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发芽法与玻璃珠破碎法提取家蚕微孢子虫孢壳蛋白的双向电泳分析
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作者 耿莉娜 吴海晶 +4 位作者 刘婷 田锐 李田 潘国庆 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期928-934,共7页
采用不同方法获得家蚕微孢子虫孢壳,并提取孢壳蛋白进行双向电泳分析,确定适用于蛋白质组学研究的家蚕微孢子虫孢壳蛋白提取方法。通过密度梯度离心纯化家蚕微孢子虫孢子后,分别用发芽法和玻璃珠破碎法得到孢壳,再经密度梯度离心纯化孢... 采用不同方法获得家蚕微孢子虫孢壳,并提取孢壳蛋白进行双向电泳分析,确定适用于蛋白质组学研究的家蚕微孢子虫孢壳蛋白提取方法。通过密度梯度离心纯化家蚕微孢子虫孢子后,分别用发芽法和玻璃珠破碎法得到孢壳,再经密度梯度离心纯化孢壳。显微镜观察可见用发芽法得到的孢壳明显膨大趋于圆形,而用玻璃珠破碎法得到的孢壳形状变化不大,但有明显的缺口。使用蛋白质裂解液提取2种方法获取孢壳的蛋白质并进行双向电泳,在发芽法提取孢壳蛋白的双向电泳图谱中检测到205个蛋白点,在破碎法提取孢壳蛋白的双向电泳图谱中检测到413个蛋白点。采用发芽法提取过程中由于使用了碱性溶液,使孢壳表面的碱溶性蛋白脱落,导致提取的孢壳蛋白丰度降低;而玻璃珠破碎法避免了碱溶过程,提取的孢壳蛋白丰度较高,并且操作简单,有利于完整获取孢壳碱溶性蛋白和与内壁结合的蛋白。 展开更多
关键词 家蚕微孢子虫 孢壳蛋白 蛋白质组 发芽 玻璃破碎 双向电泳
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用于PCR检测的扩展青霉基因组DNA提取方法比较 被引量:4
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作者 何鸿举 焦凌霞 +3 位作者 樊明涛 刘晓娇 吕丽娟 魏新元 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期198-201,共4页
为寻找一种经济、简便、高效的基因组DNA提取方法,进一步开展扩展青霉的分子生物学研究,采用氯化苄法、玻璃珠法、玻璃珠+氯化苄法、试剂盒法4种方法提取扩展青霉的基因组DNA,并测定DNA质量浓度以及进行PCR和电泳分析,比较不同提取方法... 为寻找一种经济、简便、高效的基因组DNA提取方法,进一步开展扩展青霉的分子生物学研究,采用氯化苄法、玻璃珠法、玻璃珠+氯化苄法、试剂盒法4种方法提取扩展青霉的基因组DNA,并测定DNA质量浓度以及进行PCR和电泳分析,比较不同提取方法的效果。结果表明,4种方法均可提取到基因组DNA,其抽提质量优劣依次为试剂盒法、玻璃珠+氯化苄法、玻璃珠法、氯化苄法。其中玻璃珠+氯化苄法提取效率接近试剂盒法,效果良好,并且此法成本低廉、操作简单、结果稳定,可代替昂贵的试剂盒法用于扩展青霉基因组DNA的提取。 展开更多
关键词 氯化苄 玻璃珠法 DNA提取 PCR
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6月龄内婴幼儿ABO/RhD的血型结果及两种检测方法的对比分析 被引量:3
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作者 邵明 杨乾坤 +4 位作者 朱伟涛 孔永奎 宋婕 王静 吕先萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1589-1594,共6页
目的:应用全自动微柱玻璃珠法与试管法检测不同胎龄和月龄的6月龄内婴幼儿ABO/Rh D血型并对比结果的差异。方法:收集2018年1月-2019年2月患儿血标本896例,同时应用以上两种方法检测ABO/Rh D血型抗原并进行ABO反定型抗体检出率和凝集强... 目的:应用全自动微柱玻璃珠法与试管法检测不同胎龄和月龄的6月龄内婴幼儿ABO/Rh D血型并对比结果的差异。方法:收集2018年1月-2019年2月患儿血标本896例,同时应用以上两种方法检测ABO/Rh D血型抗原并进行ABO反定型抗体检出率和凝集强度并进行比较分析。结果:两种方法正定型均检出A型标本308例(34.4%),B型标本281例(31.4%),O型标本210例(23.4%),AB型标本97例(10.8%),Rh D血型均为阳性,ABO/Rh D血型抗原的凝集强度无明显差异(P> 0.05);除AB型外,B型患儿反定型抗体检出率明显高于A型和O型,反定型A细胞凝集强度均明显高于B细胞(P <0.05)。全自动微柱玻璃珠法检测A型和O型患儿的反定型抗体检出率及各血型患儿的反定型凝集强度均明显高于试管法(P <0.05)。足月儿组的ABO反定型抗体检出率和凝集强度均明显高于早产儿组(P <0.05)。