与功能及结构类似物无显著交叉反应。相比传统间接竞争酶联免疫分析方法(icELISA),该法的IC_(50)提高了85倍,抗体消耗量降低至1/8,在大白菜和雪梨样品中的平均加标回收率为94.5%~116%,可用于果蔬中百草枯的痕量检测。 展开更多

关键词 百草枯 生物素化纳米抗体 生物素-链霉亲和素 酶联免疫分析 大白菜 梨

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人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立 被引量：6

5

作者 杨静 曾昭伟 +3 位作者 王学谦 赵倩 孙辉 李会强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期871-873,875,共4页

目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-... 目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)。对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行鉴定,并和常规ELISA、放射免疫检测以及化学发光法相比较检测了临床标本中的CEA浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50)U/mL,检测结果表明,体系稳定性良好;灵敏度为0.42 U/mL,批内、批间差异均小于10.0%。该研究建立的方法与常规ELISA对比差异有统计学意义,与放射免疫检测对比差别无统计学意义。与化学发光法相比较,回归方程为:y=0.04825+0.99674x,r=0.994,差异无统计学意义。结论:建立的CEA的BA-ELISA检测方法易于操作、灵敏度高、价格低廉,适合应用于临床检测。 展开更多

关键词 癌胚抗原 乳腺癌 生物素-亲和素酶联免疫吸附法 生物素 亲和素

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基于衍生化3-氨基-2-恶唑烷酮的夹心酶联免疫分析 被引量：2

6

作者 张世伟 吴会玲 +6 位作者 周迎春 王炳志 杨星星 杜业刚 汤璐 冯荣虎 郭继平 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期271-276,共6页

建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗... 建立一种3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ)夹心免疫检测方法。通过1,6-己二醇连接2-硝基-4-羧基苯甲醛和生物素合成针对AOZ的新型衍生试剂。在样品前处理时加入衍生试剂可对AOZ进行衍生,衍生产率为89%。在酶标板上包被抗AOZ单克隆抗体并以辣根过氧化物酶标记的亲和素或抗生物素抗体作为第二结合物可实现AOZ的夹心酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)。从实际应用的角度,得到双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下两个表位的极限距离,分别为12Å和13Å,理想距离分别为16Å和17Å。在双抗夹心和抗体-亲和素夹心模式下的检出限分别达到1.8 pg/mL和0.8 pg/mL(以AOZ质量浓度计),相对于竞争ELISA,其灵敏度最高提高了25倍。平均回收率为73%~85%,平均相对标准偏差为9.0%。 展开更多

关键词 3-氨基-2-恶唑烷酮 夹心酶联免疫分析 表位间隔距离 辣根过氧化物酶标记亲和素

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检测牛乳样品生物素酶联免疫吸附法特异性高于间接酶联免疫吸附法

7

《中国乳业》 2011年第4期42-42,共1页

印度DRKalorey等人用高纯度李斯特溶血素O作为抗原，通过与细菌学检查作比较，评估检测牛乳样品中单增李斯特菌抗体的间接酶联免疫吸附法（1ndirect ELISA）和生物素酶联免疫吸附法（A—BELISA）。

关键词 酶联免疫吸附法 生物素 间接 样品 牛乳 检测 异性 单增李斯特菌

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高灵敏度人促甲状腺激素(hTSH)酶联免疫分析试剂盒 被引量：5

8

作者 官国英 韩世泉 +3 位作者 王玉肖 刘一兵 王晶晶 刘挺 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 2002年第2期129-133,共5页

以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒... 以辣根过氧化物酶标记链亲合素 (SA) ,二株识别人促甲状腺激素 (hTSH)高度特异的单克隆抗体分别用于包被微孔和生物素化 ,以四甲基联苯胺 (TMB)为底物 ,建立了高灵敏度人促甲状腺激素生物素 亲合素酶联免疫分析 (sTSH BA ELISA)试剂盒的制备方法。本试剂盒的灵敏度为 0 0 2mIU/L ,批内变异系数 <7 8% ,批间变异系数 <9 6% ,回收率为 93 3 %～ 1 0 7 8% ,特异性鉴定显示与其它糖蛋白激素 (如FSH ,HCG ,LH)无明显的交叉反应性。正常参考值范围为 0 3～ 4 1mIU/L。本法所制备的试剂盒与中国原子能科学研究院同位素研究所的TSH IRMA试剂盒的相关方程为 y =1 .2xIRMA+0 1 4,相关系数r =0 969。本试剂盒较常规ELISA灵敏度高、简便、快速 。 展开更多

