结核分枝杆菌磷酸二酯酶重组腺病毒黏膜免疫诱导的免疫应答特点

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作者 代婷 路延之 +6 位作者 赵瑞华 宁唤唤 康健 郝乐冉 李嘉玲 常宇骁 柏银兰 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期1-8,共8页

目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼... 目的结核分枝杆菌(Mtb)耐药菌株的流行加剧了结核病(TB)的全球负担,凸显了对新的TB治疗策略的需求。方法表达环二腺苷酸(c-di-AMP)分解酶磷酸二酯酶B(CnpB)的重组腺病毒疫苗(rAd-CnpB)经黏膜免疫正常小鼠,单独或联合药物免疫治疗Mtb呼吸道感染小鼠。ELISA检测小鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)抗体水平,实时定量PCR检测小鼠肺组织中细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)转录水平,流式细胞术检测肺、脾CD4^(+)、CD8^(+)T细胞亚群细胞比例,ELISA检测脾细胞抗原刺激后的细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-10、炎症因子IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌水平,平板计数法计数Mtb感染小鼠肺、脾的荷菌数。结果rAd-CnpB滴鼻免疫可诱导小鼠血清高滴度的IgG,以及BALF中IgG和IgA产生,肺、脾T淋巴细胞亚群改变。rAd-CnpB单独或联合药物治疗Mtb感染小鼠可诱导血清IgG水平、BALF中IgA和IgG水平显著增高,rAd-CnpB免疫促进Mtb感染小鼠的脾细胞CnpB抗原特异性的细胞因子和炎症因子分泌。rAd-CnpB单独或联合药物免疫治疗并不显著影响Mtb呼吸道感染小鼠肺、脾荷菌数。结论rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导小鼠显著的黏膜、体液免疫反应,并显著增强Mtb感染小鼠中CnpB特异性细胞免疫应答。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌(Mtb) 环核苷酸磷酸二酯酶B(CnpB) 重组腺病毒 免疫治疗

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反相高效液相色谱测定白细胞与气管平滑肌环核苷酸磷酸二酯酶活性 被引量：7

2

作者 周汉良 陈季强 +1 位作者 曾苏 卞如濂 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期420-423,共4页

反相高效液相色谱测定白细胞与气管平滑肌环核苷酸磷酸二酯酶活性周汉良，陈季强，曾苏，卞如濂（浙江医科大学平喘药物研究室浙江医科大学药物分析教研室，杭州３１０００６）环核苷酸（ｃＡＭＰ与ｃＧＭＰ）是细胞信息转导中的第二信... 反相高效液相色谱测定白细胞与气管平滑肌环核苷酸磷酸二酯酶活性周汉良，陈季强，曾苏，卞如濂（浙江医科大学平喘药物研究室浙江医科大学药物分析教研室，杭州３１０００６）环核苷酸（ｃＡＭＰ与ｃＧＭＰ）是细胞信息转导中的第二信使。细胞内环核苷酸的水平主要决定于... 展开更多

关键词 环核苷酸 磷酸二酯酶 白细胞 气管平滑肌

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致敏后重复抗原攻击的大鼠肺组织环核苷酸磷酸二酯酶活性的变化 被引量：3

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作者 宋燕华 陈季强 周汉良 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2002年第2期127-130,共4页

目的 :探讨致敏后重复抗原攻击大鼠肺组织 c GMP- PDE、c AMP- PDE活性变化。方法 :HPL C法测定致敏后重复抗原攻击的大鼠 (抗原攻击组 )、致敏不攻击的大鼠 (致敏组 )和正常大鼠 (正常组 )肺组织 c GMP- PDE、c AMP- PDE活性。结果 :... 目的 :探讨致敏后重复抗原攻击大鼠肺组织 c GMP- PDE、c AMP- PDE活性变化。方法 :HPL C法测定致敏后重复抗原攻击的大鼠 (抗原攻击组 )、致敏不攻击的大鼠 (致敏组 )和正常大鼠 (正常组 )肺组织 c GMP- PDE、c AMP- PDE活性。结果 :抗原攻击组肺组织 c GMP- PDE、c AMP- PDE活性分别为 798.76± 5 2 9.2 3、5 97.5 0± 2 2 0 .75nmol·g-1protein·min-1,其中抗原攻击组大鼠肺组织 c GMP- PDE活性较正常组明显升高 (P<0 .0 5 ) ,抗原攻击组大鼠肺组织 c AMP- PDE活性较致敏组和正常组均明显升高 (P<0 .0 5 )。结论 :大鼠哮喘发病过程中肺组织c GMP- PDE、c AMP- 展开更多

