不同品系小鼠胚胎玻璃化冷冻保存的比较研究 被引量：14

1

作者 刘丽均 顾建忠 +4 位作者 朱东琴 符杰 施美莲 张瑞忠 徐平 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第2期77-80,F003,共5页

目的　研究甘油作为冷冻保护剂、不同基因型小鼠对胚胎玻璃化冷冻的影响。方法　采用 6 5mol L的甘油作为冷冻保护剂 ,采用二步法对CBA、NOD、C57BL 6J、ICR及CD1小鼠 3 5d的胚胎进行玻璃化冷冻 ,并比较了不同品系小鼠胚胎的复苏率及... 目的　研究甘油作为冷冻保护剂、不同基因型小鼠对胚胎玻璃化冷冻的影响。方法　采用 6 5mol L的甘油作为冷冻保护剂 ,采用二步法对CBA、NOD、C57BL 6J、ICR及CD1小鼠 3 5d的胚胎进行玻璃化冷冻 ,并比较了不同品系小鼠胚胎的复苏率及移植受孕率。结果和结论　CBA、NOD、C57BL 6J,ICR及CD1的复苏率分别为 5 7 6 %、4 8%、31 3%、86 5 %及 88% ,移植受孕率为 2 1%、2 3 5 %、11%、38%和 35 5 % ,封闭群小鼠的胚胎复苏率、移植受孕率均显著高于近交系小鼠。这提示胚胎的复苏率及移植受孕率可能与小鼠的不同基因型有关。五个品系中 ,桑椹胚及早期囊胚的体外复苏率均显著高于扩张囊胚。 展开更多

关键词 品系 小鼠 胚胎玻璃化冷冻保存 比较研究 复苏率 移植受孕率

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠囊胚玻璃化冷冻保存研究 被引量：6

2

作者 孙艳香 姜国诚 雷俊英 《广西师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第3期73-75,共3页

在 2 0°C室温下 ,用玻璃化冷冻液 (体积分数为 0 .4的乙二醇 ,质量浓度为 0 .1 8kg/L的葡聚糖和 0 .3mol/L海藻糖 )对昆明小白鼠囊胚进行一步法和二步法玻璃化冷冻保存 .一步法的 1 min平衡组和二步法的0 .5 min平衡组胚胎解冻后 ... 在 2 0°C室温下 ,用玻璃化冷冻液 (体积分数为 0 .4的乙二醇 ,质量浓度为 0 .1 8kg/L的葡聚糖和 0 .3mol/L海藻糖 )对昆明小白鼠囊胚进行一步法和二步法玻璃化冷冻保存 .一步法的 1 min平衡组和二步法的0 .5 min平衡组胚胎解冻后 ,体外培养 2 4h后的发育率较高 ,都为 91 % ,与对照组 (98% )相比无显著差异 (P>0 .0 5 ) ;体外培养 48h后的囊胚孵化率较好 ,分别为 48%和 5 1 % ,但与对照组 (90 % )相比 ,均有极显著差异(P<0 .0 1 ) .将此两组冷冻囊胚植入假孕 3 d的受体鼠子宫内 ,其产仔率分别为 43 %和 5 0 % ,与对照组 (5 5 % )相比 ,均无显著差异 (P>0 .0 5 ) . 展开更多

关键词 小鼠 囊胚 玻璃化冷冻保存 一步法 二步法 胚胎冷冻 体外发育率

在线阅读 下载PDF 职称材料

卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展 被引量：7

3

作者 李林凤 关伟军 +2 位作者 马月辉 史文清 韩俊文 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第5期28-30,共3页

随着许多哺乳动物卵母细胞冷冻的成功,哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存技术取得了不断发展。作者列举比较了开口式拉长细管法、电镜铜网法、固体表面法和尼龙环法等多种卵母细胞的玻璃化冷冻保存方法,并对影响卵母细胞玻璃化冷冻保存的... 随着许多哺乳动物卵母细胞冷冻的成功,哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存技术取得了不断发展。作者列举比较了开口式拉长细管法、电镜铜网法、固体表面法和尼龙环法等多种卵母细胞的玻璃化冷冻保存方法,并对影响卵母细胞玻璃化冷冻保存的细胞骨架等因素进行了阐述。讨论后提出自己的建议。 展开更多

