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金线莲甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的克隆与表达分析
被引量：
1
1
作者
李和平
林江波
+2 位作者
黄惠明
邹晖
戴艺民
《福建农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期537-544,共8页
【目的】甘露糖是金线莲多糖重要组成成分,对甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶(GMP)基因进行克隆和基因表达调控分析,为进一步研究金线莲多糖的生物合成奠定基础。【方法】以梅花山金线莲植株为材料,克隆ArGMP基因的cDNA序列和基因组序列,利用...
【目的】甘露糖是金线莲多糖重要组成成分,对甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶(GMP)基因进行克隆和基因表达调控分析,为进一步研究金线莲多糖的生物合成奠定基础。【方法】以梅花山金线莲植株为材料,克隆ArGMP基因的cDNA序列和基因组序列,利用在线软件进行生物信息学分析,并对其基因表达调控模式进行qRTPCR分析。【结果】金线莲ArGMP基因ORF区序列长1086 bp,共编码361个氨基酸;基因组序列长度为1760 bp,含有3个内含子,GenBank登录号OQ030271。生物信息学分析表明:ArGMP蛋白是一种较稳定的、无跨膜结构的亲水蛋白,该蛋白与铁皮石斛、深圳拟兰、蝴蝶兰等兰科植物的亲缘关系较近。qRT-PCR结果显示:ArGMP基因在金线莲不同组织中的表达量差异显著,在花中的表达量最高;在不同种植温度处理条件下,25℃时表达量最高,高温严重抑制其表达;35℃高温处理不同时间显示,处理3 h后ArGMP基因表达量显著下降;而不同浓度NaCl胁迫处理对ArGMP基因表达基本无影响。【结论】克隆了甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的cDNA序列和基因组序列,发现该基因具有组织特异性表达的特点,且该基因受温度调控,而不受盐胁迫调控,这为进一步研究金线莲多糖生物合成调控机制奠定理论基础。
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关键词
金线莲
甘露
糖
-
1
-
磷酸
尿苷
转移
酶
多
糖
基因表达
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职称材料
小麦条锈菌GMPP基因克隆及其产物糖转运功能分析
2
作者
刘秀峰
许静杨
+3 位作者
杨兆顺
楼辰军
许高平
邵凤武
《四川农业大学学报》
CSCD
北大核心
2023年第1期1-5,53,共6页
【目的】探讨条形柄锈菌小麦专化型真菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst)中预测编码甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶(mannose-1-phosphate guanylyltransferase,GMPP)基因产物的糖转运功能。【方法】基于Pst转录组数据与NCBI中17个Ps...
【目的】探讨条形柄锈菌小麦专化型真菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst)中预测编码甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶(mannose-1-phosphate guanylyltransferase,GMPP)基因产物的糖转运功能。【方法】基于Pst转录组数据与NCBI中17个Pst基因组比对结果设计引物,筛选和克隆Pst的GMPP基因,命名为PsMT1,构建表达载体并导入酵母己糖转运缺失突变体EBY.VW4000,对获得的pDR196-PsMT1-EBY.VW4000重组酵母菌进行糖吸收功能互补测定。【结果】PsMT1基因的编码区为1245 bp,编码414个氨基酸,等电点为6.05。构建的无根进化树显示PsMT1与小麦秆锈菌的GMPP单独聚为一个分支。在酵母己糖转运功能缺失突变体中表达PsMT1能恢复EBY.VW4000菌体在D-甘露糖为唯一碳源的固体培养基上生长。【结论】克隆了Pst的PsMT1基因,其异源表达产物具有转运甘露糖的功能,为研究糖转运蛋白介导Pst-小麦互作的机制奠定基础。
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关键词
小麦条锈菌
糖
转运
甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶
异源表达
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职称材料
题名
金线莲甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的克隆与表达分析
被引量：