关键词 环核苷酸磷酸二酯酶 哮喘 病因 色谱法 肺组织 动物实验 HPLC法

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环核苷酸磷酸二酯酶的研究进展 被引量：4

4

作者 周汉良 卞如濂 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期217-217,共1页

环核苷酸磷酸二酯酶（ＰＤＥ）有五类同工酶，它们的结构相似，但各具有不同的生化特性及生理功能，它们的调节方式亦各异。目前开发的许多选择性ＰＤＥ同工酶抑制剂有可能成为平喘药、强心药、血管扩张药、抗血栓药与抗抑郁药。

关键词 环核苷酸 磷酸二酯酶 PDE 同功酶

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API_（0134）对钙调素及其依赖性环核苷酸磷酸二酯酶的作用 被引量：2

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作者 聂磊 傅良武 +4 位作者 张婷 赵华月 周世豪 马宝瑕 熊一力 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第5期341-344,共4页

应用钙调素（ＣａＭ）靶酶环核苷酸磷酸二酯酶（ＰＤＥ－Ｉ）活性测定方法观察穿心莲有效成分（ＡＰＩ０１３４）拮抗ＣａＭ的作用。当ＡＰＩ０１３４浓度大于７．８ｍｇ·Ｌ－１时能明显抑制ＣａＭ激活ＰＤＥ－Ｉ的活性，其半抑制... 应用钙调素（ＣａＭ）靶酶环核苷酸磷酸二酯酶（ＰＤＥ－Ｉ）活性测定方法观察穿心莲有效成分（ＡＰＩ０１３４）拮抗ＣａＭ的作用。当ＡＰＩ０１３４浓度大于７．８ｍｇ·Ｌ－１时能明显抑制ＣａＭ激活ＰＤＥ－Ｉ的活性，其半抑制浓度（ＩＣ５０）为２６·９ｍｇ·Ｌ－１，在浓度为７．８～１２５ｍｇ·Ｌ－１范围内，ＡＰＩ０１３４对ＰＤＥ－Ｉ的基础活性没有影响。 展开更多

关键词 穿心莲有效成分 API₀₁₃₄ 钙调素钙调素拮抗剂 环核苷酸磷酸二酯酶

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热疗对2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶表达和C6胶质瘤细胞侵袭作用的影响 被引量：1

6

作者 王健 张田 +2 位作者 贾永森 赵喜庆 秦丽娟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期248-252,I0001,共6页

目的:探讨热疗与2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶(CNP)表达的关系,阐明热疗降低胶质瘤侵袭性的作用及其可能机制。方法:将对数生长期C6胶质瘤细胞随机分为对照组(37℃孵育)和热疗组(42℃孵箱内孵育10、30、60、120、180和240min)。各组... 目的:探讨热疗与2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶(CNP)表达的关系,阐明热疗降低胶质瘤侵袭性的作用及其可能机制。方法:将对数生长期C6胶质瘤细胞随机分为对照组(37℃孵育)和热疗组(42℃孵箱内孵育10、30、60、120、180和240min)。各组细胞均行细胞爬片,采用免疫组织化学法检测各组细胞中热休克蛋白70(HSP70)的表达水平;Western blotting法检测各组细胞中CNP蛋白的表达水平;于Transwell上室构建胶质瘤侵袭模型,经热疗后采用结晶紫染色法观察透过Transwell下室面的胶质瘤细胞数。结果:与对照组比较,热疗组C6细胞经热疗后HSP70表达水平增加,于热疗30、60、120和180min时HSP70表达水平高对于照组(P<0.05或P<0.01),且于热疗30min时达高峰(P<0.01)。热疗组C6细胞中CNP蛋白表达水平亦于热疗后开始增加,热疗60、120和180min时CNP蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05或P<0.01),并于热疗120min时达高峰(P<0.01)。热疗后透过Transwell的胶质瘤细胞数减少,细胞数于热疗120min时达到最低水平(P<0.01)。结论:热疗可能是通过增加HSP70的表达而使CNP蛋白的表达增多,增多的CNP又通过某种机制降低了胶质瘤的侵袭性。 展开更多

