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环介导间接PCR检测方法的建立
被引量：
3
1
作者
王永芬
郑鸣
边传周
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期130-134,共5页
建立环介导间接PCR检测体系,为分子诊断提供一种新的检测工具。以质粒pUC18的核苷酸序列为模板,设计两条特异性探针,采用常规PCR技术将特异性探针标记于大豆Lectin基因的左右两端充当报告基因,此标记的报告基因与待检的pUC18质粒经杂交...
建立环介导间接PCR检测体系,为分子诊断提供一种新的检测工具。以质粒pUC18的核苷酸序列为模板,设计两条特异性探针,采用常规PCR技术将特异性探针标记于大豆Lectin基因的左右两端充当报告基因,此标记的报告基因与待检的pUC18质粒经杂交和缺口补平后形成一环状DNA分子,然后采用反向PCR技术扩增报告基因,建立针对pUC18质粒的环介导间接PCR检测方法。结果表明,该检测方法的检测底限为0.32 pg/μL,与常规PCR相当,并且与其他质粒和动物DNA检测无交叉反应,是一种简单、快速、灵敏、特异的PCR检测方法。
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关键词
探针
报告基因
环介导间接pcr
建立
分子诊断
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职称材料
同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法的建立
被引量：
1
2
作者
程龙飞
傅光华
+7 位作者
林群群
刘荣昌
陈翠腾
傅秋玲
万春和
施少华
陈红梅
黄瑜
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第8期637-640,共4页
为建立同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法,本研究根据鸭疫里默氏菌外膜蛋白A基因和大肠杆菌的gapA基因的保守序列设计两对特异性探针,分别标记于猪线粒体基因片段的两端形成两种不同的捕获探针,将捕获探针与待检测菌...
为建立同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法,本研究根据鸭疫里默氏菌外膜蛋白A基因和大肠杆菌的gapA基因的保守序列设计两对特异性探针,分别标记于猪线粒体基因片段的两端形成两种不同的捕获探针,将捕获探针与待检测菌的基因组杂交、补平缺口、环化后,采用1对引物反向扩增捕获探针,建立检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法,扩增片段分别为540 bp和328 bp,本研究建立的方法对金黄色葡萄球菌、禽多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌的检测结果为阴性;能够检测出10 pg的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的基因组DNA,与常规PCR的符合率为100%。本研究建立的环介导间接PCR方法是一种特异性好、灵敏度高的快速病原学诊断方法,为同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌提供了一种可行的方法。
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关键词
鸭疫里默氏菌
大肠杆菌
环介导间接pcr
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职称材料
题名
环介导间接PCR检测方法的建立
被引量：
3
1
作者
王永芬
郑鸣
边传周
机构
郑州牧业工程高等专科学校
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期130-134,共5页
基金
河南省重点科技攻关项目(092102110073)
文摘
建立环介导间接PCR检测体系,为分子诊断提供一种新的检测工具。以质粒pUC18的核苷酸序列为模板,设计两条特异性探针,采用常规PCR技术将特异性探针标记于大豆Lectin基因的左右两端充当报告基因,此标记的报告基因与待检的pUC18质粒经杂交和缺口补平后形成一环状DNA分子,然后采用反向PCR技术扩增报告基因,建立针对pUC18质粒的环介导间接PCR检测方法。结果表明,该检测方法的检测底限为0.32 pg/μL,与常规PCR相当,并且与其他质粒和动物DNA检测无交叉反应,是一种简单、快速、灵敏、特异的PCR检测方法。
关键词
探针
报告基因
环介导间接pcr
建立
分子诊断
Keywords
Probes
Reporter gene
Loop-mediated indirect
pcr
Establishment
Molecular diagnostics
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法的建立
被引量：
1
2
作者
程龙飞
傅光华
林群群
刘荣昌
陈翠腾
傅秋玲
万春和
施少华
陈红梅
黄瑜
机构
福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心/福建省禽病防治重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第8期637-640,共4页
基金
现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-42)
福建省属公益类项目(2015R1023-2)
福建省畜禽疫病防控技术重大研发平台(2014N2003)
文摘
为建立同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法,本研究根据鸭疫里默氏菌外膜蛋白A基因和大肠杆菌的gapA基因的保守序列设计两对特异性探针,分别标记于猪线粒体基因片段的两端形成两种不同的捕获探针,将捕获探针与待检测菌的基因组杂交、补平缺口、环化后,采用1对引物反向扩增捕获探针,建立检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法,扩增片段分别为540 bp和328 bp,本研究建立的方法对金黄色葡萄球菌、禽多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌的检测结果为阴性;能够检测出10 pg的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的基因组DNA,与常规PCR的符合率为100%。本研究建立的环介导间接PCR方法是一种特异性好、灵敏度高的快速病原学诊断方法,为同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌提供了一种可行的方法。
关键词
鸭疫里默氏菌
大肠杆菌
环介导间接pcr
Keywords
Riemerella anatipestifer
Escherichia coli
loop-mediated indirect
pcr
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
环介导间接PCR检测方法的建立
王永芬
郑鸣
边传周
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
同时检测鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的环介导间接PCR方法的建立
程龙飞
傅光华
林群群
刘荣昌
陈翠腾
傅秋玲
万春和
施少华
陈红梅
黄瑜
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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已选择
0
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引用分析
参考文献
引证文献
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