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金线莲甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的克隆与表达分析
被引量:
1
1
作者
李和平
林江波
+2 位作者
黄惠明
邹晖
戴艺民
《福建农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期537-544,共8页
【目的】甘露糖是金线莲多糖重要组成成分,对甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶(GMP)基因进行克隆和基因表达调控分析,为进一步研究金线莲多糖的生物合成奠定基础。【方法】以梅花山金线莲植株为材料,克隆ArGMP基因的cDNA序列和基因组序列,利用...
【目的】甘露糖是金线莲多糖重要组成成分,对甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶(GMP)基因进行克隆和基因表达调控分析,为进一步研究金线莲多糖的生物合成奠定基础。【方法】以梅花山金线莲植株为材料,克隆ArGMP基因的cDNA序列和基因组序列,利用在线软件进行生物信息学分析,并对其基因表达调控模式进行qRTPCR分析。【结果】金线莲ArGMP基因ORF区序列长1086 bp,共编码361个氨基酸;基因组序列长度为1760 bp,含有3个内含子,GenBank登录号OQ030271。生物信息学分析表明:ArGMP蛋白是一种较稳定的、无跨膜结构的亲水蛋白,该蛋白与铁皮石斛、深圳拟兰、蝴蝶兰等兰科植物的亲缘关系较近。qRT-PCR结果显示:ArGMP基因在金线莲不同组织中的表达量差异显著,在花中的表达量最高;在不同种植温度处理条件下,25℃时表达量最高,高温严重抑制其表达;35℃高温处理不同时间显示,处理3 h后ArGMP基因表达量显著下降;而不同浓度NaCl胁迫处理对ArGMP基因表达基本无影响。【结论】克隆了甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的cDNA序列和基因组序列,发现该基因具有组织特异性表达的特点,且该基因受温度调控,而不受盐胁迫调控,这为进一步研究金线莲多糖生物合成调控机制奠定理论基础。
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关键词
金线莲
甘露
糖
-1-
磷酸
尿苷
转移
酶
多
糖
基因表达
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职称材料
小麦条锈菌GMPP基因克隆及其产物糖转运功能分析
2
作者
刘秀峰
许静杨
+3 位作者
杨兆顺
楼辰军
许高平
邵凤武
《四川农业大学学报》
CSCD
北大核心
2023年第1期1-5,53,共6页
【目的】探讨条形柄锈菌小麦专化型真菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst)中预测编码甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶(mannose-1-phosphate guanylyltransferase,GMPP)基因产物的糖转运功能。【方法】基于Pst转录组数据与NCBI中17个Ps...
【目的】探讨条形柄锈菌小麦专化型真菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst)中预测编码甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶(mannose-1-phosphate guanylyltransferase,GMPP)基因产物的糖转运功能。【方法】基于Pst转录组数据与NCBI中17个Pst基因组比对结果设计引物,筛选和克隆Pst的GMPP基因,命名为PsMT1,构建表达载体并导入酵母己糖转运缺失突变体EBY.VW4000,对获得的pDR196-PsMT1-EBY.VW4000重组酵母菌进行糖吸收功能互补测定。【结果】PsMT1基因的编码区为1245 bp,编码414个氨基酸,等电点为6.05。构建的无根进化树显示PsMT1与小麦秆锈菌的GMPP单独聚为一个分支。在酵母己糖转运功能缺失突变体中表达PsMT1能恢复EBY.VW4000菌体在D-甘露糖为唯一碳源的固体培养基上生长。【结论】克隆了Pst的PsMT1基因,其异源表达产物具有转运甘露糖的功能,为研究糖转运蛋白介导Pst-小麦互作的机制奠定基础。
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关键词
小麦条锈菌
糖
转运
甘露
糖
-1-
磷酸
鸟苷酰
转移
酶
异源表达
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职称材料
植物乳杆菌IID基因突变株的构建及对IIa类细菌素敏感性分析
被引量:
1
3
作者
熊尧
谢英
+3 位作者
张世湘
张列兵
罗云波
郝彦玲
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2013年第2期7-9,共3页
采用同源重组技术,对IIa类植物乳杆菌素LB-B1敏感的植物乳杆菌WQ0815中甘露糖磷酸转移酶系统(ElltMan)中的IID组分进行突变,利用牛津杯法分析了植物乳杆菌WQ0815 IID组分突变前后对植物乳杆菌素LB-B1的敏感性变化。结果表明,突变株对植...