关键词 卵母细胞 玻璃化冷冻保存 细胞骨架

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸡胚19期原始生殖细胞慢速冷冻和玻璃化冷冻保存的研究 被引量：4

4

作者 韩威 李碧春 +4 位作者 朱云芬 秦洁 周冠月 陈国宏 张学余 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第3期55-59,共5页

本研究对发育至第19期的鸡胚性腺原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)分离提纯后,在DMEM中添加冷冻保护剂DMSO(二甲基亚砜)、EG(乙二醇)、蔗糖、PVP(聚乙烯吡咯烷酮)分别组成6种慢速冷冻保护液和6种玻璃化冷冻保护液,进行超低温... 本研究对发育至第19期的鸡胚性腺原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)分离提纯后,在DMEM中添加冷冻保护剂DMSO(二甲基亚砜)、EG(乙二醇)、蔗糖、PVP(聚乙烯吡咯烷酮)分别组成6种慢速冷冻保护液和6种玻璃化冷冻保护液,进行超低温冷冻保存。复苏后苔盼蓝染色测定细胞存活率,体外接种培养、传代。结果:①慢速冷冻保存中,PGCs在慢速冷冻液V(10%EG+10%FBS+0.1mol/L蔗糖)条件下复苏后存活率最高(92.20%),且与慢速冷冻液I(10%DMSO+10%FBS)存活率之间差异显著(P<0.05)。②玻璃化冷冻保存中,PGCs在玻璃化冷冻液I(10%DMSO+10%EG+20%FBS+10%PVP)条件下复苏后存活率最高(84.15%),且与其余5种玻璃化冷冻液下复苏后存活率之间差异均极显著(P<0.01)。③培养传至第3代的慢速冷冻复苏后PGCs细胞和培养传至第2代的玻璃化冷冻复苏后PGCs细胞,PAS染色、AKP染色呈阳性并保持完整的二倍体核型。 展开更多

关键词 鸡 原始生殖细胞 慢速冷冻保存 玻璃化冷冻保存 培养传代

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠原核胚玻璃化冷冻保存技术的研究 被引量：2

5

作者 朱士恩 权国波 +3 位作者 吴通义 周崇 曾申明 张忠诚 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2003年第2期69-73,共5页

目的　原核胚是转基因等生物技术所必需的主要材料 ,其冷冻保存使操作不受时间和空间的限制。另外 ,冷冻保存还可以避免体外培养过程中的细胞发育阻断期。方法　在室温 (2 0℃或 2 5℃ )条件下 ,以乙二醇、DMSO为主体抗冻保护剂配制成... 目的　原核胚是转基因等生物技术所必需的主要材料 ,其冷冻保存使操作不受时间和空间的限制。另外 ,冷冻保存还可以避免体外培养过程中的细胞发育阻断期。方法　在室温 (2 0℃或 2 5℃ )条件下 ,以乙二醇、DMSO为主体抗冻保护剂配制成的玻璃化溶液 (EFS、EDT、EDFS) ,不借助冷冻仪 ,对小鼠原核胚进行一步法和二步法玻璃化冷冻保存。结果　 2 0℃室温条件下 ,用EDFS4 0平衡 1min一步法冷冻解冻后的原核胚 ,经培养后囊胚发育率最高仅为 4 7% ,与新鲜原核体外培养的对照组 (75 % )的差异极显著 (P <0 0 1) ;当原核在 10 %E +10 %D溶液中预处理 5min ,移入EDFS30中平衡 30s二步法冷冻保存 ,解冻后的囊胚发育率达 6 8%。而室温升至 2 5℃ ,二步法冷冻保存后原核胚的囊胚发育率高达 77% ,与对照组差异无显著性 (P >0 0 5 )。用最佳冷冻组的原核胚或解冻后培养到囊胚移植给受体母鼠均获得产仔。结论　本研究对小鼠原核胚实施玻璃化冷冻保存 ,经体外培养和移植结果与对照组无显著性差异 。 展开更多

