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环糊精葡糖基转移酶法改性甜菊糖的研究 被引量:3
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作者 陈智 王莹 田景振 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期178-179,182,共3页
目的:优选环糊精葡糖基转移酶法对甜菊糖进行结构改变的工艺。方法:以甜菊苷酶改转移率为指标,通过对影响酶改性反应的pH、甜菊苷与淀粉的比例、反应温度、反应时间、酶的用量五个因素进行考察,首先确定pH以及甜菊苷与淀粉的比例对转化... 目的:优选环糊精葡糖基转移酶法对甜菊糖进行结构改变的工艺。方法:以甜菊苷酶改转移率为指标,通过对影响酶改性反应的pH、甜菊苷与淀粉的比例、反应温度、反应时间、酶的用量五个因素进行考察,首先确定pH以及甜菊苷与淀粉的比例对转化率的影响,对剩余三个因素采用正交设计考察,筛选了酶改性甜菊苷的最佳工艺。结果:最佳酶改工艺组合为:pH=6,淀粉与甜菊苷的比例为2∶1,反应温度40℃,反应时间24h,酶的用量为60u/g淀粉。结论:该方法能有效对甜菊苷进行酶改,工艺合理且操作简单。 展开更多
关键词 甜菊苷 环糊精葡糖基转移酶 正交实验
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重叠延伸PCR技术构建β-环糊精葡糖基转移酶基因的定点突变原核表达载体 被引量:2
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作者 王华 文一 +4 位作者 于寒松 朴春红 王玉华 刘俊梅 胡耀辉 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期145-147,151,共4页
采用重叠延伸PCR技术对环糊精葡萄糖基转移酶基因序列中保守区域的二个氨基酸位点Y127,R254进行体外基因定点突变。将突变基因分别亚克隆进pUC-18,经PCR鉴定及序列分析,所转化的Escherichia coli BL21(DE3)中含有插入的突变基因重组质粒... 采用重叠延伸PCR技术对环糊精葡萄糖基转移酶基因序列中保守区域的二个氨基酸位点Y127,R254进行体外基因定点突变。将突变基因分别亚克隆进pUC-18,经PCR鉴定及序列分析,所转化的Escherichia coli BL21(DE3)中含有插入的突变基因重组质粒,结果表明成功构建了Y127F、R254F二个突变基因的重组表达载体。 展开更多
关键词 β-环糊精葡糖基转移酶 重叠延伸PCR 定点突变 原核表达载体 构建
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β-环糊精葡萄糖基转移酶突变基因的表达及突变酶酶学性质分析
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作者 王华 李华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第13期180-183,188,共5页
通过对已构建的β-CGTase质粒载体采用一步PCR法进行大片段基因的定点突变,得到三个带有突变位点的质粒载体,并将其进行转化得到突变菌株。分析突变酶的酶学性质并与β-环糊精葡萄糖基转移酶比较,结果表明突变酶酶活力提高到原酶活力的... 通过对已构建的β-CGTase质粒载体采用一步PCR法进行大片段基因的定点突变,得到三个带有突变位点的质粒载体,并将其进行转化得到突变菌株。分析突变酶的酶学性质并与β-环糊精葡萄糖基转移酶比较,结果表明突变酶酶活力提高到原酶活力的1.6倍以上,且突变酶作用的最适温度60℃、最适p H6.0、在60℃下和p H5~8范围内均非常稳定,经方差分析突变酶与原酶的酶学性质差异不显著(p〉0.05),但是酶活力差异显著(p〈0.05)。 展开更多
关键词 β-环糊精葡糖基转移酶 定点突变 环化活性 温度 p H
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甜菊糖的酶法改性 被引量:20
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作者 朱海霞 郑建仙 《中国食品添加剂》 CAS 2004年第1期54-60,共7页
甜菊糖是一种天然的强力甜味剂 ,它的二种组分———甜菊苷和甜菊双糖C苷有苦味和不愉快的后味 ,会显著影响甜菊糖的味质。通过酶改性法在甜菊苷、甜菊双糖C苷中引入一些糖基 ,可以改善甜质。目前酶改性甜菊糖的方法主要有 :环糊精葡糖... 甜菊糖是一种天然的强力甜味剂 ,它的二种组分———甜菊苷和甜菊双糖C苷有苦味和不愉快的后味 ,会显著影响甜菊糖的味质。通过酶改性法在甜菊苷、甜菊双糖C苷中引入一些糖基 ,可以改善甜质。目前酶改性甜菊糖的方法主要有 :环糊精葡糖基转移酶法、β -呋喃果糖苷酶法、半乳糖苷酶法和微生物糖基化法。本论文对这几种酶改性方法作一详细介绍。 展开更多
关键词 甜菊糖 强力甜味剂 酶法改性 环糊精葡糖基转移酶 β-呋喃果糖苷酶法 半乳糖苷酶法
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