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虫草素调节环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号通路对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 李娟 赵宗寒 胡纯厚 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第12期1489-1494,共6页
目的探讨虫草素对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌细胞凋亡及环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信号通路的影响。方法采用10μmol/L的ISO处理H9c2细胞,再用1、5、10、15μg... 目的探讨虫草素对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌细胞凋亡及环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信号通路的影响。方法采用10μmol/L的ISO处理H9c2细胞,再用1、5、10、15μg/ml的虫草素处理H9c2细胞,检测细胞增殖情况。将H9c2细胞分为对照组、ISO组、低虫草素组、高虫草素组、联合组。流式细胞术检测细胞凋亡率;鬼笔环肽染色检测心肌细胞表面积;定量聚合酶链反应检测肥大相关基因心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、B型钠尿肽(brain natriuretic peptide,BNP)、β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)表达。酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β以及cAMP表达;Western blot法检测B淋巴细胞瘤(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、PKA表达。结果与对照组比较,ISO组细胞凋亡率[(33.89±3.68)%vs(2.57±0.26)%]、细胞表面积、TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3、ANP、BNP、β-MHC表达明显升高,Bcl-2、cAMP、PKA表达明显降低(P<0.05)。与ISO组比较,低虫草素组和高虫草素组细胞凋亡率[(20.58±1.93)%、(7.58±0.76)%vs(33.89±3.68)%]、细胞表面积、TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3、ANP、BNP、β-MHC表达明显降低,Bcl-2、cAMP、PKA表达明显升高(P<0.05)。与高虫草素组比较,联合细胞凋亡率[(28.69±2.82)%vs(7.58±0.76)%]、细胞表面积、TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax、Caspase-3、ANP、BNP、β-MHC表达明显升高,Bcl-2、cAMP、PKA表达明显降低(P<0.05)。结论虫草素通过激活cAMP/PKA信号通路抑制ISO诱导的心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 虫草素 细胞凋亡 异丙肾上 肌细胞 磷酸/蛋白激酶A信号通路
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吴茱萸碱调节cAMP/PKA信号通路在糖尿病大鼠视网膜损伤中的作用 被引量:5
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作者 刘磊 刘珊珊 +2 位作者 胡菲菲 王洪华 王莹 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第2期94-99,共6页
目的探讨吴茱萸碱(EVO)调节环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路在糖尿病大鼠视网膜损伤中的作用。方法将96只(192眼)SD大鼠分为对照组(NC组)、模型组(Model组)、EVO低剂量组(EVO-L组)、EVO中剂量组(EVO-M组)、EVO高剂量组(EVO-H组... 目的探讨吴茱萸碱(EVO)调节环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路在糖尿病大鼠视网膜损伤中的作用。方法将96只(192眼)SD大鼠分为对照组(NC组)、模型组(Model组)、EVO低剂量组(EVO-L组)、EVO中剂量组(EVO-M组)、EVO高剂量组(EVO-H组)、羟苯磺酸钙(CD)组、SQ22536组、EVO-H+SQ22536组,每组12只。除NC组以腹腔注射生理盐水代替链脲佐菌素外,其他组大鼠均构建糖尿病视网膜病变模型。建模成功后,分别进行相应给药处理,每天给药一次,持续4周。利用血糖仪检测各组大鼠血糖;HE染色检测各组大鼠视网膜组织病理变化;TUNEL染色检测各组大鼠视网膜组织中神经节细胞凋亡;检测各组大鼠视网膜组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、cAMP水平;Western blot检测各组大鼠视网膜组织中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、P53、磷酸化的PKA(p-PKA)蛋白表达。结果与NC组比较,Model组大鼠视网膜组织病理损伤严重,血糖、视网膜神经节细胞凋亡率、MDA水平、TNF-α水平、IL-6水平、Bax蛋白、P53蛋白表达均升高,SOD水平、cAMP水平、p-PKA/PKA蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与Model组比较,EVO-L组、EVO-M组、EVO-H组、CD组大鼠视网膜组织病理损伤减轻,血糖、视网膜神经节细胞凋亡率、MDA水平、TNF-α水平、IL-6水平、Bax蛋白、P53蛋白表达均降低,SOD水平、cAMP水平、p-PKA/PKA蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与Model组比较,SQ22536组大鼠视网膜组织病理损伤严重,血糖、视网膜神经节细胞凋亡率、MDA水平、TNF-α水平、IL-6水平、Bax蛋白、P53蛋白表达均升高,SOD水平、cAMP水平、p-PKA/PKA蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与EVO-H组比较,EVO-H+SQ22536组大鼠视网膜组织病理损伤加剧,血糖、视网膜神经节细胞凋亡率、MDA水平、TNF-α水平、IL-6水平、Bax蛋白、P53蛋白表达均升高,SOD水平、cAMP水平、p-PKA/PKA蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论EVO可能通过激活cAMP/PKA信号通路改善糖尿病大鼠视网膜损伤。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 磷酸/蛋白激酶A信号通路 糖尿病视网膜病变 炎症 氧化应激
