检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

大肠杆菌甘露糖-6磷-酸异构酶基因(manA/pmi)的克隆及功能鉴定: 1; 作者杨欣梁爱华 +1 位作者罗晓丽吴家和《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期107-110,共4页; 甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi/manA)是当前植物转基因工程的重要选择标记基因,在生物安全上被认为是无害的。根据同源序列从大肠杆菌DH10B基因组中克隆出pmi基因。通过诱导原核表达获得PMI目的蛋白,对粗提和经过镍柱纯化的PMI蛋白进行We... 展开更多; 关键词甘露糖-6磷-酸异构酶大肠杆菌果糖选择标记; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因的克隆与表达被引量：3: 2; 作者张倩廖玉才 +2 位作者陈方方董璇李和平《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期461-464,共4页; 通过PCR克隆了大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因manA,分别构建了含manA基因的原核和真核生物表达载体。在大肠杆菌中经IPTG诱导表达的GST-PMI融合蛋白,经亲和层析纯化和PreScission蛋白酶酶切,SDS-PAGE分析证实PMI蛋白为42 ku。对转manA... 展开更多; 关键词 manA基因 6-磷酸甘露糖异构酶活性细菌诱导表达拟南芥转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

金龟子绿僵菌甘露糖6-磷酸异构酶基因cDNA序列的克隆及分析: 3; 作者李亚《广东海洋大学学报》 CAS 2011年第4期17-22,共6页; 通过绿僵菌属甘露糖6-磷酸异构酶基因保守核苷酸区域设计简并性引物,采用RT-PCR及RACE-PCR技术成功克隆了金龟子绿僵菌mpi基因cDNA序列。该基因cDNA序列全长为1 513 bp,开放阅读框长度为1 328 bp,共编码441氨基酸。BLAST分析发现该基因... 展开更多; 关键词金龟子绿僵菌 RACE 甘露糖6-磷酸异构酶基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

水稻遗传转化甘露糖安全筛选体系的建立被引量：7: 4; 作者王彩芬付永彩 +3 位作者朱作峰徐杰葛占宇孙传清《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期41-45,共5页; 根据genebank中公布的pmi基因序列设计引物,通过PCR扩增从大肠杆菌中分离出6-磷酸甘露糖异构酶基因。将该基因替换植物表达载体pCAMBIA1300中的潮霉素抗性基因hpt,构建了以pmi为选择标记基因的植物表达载体pPMI。对水稻进行了基因枪转... 展开更多; 关键词 6-磷酸甘露糖异构酶基因(pmi) 甘露糖安全筛选标记水稻遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

甘露糖阳性选择系统在水稻遗传转化中的应用研究进展被引量：1: 5; 作者王彩芬付永彩《中国稻米》 2008年第4期22-24,共3页; 甘露糖阳性选择系统是近几年应用较多的一种植物转基因安全筛选体系,该体系是以大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因pmi为筛选标记基因,D-甘露糖为筛选剂进行筛选。本文简要综述了甘露糖阳性选择系统在水稻转基因研究中的应用情况。; 关键词 6-磷酸甘露糖异构酶基因筛选标记基因水稻遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21) 被引量：5: 6; 作者付宏岐李海燕 +7 位作者庞实锋杨晶李洪志薛萍刘秀明李营王艳芳李校堃《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第7期163-170,共8页; 【目的】在番茄中表达人成纤维细胞生长因子-21(Fibroblast growth factor-21,FGF21),为利用植物反应器规模化生产FGF21奠定基础。【方法】以甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi)作为转基因植物的选择标记,将人源fgf21基因克隆至表达载体pCAMB... 展开更多; 关键词农杆菌成纤维细胞生长因子-21 甘露糖-6-磷酸异构酶生物反应器番茄遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

