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水果及蔬菜表面环孢子虫卵囊检测方法的建立
被引量：
1
1
作者
孙芳芳
罗楠楠
+4 位作者
李俊强
赵金凤
李廷文
黄建营
张龙现
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期713-720,共8页
为了建立检测果蔬表面人源卡耶坦环孢子虫(Cyclospora cayetanensis)卵囊的方法,分别用50,500个环孢子虫卵囊对环孢子虫卵囊阴性的新鲜果蔬进行人工污染,并设置阴性对照;使用含有0.1%Alconox,0.1%雕牌,0.1%立白、0.1%白猫的4种洗涤液...
为了建立检测果蔬表面人源卡耶坦环孢子虫(Cyclospora cayetanensis)卵囊的方法,分别用50,500个环孢子虫卵囊对环孢子虫卵囊阴性的新鲜果蔬进行人工污染,并设置阴性对照;使用含有0.1%Alconox,0.1%雕牌,0.1%立白、0.1%白猫的4种洗涤液和去离子水,在摇床中洗脱样品;然后,反复离心3次收集卵囊并提取卵囊DNA;最后,基于环孢子虫18S rRNA基因位点对卵囊DNA样品进行巢式PCR扩增.结果表明,卵囊污染吸附最佳时间为24 h,样品洗脱最佳时间为30 min.其中,只用去离子水时,生菜、西葫芦、黄瓜、西瓜、甜瓜和草莓的检测敏感性可达到50个卵囊,而西红柿可达到500个卵囊;当用不同洗涤剂时,各样品的检测敏感性均可达到50个卵囊.不同洗涤剂之间检测敏感性无显著差异.该研究初步建立检测水果、蔬菜污染环孢子虫卵囊的技术,采用此方法可特异、敏感、快速的检测果蔬表面环孢子虫卵囊,为食源性环孢子虫病暴发溯源提供技术支持.
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关键词
环孢子虫卵囊
18S
RRNA
检测敏感性
巢式PCR
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职称材料
题名
水果及蔬菜表面环孢子虫卵囊检测方法的建立
被引量：
1
1
作者
孙芳芳
罗楠楠
李俊强
赵金凤
李廷文
黄建营
张龙现
机构
河南农业大学牧医工程学院
河南省人兽共患病国际联合实验室
出处
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期713-720,共8页
基金
国家科技重大专项(2012ZX10004220)
河南省高校科研创新团队项目(012IRTSTHN005)
文摘
为了建立检测果蔬表面人源卡耶坦环孢子虫(Cyclospora cayetanensis)卵囊的方法,分别用50,500个环孢子虫卵囊对环孢子虫卵囊阴性的新鲜果蔬进行人工污染,并设置阴性对照;使用含有0.1%Alconox,0.1%雕牌,0.1%立白、0.1%白猫的4种洗涤液和去离子水,在摇床中洗脱样品;然后,反复离心3次收集卵囊并提取卵囊DNA;最后,基于环孢子虫18S rRNA基因位点对卵囊DNA样品进行巢式PCR扩增.结果表明,卵囊污染吸附最佳时间为24 h,样品洗脱最佳时间为30 min.其中,只用去离子水时,生菜、西葫芦、黄瓜、西瓜、甜瓜和草莓的检测敏感性可达到50个卵囊,而西红柿可达到500个卵囊;当用不同洗涤剂时,各样品的检测敏感性均可达到50个卵囊.不同洗涤剂之间检测敏感性无显著差异.该研究初步建立检测水果、蔬菜污染环孢子虫卵囊的技术,采用此方法可特异、敏感、快速的检测果蔬表面环孢子虫卵囊,为食源性环孢子虫病暴发溯源提供技术支持.
关键词
环孢子虫卵囊
18S
RRNA
检测敏感性
巢式PCR
Keywords
Cyclospora oocysts
18S rRNA
detectable sensitivity
nested PCR
分类号
Q958.9 [生物学—动物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水果及蔬菜表面环孢子虫卵囊检测方法的建立
孙芳芳
罗楠楠
李俊强
赵金凤
李廷文
黄建营
张龙现
《河南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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