关键词 热疗 热休克蛋白70 2’ 3’-环核苷酸3'-磷酸二酯酶 胶质瘤 侵袭性

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离子交换高效液相色谱法分析兔肝环核苷酸磷酸二酯酶反应体系 被引量：1

7

作者 廖飞 张晓萍 +4 位作者 周岐新 杨俊清 曾昭淳 陈文缘 汤先觉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2001年第1期20-22,共3页

目的：用阴离子交换HPLC分析环核苷酸磷酸二酯酶反应体系。方法：用Shim-Pak WAX-1柱，30 mmol/L 的pH 4.0磷酸钾为流动相，洗脱速度0.5 ml/min，254 nm 检测，峰面积定量。结果：上述离子交换HPLC体系可分离并定量测定cAMP和AMP。在硫... 目的：用阴离子交换HPLC分析环核苷酸磷酸二酯酶反应体系。方法：用Shim-Pak WAX-1柱，30 mmol/L 的pH 4.0磷酸钾为流动相，洗脱速度0.5 ml/min，254 nm 检测，峰面积定量。结果：上述离子交换HPLC体系可分离并定量测定cAMP和AMP。在硫酸铵分级粗制兔肝PDE反应混合物中，cAMP 和AMP同杂质完全基线分离；随反应进行，cAMP逐步下降，AMP上升到平台后再下降。用米氏酶的积分速度方程作图分析cAMP下降的进程曲线，发现硫酸铵分级粗制的兔肝PDE的米氏常数为负数。结论：此离子交换HPLC方法可以分析无杂酶干扰时PDE对cAMP的水解。 展开更多

关键词 环核苷酸磷酸二酯酶 离子交换高效液相色谱法 3 5-cAMP 5-AMP

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钙调素依赖性的环核苷酸磷酸二酯酶的制备 被引量：2

8

作者 丁文勇 任凤 赵宝昌 《吉林大学自然科学学报》 CSCD 1999年第3期81-84,共4页

通过两次离子交换柱层析， 从牛脑中制备钙调素依赖性的环核苷酸磷酸二酯酶． 所得酶不含内源性钙调素， 能被足量外加的钙调素激活 １４ 倍，

关键词 环核苷酸 磷酸二酯酶 钙调素 制备 PDE

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卡介苗对致敏后重复抗原攻击的大鼠肺组织环核苷酸磷酸二酯酶活性的影响 被引量：1

9

作者 宋燕华 陈季强 陈俊春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1020-1021,共2页

关键词 3-5’-环核苷酸磷酸二酯酶/代谢 哮喘 卡介苗

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应用正交法观察影响钙调素依赖环核苷酸磷酸二酯酶活性的因素 被引量：1

10

作者 杨东丽 顾熊飞 马涧泉 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第4期490-492,共3页

应用正交法观察影响钙调素依赖环核苷酸磷酸二酯酶活性的因素杨东丽，顾熊飞，马涧泉（中山医科大学生化教研室，广州５１００８９）（皖南医学院生化教研室，芜湖２４１００１）钙调素（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）是一种广泛存在... 应用正交法观察影响钙调素依赖环核苷酸磷酸二酯酶活性的因素杨东丽，顾熊飞，马涧泉（中山医科大学生化教研室，广州５１００８９）（皖南医学院生化教研室，芜湖２４１００１）钙调素（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）是一种广泛存在于生物界的重要钙受体蛋白，当它与Ｃ... 展开更多

关键词 调钙蛋白 环核苷酸 磷酸二酯酶

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两面针碱对钙调蛋白依赖环核苷酸磷酸二酯酶的抑制作用 被引量：2

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作者 顾熊飞 杨东丽 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 1995年第S1期34-36,共3页

