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猪繁殖与呼吸综合征病毒反转录环媒恒温检测方法的建立 被引量:24
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作者 陈长木 崔尚金 +1 位作者 张超范 鄢明华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期378-382,共5页
本研究利用PrimerExplorer V4软件设计了针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N基因保守区6个特异性部位的4种引物,建立了PRRSV的反转录环媒恒温检测方法。利用该方法所建立的反应体系在恒温水浴锅中作用1 h即可得到其特有的阶梯状条带,... 本研究利用PrimerExplorer V4软件设计了针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N基因保守区6个特异性部位的4种引物,建立了PRRSV的反转录环媒恒温检测方法。利用该方法所建立的反应体系在恒温水浴锅中作用1 h即可得到其特有的阶梯状条带,而且猪细小病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和健康猪睾丸细胞的扩增结果均为阴性。本方法对PRRSV的最低检出量为1×100个~1×101个基因拷贝。反转录环媒恒温检测方法和普通RT-PCR方法检测临床样品的符合率为96.2%。该方法为现地开展猪繁殖与呼吸综合征的快速诊断和综合防治方案的提出提供了有力的诊断工具。 展开更多
关键词 PRRSV 环媒恒温 检测方法
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鸡传染性法氏囊病毒反转录环媒恒温检测方法的初步建立 被引量:2
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作者 杨作丰 石霖 +6 位作者 邓文超 郭炎 董娜 王竹 赵培 张鑫 张雅为 《现代畜牧兽医》 2014年第12期12-17,共6页
本研究利用Primer Explorer V4软件设计了针对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)VP1基因保守区6个特异性部位的4条引物,建立了IBDV的反转录环媒恒温检测方法。该方法反应体系在恒温水浴锅中作用1 h即可得到其特有的阶梯状条带,加入荧光素后肉眼... 本研究利用Primer Explorer V4软件设计了针对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)VP1基因保守区6个特异性部位的4条引物,建立了IBDV的反转录环媒恒温检测方法。该方法反应体系在恒温水浴锅中作用1 h即可得到其特有的阶梯状条带,加入荧光素后肉眼可直接观察结果。本方法特异性高,对IBDV的最低检出量为10-6稀释倍数,敏感性是普通RT-PCR的100倍。反转录环媒恒温检测方法和普通RT-PCR方法检测临床样品的符合率为93.8%。因此该方法可以作为IBDV的综合防治和疾病诊断的实用方法。 展开更多
关键词 IBDV 环媒恒温 检测方法
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利用环媒恒温基因扩增法检测生猪刚地弓形虫
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作者 程天印 王晓君 +1 位作者 潘细妹 陈志强 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期526-528,共3页
基于已公布的刚地弓形虫Sag2基因序列设计了1套特异引物,经过条件优化,成功建立了针对刚地弓形虫(简称弓形虫)的环媒恒温基因扩增检测法.根据扩增弓形虫和其他几种病原生物的效果对该方法进行评估.结果表明,该方法只检出致病性弓形虫,... 基于已公布的刚地弓形虫Sag2基因序列设计了1套特异引物,经过条件优化,成功建立了针对刚地弓形虫(简称弓形虫)的环媒恒温基因扩增检测法.根据扩增弓形虫和其他几种病原生物的效果对该方法进行评估.结果表明,该方法只检出致病性弓形虫,特异性良好;检测最低速殖子浓度为4个/μL.对长沙、株洲、湘潭三地生猪血样检测的结果是仔猪、成猪和种母猪弓形虫感染率分别为6.45%、7.69%和15.38%. 展开更多
关键词 刚地弓形虫 Sag2基因 环媒恒温基因扩增检测法
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