生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法测定甲氨蝶呤 被引量：2

1

作者 牟方祥 王恒 +4 位作者 吴红 邹德生 邹庆华 万萍 方勇飞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1044-1046,共3页

目的将生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法（BA-c ELISA）引入甲氨蝶呤血药浓度检测,建立一种快速、简便、敏感、特异的甲氨蝶呤检测方法。方法将NH2活性生物素与MTX单抗Ig G化学连接,采用亲和素-HRP酶标记系统,建立放大竞争酶联... 目的将生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法（BA-c ELISA）引入甲氨蝶呤血药浓度检测,建立一种快速、简便、敏感、特异的甲氨蝶呤检测方法。方法将NH2活性生物素与MTX单抗Ig G化学连接,采用亲和素-HRP酶标记系统,建立放大竞争酶联免疫吸附法,连续制备5批试剂盒,对试剂盒进行批内批间精密度、敏感性、特异性、准确性和稳定性进行验证,检测口服MTX的类风湿关节炎患者血清MTX浓度,并对其检测结果进行判定。结果建立的生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法测定甲氨蝶呤的方法具有很好的敏感性和特异性,检测MTX的灵敏度达到0.087 ng/m L,检测下限为0.137 ng/m L,检测线性范围为0.1~10 ng/m L;批内RSD为3.3%~8.7%,平均批内差异为6.5%,批间RSD为7.6%~9.9%,重复性教好,检测回收率为94.2%~112.8%。结论生物素-亲和素偶联放大竞争酶联免疫吸附法检测MTX,操作简单,具有较好的灵敏度和特异性。 展开更多

关键词 甲氨蝶呤 生物素 亲和素 放大竞争酶联免疫吸附法

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圆斑酶联免疫吸附试验诊断囊虫病——生物素-亲和素酶复合物在该方法中的应用 被引量：1

2

作者 吕刚 《海南医学院学报》 CAS 1999年第4期153-155,共3页

目的：应用生物素－亲和素－酶复合物系统，建立一种繁感、特异、经济简便的囊虫病血清学诊断。方法：生物素－亲和素－酶复合物圆斑酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、滤纸血斑ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。结果：ＡＢ... 目的：应用生物素－亲和素－酶复合物系统，建立一种繁感、特异、经济简便的囊虫病血清学诊断。方法：生物素－亲和素－酶复合物圆斑酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、滤纸血斑ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。结果：ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ 诊断囊虫病，检出率（９５．９２％ ）远较圆斑酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）高８３．６７％ ，平均几何滴度（１∶２ ８０１．７３）约为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（１∶５８７．２６）的５ 倍；用该方法对４℃条件下保存３ 月的患者滤纸血斑样本进行检测，阳性率为９４．７４％ （５４／５７），无假阳性反应（０／４５）；对相同患者血清和滤纸血斑双份血样进行检测，阳性率均为９０％ （２０／２２）。结论：该方法提高了检出率，简化了采样及送样程序，适合于边远地区和用于流行病学调查。 展开更多

关键词 囊尾蚴病 诊断 生物素-亲和素-酶复合物 圆斑酶联免疫吸附试验

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CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测方法的建立 被引量：3

3

作者 曾昭伟 王学谦 李会强 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第9期1675-1678,共4页

目的:建立CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法,进行方法学评价。方法:纯化卵巢癌患者腹水得到CA125抗原,制备生物素化CA125抗体,酶标板包被生物素化BSA,建立BA-ELISA反应系统。观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定... 目的:建立CA125的生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法,进行方法学评价。方法:纯化卵巢癌患者腹水得到CA125抗原,制备生物素化CA125抗体,酶标板包被生物素化BSA,建立BA-ELISA反应系统。观察本方法的灵敏度、回收率、特异度、稳定性等指标。测定卵巢癌患者以及卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,与化学发光免疫检测结果对比。结果:BA-ELISA方法灵敏度为3.18U/L,与CEA、PSA等交叉反应率低;高低浓度样品平均回收率分别为107.11%、99.96%,批内和批间变异分别为7.97%、8.04%,稳定性好。本研究与化学发光免疫检测检出结果差异无统计学意义,检测卵巢癌患者血清CA125水平,回归方程为y=-6.830+1.014x,r=0.993。检测卵巢良性肿瘤患者血清CA125水平,回归方程为y=1.936+0.937x,r=0.986。结论:BA-ELISA检测方法的建立在诊断卵巢癌等方面灵敏度高、特异性强,操作简便,无需昂贵仪器,适合广泛应用。 展开更多