关键词 人促甲状腺激素 生物素-亲合素系统 酶联免疫分析 放射性检测 TSH-IRMA试剂盒 临床检测

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抗亲和素鼠单克隆抗体增强亲和素-生物素免疫技术和免疫组织学染色的敏感性

9

作者 W.F.Cassano 张红毅 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期64-64,共1页

亲和素、生物素已应用于增加传统免疫酶方法的敏感性。但有时发现在检测微量抗原时，敏感性依然不够。为此，作者建立了几株抗卵清和素糖蛋白的鼠单抗，通过选择性扩大ABC复合物，增加底物信号，增强亲和素一生物素免疫测定法的敏感性。

关键词 免疫组织学染色 亲和素-生物素 敏感性 鼠单克隆抗体 免疫技术 免疫测定法 微量抗原 免疫酶 鼠单抗 糖蛋白 复合物 ABC

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己烯雌酚酶联免疫检测方法的建立 被引量：11

10

作者 邴爱英 成连贵 +1 位作者 褚新星 牛钟相 《西南农业学报》 CSCD 2006年第6期1159-1161,共3页

建立灵敏度高和特异性强的己烯雌酚残留检测分析方法。用人工合成的己烯雌酚免疫原多次免疫家兔，获取高效价抗体。纯化抗体经生物素标记，可同辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素特异结合。采用纯化的抗体包被96孔板，形成固相抗体。... 建立灵敏度高和特异性强的己烯雌酚残留检测分析方法。用人工合成的己烯雌酚免疫原多次免疫家兔，获取高效价抗体。纯化抗体经生物素标记，可同辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素特异结合。采用纯化的抗体包被96孔板，形成固相抗体。加入不同浓度的己烯雌酚标准品后，再加入生物素标记抗体，以酶标记亲和素作为探针，经酶底物显色反应可获得良好的ELISA标准曲线。该方法检测灵敏度为0．125ng／mL，可定量检测范围为0．25～15．60ng／mL。该方法操作简便，具有较强灵敏度和特异性，可满足实践中一般样品的残留检测。 展开更多

关键词 己烯雌酚 酶联免疫分析 生物素-亲和素

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BA-ELISA法快速检测农产品中阿特拉津残留

11

作者 胡刘岭 金靓怡 +2 位作者 李瑞韩 刘重阳 宋洋 《天津师范大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期49-53,共5页

为快速检测阿特拉津在农产品中的残留,基于其单克隆抗体,建立了间接竞争生物素/亲和素酶联免疫法(BA-ELISA).选择黄瓜、玉米、甘蔗作为样品,用乙腈提取3种样品,将得到的提取液经PSA净化后,旋蒸至近干,并用甲醇定容.对提取液作不同倍数... 为快速检测阿特拉津在农产品中的残留,基于其单克隆抗体,建立了间接竞争生物素/亲和素酶联免疫法(BA-ELISA).选择黄瓜、玉米、甘蔗作为样品,用乙腈提取3种样品,将得到的提取液经PSA净化后,旋蒸至近干,并用甲醇定容.对提取液作不同倍数的稀释,以消除复杂基质的影响.采用BA-ELISA法测定样品中的阿特拉津含量,并与气相色谱(GC)法对比.结果显示:最优反应体系中,BA-ELISA法的检测限为0.52±0.13μg/L,灵敏度为12.24±1.28μg/L;添加回收实验中,3种样品的阿特拉津回收率在93.07%~99.67%之间,变异系数在1.5%~6.7%之间,检测时间在1 h左右.该方法的检测结果与GC法基本一致,表明BA-ELISA法可以实现农产品中阿特拉津残留的快速测定. 展开更多

关键词 阿特拉津 快速测定 生物素/亲和素酶联免疫(BA-ELISA)

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免疫-PCR法检测柯萨奇病毒B组抗原的实验研究 被引量：1

12

作者 凌伟 沈茜 +2 位作者 王靖 徐玉莲 许育 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期264-266,共3页