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基于网络药理学和转录组学探讨活心丸防治心力衰竭机制
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作者 刘想 陈科翰 +2 位作者 郑楚瑶 廖弈秋 王羚郦 《医药导报》 北大核心 2025年第3期377-386,共10页
目的基于网络药理学和转录组学分析探讨活心丸(HXP)防治心力衰竭(HF)的作用机制。方法将小鼠随机分为正常对照组,模型对照组,阳性对照组(沙库巴曲缬沙坦钠,60 mg·kg^(-1)),HXP小、大剂量组(31.2,62.4 mg·kg^(-1));其他组皮下... 目的基于网络药理学和转录组学分析探讨活心丸(HXP)防治心力衰竭(HF)的作用机制。方法将小鼠随机分为正常对照组,模型对照组,阳性对照组(沙库巴曲缬沙坦钠,60 mg·kg^(-1)),HXP小、大剂量组(31.2,62.4 mg·kg^(-1));其他组皮下注射异丙肾上腺素(ISO)(5 mg·kg^(-1))造模,正常对照组灌胃等量无菌0.9%氯化钠溶液;6 h后各给药组灌胃相应药物,正常对照组与模型对照组灌胃等体积无菌水,连续21 d。彩色多普勒超声成像系统检测小鼠心功能;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清环磷酸腺苷(cAMP)、N端B型利钠肽原(NT-proBNP)及B型利钠肽(BNP)水平;苏木精-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色法评价心肌组织病理形态,计算胶原容积分数(CVF);网络药理学结合转录组学预测HXP防治HF潜在靶点和信号通路,采用分子生物学手段进行验证。结果与正常对照组比较,模型对照组左室收缩末期内径(LVESd)及左室舒张末期内径(LVEDd)增大(P<0.01),左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)降低(P<0.01),血清BNP、NT-proBNP、cAMP含量上升(P<0.01),心肌组织间胶原纤维增多,CVF值升高(P<0.01)。与模型对照组比较,HXP小、大剂量组和阳性对照组LVESd、LVEDd下降(P<0.01),LVEF、LVFS上升(P<0.01);血清BNP、NT-proBNP、cAMP水平下降(P<0.05);心肌组织纤维化程度减轻,CVF下降(P<0.01)。网络药理学与转录组学联合分析,共预测出HXP防治HF关键靶点10个:CACNA1H、SCN10A、FGF12、PVALB、ACAN、LGALS3、SERPINE1、MMP3、GSTM1、VDR。蛋白免疫印迹法结果显示,与正常对照组比较,模型对照组心肌组织蛋白激酶A(PKA)和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)蛋白活化水平升高(P<0.01);与模型对照组比较,HXP小、大剂量组和阳性对照组心肌组织PKA、CREB蛋白活化水平下降(P<0.05)。结论HXP对ISO所致小鼠HF具有改善作用,该作用可能涉及众多靶点及cAMP/PKA信号通路。 展开更多
关键词 活心丸 心力衰竭 网络药理学 转录组学 磷酸/蛋白激酶A信号通路
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白三烯B4在“肺保护性”通气致肺损伤中的作用机制 被引量:5
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作者 袁凌跃 李江 +5 位作者 杨泳 郭欣 刘星玲 李丽莎 朱晓燕 刘睿 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1465-1471,共7页
目的探讨白三烯B4(LTB4)在“肺保护性”机械通气(LPMV)致肺损伤中的作用机制。方法32只健康日本大耳白兔随机平均分为:溶剂预处理+假手术组(S组)、乌苯美司(白三烯A4水解酶抑制剂)预处理+假手术组(BS组)、溶剂预处理+LPMV组(PM组)和乌... 目的探讨白三烯B4(LTB4)在“肺保护性”机械通气(LPMV)致肺损伤中的作用机制。方法32只健康日本大耳白兔随机平均分为:溶剂预处理+假手术组(S组)、乌苯美司(白三烯A4水解酶抑制剂)预处理+假手术组(BS组)、溶剂预处理+LPMV组(PM组)和乌苯美司预处理+LPMV组(BPM组)。BS组和BPM组先实施连续5 d的乌苯美司8 mg/(kg·d)灌胃预处理,S组和PM组则在相同时间点灌胃给予同等容积的溶剂。乌苯美司或溶剂预处理结束后,对PM组和BPM组实验动物实施时长为5 h的LPMV:潮气量(VT)=8 mL/kg,呼气末正压(PEEP)=5 cm H2O,吸气时间:呼气时间(I∶E)=1∶2,吸入氧浓度(FiO2)=0.5,调整呼吸频率(RR)维持呼末CO2在35~45 mmHg范围内;S组和BS组则保留自主呼吸。酶联免疫法用于检测实验动物肺组织LTB4和环一磷酸腺苷(cAMP)含量;肺组织cAMP含量、蛋白激酶A(PKA)蛋白表达水平和活化Rap1蛋白(Rap1-GTP)/总Rap1蛋白比值分别用于反映cAMP/PKA和Rap1信号通路活性变化情况;用肺通透性[肺通透性指数和肺湿/干(W/D)重比值]、肺炎症反应[支气管肺泡灌洗液(BALF)中多形核白细胞(PMN)计数和肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性]和肺组织形态学评分对肺损伤的严重程度进行判断。结果S组与BS组实验动物各检测指标无显著差异;除肺组织学评分无显著差异外,PM组和BPM组实验动物其余各指标均显著增高于S组(P<0.05);与PM组相比,BPM组实验动物肺内LTB4生成明显减少(P<0.05),cAMP/PKA和Rap1信号通路活性进一步上调(P<0.05),肺炎症反应与肺通透性增加明显减轻(P<0.05)。结论LPMV会造成实验动物肺内LTB4大量生成继而诱发肺炎症反应和肺通透性增加,LTB4在其中的作用机制与下调cAMP/PKA和Rap1信号通路活性有关;乌苯美司可通过抑制肺内LTB4的生成发挥抗LPMV诱导的肺炎症反应和肺通透性增加保护作用。 展开更多
关键词 机械通气 肺损伤 白三烯B4 磷酸/蛋白激酶A信号通路 磷酸/Rap1信号通路
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