乳鼠心肌细胞的体外培养及生物学特性研究 被引量：7

1

作者 何蕾 张莉 +4 位作者 黄靖香 赵斌 崔雪梅 宋光 江朝光 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期506-507,共2页

目的探讨乳鼠心肌细胞的体外培养方法并对其生物学特性进行观察。方法1～3日龄新生SD大鼠10只,用无酶消化法行含血清培养基原代心肌细胞培养,连续观察细胞生长及传代情况40天。α-横纹肌肌动蛋白抗体标记培养细胞,以流式细胞仪行心肌细... 目的探讨乳鼠心肌细胞的体外培养方法并对其生物学特性进行观察。方法1～3日龄新生SD大鼠10只,用无酶消化法行含血清培养基原代心肌细胞培养,连续观察细胞生长及传代情况40天。α-横纹肌肌动蛋白抗体标记培养细胞,以流式细胞仪行心肌细胞纯度鉴定,Giemsa染色观察培养心肌细胞形态,吖啶橙-碘化丙啶(AO-PI)染色法检测培养细胞活性。记录培养心肌细胞总数,计算单个乳鼠心脏细胞产量。结果原代组织块和单个心肌细胞在接种后24～48h贴壁,其中部分出现搏动并持续至观察期末。培养细胞群鉴定心肌细胞纯度为94.1%,活细胞比例95.3%,95%可信区间(CI)为91.6%～99.0%。平均每个乳鼠心脏单细胞产量为3.3×106个,95%CI为2.1×106～4.5×106个。结论无酶消化法培养的乳鼠心肌细胞纯度、活力及产量能够满足心肌细胞研究的需要。 展开更多

关键词 细胞培养 流式细胞术 生物学鉴定法 心肌细胞 无酶消化法

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清洁级BALB/c近交系小鼠常规生物学特性研究 被引量：2

2

作者 王冬平 随丽华 +4 位作者 吴娜 尚世臣 孔德强 李桂军 凡秀 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第5期291-294,共4页

目的建立BALB/c近交系小鼠常规生物学特性指标。方法采用日本光电MEK-5126血球计数仪、荷兰半自动生化仪、流式细胞仪及常规的实验方法检测。结果血液细胞计数、血液生化指标、体重、脏器重量、脏器指数等常规生物学指标结果比较均一;... 目的建立BALB/c近交系小鼠常规生物学特性指标。方法采用日本光电MEK-5126血球计数仪、荷兰半自动生化仪、流式细胞仪及常规的实验方法检测。结果血液细胞计数、血液生化指标、体重、脏器重量、脏器指数等常规生物学指标结果比较均一;清洁级BALB/c近交系小鼠的血液细胞计数和血液生化指标同普通级BALB/c近交系小鼠比较差异显著;普通级的CD4+/CD8+指标雌雄之间及普通级与清洁级的CD4+/CD8+差异显著。结论清洁级BALB/c近交系小鼠具有比较稳定的生物学特性。 展开更多

关键词 小鼠 近交系 生物学鉴定法 生物学特性研究 BALB/c 近交系小鼠 清洁级 CD4^+/CD8^+ 血液生化指标 半自动生化仪 细胞计数 差异显著

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分枝杆菌菌型快速鉴定方法的应用研究

3

作者 匡铁吉 董梅 +3 位作者 张青霞 雷红 孟详红 宋萍 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期406-406,共1页

关键词 生物学鉴定法 结核分枝杆菌 DNA PCR

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线粒体16SrRNA和Cytb基因复合扩增进行种属鉴定 被引量：7

4

作者 叶懿 吴谨 +2 位作者 罗海玻 王卓 李英碧 《法医学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期259-261,I0001,共4页

目的建立一种用于种属鉴定的线粒体DNA16SrRNA基因和细胞色素b基因荧光标记复合扩增检测体系。方法利用引物设计软件Primer5.0对mtDNA序列的16SrRNA基因和细胞色素b基因各设计一对引物,建立复合扩增体系,分别扩增人和牛、猪、狗、鸡、草... 目的建立一种用于种属鉴定的线粒体DNA16SrRNA基因和细胞色素b基因荧光标记复合扩增检测体系。方法利用引物设计软件Primer5.0对mtDNA序列的16SrRNA基因和细胞色素b基因各设计一对引物,建立复合扩增体系,分别扩增人和牛、猪、狗、鸡、草鱼5种常见动物,用310遗传分析仪对产物进行分析。结果人和5种动物DNA扩增产物均出现两个峰,Cytb通用引物的扩增产物为人与动物的共有峰,为358bp;16SrRNA基因的扩增产物为人与动物间存在位置差异的特异峰,位于231～256bp之间。结论该复合扩增体系可以明确区分人和5种动物样本,可用于种属鉴定。 展开更多