目的 :建立免疫 - PCR法 ,对分离培养的柯萨奇 B组病毒 (Cox B)毒株及临床可疑为 Cox B感染的血清标本进行检测。方法 :以间日疟原虫 SSU r RNA基因为指示分子 ,采用生物素进行末端标记 ,利用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)和 PCR原理 ,建... 目的 :建立免疫 - PCR法 ,对分离培养的柯萨奇 B组病毒 (Cox B)毒株及临床可疑为 Cox B感染的血清标本进行检测。方法 :以间日疟原虫 SSU r RNA基因为指示分子 ,采用生物素进行末端标记 ,利用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)和 PCR原理 ,建立免疫 - PCR法 ,并对 6 0份临床标本进行检测。 结果 :该方法具有较高敏感性和特异性 ,其敏感性是 EL ISA法的 3 0 0 0倍 ,也高出 RT- PCR法 10倍。 结论 :免疫 - PCR法是检测 Cox B抗原的敏感而特异的方法 ,为 Cox B的临床早期快速鉴定和流行病学研究等提供了一种新的微量抗原检测手段。 展开更多

关键词 免疫-PCR 柯萨奇病毒B组 生物-亲和素 酶联免疫吸附 试验 抗原

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检测猪瘟病毒抗原的酶联免疫试验

13

作者 邱昌庆 《畜牧兽医科技信息》 2000年第5期11-12,共2页

加拿大学者Clavijo.A等建立了一种抗原捕捉酶测定法(CIA),用于直接从10％(W/V)组织悬液中检测古典猪瘟病毒(CSFV)抗原。建立本方法是以夹心法为基础,使用以生物素标记单克隆抗体。

关键词 猪瘟病毒抗原 酶联免疫 病毒分离 古典猪瘟病毒 标记单克隆抗体 酶测定法 生物素 非洲猪瘟病毒 夹心法 种抗原

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二恶英类物质的生物检测方法 被引量：19

14

作者 王承智 胡筱敏 +2 位作者 石荣 祁国恕 李锐 《中国安全科学学报》 CAS CSCD 2006年第5期135-140,共6页

我国的食品卫生、环境安全和公共健康正受到二恶英污染的威胁。国内虽已建成或在建少数HRGC-HRMS二恶英检测实验室,但其检测能力十分有限。笔者介绍二恶英类化合物生物检测方法,对各分析方法的原理和应用进行了对比分析;重点探讨CALUX法... 我国的食品卫生、环境安全和公共健康正受到二恶英污染的威胁。国内虽已建成或在建少数HRGC-HRMS二恶英检测实验室,但其检测能力十分有限。笔者介绍二恶英类化合物生物检测方法,对各分析方法的原理和应用进行了对比分析;重点探讨CALUX法,与HRGC-HRMS及其他生物法相比,认为CALUX法更适于对大批量样品二恶英含量的快速定量筛选,对于二恶英污染调查有广阔的应用前景;同时对我国开展二恶英类分析检测提出了建议和展望,为完善二恶英类物质检测分析体系提供了依据。 展开更多

关键词 二恶英类 检测方法 生物法(BioA) 免疫法 高分辨气相色谱-质谱联用 荧光素酶报告基因法

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类风湿关节炎治疗前后血清基质金属蛋白酶-3的变化 被引量：4

15

作者 梁柳琴 詹钟平 +3 位作者 邱茜 叶玉津 许韩师 杨岫岩 《实用医学杂志》 CAS 2008年第11期1901-1903,共3页

目的:检测活动期类风温关节炎(RA)患者治疗前后血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平,探讨MMP-3在RA中的作用,为RA的疗效判断寻找新的指标。方法:分别检测45例RA患者和20例健康体检者血清MMP-3水平。MMP-3检测采用酶联免疫吸附法(ELISA)。结... 目的:检测活动期类风温关节炎(RA)患者治疗前后血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平,探讨MMP-3在RA中的作用,为RA的疗效判断寻找新的指标。方法:分别检测45例RA患者和20例健康体检者血清MMP-3水平。MMP-3检测采用酶联免疫吸附法(ELISA)。结果:治疗前活动期RA患者血清MMP-3水平为(372.34±198.24)ng/mL,显著高于正常对照组的(27.46±16.83)ng/mL(P<0.001)。治疗前活动期RA患者血清MMP-3水平与DAS评分呈正相关关系(r=0.526,P<0.05)。治疗后MMP-3水平下降,其中病情缓解者下降差异有显著性[(361.27±193.83)ng/mLvs(192.52±107.33)ng/mL,P<0.05];进一步的相关分析显示,治疗后MMP-3的降低水平与DAS评分下降值亦呈正相关关系(r=0.493,P<0.05)。结论:RA患者血清MMP-3水平显著升高,可作为疾病活动性指标之一,并可作为了解RA治疗效果和预后评估的重要手段。 展开更多

