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甜瓜响应甜瓜坏死斑点病毒侵染的cDNA文库构建
被引量:
5
1
作者
吴会杰
康保珊
+2 位作者
彭斌
刘丽锋
古勤生
《中国蔬菜》
北大核心
2020年第9期36-40,共5页
为解析甜瓜坏死斑点病毒(melon necrotic spot virus,MNSV)与寄主甜瓜的互作,筛选病毒编码的蛋白与寄主的互作因子,构建了MNSV侵染的甜瓜cDNA文库。在甜瓜品种白玫子叶期接种MNSV,待植株表现典型的系统坏死斑点症状后,收集症状明显的整...
为解析甜瓜坏死斑点病毒(melon necrotic spot virus,MNSV)与寄主甜瓜的互作,筛选病毒编码的蛋白与寄主的互作因子,构建了MNSV侵染的甜瓜cDNA文库。在甜瓜品种白玫子叶期接种MNSV,待植株表现典型的系统坏死斑点症状后,收集症状明显的整株甜瓜幼苗,采用SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)技术合成cDNA,利用DSN(duplex-specific nuclease)对cDNA均一化处理后,首次构建了MNSV侵染甜瓜的cDNA文库并评价了文库的质量,文库容量为4.5×106 cfu,文库滴度为3.6×10^7 cfu·mL^-1,文库克隆重组率为100%,文库插入片段大小在500~2000 bp之间,说明文库质量很好。该文库的构建为解析MNSV与寄主互作及甜瓜响应MNSV的致病机制奠定了基础。
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关键词
甜瓜
甜瓜坏死斑点病毒
CDNA文库
文库质量评价
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职称材料
广西三种甜瓜病毒分离物的分子检测与鉴定
被引量:
18
2
作者
杨世安
李战彪
+5 位作者
秦碧霞
谢慧婷
崔丽贤
苏琴
邓铁军
蔡健和
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期83-89,102,共8页
瓜类褪绿黄化病毒Cucurbits chlorotic yellows virus(CCYV)、甜瓜黄化斑点病毒Melon yellow spot virus(MYSV)及甜瓜坏死斑点病毒Melon necrotic spot virus(MNSV)是近年来报道侵染瓜类作物的新病毒,在个别种植区大面积发生,对生产构...
瓜类褪绿黄化病毒Cucurbits chlorotic yellows virus(CCYV)、甜瓜黄化斑点病毒Melon yellow spot virus(MYSV)及甜瓜坏死斑点病毒Melon necrotic spot virus(MNSV)是近年来报道侵染瓜类作物的新病毒,在个别种植区大面积发生,对生产构成严重威胁。为了解3种病毒在广西的发生情况,先后到各西甜瓜种植区进行了调查,并采集疑似CCYV、MYSV及MNSV的甜瓜病叶样品,提取病叶总RNA,通过特异性引物分别进行一步法RTPCR扩增,电泳结果显示RT-PCR产物与预期大小一致的序列条带;将扩增产物分别连接到pMD19-T克隆载体上,挑选阳性克隆子进行序列测定及比对分析。结果表明:CCYV、MYSV和MNSV广西分离物的CP基因序列与其他已报道核苷酸序列一致性分别达95.1%~100%、96.5%~99%和83.7%~92.5%。
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关键词
广西
瓜类褪绿黄化
病毒
甜瓜
黄化
斑点
病毒
甜瓜坏死斑点病毒
一步法RT-PCR
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职称材料
两种甜瓜病毒寿光分离物的分子检测与鉴定
被引量:
10
3
作者
乔宁
魏家鹏
+4 位作者
李美芹
刘永光
姜会霞
竺晓平
田素波
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期130-133,共4页
甜瓜坏死斑点病毒(Melon necrotic spot virus ,MNSV)及瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows vi-rus ,CCYV)近年来在瓜类种植区均大面积发生,危害较为严重,已成为制约甜瓜生产的重要因素。本研究广泛收集疑似感染 MNSV 及 ...