以PMI为选择标记基因的雪柑遗传转化体系的优化: 7; 作者王会全吴少华余志雄《安徽农业科学》 CAS 2018年第36期83-89,共7页; [目的]以PMI为选择标记基因对雪柑的遗传转化体系进行优化。[方法]对农杆菌的菌液浓度、实生苗培养条件、甘露糖筛选压、2,4-D浓度、2,4-D预处理时间、农杆菌侵染时间、共培养时间进行梯度试验来研究转化后的再生率,并对筛选培养基中6-B... 展开更多; 关键词柑橘 6-磷酸甘露糖异构酶遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌甘露糖-6磷-酸异构酶基因(manA/pmi)的克隆及功能鉴定: 1; 作者杨欣梁爱华罗晓丽吴家和; 机构中国科学院微生物研究所山西大学生物技术研究所山西省农业科学院棉花研究所; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期107-110,共4页; 基金农业公益行业专项(20080324) 转基因专项(2008ZX08010-004); 文摘甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi/manA)是当前植物转基因工程的重要选择标记基因,在生物安全上被认为是无害的。根据同源序列从大肠杆菌DH10B基因组中克隆出pmi基因。通过诱导原核表达获得PMI目的蛋白,对粗提和经过镍柱纯化的PMI蛋白进行Western分析和酶活反应鉴定。以上结果表明,PMI蛋白成功诱导,其分子量为46kDa,纯化过的PMI具有高的酶活性,能催化甘露糖-6-磷酸发生异构反应生成果糖-6-磷酸。同时利用pmi基因作为选择基因构建植物表达载体pCPMi,通过农杆菌介导法转化烟草获得转基因植株,PCR检测结果表明96个再生植株有72株为阳性。以上结果表明,克隆的pmi基因具有高的酶活性,并能作为转基因植物的一种选择标记,同时也为转基因植物提供安全的选择标记基因,便于转基因植物的推广。; 关键词甘露糖-6磷-酸异构酶大肠杆菌果糖选择标记; Keywords Mannose-6-phosphate isomerase（PMI） Escheriachia coli Fructose Selection marker; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因的克隆与表达被引量：3: 2; 作者张倩廖玉才陈方方董璇李和平; 机构华中农业大学生命科学技术学院华中农业大学植物科学技术学院; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期461-464,共4页; 基金国家自然科学基金(304709291 30530510) +1 种基金转基因植物专项(JY04-A-01) 教育部博士点基金资助; 文摘通过PCR克隆了大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因manA,分别构建了含manA基因的原核和真核生物表达载体。在大肠杆菌中经IPTG诱导表达的GST-PMI融合蛋白,经亲和层析纯化和PreScission蛋白酶酶切,SDS-PAGE分析证实PMI蛋白为42 ku。对转manA基因的拟南芥进行PCR分析表明,manA基因已稳定整合到拟南芥基因组中。氯酚红显色反应证实,整合到拟南芥基因组中的manA基因能表达具有6-磷酸甘露糖异构酶活性的PMI蛋白。这些结果说明,克隆的manA基因可在细菌和高等植物中高效表达。; 关键词 manA基因 6-磷酸甘露糖异构酶活性细菌诱导表达拟南芥转化; Keywords manA gene 6-phosphomannose isomerase activity induced expression in bacterium Arabidopsis transformation; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名金龟子绿僵菌甘露糖6-磷酸异构酶基因cDNA序列的克隆及分析: 3; 作者李亚; 机构广东海洋大学农学院; 出处《广东海洋大学学报》 CAS 2011年第4期17-22,共6页; 基金广东省自然科学基金(9452408801002439) 湛江市科技计划项目; 文摘通过绿僵菌属甘露糖6-磷酸异构酶基因保守核苷酸区域设计简并性引物,采用RT-PCR及RACE-PCR技术成功克隆了金龟子绿僵菌mpi基因cDNA序列。该基因cDNA序列全长为1 513 bp,开放阅读框长度为1 328 bp,共编码441氨基酸。BLAST分析发现该基因演绎的氨基酸序列与其它真菌同源性较高,蛋白结构分析表明MPI蛋白是较保守的蛋白磷酸酶结构特征,主要由α螺旋和不规则卷曲构成。; 关键词金龟子绿僵菌 RACE 甘露糖6-磷酸异构酶基因克隆; Keywords Metarhizium anisopliae RACE mannose-6-phosphate isomerase gene cloning; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水稻遗传转化甘露糖安全筛选体系的建立被引量：7: 4; 作者王彩芬付永彩朱作峰徐杰葛占宇孙传清; 机构中国农业大学植物遗传育种系农业生物技术国家重点实验室教育部作物杂种优势研究与利用重点实验室农业部农作物基因组学与遗传改良重点开放实验室北京市作物遗传改良重点实验室; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期41-45,共5页; 文摘根据genebank中公布的pmi基因序列设计引物,通过PCR扩增从大肠杆菌中分离出6-磷酸甘露糖异构酶基因。将该基因替换植物表达载体pCAMBIA1300中的潮霉素抗性基因hpt,构建了以pmi为选择标记基因的植物表达载体pPMI。对水稻进行了基因枪转化和农杆菌转化,研究了筛选培养基中甘露糖浓度对抗性愈伤组织频率的影响。部分抗性愈伤组织已获得再生植株,PCR检测初步证明外源基因已转入植物细胞。; 关键词 6-磷酸甘露糖异构酶基因(pmi) 甘露糖安全筛选标记水稻遗传转化; Keywords 6-Phosphomarmose isomerase gene Mannose Security selection marker Rice Transformation; 分类号 S511 [农业科学—作物学] Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘露糖阳性选择系统在水稻遗传转化中的应用研究进展被引量：1: 5; 作者王彩芬付永彩; 机构宁夏农林科学院农作物研究所中国农业大学植物遗传育种系农业部农作物基因组学与遗传改良重点开放实验室; 出处《中国稻米》 2008年第4期22-24,共3页; 文摘甘露糖阳性选择系统是近几年应用较多的一种植物转基因安全筛选体系,该体系是以大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因pmi为筛选标记基因,D-甘露糖为筛选剂进行筛选。