关键词 关节炎 类风湿 基质溶解素1 基质金属蛋白酶-3 酶联免疫吸附法

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水产品中孔雀石绿BA-ELISA检测方法的建立及应用 被引量：7

16

作者 杨光昕 苏悦 +5 位作者 李冰莲 孔聪 黄宣运 张璇 于慧娟 韩峰 《中国渔业质量与标准》 2019年第4期30-35,共6页

建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生... 建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生物素化抗体的稀释倍数均为1∶ 2 000,封闭液为1%明胶,抗原抗体反应时间为 60 min ,缓冲液的pH值为7.0,盐离子强度为0.1 mol/L。在此条件下,该方法的线性范围为0.05~20.00 ng/mL,检出限(LOD)为0.037 μg/kg,回收率为83.5%~115.0%,变异系数( CV )为4.53%~13.80%。将该方法用于实际样品的分析检测,检测结果与LC/MS相比,具有较好的相关性。上述结果表明,本实验建立的方法灵敏度高,特异性和稳定性较好,可用于水产品中MG的分析筛查。 展开更多

关键词 孔雀石绿 水产品 生物素-链霉亲和素 酶联免疫吸附法

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BA-ELISA法对食品中克百威残留的高效测定 被引量：1

17

作者 朱文博 赵凌燕 +1 位作者 王敏思 宋洋 《天津师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2022年第4期59-63,共5页

为了简单、快速、准确地检测水果及其制品中的克百威农药残留,基于单克隆抗体,建立了间接竞争生物素/亲和素酶联免疫分析方法(BA-ELISA).以苹果、苹果汁、橙子、橙汁为样品原材料,采用乙腈提取、旋蒸、甲醇复溶等简单前处理,用0.5%的FG-... 为了简单、快速、准确地检测水果及其制品中的克百威农药残留,基于单克隆抗体,建立了间接竞争生物素/亲和素酶联免疫分析方法(BA-ELISA).以苹果、苹果汁、橙子、橙汁为样品原材料,采用乙腈提取、旋蒸、甲醇复溶等简单前处理,用0.5%的FG-PBS稀释20倍以基本消除基质影响,用BA-ELISA法测定样品中的克百威含量,同时优化检测条件并对该方法进行评价.结果表明,BA-ELISA检测方法的标准曲线检测限为(0.082±0.002)μg/L,灵敏度为(0.265±0.010)μg/L. 4种水果及其制品中的克百威在3种不同加标浓度水平下的添加回收率为90.20%~99.83%,变异系数为1.8%~6.3%,检测时间缩短至1 h.以气相色谱法作为对照,BA-ELISA法对克百威含量的测定较为准确,可作为水果中检测克百威残留的技术手段. 展开更多

关键词 水果 克百威 快速检测 生物素/亲和素酶联免疫(BA-ELISA)

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制备醛固酮多克隆抗体建立检测血浆醛固酮的化学发光免疫分析法

18

作者 冯婷婷 杨超一 +1 位作者 张雪峰 王斌 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期65-70,共6页

目的:制备可用于免疫分析的醛固酮(ALD)多克隆抗体,并建立基于生物素-链霉亲和素放大系统的ALD化学发光免疫分析方法,用于测定人血液中的ALD含量。方法:对ALD进行化学改造,制备醛固酮肟,再与BSA偶联制备免疫原,免疫兔,制备抗ALD多克隆... 目的:制备可用于免疫分析的醛固酮(ALD)多克隆抗体,并建立基于生物素-链霉亲和素放大系统的ALD化学发光免疫分析方法,用于测定人血液中的ALD含量。方法:对ALD进行化学改造,制备醛固酮肟,再与BSA偶联制备免疫原,免疫兔,制备抗ALD多克隆抗体。以生物素-链霉亲和素放大系统采用竞争法建立ALD化学发光免疫分析方法。结果:经检测免疫的3号兔获得的抗ALD抗体灵敏度最高,50%抑制率(IC50)ALD浓度是268 pg/ml。用该抗体建立的化学发光免疫分析法的检测范围为62.5~2 000 pg/ml,灵敏度为23.7 pg/ml,批内变异系数为6.9%~9.5%,批间变异系数为8.5%~12.7%,回收率范围为93.1%~104.1%,稀释实验测定值与理论值呈线性相关,相关系数为r=0.996,与放射免疫分析试剂盒的相关性方程分别为y=0.932x+4.596,相关系数r=0.948(n=95)。结论:建立的检测ALD的化学发光免疫分析法符合临床应用的基本要求。 展开更多

