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玻璃化冻存对鲫鱼卵细胞活性的影响
1
作者 沈蔷 章海敏 +1 位作者 施旆旆 胡军祥 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期83-88,共6页
以鲫鱼Carassius cuvieri未成熟的卵细胞为材料,研究了玻璃化冻存对鲫鱼卵细胞的存活率及琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响.结果表明：鲫鱼卵细胞存活率在1～6 d下降明显,6～8 d下降趋势减弱,保持相对稳定;琥珀酸脱氢酶活性呈显著下降（P... 以鲫鱼Carassius cuvieri未成熟的卵细胞为材料,研究了玻璃化冻存对鲫鱼卵细胞的存活率及琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响.结果表明：鲫鱼卵细胞存活率在1～6 d下降明显,6～8 d下降趋势减弱,保持相对稳定;琥珀酸脱氢酶活性呈显著下降（P＜0.05）.玻璃化冻存液VSd组的冻存效果最好,其组分为180.0 g·L-1 1,2-丙二醇,110.0 g·L-1甲醇,0.1 mol· L-1海藻糖和40.0 g·L-1聚乙二醇.该玻璃化冻存液配方及方法在一定时间内保存鲫鱼未成熟卵细胞具有一定的应用价值. 展开更多
关键词 动物学 卵细胞 玻璃化冻存 玻璃化冻存液 存活率 琥珀酸脱氢酶(SDH)
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魔芋茎尖玻璃化冻存研究 被引量：21
2
作者 张玉进 张兴国 +1 位作者 庞杰 刘佩瑛 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期97-102,共6页
研究了魔芋茎尖玻璃化冻存的主要技术环节，建立了较适宜的魔芋种质资源超低温保存体 系：在实体显微镜下，从继代培养 ２周的不定芽上切取 １～１． ３３ ｍｍ大小的茎尖，经０． ７ ｍｏｌ／Ｌ蔗糖的 ＭＳ－ＮＨ４＋培养液室内预培养... 研究了魔芋茎尖玻璃化冻存的主要技术环节，建立了较适宜的魔芋种质资源超低温保存体 系：在实体显微镜下，从继代培养 ２周的不定芽上切取 １～１． ３３ ｍｍ大小的茎尖，经０． ７ ｍｏｌ／Ｌ蔗糖的 ＭＳ－ＮＨ４＋培养液室内预培养 ２ｄ，玻璃化溶液ＰＶＳ２室温下处理 １０～２０ ｍｉｎ，直接投入液氮中保存。保 存后，茎尖经 ４０～７７℃水浴快速化冻， １． ２ ｍｏｌ／Ｌ蔗糖的培养液洗 ２次，各 １０ ｍｉｎ，暗中培养 ２周后转 入光下。冻存的茎尖直接生长发育或经愈伤组织再分化形成完整植株，存活率为５０％～７０％。从基因 组ＤＮＡ检测结果表明，魔芋茎尖经超低温保存后，其遗传特性未发生改变。 展开更多
关键词 玻璃化冻存 超低温保存 魔芋 茎尖 种质保存
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玻璃化冻存对羊软骨细胞的影响 被引量：3
3
作者 黄佩龙 张绍志 +1 位作者 虞效益 胡军祥 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期269-274,共6页
对玻璃化冻存后羊Ovis aries软骨细胞的存活率和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性进行了初步研究。结果表明：细胞存活率随着冻存时间的延长而逐渐下降,但下降速度不明显;SDH活性在玻璃化冻存1~20 d变化幅度较大,20~30 d下降趋势减弱,保持相对... 对玻璃化冻存后羊Ovis aries软骨细胞的存活率和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性进行了初步研究。结果表明：细胞存活率随着冻存时间的延长而逐渐下降,但下降速度不明显;SDH活性在玻璃化冻存1~20 d变化幅度较大,20~30 d下降趋势减弱,保持相对稳定。从各项指标来看,认为玻璃化溶液VSb组的冻存效果最好,在经过5,10,15,20和30 d的冻存后,其存活率分别为85.47%±1.78%,80.73%±1.81%,78.62%±2.06%,76.35%±2.58%和73.83%±1.49%,细胞SDH活性吸光度值分别为0.49±0.064,0.444±0.073,0.394±0.039,0.354±0.082和0.339±0.053。该玻璃化冻存方法对长期冻存羊软骨细胞具有一定的实际应用意义。 展开更多
关键词 动物学 玻璃化冻存 软骨细胞 存活率 琥珀酸脱氢酶 绵羊
