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调节circRNA内的miRNA结合位点以提高其翻译效率
1
作者
张可维
单革
陈亮
《中国科学技术大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第9期39-50,66,67,共14页
环状RNA(circRNA)是具有共价闭合的环状结构的RNA,其中有些circRNA具有翻译能力。然而,调节circRNA翻译效率的方法及其应用仍需我们进一步探索。本文利用T7 RNA聚合酶和优化的PIE方法,转录形成含有CVB3 IRES翻译起始元件和荧光素酶蛋白...
环状RNA(circRNA)是具有共价闭合的环状结构的RNA,其中有些circRNA具有翻译能力。然而,调节circRNA翻译效率的方法及其应用仍需我们进一步探索。本文利用T7 RNA聚合酶和优化的PIE方法,转录形成含有CVB3 IRES翻译起始元件和荧光素酶蛋白编码序列的RNA,并在体外环化形成环状RNA。我们将环状RNA转染到细胞中,并成功翻译成具有活性的荧光素酶。在荧光素酶编码序列两侧插入miRNA结合位点显著降低了circRNA的翻译效率。随后萤火虫荧光素酶编码序列中的miRNA结合位点的同义突变导致体外合成的circRNA翻译效率增加。我们还证明了特定miRNA结合位点的突变也可以增强合成circRNA的翻译效率。进一步的体内实验通过生物发光成像表明,miRNA结合位点的同义突变促进了体外合成circRNA在体内的翻译。本研究表明,调节circRNA内的miRNA结合位点影响了circRNA的翻译效率,这有望作为未来临床成像应用的多功能工具。
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关键词
环状
rna
环状rna翻译
体外环化
微小
rna
环状
rna
应用
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职称材料
题名
调节circRNA内的miRNA结合位点以提高其翻译效率
1
作者
张可维
单革
陈亮
机构
中国科学技术大学附属第一医院检验科
出处
《中国科学技术大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第9期39-50,66,67,共14页
基金
This work was supported by the National Natural Science Foundation of China(32270590,31930019).
文摘
环状RNA(circRNA)是具有共价闭合的环状结构的RNA,其中有些circRNA具有翻译能力。然而,调节circRNA翻译效率的方法及其应用仍需我们进一步探索。本文利用T7 RNA聚合酶和优化的PIE方法,转录形成含有CVB3 IRES翻译起始元件和荧光素酶蛋白编码序列的RNA,并在体外环化形成环状RNA。我们将环状RNA转染到细胞中,并成功翻译成具有活性的荧光素酶。在荧光素酶编码序列两侧插入miRNA结合位点显著降低了circRNA的翻译效率。随后萤火虫荧光素酶编码序列中的miRNA结合位点的同义突变导致体外合成的circRNA翻译效率增加。我们还证明了特定miRNA结合位点的突变也可以增强合成circRNA的翻译效率。进一步的体内实验通过生物发光成像表明,miRNA结合位点的同义突变促进了体外合成circRNA在体内的翻译。本研究表明,调节circRNA内的miRNA结合位点影响了circRNA的翻译效率,这有望作为未来临床成像应用的多功能工具。
关键词
环状
rna
环状rna翻译
体外环化
微小
rna
环状
rna
应用
Keywords
circ
rna
circ
rna
translation
in vitro circularization
mi
rna
circ
rna
-based application
分类号
Q522 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
调节circRNA内的miRNA结合位点以提高其翻译效率
张可维
单革
陈亮
《中国科学技术大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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