甜瓜坏死斑点病毒(Melon necrotic spot virus ,MNSV)及瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows vi-rus ,CCYV)近年来在瓜类种植区均大面积发生,危害较为严重,已成为制约甜瓜生产的重要因素。本研究广泛收集疑似感染 MNSV 及 CCYV 的甜瓜病叶,从中提取植物总 RNA 进行 RT-PCR 扩增,将产物分别连接到 pEASY-T1 Simple 克隆载体上,对含有目的片段的重组子进行测序及比对分析。结果显示得到了与预期结果一致的 DNA序列,其扩增产物大小分别为673 bp(MNSV)和877 bp(CCYV)。同源性分析结果表明,MNSV 和 CCYV 寿光分离物的核苷酸序列与中国其他地区或一些国家已报道的分离物同源性达99%~100%。
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关键词
甜瓜坏死斑点病毒
瓜类褪绿黄化
病毒
序列分析
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职称材料
我国主要甜瓜病毒的研究及防治
被引量:
6
4
作者
张培培
刘紫征
+1 位作者
耿晓进
姜淑慧
《广东蚕业》
2020年第6期21-23,共3页
随着甜瓜种植面积不断扩大,病虫害监控防治成为生产优质瓜果的关键环节之一,而病毒病在甜瓜生产过程中危害严重。因此该研究就几种主要的甜瓜病毒,即小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit...
随着甜瓜种植面积不断扩大,病虫害监控防治成为生产优质瓜果的关键环节之一,而病毒病在甜瓜生产过程中危害严重。因此该研究就几种主要的甜瓜病毒,即小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellow virus,CCYV)、甜瓜坏死斑点病毒(Melon necrotic spot virus,MNSV)和甜瓜黄化斑点病毒(Melon yellow spot virus,MYSV)的分类、基因组结构、传播方式、寄主、症状展开论述。并对甜瓜病毒的检测和防治方法进行综述,以期为甜瓜病毒的防控提供依据。
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关键词
甜瓜
病毒
小西葫芦黄花叶
病毒
瓜类褪绿黄化
病毒
甜瓜坏死斑点病毒
甜瓜
黄化
斑点
病毒
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职称材料
题名
甜瓜响应甜瓜坏死斑点病毒侵染的cDNA文库构建
被引量:
5
1
作者
吴会杰
康保珊
彭斌
刘丽锋
古勤生
机构
中国农业科学院郑州果树研究所
出处
《中国蔬菜》
北大核心
2020年第9期36-40,共5页
基金
国家青年科学基金项目(31701941)
河南省基础与前沿技术研究项目(152300410231,152300410232)
+1 种基金
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610192020501)
国家西甜瓜产业技术体系病毒防控岗位项目(CARS-26-13)。
文摘
为解析甜瓜坏死斑点病毒(melon necrotic spot virus,MNSV)与寄主甜瓜的互作,筛选病毒编码的蛋白与寄主的互作因子,构建了MNSV侵染的甜瓜cDNA文库。在甜瓜品种白玫子叶期接种MNSV,待植株表现典型的系统坏死斑点症状后,收集症状明显的整株甜瓜幼苗,采用SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)技术合成cDNA,利用DSN(duplex-specific nuclease)对cDNA均一化处理后,首次构建了MNSV侵染甜瓜的cDNA文库并评价了文库的质量,文库容量为4.5×106 cfu,文库滴度为3.6×10^7 cfu·mL^-1,文库克隆重组率为100%,文库插入片段大小在500~2000 bp之间,说明文库质量很好。该文库的构建为解析MNSV与寄主互作及甜瓜响应MNSV的致病机制奠定了基础。
关键词
甜瓜
甜瓜坏死斑点病毒
CDNA文库
文库质量评价
Keywords
Melon
Melon necrotis spot virus(MNSV)
cDNA library
Library quality evaluation
分类号
S436.5 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
广西三种甜瓜病毒分离物的分子检测与鉴定
被引量:
18
2
作者
杨世安
李战彪
秦碧霞
谢慧婷
崔丽贤
苏琴
邓铁军
蔡健和
机构
广西大学农学院
广西作物病虫害生物学重点实验室广西农业科学院植物保护研究所
出处
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期83-89,102,共8页
基金
国家现代农业产业技术体系广西特色水果创新团队项目(nycytxgxcxtd-04-19-2)
广西自然科学基金(2015GXNSFBA139075)
+1 种基金
广西农业科学院科技发展基金(2015JZ48)
河南郑州果树瓜类重点实验室开放基金(HNS-201508-10)
文摘