以钙调蛋白依赖环核苷酸磷酸二酯酶（ＣａＭ－ＰＤＥ）为分子模型，应用正文试验证实两面针碱（Ｎｉ－ｔｉｄｉｎｅ，Ｎｉｔ）是一种新的ＣａＭ拮抗剂。实验结果表明：①：Ｎｉｔ抑制ＣａＭ－ＰＤＥ活性ＩＣ５０为８６μｍｏｌ／Ｌ。②... 以钙调蛋白依赖环核苷酸磷酸二酯酶（ＣａＭ－ＰＤＥ）为分子模型，应用正文试验证实两面针碱（Ｎｉ－ｔｉｄｉｎｅ，Ｎｉｔ）是一种新的ＣａＭ拮抗剂。实验结果表明：①：Ｎｉｔ抑制ＣａＭ－ＰＤＥ活性ＩＣ５０为８６μｍｏｌ／Ｌ。②７５μｍｏｌ／ＬＮｉｔ对０～８０ｎｇ／ｍｌＣａＭ存在下，ＣａＭ－ＰＤＥＶｍａｘ基本不变，半激活浓度（ＡＣ５０）增大，抑制常数（Ｋｉ）为６６μｍｏｌ／Ｌ。提示Ｎｉｔ以竞争方式拮抗ＣａＭ对其靶酶（ＰＤＥ）的活化。③７５μｍｏｌ／ＬＮｉｔ对ＣａＭ－ＰＤＥ抑制动力学研究：改变底物（ｃＡＭＦ）浓度，ＣａＭ－ＰＤＥ的Ｖｍａｘ减少，米氏常数（Ｋｍ）值增大，Ｋｉ为６４μｍｏｌ／Ｌ，α＞１。提示Ｎｉｔ对ＣａＭ－ＰＤＥ的抑制作用是非竞争一竞争性混合型抑制。由此推测Ｎｉｔ可能通过与ＣａＭ竞争酶分子上的ＣａＭ结合位点从而抑制ＣａＭ－ＰＤＥ的激活活性。 展开更多

关键词 钙调蛋白/拮抗剂和抑制剂 磷酸二酯酶类 两面针碱③/药物作用

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钙调素依赖性环核苷酸磷酸二酯酶的简易粗提法 被引量：1

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作者 鄢佳程 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第2期247-249,共3页

钙调素依赖性环核苷酸磷酸二酯酶(camodulindependent cyclic nucleotide phosphodiesterase, CaM-PDE)是研究环核苷酸和钙调素酶法测定必备的工具。由于其稳定性较差,不能长期保存,需经常提取。传统提取方法采用冷室中线性离子梯度DEA... 钙调素依赖性环核苷酸磷酸二酯酶(camodulindependent cyclic nucleotide phosphodiesterase, CaM-PDE)是研究环核苷酸和钙调素酶法测定必备的工具。由于其稳定性较差,不能长期保存,需经常提取。传统提取方法采用冷室中线性离子梯度DEAE纤维素柱层析与其它层析并用。本法利用DE_(52)柱层析,阶段离子浓度洗脱。纯化CaM-PDE近20倍。在足够的钙调素(CAM)存在下可激活10倍。 展开更多

关键词 钙调素 环核苷酸 磷酸二酯酶

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环核苷酸磷酸二酯酶活性的反相高效液相色谱测定法

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作者 徐骁 华丽 +1 位作者 陈季强 周汉良 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 1995年第4期182-185,共4页

本实验应用反相高效液相色谱法（ＲＰ－ＨＰＬＣ）测定环腺苷酸（ｃＡＭＰ）和环鸟苷酸（ｃＧＭＰ）的含量，根据底物量的减少，确认了犬气管平滑肌组织中环核苷酸磷酸二酯酶（ＰＤＥ）活性的存在。并首次采用甲醇－磷酸缓冲液（１０：... 本实验应用反相高效液相色谱法（ＲＰ－ＨＰＬＣ）测定环腺苷酸（ｃＡＭＰ）和环鸟苷酸（ｃＧＭＰ）的含量，根据底物量的减少，确认了犬气管平滑肌组织中环核苷酸磷酸二酯酶（ＰＤＥ）活性的存在。并首次采用甲醇－磷酸缓冲液（１０：９０）的非梯度洗脱法，取得良好色谱分离效果，为研究犬气管平滑肌组织中ＰＤＥ活性提供了简便而有效的测定方法。 展开更多