关键词 法医遗传学 生物学鉴定法 基因扩增 DNA 线粒体 基因 16SrRNA 基因 细胞色素B

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339株非结核分枝杆菌临床分离株菌种鉴定及耐药性分析 被引量：20

5

作者 秦中华 景晔 +2 位作者 杜岩青 宋晓梅 张丽霞 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2020年第6期630-633,共4页

回顾性分析2014年3月至2019年3月天津市海河医院经罗氏培养和"DNA微阵列芯片技术"确定的339株非结核分枝杆菌(NTM),并对其药物敏感性试验(简称"药敏试验")结果进行分析。339株NTM临床分离株中,排在前3位者分别为胞... 回顾性分析2014年3月至2019年3月天津市海河医院经罗氏培养和"DNA微阵列芯片技术"确定的339株非结核分枝杆菌(NTM),并对其药物敏感性试验(简称"药敏试验")结果进行分析。339株NTM临床分离株中,排在前3位者分别为胞内分枝杆菌38.6%(131/339)、龟-脓肿分枝杆菌21.2%(72/339)、堪萨斯分枝杆菌18.3%(62/339)。体外药敏试验显示胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和龟-脓肿分枝杆菌对8种抗结核药品(异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、对氨基水杨酸、卡那霉素、卷曲霉素、氧氟沙星)耐药率情况为:胞内分枝杆菌的耐药率分别为95.6%(108/113)、82.3%(93/113)、94.7%(107/113)、54.0%(61/113)、92.0%(69/75)、81.3%(61/75)、85.3%(64/75)、87.5%(49/56);堪萨斯分枝杆菌的耐药率分别为100.0%(54/54)、3.7%(2/54)、98.1%(53/54)、11.1%(6/54)、95.0%(38/40)、90.0%(36/40)、27.5%(11/40)、13.8%(4/29);龟-脓肿分枝杆菌的耐药率分别为96.9%(62/64)、93.8%(60/64)、95.3%(61/64)、92.2%(59/64)、88.4%(38/43)、86.0%(37/43)、88.4%(38/43)、87.1%(27/31)。临床分离NTM菌种以胞内分枝杆菌、龟-脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌为主,其中胞内分枝杆菌、龟-脓肿分枝杆菌对常用一线、二线抗结核药品具有较高的耐药性,堪萨斯分枝杆菌对利福平、乙胺丁醇、氧氟沙星、卷曲霉素的耐药率低。 展开更多

关键词 分枝杆菌 非典型性 生物学鉴定法 细菌分型技术 微生物敏感试验 数据说明 统计

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129株非结核分枝杆菌采用两种分子检测技术行菌种鉴定的结果分析 被引量：10

6

作者 刘佳文 吕红艳 +1 位作者 丁北川 张治国 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第9期999-1004,共6页

目的分析北京地区3个单位非结核分枝杆菌(NTM)临床分离株采用芯片杂交法(简称“芯片法”)和16SrRNA基因测序(简称“基因测序”)进行菌种鉴定的结果,为临床分枝杆菌病的快速准确诊断提供科学依据。方法用芯片法和基因测序进行北京地区3... 目的分析北京地区3个单位非结核分枝杆菌(NTM)临床分离株采用芯片杂交法(简称“芯片法”)和16SrRNA基因测序(简称“基因测序”)进行菌种鉴定的结果,为临床分枝杆菌病的快速准确诊断提供科学依据。方法用芯片法和基因测序进行北京地区3个单位129株NTM临床分离株的菌种鉴定,实验操作者之间采用双盲法,对两种鉴定方法的结果进行比较和评价。结果129株NTM菌株中,有107株进行分枝杆菌基因测序,其中59株为胞内分枝杆菌(55.1%);29株为堪萨斯分枝杆菌(27.1%);5株为龟分枝杆菌/脓肿分枝杆菌(4.7%);3株为鸟分枝杆菌(2.8%);2株为偶发分枝杆菌(1.9%);2株为戈登分枝杆菌(1.9%);1株为蟾蜍分枝杆菌(0.9%);1株为草分枝杆菌(0.9%);1株为瘰疬分枝杆菌(0.9%);4株为其他NTM(3.7%)。有116株进行芯片法分枝杆菌菌种鉴定,且有96株同时进行芯片法和基因测序法检测,两种方法进行菌种鉴定的符合率为88.5%(85/96)。基因测序发现有3株外来菌株,分别为明尼苏达分枝杆菌、熊本分枝杆菌、提门分枝杆菌(M.temen)。结论北京3家机构NTM菌种以胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌和龟分枝杆菌/脓肿分枝杆菌为主。用芯片法和基因测序对NTM临床分离株进行菌种鉴定的一致率较高。 展开更多