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玻璃化冻存对斑马鱼卵母细胞的影响 被引量：1
4
作者 方晨 韦祥相 +2 位作者 张钊 李贤梅 张小雪 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期773-777,共5页
采用比色法测定了在不同玻璃化冻存液中冻存1、2、4、8d时斑马鱼卵母细胞中谷胱甘肽含量和三磷酸腺苷酶的活性,以研究玻璃化冻存对卵母细胞谷胱甘肽含量和线粒体三磷酸腺苷酶活性的影响。试验结果显示,V4组斑马鱼(玻璃化液组分是:1.5mo... 采用比色法测定了在不同玻璃化冻存液中冻存1、2、4、8d时斑马鱼卵母细胞中谷胱甘肽含量和三磷酸腺苷酶的活性,以研究玻璃化冻存对卵母细胞谷胱甘肽含量和线粒体三磷酸腺苷酶活性的影响。试验结果显示,V4组斑马鱼(玻璃化液组分是:1.5mol/L甲醇、6.0mol/L乙二醇、0.25mol/L蔗糖)卵母细胞冻存1、2、4、8d后存活率最高[分别为(48.89±2.58)%、(39.35±1.34)%、(24.18±2.32)%和(14.56±1.64)%],显著高于其他组。经玻璃化冻存后,斑马鱼卵母细胞谷胱甘肽含量和线粒体三磷酸腺苷酶活性均随冻存天数的增加而显著下降(P<0.05)。V4组的谷胱甘肽含量[(13.37±0.59)mg/g]和线粒体三磷酸腺苷酶活性较高,线粒体Ca^(2+)-三磷酸腺苷酶[(3.823±0.144)U/mg]、Mg^(2+)-三磷酸腺苷酶[(4.503±0.144)U/mg]和Na^+/K^+-三磷酸腺苷酶[(7.520±0.198)U/mg]活性最高。各组细胞的活性随着冻存天数的增加而逐渐下降。试验结果表明,玻璃化冻存不能完全避免低温和冷冻保护剂的毒性和对卵母细胞的损伤。 展开更多
关键词 斑马鱼 卵母细胞 玻璃化冻存 谷胱甘肽 线粒体三磷酸腺苷酶
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玻璃化冻存对胚胎神经细胞活性及脊髓移植的影响 被引量：2
5
作者 胡军祥 姜玉新 +3 位作者 周晴 郑斯涌 曾跃武 冯春木 《杭州大学学报（自然科学版）》 CSCD 1999年第1期65-69,共5页
采用玻璃化冻存技术对大鼠胚胎神经细胞进行深低温保存，在冻存１ｄ、１０ｄ、２０ｄ和４０ｄ后，３８℃水浴快速复温，离心洗脱冷冻保护剂，检测胚胎神经细胞的活性与功能，并移植于脊髓损伤大鼠．实验结果表明：玻璃化冻存４０ｄ的胚... 采用玻璃化冻存技术对大鼠胚胎神经细胞进行深低温保存，在冻存１ｄ、１０ｄ、２０ｄ和４０ｄ后，３８℃水浴快速复温，离心洗脱冷冻保护剂，检测胚胎神经细胞的活性与功能，并移植于脊髓损伤大鼠．实验结果表明：玻璃化冻存４０ｄ的胚胎神经细胞，存活率为７６．４±８．３％，膜完整性为冻存前的６９．４±７．８％．细胞活力虽有下降，但仍可维持较高水平．培养１周的部分神经元建立突触联系。 展开更多
关键词 胚胎 神经细胞 脊髓移植 玻璃化冻存 活性
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脐血干细胞玻璃化冻存技术研究 被引量：3
6
作者 吴一峰 高燕平 钱凯先 《浙江大学学报（工学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1526-1529,共4页
以羟乙基淀粉(HES)法分离所得的脐血干细胞作为材料,进行玻璃化超低温保存,探索和建立最合适的保护剂浓度和预处理时间,以期在细胞冻融后获得较高的活率.采用系列体积分数的玻璃化冷冻保护剂(PVS2)预处理不同的时间,样品在完全浓度的玻... 以羟乙基淀粉(HES)法分离所得的脐血干细胞作为材料,进行玻璃化超低温保存,探索和建立最合适的保护剂浓度和预处理时间,以期在细胞冻融后获得较高的活率.采用系列体积分数的玻璃化冷冻保护剂(PVS2)预处理不同的时间,样品在完全浓度的玻璃化保护剂中直接存入液氮.冻融后的细胞经过噻唑蓝(MTT)法和FDA PI双荧光染色法检测存活率,获得预处理过程的优化条件:体积分数为60%的PVS2,预处理15min,FDA PI值为46.43.用海藻糖取代原保护剂中的蔗糖,与同样条件下含蔗糖保护剂处理的细胞相比较,FDA PI最大值高于后者20.25%,CD34+回收率最大值高于后者25.64%,表明含海藻糖的保护剂在该冻存技术中的保护效果明显优于含蔗糖的保仿剂. 展开更多
关键词 脐血干细胞 分离 玻璃化冻存 活率检测 海藻糖
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鱼类卵母细胞玻璃化冻存的研究进展及前景展望 被引量：2
7
