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人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立
被引量：
6
1
作者
杨静
曾昭伟
+3 位作者
王学谦
赵倩
孙辉
李会强
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期871-873,875,共4页
目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-...
目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)。对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行鉴定,并和常规ELISA、放射免疫检测以及化学发光法相比较检测了临床标本中的CEA浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50)U/mL,检测结果表明,体系稳定性良好;灵敏度为0.42 U/mL,批内、批间差异均小于10.0%。该研究建立的方法与常规ELISA对比差异有统计学意义,与放射免疫检测对比差别无统计学意义。与化学发光法相比较,回归方程为:y=0.04825+0.99674x,r=0.994,差异无统计学意义。结论:建立的CEA的BA-ELISA检测方法易于操作、灵敏度高、价格低廉,适合应用于临床检测。
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关键词
癌胚抗原
乳腺癌
生物
素
-
亲和
素
酶
联
免疫吸附
法
生物
素
亲和
素
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职称材料
水产品中孔雀石绿BA-ELISA检测方法的建立及应用
被引量：
7
2
作者
杨光昕
苏悦
+5 位作者
李冰莲
孔聪
黄宣运
张璇
于慧娟
韩峰
《中国渔业质量与标准》
2019年第4期30-35,共6页
建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生...
建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生物素化抗体的稀释倍数均为1∶ 2 000,封闭液为1%明胶,抗原抗体反应时间为 60 min ,缓冲液的pH值为7.0,盐离子强度为0.1 mol/L。在此条件下,该方法的线性范围为0.05~20.00 ng/mL,检出限(LOD)为0.037 μg/kg,回收率为83.5%~115.0%,变异系数( CV )为4.53%~13.80%。将该方法用于实际样品的分析检测,检测结果与LC/MS相比,具有较好的相关性。上述结果表明,本实验建立的方法灵敏度高,特异性和稳定性较好,可用于水产品中MG的分析筛查。
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关键词
孔雀石绿
水产品
生物
素
-
链霉
亲和
素
酶
联
免疫吸附
法
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职称材料
嗜水气单胞菌BA-ELISA的建立及其在病原检测中的应用
被引量：
15
3
作者
胡大雁
钱冬
+3 位作者
刘问
张友平
潘清清
陈昌福
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期80-85,共6页
从中华鳖中分离的嗜水气单胞菌致病株T0608经福尔马林灭活后,注射免疫新西兰兔,制备了高价免疫血清,血清的菌体凝集效价可达1/1 280;G蛋白亲和层析纯化兔IgG,将IgG用生物素标记,建立了生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法(BA-ELISA)...
从中华鳖中分离的嗜水气单胞菌致病株T0608经福尔马林灭活后,注射免疫新西兰兔,制备了高价免疫血清,血清的菌体凝集效价可达1/1 280;G蛋白亲和层析纯化兔IgG,将IgG用生物素标记,建立了生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法(BA-ELISA);其最低检出限为2.5×103cfu,相当于0.5 ng菌体蛋白,其检测灵敏度为ABC-ELISA(4.0×104cfu)和间接ELISA(4.0×104cfu)的16倍;特异性试验结果表明,本法与鱼类气单胞菌、拟态弧菌、海豚链球菌、大肠杆菌等无交叉反应。BA-ELISA可不经细菌培养直接检测人工感染48 h中华鳖的肝、肠道组织中的嗜水气单胞菌。用该方法对湖州市龟鳖养殖场的水样、中华鳖和巴西龟肝、肠道内容物进行检测,结果表明该方法可较好地应用于发病中华鳖的病原早期诊断及养殖中华鳖的病原检测。
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关键词
生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法
中华鳖
嗜水气单胞菌
检测
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职称材料
题名
人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立
被引量：
6
1
作者
杨静
曾昭伟
王学谦
赵倩
孙辉
李会强
机构
天津渤海职业技术学院生物工程系
天津医科大学
天津市天津医院
沃克(天津)生物科技有限公司
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期871-873,875,共4页