采用同源重组技术,对IIa类植物乳杆菌素LB-B1敏感的植物乳杆菌WQ0815中甘露糖磷酸转移酶系统(ElltMan)中的IID组分进行突变,利用牛津杯法分析了植物乳杆菌WQ0815 IID组分突变前后对植物乳杆菌素LB-B1的敏感性变化。结果表明,突变株对植物乳杆菌素LB-B1产生抗性,说明敏感菌株中ElltMan的IID组分是植物乳杆菌素LB-B1发挥抑菌作用时的结合位点。
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关键词
植物乳杆菌素LB-B1
甘露糖磷酸转移酶
系统IID组分
突变体
功能鉴定
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职称材料
植物乳杆菌素BM-1对大肠杆菌抑菌活性的研究
被引量:
2
4
作者
张含薇
谢远红
+1 位作者
金君华
张红星
《北京农学院学报》
2019年第3期93-98,共6页
【目的】探究植物乳杆菌素BM-1对大肠杆菌的抑菌活性。【方法】通过管碟法检测植物乳杆菌素BM-1对12株大肠杆菌的抑菌活性,选取不同敏感型大肠杆菌5株,对大肠杆菌生长曲线、活菌数、生物膜的形成进行测定,并采用实时荧光定量PCR方法测...
【目的】探究植物乳杆菌素BM-1对大肠杆菌的抑菌活性。【方法】通过管碟法检测植物乳杆菌素BM-1对12株大肠杆菌的抑菌活性,选取不同敏感型大肠杆菌5株,对大肠杆菌生长曲线、活菌数、生物膜的形成进行测定,并采用实时荧光定量PCR方法测定大肠杆菌中细菌素受体基因的表达。【结果】生长曲线、活菌数、生物膜的形成试验结果显示,大肠杆菌CGMCC1.8723对植物乳杆菌素BM-1敏感性最强;实时荧光定量PCR显示植物乳杆菌素BM-1显著影响大肠杆菌甘露糖磷酸转移酶系统编码基因的表达。【结论】植物乳杆菌素BM-1对大肠杆菌表现出不同水平的抑菌活性。
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关键词
植物乳杆菌素BM-1
大肠杆菌
甘露糖磷酸转移酶
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职称材料
题名
金线莲甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的克隆与表达分析
被引量:
1
1
作者
李和平
林江波
黄惠明
邹晖
戴艺民
机构
福建省农业科学院亚热带农业研究所
出处
《福建农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期537-544,共8页
基金
福建省科技计划公益类专项(2020R1030003)
福建省农业科学院科技创新团队建设项目(CXTD2021001-2)。
文摘
【目的】甘露糖是金线莲多糖重要组成成分,对甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶(GMP)基因进行克隆和基因表达调控分析,为进一步研究金线莲多糖的生物合成奠定基础。【方法】以梅花山金线莲植株为材料,克隆ArGMP基因的cDNA序列和基因组序列,利用在线软件进行生物信息学分析,并对其基因表达调控模式进行qRTPCR分析。【结果】金线莲ArGMP基因ORF区序列长1086 bp,共编码361个氨基酸;基因组序列长度为1760 bp,含有3个内含子,GenBank登录号OQ030271。生物信息学分析表明:ArGMP蛋白是一种较稳定的、无跨膜结构的亲水蛋白,该蛋白与铁皮石斛、深圳拟兰、蝴蝶兰等兰科植物的亲缘关系较近。qRT-PCR结果显示:ArGMP基因在金线莲不同组织中的表达量差异显著,在花中的表达量最高;在不同种植温度处理条件下,25℃时表达量最高,高温严重抑制其表达;35℃高温处理不同时间显示,处理3 h后ArGMP基因表达量显著下降;而不同浓度NaCl胁迫处理对ArGMP基因表达基本无影响。【结论】克隆了甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的cDNA序列和基因组序列,发现该基因具有组织特异性表达的特点,且该基因受温度调控,而不受盐胁迫调控,这为进一步研究金线莲多糖生物合成调控机制奠定理论基础。
关键词
金线莲
甘露
糖
-1-
磷酸
尿苷
转移
酶
多
糖
基因表达
Keywords
Anoectochilus roxburghii
mannose-1-phosphate guanyltransferase
polysaccharide
gene expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
小麦条锈菌GMPP基因克隆及其产物糖转运功能分析
2
作者
刘秀峰
许静杨
杨兆顺
楼辰军
许高平
邵凤武
机构
天津市农业科学院农作物研究所
天津市农业科学院植物保护研究所
出处
《四川农业大学学报》
CSCD
北大核心
2023年第1期1-5,53,共6页
基金
天津市农业科学院青年科技创新项目(2020001)
天津市应用基础与前沿技术研究计划(15JCYBJC30800)。
文摘