关键词 CA-125抗原 生物素-亲和素酶联免疫法 卵巢癌 化学发光

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检测牛乳样品生物素酶联免疫吸附法特异性高于间接酶联免疫吸附法

4

《中国乳业》 2011年第4期42-42,共1页

印度DRKalorey等人用高纯度李斯特溶血素O作为抗原，通过与细菌学检查作比较，评估检测牛乳样品中单增李斯特菌抗体的间接酶联免疫吸附法（1ndirect ELISA）和生物素酶联免疫吸附法（A—BELISA）。

关键词 酶联免疫吸附法 生物素 间接 样品 牛乳 检测 异性 单增李斯特菌

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人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立 被引量：6

5

作者 杨静 曾昭伟 +3 位作者 王学谦 赵倩 孙辉 李会强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期871-873,875,共4页

目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-... 目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)。对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行鉴定,并和常规ELISA、放射免疫检测以及化学发光法相比较检测了临床标本中的CEA浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50)U/mL,检测结果表明,体系稳定性良好;灵敏度为0.42 U/mL,批内、批间差异均小于10.0%。该研究建立的方法与常规ELISA对比差异有统计学意义,与放射免疫检测对比差别无统计学意义。与化学发光法相比较,回归方程为:y=0.04825+0.99674x,r=0.994,差异无统计学意义。结论:建立的CEA的BA-ELISA检测方法易于操作、灵敏度高、价格低廉,适合应用于临床检测。 展开更多

关键词 癌胚抗原 乳腺癌 生物素-亲和素酶联免疫吸附法 生物素 亲和素

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基于生物素化纳米抗体的果蔬中百草枯超灵敏免疫检测方法研究 被引量：1

6

作者 张咏仪 杨金易 +5 位作者 曾道平 徐振林 王弘 田元新 孙远明 沈玉栋 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1959-1964,共6页

通过纳米抗体活性口袋生物素化修饰实现识别活性提升,并以生物素化纳米抗体(Biotin-Nb2-12)作为识别元件,结合生物素-多聚辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(polyHRP-SA)亲和识别信号系统,建立了检测果蔬中百草枯的生物素-链霉亲和素酶联... 通过纳米抗体活性口袋生物素化修饰实现识别活性提升,并以生物素化纳米抗体(Biotin-Nb2-12)作为识别元件,结合生物素-多聚辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(polyHRP-SA)亲和识别信号系统,建立了检测果蔬中百草枯的生物素-链霉亲和素酶联免疫分析方法(BA-ELISA)。经多参数系统优化,所建方法的检出限(LOD)达0.58 pg/mL,半数抑制浓度(IC_(50))为14.1 pg/mL,线性范围为1.7~116.2 pg/mL,且与功能及结构类似物无显著交叉反应。相比传统间接竞争酶联免疫分析方法(icELISA),该法的IC_(50)提高了85倍,抗体消耗量降低至1/8,在大白菜和雪梨样品中的平均加标回收率为94.5%~116%,可用于果蔬中百草枯的痕量检测。 展开更多

关键词 百草枯 生物素化纳米抗体 生物素-链霉亲和素 酶联免疫分析 大白菜 梨

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抗亲和素鼠单克隆抗体增强亲和素-生物素免疫技术和免疫组织学染色的敏感性

7

作者 W.F.Cassano 张红毅 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期64-64,共1页

亲和素、生物素已应用于增加传统免疫酶方法的敏感性。但有时发现在检测微量抗原时，敏感性依然不够。为此，作者建立了几株抗卵清和素糖蛋白的鼠单抗，通过选择性扩大ABC复合物，增加底物信号，增强亲和素一生物素免疫测定法的敏感性。