1
1
作者
李和平
林江波
黄惠明
邹晖
戴艺民
机构
福建省农业科学院亚热带农业研究所
出处
《福建农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期537-544,共8页
基金
福建省科技计划公益类专项(2020R1030003)
福建省农业科学院科技创新团队建设项目(CXTD2021001-2)。
文摘
【目的】甘露糖是金线莲多糖重要组成成分,对甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶(GMP)基因进行克隆和基因表达调控分析,为进一步研究金线莲多糖的生物合成奠定基础。【方法】以梅花山金线莲植株为材料,克隆ArGMP基因的cDNA序列和基因组序列,利用在线软件进行生物信息学分析,并对其基因表达调控模式进行qRTPCR分析。【结果】金线莲ArGMP基因ORF区序列长1086 bp,共编码361个氨基酸;基因组序列长度为1760 bp,含有3个内含子,GenBank登录号OQ030271。生物信息学分析表明:ArGMP蛋白是一种较稳定的、无跨膜结构的亲水蛋白,该蛋白与铁皮石斛、深圳拟兰、蝴蝶兰等兰科植物的亲缘关系较近。qRT-PCR结果显示:ArGMP基因在金线莲不同组织中的表达量差异显著,在花中的表达量最高;在不同种植温度处理条件下,25℃时表达量最高,高温严重抑制其表达;35℃高温处理不同时间显示,处理3 h后ArGMP基因表达量显著下降;而不同浓度NaCl胁迫处理对ArGMP基因表达基本无影响。【结论】克隆了甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的cDNA序列和基因组序列,发现该基因具有组织特异性表达的特点,且该基因受温度调控,而不受盐胁迫调控,这为进一步研究金线莲多糖生物合成调控机制奠定理论基础。
关键词
金线莲
甘露
糖
-
1
-
磷酸
尿苷
转移
酶
多
糖
基因表达
Keywords
Anoectochilus roxburghii
mannose
-
1
-
phosphate guanyltransferase
polysaccharide
gene expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
小麦条锈菌GMPP基因克隆及其产物糖转运功能分析
2
作者
刘秀峰
许静杨
杨兆顺
楼辰军
许高平
邵凤武
机构
天津市农业科学院农作物研究所
天津市农业科学院植物保护研究所
出处
《四川农业大学学报》
CSCD
北大核心
2023年第1期1-5,53,共6页
基金
天津市农业科学院青年科技创新项目(2020001)
天津市应用基础与前沿技术研究计划(15JCYBJC30800)。
文摘
【目的】探讨条形柄锈菌小麦专化型真菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst)中预测编码甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶(mannose-1-phosphate guanylyltransferase,GMPP)基因产物的糖转运功能。【方法】基于Pst转录组数据与NCBI中17个Pst基因组比对结果设计引物,筛选和克隆Pst的GMPP基因,命名为PsMT1,构建表达载体并导入酵母己糖转运缺失突变体EBY.VW4000,对获得的pDR196-PsMT1-EBY.VW4000重组酵母菌进行糖吸收功能互补测定。【结果】PsMT1基因的编码区为1245 bp,编码414个氨基酸,等电点为6.05。构建的无根进化树显示PsMT1与小麦秆锈菌的GMPP单独聚为一个分支。在酵母己糖转运功能缺失突变体中表达PsMT1能恢复EBY.VW4000菌体在D-甘露糖为唯一碳源的固体培养基上生长。【结论】克隆了Pst的PsMT1基因,其异源表达产物具有转运甘露糖的功能,为研究糖转运蛋白介导Pst-小麦互作的机制奠定基础。
关键词
小麦条锈菌
糖
转运
甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶
异源表达
Keywords
Puccinia striiformis f.sp.tritici
sugar transport
mannose
-
1
-
phosphate guanylyltransferase
heterologous expression
分类号
S435.121.42 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
金线莲甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的克隆与表达分析
李和平
林江波
黄惠明
邹晖
戴艺民
《福建农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
小麦条锈菌GMPP基因克隆及其产物糖转运功能分析
刘秀峰
许静杨
杨兆顺
楼辰军
许高平
邵凤武
《四川农业大学学报》
CSCD
北大核心
2023
0
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