【目的】探讨条形柄锈菌小麦专化型真菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst)中预测编码甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶(mannose-1-phosphate guanylyltransferase,GMPP)基因产物的糖转运功能。【方法】基于Pst转录组数据与NCBI中17个Pst基因组比对结果设计引物,筛选和克隆Pst的GMPP基因,命名为PsMT1,构建表达载体并导入酵母己糖转运缺失突变体EBY.VW4000,对获得的pDR196-PsMT1-EBY.VW4000重组酵母菌进行糖吸收功能互补测定。【结果】PsMT1基因的编码区为1245 bp,编码414个氨基酸,等电点为6.05。构建的无根进化树显示PsMT1与小麦秆锈菌的GMPP单独聚为一个分支。在酵母己糖转运功能缺失突变体中表达PsMT1能恢复EBY.VW4000菌体在D-甘露糖为唯一碳源的固体培养基上生长。【结论】克隆了Pst的PsMT1基因,其异源表达产物具有转运甘露糖的功能,为研究糖转运蛋白介导Pst-小麦互作的机制奠定基础。
关键词
小麦条锈菌
糖
转运
甘露
糖
-1-
磷酸
鸟苷酰
转移
酶
异源表达
Keywords
Puccinia striiformis f.sp.tritici
sugar transport
mannose-1-phosphate guanylyltransferase
heterologous expression
分类号
S435.121.42 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
植物乳杆菌IID基因突变株的构建及对IIa类细菌素敏感性分析
被引量:
1
3
作者
熊尧
谢英
张世湘
张列兵
罗云波
郝彦玲
机构
中国农业大学食品科学与营养工程学院.北京
出处
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2013年第2期7-9,共3页
基金
国家自然基金项目(30972292)
文摘
采用同源重组技术,对IIa类植物乳杆菌素LB-B1敏感的植物乳杆菌WQ0815中甘露糖磷酸转移酶系统(ElltMan)中的IID组分进行突变,利用牛津杯法分析了植物乳杆菌WQ0815 IID组分突变前后对植物乳杆菌素LB-B1的敏感性变化。结果表明,突变株对植物乳杆菌素LB-B1产生抗性,说明敏感菌株中ElltMan的IID组分是植物乳杆菌素LB-B1发挥抑菌作用时的结合位点。
关键词
植物乳杆菌素LB-B1
甘露糖磷酸转移酶
系统IID组分
突变体
功能鉴定
Keywords
Plantaricin LB-B1
mannose phosphotransferase system liD component
mutant
functional identification
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
植物乳杆菌素BM-1对大肠杆菌抑菌活性的研究
被引量:
2
4
作者
张含薇
谢远红
金君华
张红星
机构
北京农学院食品科学与工程学院/食品质量与安全北京实验室/农产品有害微生物及农残安全检测与控制北京市重点实验室
出处
《北京农学院学报》
2019年第3期93-98,共6页
基金
北京市教委科研计划项目(KM201810020016)
文摘
【目的】探究植物乳杆菌素BM-1对大肠杆菌的抑菌活性。【方法】通过管碟法检测植物乳杆菌素BM-1对12株大肠杆菌的抑菌活性,选取不同敏感型大肠杆菌5株,对大肠杆菌生长曲线、活菌数、生物膜的形成进行测定,并采用实时荧光定量PCR方法测定大肠杆菌中细菌素受体基因的表达。【结果】生长曲线、活菌数、生物膜的形成试验结果显示,大肠杆菌CGMCC1.8723对植物乳杆菌素BM-1敏感性最强;实时荧光定量PCR显示植物乳杆菌素BM-1显著影响大肠杆菌甘露糖磷酸转移酶系统编码基因的表达。【结论】植物乳杆菌素BM-1对大肠杆菌表现出不同水平的抑菌活性。
关键词
植物乳杆菌素BM-1
大肠杆菌
甘露糖磷酸转移酶
Keywords
plantaricin BM-1
Escherichia coli
mannose phosphotransferase system
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
金线莲甘露糖-1-磷酸尿苷转移酶基因的克隆与表达分析
李和平
林江波
黄惠明
邹晖
戴艺民
《福建农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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职称材料
2
小麦条锈菌GMPP基因克隆及其产物糖转运功能分析
刘秀峰
许静杨
杨兆顺
楼辰军
许高平
邵凤武
《四川农业大学学报》
CSCD
北大核心
2023
0
在线阅读
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职称材料
3
植物乳杆菌IID基因突变株的构建及对IIa类细菌素敏感性分析
熊尧
谢英
张世湘
张列兵
罗云波
郝彦玲
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2013
1
在线阅读
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职称材料
4
植物乳杆菌素BM-1对大肠杆菌抑菌活性的研究
张含薇
谢远红
金君华
张红星
《北京农学院学报》
2019
2
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职称材料
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