关键词 免疫组织学染色 亲和素-生物素 敏感性 鼠单克隆抗体 免疫技术 免疫测定法 微量抗原 免疫酶 鼠单抗 糖蛋白 复合物 ABC

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己烯雌酚酶联免疫检测方法的建立 被引量：11

8

作者 邴爱英 成连贵 +1 位作者 褚新星 牛钟相 《西南农业学报》 CSCD 2006年第6期1159-1161,共3页

建立灵敏度高和特异性强的己烯雌酚残留检测分析方法。用人工合成的己烯雌酚免疫原多次免疫家兔，获取高效价抗体。纯化抗体经生物素标记，可同辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素特异结合。采用纯化的抗体包被96孔板，形成固相抗体。... 建立灵敏度高和特异性强的己烯雌酚残留检测分析方法。用人工合成的己烯雌酚免疫原多次免疫家兔，获取高效价抗体。纯化抗体经生物素标记，可同辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素特异结合。采用纯化的抗体包被96孔板，形成固相抗体。加入不同浓度的己烯雌酚标准品后，再加入生物素标记抗体，以酶标记亲和素作为探针，经酶底物显色反应可获得良好的ELISA标准曲线。该方法检测灵敏度为0．125ng／mL，可定量检测范围为0．25～15．60ng／mL。该方法操作简便，具有较强灵敏度和特异性，可满足实践中一般样品的残留检测。 展开更多

关键词 己烯雌酚 酶联免疫分析 生物素-亲和素

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免疫-PCR法检测柯萨奇病毒B组抗原的实验研究 被引量：1

9

作者 凌伟 沈茜 +2 位作者 王靖 徐玉莲 许育 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期264-266,共3页

目的 :建立免疫 - PCR法 ,对分离培养的柯萨奇 B组病毒 (Cox B)毒株及临床可疑为 Cox B感染的血清标本进行检测。方法 :以间日疟原虫 SSU r RNA基因为指示分子 ,采用生物素进行末端标记 ,利用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)和 PCR原理 ,建... 目的 :建立免疫 - PCR法 ,对分离培养的柯萨奇 B组病毒 (Cox B)毒株及临床可疑为 Cox B感染的血清标本进行检测。方法 :以间日疟原虫 SSU r RNA基因为指示分子 ,采用生物素进行末端标记 ,利用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)和 PCR原理 ,建立免疫 - PCR法 ,并对 6 0份临床标本进行检测。 结果 :该方法具有较高敏感性和特异性 ,其敏感性是 EL ISA法的 3 0 0 0倍 ,也高出 RT- PCR法 10倍。 结论 :免疫 - PCR法是检测 Cox B抗原的敏感而特异的方法 ,为 Cox B的临床早期快速鉴定和流行病学研究等提供了一种新的微量抗原检测手段。 展开更多

关键词 免疫-PCR 柯萨奇病毒B组 生物-亲和素 酶联免疫吸附 试验 抗原

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类风湿关节炎治疗前后血清基质金属蛋白酶-3的变化 被引量：4

10

作者 梁柳琴 詹钟平 +3 位作者 邱茜 叶玉津 许韩师 杨岫岩 《实用医学杂志》 CAS 2008年第11期1901-1903,共3页

目的:检测活动期类风温关节炎(RA)患者治疗前后血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平,探讨MMP-3在RA中的作用,为RA的疗效判断寻找新的指标。方法:分别检测45例RA患者和20例健康体检者血清MMP-3水平。MMP-3检测采用酶联免疫吸附法(ELISA)。结... 目的:检测活动期类风温关节炎(RA)患者治疗前后血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)水平,探讨MMP-3在RA中的作用,为RA的疗效判断寻找新的指标。方法:分别检测45例RA患者和20例健康体检者血清MMP-3水平。MMP-3检测采用酶联免疫吸附法(ELISA)。结果:治疗前活动期RA患者血清MMP-3水平为(372.34±198.24)ng/mL,显著高于正常对照组的(27.46±16.83)ng/mL(P<0.001)。治疗前活动期RA患者血清MMP-3水平与DAS评分呈正相关关系(r=0.526,P<0.05)。治疗后MMP-3水平下降,其中病情缓解者下降差异有显著性[(361.27±193.83)ng/mLvs(192.52±107.33)ng/mL,P<0.05];进一步的相关分析显示,治疗后MMP-3的降低水平与DAS评分下降值亦呈正相关关系(r=0.493,P<0.05)。结论:RA患者血清MMP-3水平显著升高,可作为疾病活动性指标之一,并可作为了解RA治疗效果和预后评估的重要手段。 展开更多