文摘
目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)。对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行鉴定,并和常规ELISA、放射免疫检测以及化学发光法相比较检测了临床标本中的CEA浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50)U/mL,检测结果表明,体系稳定性良好;灵敏度为0.42 U/mL,批内、批间差异均小于10.0%。该研究建立的方法与常规ELISA对比差异有统计学意义,与放射免疫检测对比差别无统计学意义。与化学发光法相比较,回归方程为:y=0.04825+0.99674x,r=0.994,差异无统计学意义。结论:建立的CEA的BA-ELISA检测方法易于操作、灵敏度高、价格低廉,适合应用于临床检测。
关键词
癌胚抗原
乳腺癌
生物
素
-
亲和
素
酶
联
免疫吸附
法
生物
素
亲和
素
Keywords
CEA
breast carcinoma
BA
-
ELISA
biotin
avidin
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
水产品中孔雀石绿BA-ELISA检测方法的建立及应用
被引量：
7
2
作者
杨光昕
苏悦
李冰莲
孔聪
黄宣运
张璇
于慧娟
韩峰
机构
中国水产科学研究院东海水产研究所
上海理工大学环境与建筑学院
出处
《中国渔业质量与标准》
2019年第4期30-35,共6页
基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2016T09)
文摘
建立了基于生物素-链霉亲合素放大的酶联免疫吸附法(BA-ELISA)检测水产品中的孔雀石绿(MG)含量的方法。优化了包被原和生物素化抗体的工作浓度,以及封闭液、温育时间、pH值和盐离子强度等实验条件。结果显示,最佳实验条件为:包被原和生物素化抗体的稀释倍数均为1∶ 2 000,封闭液为1%明胶,抗原抗体反应时间为 60 min ,缓冲液的pH值为7.0,盐离子强度为0.1 mol/L。在此条件下,该方法的线性范围为0.05~20.00 ng/mL,检出限(LOD)为0.037 μg/kg,回收率为83.5%~115.0%,变异系数( CV )为4.53%~13.80%。将该方法用于实际样品的分析检测,检测结果与LC/MS相比,具有较好的相关性。上述结果表明,本实验建立的方法灵敏度高,特异性和稳定性较好,可用于水产品中MG的分析筛查。
关键词
孔雀石绿
水产品
生物
素
-
链霉
亲和
素
酶
联
免疫吸附
法
Keywords
malachite green
aquatic products
biotin
-
streptavidin
enzyme
-
linked immunosorbent assay
分类号
S91 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
嗜水气单胞菌BA-ELISA的建立及其在病原检测中的应用
被引量：
15
3
作者
胡大雁
钱冬
刘问
张友平
潘清清
陈昌福
机构
华中农业大学水产学院
浙江省淡水水产研究所
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第1期80-85,共6页
基金
“十一五”国家攻关课题(2006BAD03B0502)资助
文摘
从中华鳖中分离的嗜水气单胞菌致病株T0608经福尔马林灭活后,注射免疫新西兰兔,制备了高价免疫血清,血清的菌体凝集效价可达1/1 280;G蛋白亲和层析纯化兔IgG,将IgG用生物素标记,建立了生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法(BA-ELISA);其最低检出限为2.5×103cfu,相当于0.5 ng菌体蛋白,其检测灵敏度为ABC-ELISA(4.0×104cfu)和间接ELISA(4.0×104cfu)的16倍;特异性试验结果表明,本法与鱼类气单胞菌、拟态弧菌、海豚链球菌、大肠杆菌等无交叉反应。BA-ELISA可不经细菌培养直接检测人工感染48 h中华鳖的肝、肠道组织中的嗜水气单胞菌。用该方法对湖州市龟鳖养殖场的水样、中华鳖和巴西龟肝、肠道内容物进行检测,结果表明该方法可较好地应用于发病中华鳖的病原早期诊断及养殖中华鳖的病原检测。
关键词
生物素-亲和素双抗体夹心酶联免疫吸附法
中华鳖
嗜水气单胞菌
检测
Keywords
BA
-
ELISA
Chinese soft
-
shelled turtle
A.hydrophila
detection
分类号
S947.12 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立
杨静
曾昭伟
王学谦
赵倩
孙辉
李会强
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
6
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职称材料
2
水产品中孔雀石绿BA-ELISA检测方法的建立及应用
杨光昕
苏悦
李冰莲
孔聪
黄宣运
张璇
于慧娟
韩峰
《中国渔业质量与标准》
2019
7
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职称材料
3
嗜水气单胞菌BA-ELISA的建立及其在病原检测中的应用
胡大雁
钱冬
刘问
张友平
潘清清
陈昌福
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
15
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