全自动微柱玻璃珠法检测两组患儿反定型抗体检出率以及凝集强度均明显高于试管法(P <0.05)。不同月龄4组患儿中,Ⅳ组(4月龄至6月龄)患儿ABO反定型检出率和凝集强度均明显高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(3月龄以下,P<0.05)。全自动微柱玻璃珠法检测Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组患儿反定型抗体检出率及各组患儿反定型凝集强度均明显高于试管法(P <0.05)。结论:大部分婴幼儿可以准确检测出ABO/Rh D血型抗原,而ABO抗体检出率与胎龄和月龄相关。全自动微柱玻璃珠法对ABO血型的反定型抗体检出率及凝集强度均强于试管法,特别对于早产儿以及3月龄以内的患儿更为可靠和敏感。 展开更多
关键词 全自动微柱玻璃珠法 试管 6月龄内婴幼儿 ABO血型 RH血型
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腐乳中菌群基因组DNA提取方法的对比研究 被引量:4
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作者 张娜娜 徐琼 黎鸿艺 《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第10期177-181,共5页
为更好研究腐乳中微生物菌群的多样性,采用改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和玻璃珠法对腐乳中的微生物进行非培养方式的基因组DNA提取,并将提取产物进行高通量测序分析。结果显示,在基因组DNA提取浓度方面,玻璃珠法和改良CTAB法均能... 为更好研究腐乳中微生物菌群的多样性,采用改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法和玻璃珠法对腐乳中的微生物进行非培养方式的基因组DNA提取,并将提取产物进行高通量测序分析。结果显示,在基因组DNA提取浓度方面,玻璃珠法和改良CTAB法均能得到一定量的基因组DNA,且均可得到扩增条带,但玻璃珠法拖尾严重。借助高通量测序方法检测,两种提取方法得到的样品基因组DNA在文库中的序列基本都能够被测出,在门和属水平上菌群结构相差不大。综上,改良CTAB法更适合大批量样品进行非培养方式的基因组DNA提取,该方法提取得到的基因组DNA浓度高且不影响后续实验。 展开更多
关键词 腐乳 微生物 基因组DNA提取 改良CTAB 玻璃珠法 高通量测序
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一种快速高效提取酵母质粒的方法 被引量:2
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作者 张怡 刘坤 +5 位作者 曹鹏 魏森 韦丹丹 杜建 李鹏坤 李成伟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1194-1198,共5页
质粒提取是遗传工程操作的重要步骤。酵母细胞壁坚韧,不易破壁,使酵母质粒提取变得非常困难。为了获得一种快速、简便、高效、稳定的提取酵母质粒的方法,利用琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白测定仪和PCR扩增等方法,对玻璃珠液氮法、蜗牛酶法... 质粒提取是遗传工程操作的重要步骤。酵母细胞壁坚韧,不易破壁,使酵母质粒提取变得非常困难。为了获得一种快速、简便、高效、稳定的提取酵母质粒的方法,利用琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白测定仪和PCR扩增等方法,对玻璃珠液氮法、蜗牛酶法和试剂盒法提取的酵母质粒,在产率、纯度和对后续实验的影响等方面进行了比较。结果表明,与另外两种方法比较,玻璃珠液氮法提取酵母质粒具有效率高、质量好、成本低、时间短、操作简单的优点,可作为实验室规模化提取酵母质粒的常用方法。 展开更多
关键词 酵母菌 质粒提取 玻璃液氮
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大量Pichia pastoris酵母基因组DNA的提取 被引量:4
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作者 刘晓志 高健 +2 位作者 韩柱 王志明 陈伟斌 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期167-170,共4页
巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是目前应用最广泛的外源基因表达系统之一,提取酵母基因组是研究酵母必需的方法之一。针对常用的几种毕赤酵母基因组DNA的制备方法进行比较,并对玻璃珠法进行改进。改良的玻璃珠法不但具有省时... 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是目前应用最广泛的外源基因表达系统之一,提取酵母基因组是研究酵母必需的方法之一。针对常用的几种毕赤酵母基因组DNA的制备方法进行比较,并对玻璃珠法进行改进。改良的玻璃珠法不但具有省时省力、操作简便且结果稳定的优点,适合于大量DNA的提取。该方法的革新将对酵母重组子的PCR鉴定检测及表达产品DNA相关检测提供更高效稳定的保证,将成为酵母等类似微生物基因组DNA制备的首选方法。 展开更多
关键词 PICHIA pastoris酵母 基因组 蜗牛酶 玻璃珠法 改良玻璃珠法
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中国蜘蛛抱蛋属植物总DNA的抽提与纯化 被引量:4
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作者 苏何玲 唐绍清 +1 位作者 李焰斌 吕建珍 《广西园艺》 2003年第1期3-5,共3页
简述了用 CTAB法抽提蜘蛛抱蛋总 DNA的过程 ,并对遇到的问题进行了分析和讨论。利用玻璃珠纯化法对蜘蛛抱蛋总 DNA进行了纯化 ,从实验结果得出用 CTAB法抽提蜘蛛抱蛋的总 DNA和用玻璃珠法纯化蜘蛛抱蛋的总 DNA是可行的。所得到的 DNA可... 简述了用 CTAB法抽提蜘蛛抱蛋总 DNA的过程 ,并对遇到的问题进行了分析和讨论。利用玻璃珠纯化法对蜘蛛抱蛋总 DNA进行了纯化 ,从实验结果得出用 CTAB法抽提蜘蛛抱蛋的总 DNA和用玻璃珠法纯化蜘蛛抱蛋的总 DNA是可行的。所得到的 DNA可满足进一步对蜘蛛抱蛋进行分子研究的要求。 展开更多
关键词 中国 蜘蛛抱蛋属植物 总DNA 抽提 纯化 CTAB 玻璃纯化
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结核分枝杆菌菌悬液光密度值与菌落计数的关联性 被引量:8
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作者 秦云贺 王艺红 +2 位作者 郭庆龙 王洪海 张雪莲 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期150-154,共5页
目的建立一种基于光密度值计算结核分枝杆菌菌落数的可靠方法。方法利用低频超声和玻璃珠研磨两种方法制备H37Ra菌悬液,菌悬液2倍梯度稀释后,分别测定各个稀释度菌悬液在600 nm处的光密度值(OD600值),并分析OD600值与稀释倍数曲线,确... 目的建立一种基于光密度值计算结核分枝杆菌菌落数的可靠方法。方法利用低频超声和玻璃珠研磨两种方法制备H37Ra菌悬液,菌悬液2倍梯度稀释后,分别测定各个稀释度菌悬液在600 nm处的光密度值(OD600值),并分析OD600值与稀释倍数曲线,确定最佳的菌悬液制备方法,OD600线性范围,以及OD600值与CFU关联曲线。结果 OD600值为0.1~0.6,线性范围内OD600值与稀释倍数线性回归分析结果显示,玻璃珠研磨法和低频超声法相关系数(R2)分别为0.98、1.00,均呈良好的相关性,且低频超声法比玻璃珠研磨法的相关性好,其菌液分散更均匀。OD600值与CFU值线性回归分析结果显示,玻璃珠研磨法和低频超声法回归方程分别是:CFU=2.35×107×OD600+4.42×105、CFU=3.26×107×OD600+6.89×105。结论低频超声法是一种较好的结核分枝杆菌菌悬液制备方法,结合OD600值测定,可成为一种可靠、快速的结核分枝杆菌定量方法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 菌落形成单位 OD600 CFU 定量 低频超声 玻璃研磨
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多烯康的降血脂及抗血小板作用10例观察
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作者 魏婉丽 《实用医学杂志》 CAS 1994年第5期459-460,共2页
多烯康的降血脂及抗血小板作用10例观察中船总公司433厂魏婉丽近年来不少临床实验已经证实鱼油20碳5烯酸(EPA)和22碳6烯酸(DHA)有降脂和抗血小板作用。本文观察了EPA和DHA对10例高脂血症患者的血脂、血小... 多烯康的降血脂及抗血小板作用10例观察中船总公司433厂魏婉丽近年来不少临床实验已经证实鱼油20碳5烯酸(EPA)和22碳6烯酸(DHA)有降脂和抗血小板作用。本文观察了EPA和DHA对10例高脂血症患者的血脂、血小板聚集、粘附功能及血液粘度的变化。... 展开更多
关键词 多烯康 降血脂 抗血小板 血液粘度 玻璃
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