本文简要综述了甘露糖阳性选择系统在水稻转基因研究中的应用情况。; 关键词 6-磷酸甘露糖异构酶基因筛选标记基因水稻遗传转化; 分类号 S511 [农业科学—作物学] TS273 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21) 被引量：5: 6; 作者付宏岐李海燕庞实锋杨晶李洪志薛萍刘秀明李营王艳芳李校堃; 机构吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心吉林农业大学中药材学院吉林农业大学生命科学学院广东医学院生物教研室牡丹江医学院吉林市农业科学院; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第7期163-170,共8页; 基金国家高新技术研究与发展计划项目("863"项目)生物反应器重大专项(2007AA100503) 吉林省科技发展重点计划项目(20070922) 教育部高等学校科技创新工程重大项目(70S018); 文摘【目的】在番茄中表达人成纤维细胞生长因子-21(Fibroblast growth factor-21,FGF21),为利用植物反应器规模化生产FGF21奠定基础。【方法】以甘露糖-6-磷酸异构酶基因(pmi)作为转基因植物的选择标记,将人源fgf21基因克隆至表达载体pCAMBIA1390RⅡ(简写为p1390RⅡ)上,构建重组表达质粒p1390 RⅡMFGF21。采用冻融法将质粒p1390RⅡMFGF21转入根瘤农杆菌EHA105,叶盘法转化番茄(Lycopersicon esculentum)"中蔬6号",采用PCR检测、Southern杂交筛选转基因番茄阳性植株,并对FGF21蛋白在转基因番茄叶片中的表达进行了Western blot分析。【结果】成功构建了带pmi安全选择标记基因的植物双元表达载体p1390RⅡMFGF21,在番茄中初步建立了以pmi为选择标记基因的遗传转化体系,共获得了26株转基因番茄植株,其中5株为阳性克隆,转化率为19.2%。采用PCR扩增和Southern blot分析进行检测,结果表明,重组fgf21基因已整合到转基因番茄基因组中。Western blot分析检测结果显示,FGF21蛋白在转基因番茄叶片中有一定水平的表达,并具有良好的抗原性。【结论】获得了以pmi为选择标记成功表达FGF21蛋白的转基因番茄遗传体系。; 关键词农杆菌成纤维细胞生长因子-21 甘露糖-6-磷酸异构酶生物反应器番茄遗传转化; Keywords Agrobacterium tumefaciens FGF21 PMI plant bioreactor tomato transformation; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学] S641.2 [农业科学—蔬菜学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名以PMI为选择标记基因的雪柑遗传转化体系的优化: 7; 作者王会全吴少华余志雄; 机构福建农业职业技术学院福建农林大学园艺植物天然产物研究所; 出处《安徽农业科学》 CAS 2018年第36期83-89,共7页; 基金福建省教育厅青年基金项目(JA12423) 福建农业职业技术学院青年项目(2016JS0004); 文摘 [目的]以PMI为选择标记基因对雪柑的遗传转化体系进行优化。[方法]对农杆菌的菌液浓度、实生苗培养条件、甘露糖筛选压、2,4-D浓度、2,4-D预处理时间、农杆菌侵染时间、共培养时间进行梯度试验来研究转化后的再生率,并对筛选培养基中6-BA和NAA不同浓度组合进行试验来研究抗性大苗的筛选。[结果]经过暗培养20 d光培养10 d条件的实生苗外植体在农杆菌菌液OD600为0.6,1.0 mg/L 2,4-D预处理3 h,农杆菌侵染30 min,共培养时间4 d,筛选压为甘露糖20 g/L的情况下转化后的再生率大大提高,而在筛选培养基中加入2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA有助于抗性大苗的筛选。[结论]通过对影响转化的各种因素的优化试验建立了雪柑以PMI基因/甘露糖选择标记系统的高效遗传转化体系。; 关键词柑橘 6-磷酸甘露糖异构酶遗传转化; Keywords Citrus 6-phosphomannose isomerase Genetic transformation; 分类号 S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	大肠杆菌甘露糖-6磷-酸异构酶基因(manA/pmi)的克隆及功能鉴定	杨欣梁爱华罗晓丽吴家和	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因的克隆与表达	张倩廖玉才陈方方董璇李和平	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	金龟子绿僵菌甘露糖6-磷酸异构酶基因cDNA序列的克隆及分析	李亚	《广东海洋大学学报》 CAS	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	水稻遗传转化甘露糖安全筛选体系的建立	王彩芬付永彩朱作峰徐杰葛占宇孙传清	《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	7	在线阅读下载PDF 职称材料
5	甘露糖阳性选择系统在水稻遗传转化中的应用研究进展	王彩芬付永彩	《中国稻米》	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	利用转基因番茄表达人成纤维细胞生长因子21(FGF21)	付宏岐李海燕庞实锋杨晶李洪志薛萍刘秀明李营王艳芳李校堃	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
7	以PMI为选择标记基因的雪柑遗传转化体系的优化	王会全吴少华余志雄	《安徽农业科学》 CAS	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料