关键词 醛固酮(ALD) 多克隆抗体 生物素-链霉亲和素系统 化学发光免疫分析法

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嗜水气单胞菌BA-ELISA的建立及其在病原检测中的应用 被引量：15

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作者 胡大雁 钱冬 +3 位作者 刘问 张友平 潘清清 陈昌福 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期80-85,共6页

从中华鳖中分离的嗜水气单胞菌致病株T0608经福尔马林灭活后,注射免疫新西兰兔,制备了高价免疫血清,血清的菌体凝集效价可达1/1 280;G蛋白亲和层析纯化兔IgG,将IgG用生物素标记,建立了生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法(BA-ELISA)... 从中华鳖中分离的嗜水气单胞菌致病株T0608经福尔马林灭活后,注射免疫新西兰兔,制备了高价免疫血清,血清的菌体凝集效价可达1/1 280;G蛋白亲和层析纯化兔IgG,将IgG用生物素标记,建立了生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法(BA-ELISA);其最低检出限为2.5×103cfu,相当于0.5 ng菌体蛋白,其检测灵敏度为ABC-ELISA(4.0×104cfu)和间接ELISA(4.0×104cfu)的16倍;特异性试验结果表明,本法与鱼类气单胞菌、拟态弧菌、海豚链球菌、大肠杆菌等无交叉反应。BA-ELISA可不经细菌培养直接检测人工感染48 h中华鳖的肝、肠道组织中的嗜水气单胞菌。用该方法对湖州市龟鳖养殖场的水样、中华鳖和巴西龟肝、肠道内容物进行检测,结果表明该方法可较好地应用于发病中华鳖的病原早期诊断及养殖中华鳖的病原检测。 展开更多

关键词 生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法 中华鳖 嗜水气单胞菌 检测

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^(125)I放射性粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤的有效性研究 被引量：2

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作者 宋琦 刘玉 +3 位作者 王忠敏 黄蔚 陆健 陈克敏 《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2010年第10期795-799,共5页

目的探讨125I放射性粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤的疗效及其作用机制。方法人胰腺癌SW1990细胞株接种于BABL/c裸鼠右下肢旁腹股沟区偏背侧皮下,成瘤后取瘤块接种,6周后成瘤8～10mm。共16只成瘤大小合适的裸鼠用于实验,分别植入... 目的探讨125I放射性粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤的疗效及其作用机制。方法人胰腺癌SW1990细胞株接种于BABL/c裸鼠右下肢旁腹股沟区偏背侧皮下,成瘤后取瘤块接种,6周后成瘤8～10mm。共16只成瘤大小合适的裸鼠用于实验,分别植入125I粒子(8只)和空载粒子(8只)。粒子植入后,每4天测量肿瘤的长径和短径并称裸鼠体重,裸鼠处死后称量瘤体重。瘤体标本行组织病理学检查、末端脱氧核苷酸转移酶-生物素dUTP切口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞及免疫组化染色检测增殖细胞核抗原。结果 125I粒子治疗组肿瘤体积增长缓慢,而对照组肿瘤体积增长迅速。实验组和对照组瘤体重分别约(2.68±0.70)g和(4.68±1.45)g,两者的差异有统计学意义(P=0.021);抑瘤率约42.66%。粒子植入前、后实验组和对照组间裸鼠体重对比差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组肿瘤细胞坏死明显,而对照组肿瘤细胞无明显或仅有少许坏死。TUENL法检查发现实验组和对照组的凋亡指数分别为(23.2±1.9)%和(8.1±1.5)%,两者的差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组化染色发现:实验组及对照组增殖细胞核抗原(PCNA)阳性染色指数分别为(49.8±1.8)%和(82.2±2.4)%,两者的差异有统计学意义(P<0.01)。裸鼠心、肝、肺、肾及脾脏等组织无明显放射性炎症表现。结论 125I粒子组织间植入治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤是有效的,其作用机制包括:直接杀伤肿瘤细胞、诱导肿瘤细胞凋亡及降低细胞增殖,并且125I粒子植入瘤体内对周围脏器是安全的。 展开更多

关键词 125I粒子 短距离放疗 胰腺癌 末端脱氧核糖核苷酸转移酶-生物素dUTP切口末端标记法 免疫组织化学 磁共振

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