关键词 小鼠 原核胚 玻璃化冷冻保存 体外培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

绵羊卵母细胞玻璃化冷冻保存实验 被引量：4

6

作者 李辉 张居农 《云南畜牧兽医》 2002年第4期22-23,共2页

采用玻璃化冷冻保存方法,对375个成熟的绵羊卵母细胞进行冷冻,解冻后进行体外受精。结果为:形态完好率94.4%,卵裂114个,36个受精卵达到早期桑葚胚的阶段。实验的目的在于尝试绵羊卵母细胞玻璃化冷冻保存的可能性,相信绵羊卵母细胞冷冻... 采用玻璃化冷冻保存方法,对375个成熟的绵羊卵母细胞进行冷冻,解冻后进行体外受精。结果为:形态完好率94.4%,卵裂114个,36个受精卵达到早期桑葚胚的阶段。实验的目的在于尝试绵羊卵母细胞玻璃化冷冻保存的可能性,相信绵羊卵母细胞冷冻保存问题最终会得到解决。 展开更多

关键词 玻璃化冷冻保存 绵羊 卵母细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

胚胎玻璃化冷冻保存技术及其在牛和猪应用的研究进展 被引量：6

7

作者 谭世俭 《广西畜牧兽医》 2002年第3期38-41,共4页

关键词 胚胎玻璃化冷冻保存技术 牛 猪 应用 胚胎移植

在线阅读 下载PDF 职称材料

渤海黑牛超数排卵与胚胎玻璃化冷冻保存研究

8

作者 游伟 赵书庆 +5 位作者 靳青 姜富贵 成海建 宋恩亮 张冬梅 谭秀文 《山东农业科学》 北大核心 2022年第10期117-121,共5页

渤海黑牛目前存栏量急剧下降,亟需对这一宝贵种质资源进行抢救性保护。本试验选用青年牛作为供体进行超数排卵处理,研究季节、促卵泡素(FSH)来源、饲粮成分对其超数排卵效果的影响,并将获得的可用胚胎利用冷冻载杆进行玻璃化冷冻保存。... 渤海黑牛目前存栏量急剧下降,亟需对这一宝贵种质资源进行抢救性保护。本试验选用青年牛作为供体进行超数排卵处理,研究季节、促卵泡素(FSH)来源、饲粮成分对其超数排卵效果的影响,并将获得的可用胚胎利用冷冻载杆进行玻璃化冷冻保存。结果表明:(1)春季头均可用胚数、胚胎可用率显著高于冬季(P<0.05);(2)使用国产FSH渤海黑牛的超排有效率、头均胚胎数、头均可用胚数、胚胎可用率显著低于进口FSH(P<0.05);(3)含胚芽玉米组超排有效率、头均胚胎数、头均可用胚数、胚胎可用率均显著高于不含胚芽玉米组(P<0.05);(4)玻璃化冷冻保存85枚胚胎,胚胎冷冻可用率为82.52%,杆均胚胎数为2.30枚。本试验为渤海黑牛体内胚胎生产及种质资源保存提供了一定的参考。 展开更多

关键词 渤海黑牛 超数排卵 体内胚胎 玻璃化冷冻保存

在线阅读 下载PDF 职称材料

哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存概况及其常用方法 被引量：1

9

作者 曹亮 聂旭 《黑龙江动物繁殖》 2009年第4期10-11,共2页

哺乳动物卵母细胞和胚胎的超低温冷冻保存技术，是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等生物技术不可缺少的部分。Rall和Fahy于1985年首次报道了用玻璃化方法来冷冻保存小鼠胚胎，这种方法不仅大大简化了冷冻过程，而且减少了由于细胞冰... 哺乳动物卵母细胞和胚胎的超低温冷冻保存技术，是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等生物技术不可缺少的部分。Rall和Fahy于1985年首次报道了用玻璃化方法来冷冻保存小鼠胚胎，这种方法不仅大大简化了冷冻过程，而且减少了由于细胞冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤，提高了冷冻效率。 展开更多