作者 章海敏 姜红强 虞效益 《现代农业科技》 2016年第6期240-242,共3页
玻璃化冻存是指利用一种或多种高浓度冷冻保护剂(即玻璃化液)保护待冷冻的生物材料,直接投入液氮中进行冻存的方法。近年来,鱼类卵细胞和胚胎的低温和超低温保存研究引起人们重视。本文针对现阶段研究进展及存在的主要问题进行综述,并... 玻璃化冻存是指利用一种或多种高浓度冷冻保护剂(即玻璃化液)保护待冷冻的生物材料,直接投入液氮中进行冻存的方法。近年来,鱼类卵细胞和胚胎的低温和超低温保存研究引起人们重视。本文针对现阶段研究进展及存在的主要问题进行综述,并对鱼卵细胞常用活性检测方法进行汇总。 展开更多
关键词 鱼卵细胞 玻璃化冻存 影响因子 活性检测
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海洋微藻的玻璃化冻存技术研究进展 被引量：4
8
作者 林小园 刘红全 袁卫生 《江苏农业科学》 北大核心 2014年第1期190-194,共5页
微藻的营养丰富,在生活和生产实践中备受研究者的亲睐,但由于海洋微藻的长时间培养和多次接种易导致藻种污染或遗传漂变,使微藻的科研工作和商业化开发受到极大的限制。因此有效的藻种保存方法是进一步研究和开发利用海洋微藻的关键。... 微藻的营养丰富,在生活和生产实践中备受研究者的亲睐,但由于海洋微藻的长时间培养和多次接种易导致藻种污染或遗传漂变,使微藻的科研工作和商业化开发受到极大的限制。因此有效的藻种保存方法是进一步研究和开发利用海洋微藻的关键。玻璃化保存技术是一门新兴的生物技术,具有操作简便、快速、高效等特点,是目前海洋微藻种质资源长期稳定保存的理想方法。现对玻璃化法超低温保存的原理、优点,玻璃化冻存法的操作程序、影响因素、关键技术和海洋微藻冻存苗的应用前景进行综述,并对其今后的发展进行了展望。 展开更多
关键词 海洋微藻 玻璃化冻存 研究进展
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2种绿藻的玻璃化冻存研究 被引量：1
9
作者 刘红全 袁莎 +4 位作者 林小园 李洁琼 龙寒 禤金彩 何秀苗 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第21期183-186,共4页
收集对数生长后期细胞,采用不同配方及浓度的玻璃化冻存液以及不同的冻存步骤对胶网藻HE01和小球藻HE07进行冷冻保存试验,通过复苏后的细胞存活率判断适合的冻存液和冻存步骤。结果发现,不同的微藻所需的冻存液不同。对HE01和HE07海洋... 收集对数生长后期细胞,采用不同配方及浓度的玻璃化冻存液以及不同的冻存步骤对胶网藻HE01和小球藻HE07进行冷冻保存试验,通过复苏后的细胞存活率判断适合的冻存液和冻存步骤。结果发现,不同的微藻所需的冻存液不同。对HE01和HE07海洋微藻分别使用5%DMSO+15%乙二醇+25%蔗糖溶液和15%DMSO+15%乙二醇+25%蔗糖溶液做为冻存剂,4℃条件下30 min后,转入-20℃预冻存2 h,再-80℃过夜后投入液氮中保存,胶网藻HE01和小球藻HE07的冻存率分别为70.2%、70.59%。复苏后微藻生长状况良好。 展开更多
关键词 胶网藻 小球藻 玻璃化冻存 抗冻保护剂
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瓯柑愈伤组织的玻璃化法超低温保存研究 被引量：23
10
作者 陈勇 陈娴婷 王君晖 《浙江大学学报（理学版）》 CAS CSCD 2004年第2期197-201,共5页
采用玻璃化法对瓯柑愈伤组织进行超低温保存研究.瓯柑愈伤组织在含5%二甲亚砜(DMSO)的MS培养基上预培养5d,室温下60%PVS2预处理20min,然后用100%PVS2于0℃处理40min,投入液氮(LN)保存,24h后在40℃水浴中迅速化冻,再用1.2mol/L蔗糖培养... 采用玻璃化法对瓯柑愈伤组织进行超低温保存研究.瓯柑愈伤组织在含5%二甲亚砜(DMSO)的MS培养基上预培养5d,室温下60%PVS2预处理20min,然后用100%PVS2于0℃处理40min,投入液氮(LN)保存,24h后在40℃水浴中迅速化冻,再用1.2mol/L蔗糖培养液洗涤3次.用氯化三苯四氮唑(TTC)法检测,其存活率可达85.62%.冻后的愈伤组织转移到MS+6-BA0.5mg/L继代培养基上,在黑暗中培养生长,存活率可达76.32%.分析讨论了瓯柑愈伤组织玻璃化法超低温保存中存在的一些问题及意义,并对其前景进行了展望. 展开更多
关键词 瓯柑 愈伤组织 超低温保存 玻璃化冻存法 芸香科 中药材
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