关键词 分枝杆菌 非典型性 生物学鉴定法 芯片分析技术 分子探针技术 寡核苷酸序列分析 结果与过程评价(卫生保健)

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海洋生物毒素检测技术研究进展 被引量：5

7

作者 孟文琪 裴志鹏 +5 位作者 冯雍炜 孙铭学 鄂鹏飞 杨玉彦 赵杰 肖凯 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1148-1158,共11页

海洋生物毒素具有分布广、毒性强及解毒难等特性,对我国公共安全和人民健康造成极大的威胁。为了保护我国的公共安全,保障人民健康,对海洋生物毒素检测的研究已经越来越多。目前,海洋生物毒素的检测方法有生物检测法、免疫分析法、液相... 海洋生物毒素具有分布广、毒性强及解毒难等特性,对我国公共安全和人民健康造成极大的威胁。为了保护我国的公共安全,保障人民健康,对海洋生物毒素检测的研究已经越来越多。目前,海洋生物毒素的检测方法有生物检测法、免疫分析法、液相色谱法、酶活力抑制分析法、细胞毒性试验等。本文将对海洋生物毒素检测技术的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 海洋生物毒素 生物学鉴定法 免疫测定 液相色谱法

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人巨细胞病毒地方分离株的鉴定及其UL83序列分析 被引量：1

8

作者 史永林 陈敬贤 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第6期612-616,共5页

目的鉴定从合肥市某医院先天性脑瘫患儿尿标本中分离的4株人巨细胞病毒（HCMV）毒株并对其UL83基因序列进行分析，为HCMV感染的预防及pp65蛋白疫苗的研制提供参考依据。方法应用细胞培养法复苏病毒，间接免疫荧光法检测pp65蛋白表达，... 目的鉴定从合肥市某医院先天性脑瘫患儿尿标本中分离的4株人巨细胞病毒（HCMV）毒株并对其UL83基因序列进行分析，为HCMV感染的预防及pp65蛋白疫苗的研制提供参考依据。方法应用细胞培养法复苏病毒，间接免疫荧光法检测pp65蛋白表达，并用特异性引物对UL73基因进行PCR，扩增的产物经凝胶纯化后测序；序列结果运用DNAMAN软件和GenBank登录的3株代表性HCMV毒株进行核苷酸和氨基酸序列比对。结果HCMV AD169株与HCMV-1分离株的UL83基因核苷酸及编码氨基酸序列的同源性均为100％，与其余3株的同源性也达99．26％～99．69％；4株HCMV分离株与Merlin株、Towne株在相应基因片段核苷酸及氨基酸的同源性最低的分别为98．95％，99．06％。结论UL83序列分析结果表明，HCMV UL83编码pp65蛋白的优势抗原决定簇氨基酸序列无变化。 展开更多

关键词 巨细胞病毒/分离和提纯 生物学鉴定法/方法 序列分析 DNA

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临床标本中结核分枝杆菌抗原蛋白鉴定的研究进展 被引量：3

9

作者 盛钢 褚洪迁 +1 位作者 刘丁一 孙照刚 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2022年第12期1363-1368,共6页

结核病是由结核分枝杆菌感染导致的严重的呼吸系统传染病,其传播隐匿,防控难度大。目前的结核病快速发现技术存在一定缺陷,亟需新的诊断技术。抗原检测技术具有适用广泛、操作简便、快速精确的优点,但尚未发现具有良好的稳定检测效果的... 结核病是由结核分枝杆菌感染导致的严重的呼吸系统传染病,其传播隐匿,防控难度大。目前的结核病快速发现技术存在一定缺陷,亟需新的诊断技术。抗原检测技术具有适用广泛、操作简便、快速精确的优点,但尚未发现具有良好的稳定检测效果的靶标。另外,即使是针对同一抗原靶标,不同研究的检测效能差异也较大。因此,笔者对不同鉴定方法和实验研究证实的各种临床标本中存在的抗原蛋白的检测状况进行综述,以重新思考结核分枝杆菌抗原在临床标本中实际存在的状态和含量,以及改进抗原发现和鉴定的方法,为结核病抗原诊断技术的发展提供理论参考。 展开更多

关键词 分枝杆菌 结核 抗原 免疫学 生物学鉴定法 综述文献(主题)

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血清细胞因子TNF-α、IL-4、sIL-2R和IFN-γ对预测抗结核治疗效果的价值 被引量：13

10

作者 聂文娟 石文卉 +4 位作者 刘佩英 杨扬 王隽 王庆枫 初乃惠 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2022年第10期1022-1027,共6页