关键词 玻璃化冷冻保存 哺乳动物胚胎 常用方法 冷冻保存技术 卵母细胞 胚胎移植 体外受精 生物技术

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛胚胎玻璃化冷冻保存研究进展

10

作者 史福艳 李建栋 +1 位作者 董雅娟 柏学进 《黑龙江动物繁殖》 2007年第1期12-14,共3页

所谓的玻璃化冷冻就是在完全的玻璃化状态下冷冻保存细胞、组织或器官。为了在一定冷冻速度下形成玻璃化，需要使用高浓度的可渗透性低温保护剂。

关键词 玻璃化冷冻保存 牛胚胎 低温保护剂 冷冻速度 可渗透性 器官

在线阅读 下载PDF 职称材料

新生小鼠卵巢组织玻璃化冷冻保存与异体异位移植研究 被引量：1

11

作者 廖海艳 周卫国 王方剑 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第9期71-75,共5页

开展小鼠新生胎儿卵巢组织冷冻保存与移植研究,为建立家畜卵巢组织冷冻保存与移植技术奠定基础。采用微滴法玻璃化冻存方法处理卵巢,卵巢复苏后移植到昆明系雄性小鼠受体肾囊下,19只雄性受体鼠接受了卵巢移植,每侧肾囊移植2枚,卵巢共移... 开展小鼠新生胎儿卵巢组织冷冻保存与移植研究,为建立家畜卵巢组织冷冻保存与移植技术奠定基础。采用微滴法玻璃化冻存方法处理卵巢,卵巢复苏后移植到昆明系雄性小鼠受体肾囊下,19只雄性受体鼠接受了卵巢移植,每侧肾囊移植2枚,卵巢共移植1日龄小鼠卵巢38个。饲喂28 d有效回收移植卵巢的受体鼠为17只,受体总有效率分别为89.4%;有效回收移植卵巢30个,卵巢总回收率为78.9%。结果表明,小鼠早期卵巢经过冷冻、解冻并异体异位移植后,其原始卵泡能够重新启动生长发育。 展开更多

关键词 小鼠 玻璃化冷冻保存 卵巢移植

在线阅读 下载PDF 职称材料

世界首例玻璃化冷冻保存体细胞克隆牛的胚胎移植犊牛在莱阳农学院诞生

12

《黑龙江动物繁殖》 2003年第4期40-40,共1页

世界首例玻璃化超快速冷冻保存的体细胞克隆牛的超数排卵,胚胎移植犊牛,于2003年10月8日凌晨3点18分在莱阳农学院诞生.

关键词 玻璃化冷冻保存 体细胞 克隆牛 胚胎移植

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠早期胚胎的EFS20/40、EFS40、DAP213和GP25玻璃化法冷冻保存 被引量：3

13

作者 梁洋 杜文敬 +2 位作者 王春生 朴善花 安铁洙 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1248-1252,共5页

为了筛选适合用于小鼠不同发育时期胚胎的玻璃化冷冻方法,采用EFS20/40、EFS40、DAP213和GP25法分别冷冻保存不同发育期的小鼠胚胎。结果表明,采用EFS20/40法冷冻的2细胞期胚经解冻后发育至扩张囊胚的比率(93%)显著高于EFS40、DAP213和G... 为了筛选适合用于小鼠不同发育时期胚胎的玻璃化冷冻方法,采用EFS20/40、EFS40、DAP213和GP25法分别冷冻保存不同发育期的小鼠胚胎。结果表明,采用EFS20/40法冷冻的2细胞期胚经解冻后发育至扩张囊胚的比率(93%)显著高于EFS40、DAP213和GP25法(分别为70.9%、39.1%和11.1%)(P<0.01);采用EFS20/40法冷冻保存小鼠4～8细胞期胚时,与EFS40相比,解冻后发育至扩张囊胚的比率差异不显著(分别为86.2%和90.0%),但与DAP213(64.5%,P<0.05)和GP25法(47.8%,P<0.01)相比其扩张囊胚率显著增高。此外,虽然EFS40法与EFS20/40法冷冻保存小鼠桑椹胚解冻后的扩张囊胚率差异不显著(分别为68.9%和70.8%),但均显著高于DAP213(38.9%)和GP25法(37.5%)(P<0.01)。结果表明,EFS20/40法适合用于小鼠的2细胞期冷冻保存,而EFS20/40和EFS40法均适合用于4～8细胞期胚和桑椹胚的冷冻。 展开更多

关键词 小鼠 早期胚胎 玻璃化冷冻保存 体外培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪卵母细胞、胚胎玻璃化冷冻初步研究(续上期)