关键词 环核苷酸磷酸二酯酶活性 反相高效液相色谱 含量测定 环腺苷酸 环鸟苷酸 气管平滑肌组织

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磷酸二酯酶4D基因rs966221位点单核苷酸多态性与缺血性脑卒中发病的关系 被引量：1

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作者 江东东 李海华 +3 位作者 李建立 肖友生 甘露 罗曼 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2018年第3期271-274,共4页

目的探讨广西壮族人群磷酸二酯酶4D(PDE4D)基因rs966221位点单核苷酸多态性与缺血性脑卒中(IS)发病的关系。方法采用病例-对照研究设计,运用SNaPshot技术对101例广西壮族IS患者(IS组)及同期104例健康体检者(对照组)的PDE4D基因rs966221... 目的探讨广西壮族人群磷酸二酯酶4D(PDE4D)基因rs966221位点单核苷酸多态性与缺血性脑卒中(IS)发病的关系。方法采用病例-对照研究设计,运用SNaPshot技术对101例广西壮族IS患者(IS组)及同期104例健康体检者(对照组)的PDE4D基因rs966221位点单核苷酸多态性进行检测,比较2组各基因型及等位基因频率,并进行相关性分析。结果 IS组与对照组PDE4D基因rs966221位点GG、GA、AA基因型(0.99%vs 3.85%,29.70%vs 21.15%,69.31%vs 75.00%)及G、A等位基因频率(15.84%vs 14.42%,84.16%vs 85.58%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。单因素及多因素logistic回归分析显示,在显性(AAvs GG+GA)、隐性(GGvs AA+GA)和加性(GGvs AA)3种遗传模型下,PDE4D基因rs966221位点单核苷酸多态性与IS患病风险均无关联(P>0.05)。结论广西壮族人群PDE4D基因rs966221位点单核苷酸多态性与IS发病不相关。 展开更多

关键词 环核苷酸磷酸二酯酶类 4型 多态性 单核苷酸 基因频率 基因型 卒中 磁共振成像

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白假丝酵母环核苷酸磷酸二酯酶2的异源表达、纯化与酶学特性分析 被引量：2

15

作者 李赤霞 陈滢 +3 位作者 张萌 陈玉娟 田元元 王友升 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第22期82-87,共6页

为获得白假丝酵母(Candida albicans)环核苷酸磷酸二酯酶2(phosphodiesterases 2,PDE2),以C.albicans基因组为模板,经聚合酶链式反应扩增获得目的基因,构建重组质粒pET28a-C.albicans pde2,转化至大肠杆菌BL21中,获得稳定表达的基因工... 为获得白假丝酵母(Candida albicans)环核苷酸磷酸二酯酶2(phosphodiesterases 2,PDE2),以C.albicans基因组为模板,经聚合酶链式反应扩增获得目的基因,构建重组质粒pET28a-C.albicans pde2,转化至大肠杆菌BL21中,获得稳定表达的基因工程菌。所表达的蛋白通过亲和层析柱(Ni-NAT)、离子交换层析柱(Q-Sepharose)和分子筛层析柱(Sephacryl S200)逐步进行纯化。应用高效液相色谱方法测定纯化的PDE2蛋白(约62 kDa)对单底物及双底物的水解特性,证明PDE2在0.385 mg/mL质量浓度下,对0.4 mmol/L cAMP和cGMP的水解率达到60%~70%,且对底物cAMP具有更高的亲和力,并确定该酶具有较高生物学活性和稳定性,为该蛋白的晶体学解析及在C.albicans中的生理病理机制研究提供理论依据。 展开更多

关键词 白假丝酵母 环核苷酸磷酸二酯酶 表达纯化 高效液相色谱

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酿酒酵母环核苷酸磷酸二酯酶1的异源表达、分离纯化与活性检测 被引量：1

16

作者 陈滢 李赤霞 +4 位作者 陈玉娟 田元元 张萌 韩潆仪 王友升 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第18期71-76,共6页