瓜类褪绿黄化病毒Cucurbits chlorotic yellows virus(CCYV)、甜瓜黄化斑点病毒Melon yellow spot virus(MYSV)及甜瓜坏死斑点病毒Melon necrotic spot virus(MNSV)是近年来报道侵染瓜类作物的新病毒,在个别种植区大面积发生,对生产构成严重威胁。为了解3种病毒在广西的发生情况,先后到各西甜瓜种植区进行了调查,并采集疑似CCYV、MYSV及MNSV的甜瓜病叶样品,提取病叶总RNA,通过特异性引物分别进行一步法RTPCR扩增,电泳结果显示RT-PCR产物与预期大小一致的序列条带;将扩增产物分别连接到pMD19-T克隆载体上,挑选阳性克隆子进行序列测定及比对分析。结果表明:CCYV、MYSV和MNSV广西分离物的CP基因序列与其他已报道核苷酸序列一致性分别达95.1%~100%、96.5%~99%和83.7%~92.5%。
关键词
广西
瓜类褪绿黄化
病毒
甜瓜
黄化
斑点
病毒
甜瓜坏死斑点病毒
一步法RT-PCR
Keywords
Guangxi
Cucurbit chlorotic yellows virus(CCYV)
Melon yellow spot virus(MYSV)
Melon necrotic spot virus(MNSV)
one-step RT-PCR
分类号
S436.5 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
两种甜瓜病毒寿光分离物的分子检测与鉴定
被引量:
10
3
作者
乔宁
魏家鹏
李美芹
刘永光
姜会霞
竺晓平
田素波
机构
潍坊科技学院
山东农业大学植保学院
山东寿光蔬菜种业集团有限公司
出处
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期130-133,共4页
基金
公益性行业(农业)科研专项(201303028)
山东省自然科学基金(ZR2012CM032)
+3 种基金
山东省科技发展计划(2010GNC10915)
潍坊市科技发展计划(201301159
2013YD177)
山东省农业良种工程现代种业企业科技培育计划
文摘
甜瓜坏死斑点病毒(Melon necrotic spot virus ,MNSV)及瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows vi-rus ,CCYV)近年来在瓜类种植区均大面积发生,危害较为严重,已成为制约甜瓜生产的重要因素。本研究广泛收集疑似感染 MNSV 及 CCYV 的甜瓜病叶,从中提取植物总 RNA 进行 RT-PCR 扩增,将产物分别连接到 pEASY-T1 Simple 克隆载体上,对含有目的片段的重组子进行测序及比对分析。结果显示得到了与预期结果一致的 DNA序列,其扩增产物大小分别为673 bp(MNSV)和877 bp(CCYV)。同源性分析结果表明,MNSV 和 CCYV 寿光分离物的核苷酸序列与中国其他地区或一些国家已报道的分离物同源性达99%~100%。
关键词
甜瓜坏死斑点病毒
瓜类褪绿黄化
病毒
序列分析
Keywords
RT-PCR
MNSV
CCYV
RT-PCR
sequence analysis
分类号
S436.5 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
我国主要甜瓜病毒的研究及防治
被引量:
6
4
作者
张培培
刘紫征
耿晓进
姜淑慧
机构
廊坊师范学院生命科学学院
廊坊市细胞工程与应用研究重点实验室
出处
《广东蚕业》
2020年第6期21-23,共3页
基金
河北省人社厅引进留学人员资助项目,基于高通量测序技术的甜瓜病毒群体遗传变异研究(C20190362)
廊坊市科学技术研究与发展计划项目,高通量测序技术鉴定廊坊甜瓜病样的病原技术研究应用(2019012002)
河北省省属高等学校基本科研业务费研究项目,甜瓜中小西葫芦黄花叶病毒的调查鉴定和遗传多样性研究(JQ201901)。
文摘
随着甜瓜种植面积不断扩大,病虫害监控防治成为生产优质瓜果的关键环节之一,而病毒病在甜瓜生产过程中危害严重。因此该研究就几种主要的甜瓜病毒,即小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellow virus,CCYV)、甜瓜坏死斑点病毒(Melon necrotic spot virus,MNSV)和甜瓜黄化斑点病毒(Melon yellow spot virus,MYSV)的分类、基因组结构、传播方式、寄主、症状展开论述。并对甜瓜病毒的检测和防治方法进行综述,以期为甜瓜病毒的防控提供依据。
关键词
甜瓜
病毒
小西葫芦黄花叶
病毒
瓜类褪绿黄化
病毒
甜瓜坏死斑点病毒
甜瓜
黄化
斑点
病毒
分类号
S436.42 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甜瓜响应甜瓜坏死斑点病毒侵染的cDNA文库构建
吴会杰
康保珊
彭斌
刘丽锋
古勤生
《中国蔬菜》
北大核心
2020
5
在线阅读
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职称材料
2
广西三种甜瓜病毒分离物的分子检测与鉴定
杨世安
李战彪
秦碧霞
谢慧婷
崔丽贤
苏琴
邓铁军
蔡健和
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2017
18
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下载PDF
职称材料
3
两种甜瓜病毒寿光分离物的分子检测与鉴定
乔宁
魏家鹏
李美芹
刘永光
姜会霞
竺晓平
田素波
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2015
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
我国主要甜瓜病毒的研究及防治
张培培
刘紫征
耿晓进
姜淑慧
《广东蚕业》
2020
6
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