14

作者 张德福 刘东 +3 位作者 王邵凯 王少兵 芮荣 汤琳琳 《中国畜禽种业》 2005年第12期45-47,共3页

关键词 猪卵母细胞 玻璃化冷冻保存 冷冻效果 体外受精 早期胚胎 冷冻过程 孵化囊胚 基础液 玻璃化冷冻液 存活率

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛卵母细胞玻璃化冷冻研究进展

15

作者 李丽萍 戴雁峰 《湖北畜牧兽医》 2021年第8期19-22,共4页

探讨了玻璃化冷冻对牛卵母细胞的损伤以及目前常用的改善方法,以期降低牛卵母细胞玻璃化冷冻带来的损伤。

关键词 玻璃化冷冻保存 卵母细胞 牛

在线阅读 下载PDF 职称材料

N-乙酰半胱氨酸对玻璃化冻存小鼠GV期卵母细胞成熟和后续胚胎发育能力影响 被引量：4

16

作者 周佳勃 张宇霆 +4 位作者 岳巍 邢月超 汪顺伟 孙梦 岳顺利 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期76-82,共7页

冷冻保存后的GV期卵母细胞内大量积累ROS,影响胚胎发育。NAC作为一种抗氧化剂,可缓解氧应激造成的损伤。但NAC对冷冻GV期卵母细胞是否存在维持作用尚待研究。为探究NAC在冷冻、解冻后小鼠GV期卵母细胞发育中作用,检测冷冻保存后小鼠GV... 冷冻保存后的GV期卵母细胞内大量积累ROS,影响胚胎发育。NAC作为一种抗氧化剂,可缓解氧应激造成的损伤。但NAC对冷冻GV期卵母细胞是否存在维持作用尚待研究。为探究NAC在冷冻、解冻后小鼠GV期卵母细胞发育中作用,检测冷冻保存后小鼠GV期卵母细胞在添加不同浓度NAC成熟培养液后成熟情况,观察其卵裂率与囊胚率、线粒体分布、ROS水平和受精后胚胎发育等。结果表明,添加1.5 mmol·L^(-1)NAC,冷冻保存后,小鼠GV期卵母细胞,线粒体排布均匀,卵母细胞比例显著提高,ROS水平降低。NAC可改善小鼠GV期卵母细胞经冷冻保存后复苏和体外成熟水平,提高其发育能力。 展开更多

关键词 小鼠 N-乙酰半胱氨酸 玻璃化冷冻保存 卵母细胞 ROS

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠的胚胎冷冻保存研究

17

作者 曲玉秀 刘铁铮 +1 位作者 汤家铭 成国祥 《四川畜牧兽医》 2002年第12期28-29,共2页

随着生物工程技术的进步,出现了许多生物工程小鼠品系,促使小鼠胚胎冷冻保存技术得到了广泛的应用。采用胚胎冷冻的方法来长期的保存这些品系,可以节省大量的人力和物力。目前,在小鼠胚胎冷冻方面的研究主要是围绕提高存活率和简化操作... 随着生物工程技术的进步,出现了许多生物工程小鼠品系,促使小鼠胚胎冷冻保存技术得到了广泛的应用。采用胚胎冷冻的方法来长期的保存这些品系,可以节省大量的人力和物力。目前,在小鼠胚胎冷冻方面的研究主要是围绕提高存活率和简化操作过程,本文综述了在小鼠胚胎冷冻保存方面的国内外研究进展。 展开更多

关键词 小鼠 胚胎冷冻 玻璃化冷冻保存

在线阅读 下载PDF 职称材料

我国首例体细胞克隆牛生子

18

作者 刘学军 《畜牧兽医科技信息》 2004年第1期28-28,共1页

关键词 牛 体细胞克隆 超数排卵 玻璃化冷冻保存技术 胚胎保存 繁殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

科技博览

19

《农村百事通》 2003年第23期7-8,共2页

关键词 科技博览 无土草坪 猪繁殖与呼吸综合征 荒漠化土地 胚胎玻璃化冷冻保存 研制成功 技术体系 小麦新品种 改良土壤 保鲜技术

在线阅读 下载PDF 职称材料