制备获得高纯度酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)环核苷酸磷酸二酯酶1(phosphodiesterase 1,PDE1)蛋白,以pGM-T-S.cerevisiae基因组为模板,聚合酶链式反应扩增目的基因,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21中,并诱导表达。高压破碎菌体... 制备获得高纯度酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)环核苷酸磷酸二酯酶1(phosphodiesterase 1,PDE1)蛋白,以pGM-T-S.cerevisiae基因组为模板,聚合酶链式反应扩增目的基因,构建表达质粒,转化至大肠杆菌BL21中,并诱导表达。高压破碎菌体提取物先后通过亲和层析纯化系统(Ni-NAT柱)、离子交换纯化系统(Q-Sepharose柱)和分子筛纯化系统(Sephacryl S200柱)进行纯化,经酶活性测定显示,纯化后的蛋白活性达92%。研究结果可为将来该蛋白的晶体学分析和在酿酒酵母中的代谢调控提供前期基础。 展开更多

关键词 酿酒酵母 环核苷酸磷酸二酯酶 表达纯化 酶活性检测

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磷酸二酯酶5抑制剂促进大鼠脑缺血再灌注后神经及血管再生的研究 被引量：5

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作者 范秉林 周东 +1 位作者 田林郁 甘靖 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2012年第12期1312-1315,共4页

目的探讨磷酸二酯酶5抑制剂西地那非对大鼠脑缺血再灌注后海马神经前体细胞标记物微管相关蛋白增殖及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法雄性SD大鼠75只,随机分为假手术组5只,局灶性脑缺血再灌注组(单纯缺血组)35只及局灶性脑... 目的探讨磷酸二酯酶5抑制剂西地那非对大鼠脑缺血再灌注后海马神经前体细胞标记物微管相关蛋白增殖及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法雄性SD大鼠75只,随机分为假手术组5只,局灶性脑缺血再灌注组(单纯缺血组)35只及局灶性脑缺血+西地那非组(西地那非组)35只。西地那非组在大脑中动脉局灶缺血模型再灌注后2 h喂服西地那非3 d。单纯缺血组和西地那非组在术后2 h、1 d、3 d、5 d、7 d、10 d和14 d检测神经功能缺损评分。免疫组织化学方法检测各时间点海马神经前体细胞标记物微管相关蛋白阳性细胞及梗死灶周围VEGF的吸光度值。结果假手术组几乎无微管相关蛋白表达。与单纯缺血组比较,西地那非组7 d、10 d、14 d神经功能缺损评分明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);西地那非组5 d、7 d、10 d、14 d微管相关蛋白明显高于单纯缺血组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);西地那非组3 d、5 d、7 d、10 d VEGF明显高于单纯缺血组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论西地那非能够促进大鼠脑缺血再灌注后急性期神经及血管再生,改善神经功能。 展开更多

关键词 环核苷酸磷酸二酯酶类 5型 磷酸二酯酶抑制剂 脑缺血 血管内皮生长因子类 再灌注 海马

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浙江南部地区人群5-脂氧合酶激活蛋白和磷酸二酯酶4D基因突变与缺血性脑卒中的研究 被引量：7

18

作者 邵敏洁 易兴阳 池丽芬 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2013年第6期592-595,共4页

目的为探索浙江南部地区人群5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因中SG13S89、SG13S114和磷酸二酯酶4D(PDE4D)基因中单核苷酸多态性83与缺血性脑卒中的关系。方法选择脑梗死患者394例为脑梗死组,另选无脑梗死382例为对照组。采用PCR和基质... 目的为探索浙江南部地区人群5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因中SG13S89、SG13S114和磷酸二酯酶4D(PDE4D)基因中单核苷酸多态性83与缺血性脑卒中的关系。方法选择脑梗死患者394例为脑梗死组,另选无脑梗死382例为对照组。采用PCR和基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱法,分析ALOX5AP基因中的SG13S89(rs4769874)、SG13S114(rs10507391)和PDE4D基因中单核苷酸多态性83(rs966221)的多态性。结果与对照组比较,脑梗死组SG13S89基因AG型、A等位基因频率明显升高(4.1%vs 1.3%,P<0.05;2.0%vs0.7%,P<0.05);。多因素logistic回归分析显示,调整高血压、糖尿病和年龄后,SG13S89的AG基因型相对于GG基因型有较高的脑卒中风险(OR=4.24,95%CI:1.17～15.32,P=0.027)。SG13S89等位基因分布与大动脉粥样硬化型和小动脉闭塞型脑梗死差异无统计学意义(P>0.05)。SG13S89的AG基因型与女性人群发生脑卒中相关(P=0.022),但A等位基因在女性脑卒中人群中差异无统计学意义(P>0.05)。结论 rs4769874AG基因型和A等位基因频率可增高缺血性脑卒中风险,可能是该基因与血管炎性反应和通透性增加导致脑梗死的机制相关。但未发现PDE4D基因单核苷酸多态性83突变与脑卒中相关。 展开更多