关键词 关节炎 类风湿 基质溶解素1 基质金属蛋白酶-3 酶联免疫吸附法

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水产品中孔雀石绿BA-ELISA检测方法的建立及应用 被引量：7

11

作者 杨光昕 苏悦 +5 位作者 李冰莲 孔聪 黄宣运 张璇 于慧娟 韩峰 《中国渔业质量与标准》 2019年第4期30-35,共6页

建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生... 建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生物素化抗体的稀释倍数均为1∶ 2 000,封闭液为1%明胶,抗原抗体反应时间为 60 min ,缓冲液的pH值为7.0,盐离子强度为0.1 mol/L。在此条件下,该方法的线性范围为0.05~20.00 ng/mL,检出限(LOD)为0.037 μg/kg,回收率为83.5%~115.0%,变异系数( CV )为4.53%~13.80%。将该方法用于实际样品的分析检测,检测结果与LC/MS相比,具有较好的相关性。上述结果表明,本实验建立的方法灵敏度高,特异性和稳定性较好,可用于水产品中MG的分析筛查。 展开更多

关键词 孔雀石绿 水产品 生物素-链霉亲和素 酶联免疫吸附法

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嗜水气单胞菌BA-ELISA的建立及其在病原检测中的应用 被引量：15

12

作者 胡大雁 钱冬 +3 位作者 刘问 张友平 潘清清 陈昌福 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期80-85,共6页

从中华鳖中分离的嗜水气单胞菌致病株T0608经福尔马林灭活后,注射免疫新西兰兔,制备了高价免疫血清,血清的菌体凝集效价可达1/1 280;G蛋白亲和层析纯化兔IgG,将IgG用生物素标记,建立了生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法(BA-ELISA)... 从中华鳖中分离的嗜水气单胞菌致病株T0608经福尔马林灭活后,注射免疫新西兰兔,制备了高价免疫血清,血清的菌体凝集效价可达1/1 280;G蛋白亲和层析纯化兔IgG,将IgG用生物素标记,建立了生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法(BA-ELISA);其最低检出限为2.5×103cfu,相当于0.5 ng菌体蛋白,其检测灵敏度为ABC-ELISA(4.0×104cfu)和间接ELISA(4.0×104cfu)的16倍;特异性试验结果表明,本法与鱼类气单胞菌、拟态弧菌、海豚链球菌、大肠杆菌等无交叉反应。BA-ELISA可不经细菌培养直接检测人工感染48 h中华鳖的肝、肠道组织中的嗜水气单胞菌。用该方法对湖州市龟鳖养殖场的水样、中华鳖和巴西龟肝、肠道内容物进行检测,结果表明该方法可较好地应用于发病中华鳖的病原早期诊断及养殖中华鳖的病原检测。 展开更多

关键词 生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法 中华鳖 嗜水气单胞菌 检测

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应用ABC—ELISA进行人血痕种属鉴识的研究 被引量：1

13

作者 程大霖 刘祖伯 《法医学杂志》 CAS CSCD 1993年第3期103-104,121,共3页

本文报道了用生物素亲和素复合物—酶联免疫吸附测定(ABC—ELISA)点斑法对不同种动物血痕及人血痕进行人种属鉴识的实验结果。反应在硝酸纤维素薄膜上进行,结果可直接用肉眼判别,也可经透明处理后由酶标比色计判读。作者认为,本法可提... 本文报道了用生物素亲和素复合物—酶联免疫吸附测定(ABC—ELISA)点斑法对不同种动物血痕及人血痕进行人种属鉴识的实验结果。反应在硝酸纤维素薄膜上进行,结果可直接用肉眼判别,也可经透明处理后由酶标比色计判读。作者认为,本法可提高人种属鉴识灵敏度。本法也可适用于法医物证检验中相似的免疫测定。 展开更多

关键词 ELISA 血痕种属 行人 ABC 酶联免疫吸附测定 硝酸纤维素 免疫测定 物证检验 复合物 亲和素 生物素 比色计 灵敏度

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