目的:探索肺结核患者血清细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)、可溶性白细胞介素受体(sIL-2R)和γ-干扰素(IFN-γ)水平对抗结核治疗效果的预测价值。方法:采用前瞻性队列研究方法,参照入组标准纳入2017年12月至2019年... 目的:探索肺结核患者血清细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)、可溶性白细胞介素受体(sIL-2R)和γ-干扰素(IFN-γ)水平对抗结核治疗效果的预测价值。方法:采用前瞻性队列研究方法,参照入组标准纳入2017年12月至2019年6月首都医科大学附属北京胸科医院收治的67例新诊断活动性肺结核患者作为研究对象。使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者治疗前、抗结核治疗1~2个月和治疗6个月时外周血血清TNF-α、IL-4、sIL-2R和IFN-γ水平,对显著差异的指标进行受试者工作特征(ROC)曲线分析以确定其最佳临界值,并以此为界值预测肺结核的活动性和治疗进展。结果:治疗1~2个月的sIL-2R水平[14.1(11.2,19.1)pg/ml]、治疗6个月的TNF-α水平[686.6(226.9,1030.5)pg/ml]和治疗1~2个月的IFN-γ水平[357.0(273.4,431.0)pg/ml]均明显低于治疗前[分别为16.7(12.9,23.9)、848.3(345.2,1201.6)、490.0(303.6,607.9)pg/ml],差异均有统计学意义(χ^(2)=15.276,P=0.036;χ^(2)=33.421,P=0.002;χ^(2)=31.111,P=0.000)。ROC曲线分析显示:当血清TNF-α水平为845.2 pg/ml时,治疗有效性的曲线下最大面积(AUC)为0.594(P=0.013);当血清IFN-γ水平为393.3 pg/ml时,治疗有效性的AUC为0.651(P=0.017)。以最佳临界值为参照标准,发现治疗前血清IFN-γ和TNF-α水平高于其最佳临界值者(阳性者)分别为43例(64.2%)和34例(50.7%),明显高于治疗1~2个月的IFN-γ[14例(20.9%)]和治疗6个月的TNF-α阳性者[19例(28.4%)],差异均有统计学意义(χ^(2)=34.634,P=0.000;χ^(2)=53.181,P=0.013)。结论:血清TNF-α和IFN-γ水平作为监测抗结核治疗的生物标志物可能具有一定意义。 展开更多

关键词 结核 细胞因子类 生物学鉴定法 治疗结果

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马铃薯纺锤块茎类病毒对产量影响研究 被引量：1

11

作者 张明爽 《农业科技通讯》 2011年第8期58-58,157,共2页

利用在试管中保存的马铃薯纺锤块茎类病毒（pstvd）的纯毒源，在防虫的网棚（网绷纱要求100目）中，利用金钢砂、喷粉器、棉球、研钵，将毒源中加入0．1ml磷酸缓冲液后将其研碎，接种在克新2号、克新3号、克新4号的植株上。该试验进行... 利用在试管中保存的马铃薯纺锤块茎类病毒（pstvd）的纯毒源，在防虫的网棚（网绷纱要求100目）中，利用金钢砂、喷粉器、棉球、研钵，将毒源中加入0．1ml磷酸缓冲液后将其研碎，接种在克新2号、克新3号、克新4号的植株上。该试验进行两次接种，第1次接种10d后，进行第2次接种．根据植株的外观表现：健康株、健康株生长势低于前者、轻束顶症株、重束硕症株来判定接种纺锤块茎症病毒后植株的发病情况，根据小区测产对比总结出马铃薯纺锤块茎类病毒对马铃薯产量影响的程度．克新2号品种减产27．2%-61．80％；克新4号品种减产17．40％-57．40％。 展开更多

关键词 马铃薯 纺锤块茎类病毒 生物学鉴定法

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黑龙江省马铃薯纺锤块茎类病毒的研究

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作者 张新宇 《农业科技通讯》 2017年第10期99-100,共2页

利用金钢砂、喷粉器、棉球、研钵,将在试管中保存的马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVD)的纯毒源,在防虫的网棚(网绷纱要求100目)中加入0.1 m磷酸缓冲液后将其研碎,接种在克新十三号、克新十八号、克新十九号的植株上,据植株的外观表现,即健康... 利用金钢砂、喷粉器、棉球、研钵,将在试管中保存的马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVD)的纯毒源,在防虫的网棚(网绷纱要求100目)中加入0.1 m磷酸缓冲液后将其研碎,接种在克新十三号、克新十八号、克新十九号的植株上,据植株的外观表现,即健康株、健康株生长势低于前者、轻束顶症株、重束顶症株,来判定接种纺锤块茎症毒后植株的发病情况,根据小区测产对比总结出马铃薯纺锤块茎类病毒对马铃薯产量影响的程度。结果表明,接种马铃薯纺锤块病毒后,使克新十三号品种的减产率从27.20%增加到61.80%;使克新十九号品种的减产率从17.40%增加到57.40%。 展开更多

关键词 马铃薯纺锤块茎类病毒 生物学鉴定法 减产率

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