关键词 环核苷酸磷酸二酯酶类 4型 多态性 单核苷酸 卒中 脑梗死 基因频率 基因型

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广东汉族人群磷酸二酯酶4D基因多态性与缺血性脑卒中的关系 被引量：5

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作者 罗曼 许晓伟 +4 位作者 李骄星 孙逊沙 赖蓉 王玉芳 盛文利 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2014年第5期503-506,共4页

目的探讨广东汉族人群磷酸二酯酶4D基因(phosphodiesterase 4D,PDE4D)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与缺血性脑卒中的关系。方法采用病例-对照的研究方法,选择广东地区712例缺血性脑卒中患者作为病例组,另选择同... 目的探讨广东汉族人群磷酸二酯酶4D基因(phosphodiesterase 4D,PDE4D)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与缺血性脑卒中的关系。方法采用病例-对照的研究方法,选择广东地区712例缺血性脑卒中患者作为病例组,另选择同期健康体检的广东居民774例作为对照组。根据TOAST分型将病例组又分为大动脉粥样硬化型327例、小动脉闭塞型221例、心源性栓塞型54例、其他明确病因型52例和不明原因型58例。使用SNaPshot方法对PDE4D基因SNP83多态性进行检测,并分析SNP83多态性与缺血性脑卒中及其5个亚型之间的关系。结果病例组与对照组SNP83的CC、CT和TT基因型分布比较,差异无统计学意义(2.9%vs2.3%,29.1%vs 26.2%,68.0%vs 71.4%,P>0.05)。在显性、隐性及加性3种遗传模型下,PDE4D基因SNP83多态性与病例组及5个亚型均无相关性。结论 PDE4D基因SNP83多态性与广东汉族人群缺血性脑卒中不相关。 展开更多

关键词 环核苷酸磷酸二酯酶类 4型 多态性 单核苷酸 脑缺血 卒中 基因型

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超高效液相色谱-串联质谱法测定壮阳类保健品中非法添加的5种5型磷酸二酯酶抑制剂 被引量：2

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作者 杨坤 张建炀 石庆楠 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期703-707,共5页

称取经研磨后的样品0.500 0g,用甲醇超声溶解,并定容至50mL,以10 000r·min-1转速离心10 min,上清液经0.25μm滤膜过滤后,采用Waters Symmetry Shield RP色谱柱(100mm×2.1mm,5μm)分离5种5型磷酸二酯酶(PDE-5)抑制剂(西地那非... 称取经研磨后的样品0.500 0g,用甲醇超声溶解,并定容至50mL,以10 000r·min-1转速离心10 min,上清液经0.25μm滤膜过滤后,采用Waters Symmetry Shield RP色谱柱(100mm×2.1mm,5μm)分离5种5型磷酸二酯酶(PDE-5)抑制剂(西地那非、他达拉非、红地那非、伐地那非、伪伐地那非),以含0.1%(体积分数,下同)甲酸的甲醇和含0.1%甲酸的10mmol·L-1乙酸铵溶液为流动相,进行梯度洗脱。在电喷雾正离子模式下以多反应监测模式检测,采用外标法定量。结果表明,5种PDE-5药物的质量浓度在一定范围内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.25~0.43mg·kg-1。加标回收率为97.2%~104%,测定值的相对标准偏差(n=6)为0.31%~1.1%。方法用于检测62种壮阳类保健品中上述5种PDE-5药物,共有37种保健品中检出非法添加药物。 展开更多

关键词 超高效液相色谱-串联质谱法 5型磷酸二酯酶抑制剂 西地那非 他达拉非 红地那非 伐地那非 伪伐地那非 壮阳类保健品

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