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不同基因型猫嵌杯状病毒的分离鉴定与致病性比较
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作者 李博文 王淑娟 +7 位作者 胡煜锋 王益冰 甘雪强 陈岩岩 王东方 马震原 赵雪丽 闫若潜 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期4112-4119,共8页
本研究针对猫嵌杯状病毒(FCV)的遗传变异与致病特征展开分析,成功分离鉴定5株FCV流行毒株。通过检测127份临床样本获得31份核酸阳性样本(阳性率24.4%),经细胞培养分离获得5株病毒。结果显示:其中4株为FCVⅠ型(HN78等),1株为FCVⅡ型(HN77... 本研究针对猫嵌杯状病毒(FCV)的遗传变异与致病特征展开分析,成功分离鉴定5株FCV流行毒株。通过检测127份临床样本获得31份核酸阳性样本(阳性率24.4%),经细胞培养分离获得5株病毒。结果显示:其中4株为FCVⅠ型(HN78等),1株为FCVⅡ型(HN77)。病毒粒子电镜观察显示典型球形无囊膜结构,VP1基因测序显示毒株间相似性为75.4%~75.65%。动物回归试验证实,Ⅰ型HN78与Ⅱ型HN77均能引发典型临床症状,但不同基因型致病特征存在差异。该研究首次系统比较我国FCV基因Ⅰ/Ⅱ型的生物学特性,为疫苗研发和临床防控提供了重要毒株资源与理论依据。 展开更多
关键词 杯状病毒(fcv) 分离株 遗传特征 变异 基因测序
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北京部分地区猫泛白细胞减少症病毒、疱疹病毒和杯状病毒流行病学调查分析 被引量:2
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作者 张美华 张中华 +5 位作者 鲁锋 朱方超 赵俊鑫 苏煜智 武峥 石文达 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期138-141,共4页
为了解北京地区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、疱疹病毒(FHV)和杯状病毒(FCV)的流行情况,并统计分析年龄和疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率的相关性,本调查于2021年1月—2023年6月收集北京地区多家宠物医院疑似感染FPV(313份)、FHV(1869份)... 为了解北京地区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、疱疹病毒(FHV)和杯状病毒(FCV)的流行情况,并统计分析年龄和疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率的相关性,本调查于2021年1月—2023年6月收集北京地区多家宠物医院疑似感染FPV(313份)、FHV(1869份)或FCV(1638份)和体检动物样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)进行检测,并对结果进行统计分析。结果显示,FPV、FHV和FCV阳性率分别为57.51%、39.43%和42.31%;0~6月龄猫FPV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FPV;0~6月龄猫FHV阳性率显著高于>6~12月龄、>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FHV;0~6月龄和>6~12月龄猫FCV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~12月龄猫更易感染FCV;免疫猫FPV、FHV和FCV阳性率极显著低于未免疫猫(P<0.01),说明疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率呈强相关性,进一步表明疫苗免疫可有效降低FPV、FHV和FCV阳性率。因此,建议在0~6月龄及时进行猫三联疫苗免疫,可有效降低猫感染FPV、FHV和FCV的风险,更有利于宠物健康。 展开更多
关键词 泛白细胞减少症病毒(FPV) 疱疹病毒(FHV) 杯状病毒(fcv) 流行病学调查
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猫杯状病毒实时荧光定量逆转录PCR检测方法的建立
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作者 李静怡 熊雷 +4 位作者 黄莉璎 刘晓鹏 杨盛奋 金京勋 王弋 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第12期64-72,共9页
为了建立可快速检测猫杯状病毒(FCV)的方法,本试验采用肽核酸(PNA)设计分子信标荧光探针,优化反应体系和条件,建立了FCV实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测方法,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行验证,并进行临床样本检测。结果显... 为了建立可快速检测猫杯状病毒(FCV)的方法,本试验采用肽核酸(PNA)设计分子信标荧光探针,优化反应体系和条件,建立了FCV实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测方法,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行验证,并进行临床样本检测。结果显示,建立的RT-qPCR检测FCV参考株具有良好的线性关系(R^(2)=0.9995),最低检测限为1×10^(2)TCID_(50)/mL,对其他相关病毒无有效响应,组内变异系数和组间变异系数均小于1%。应用该方法检测33份临床样本,阳性率为51.5%。由此可见,本试验建立的RT-qPCR敏感性、特异性和重复性均良好,可为FCV的早期快速诊断和疫病防控等提供检测手段。 展开更多
关键词 杯状病毒(fcv) 肽核酸(PNA) 分子信标荧光探针 实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR) 开放阅读框(ORF)
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猫杯状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:10
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作者 姜雪 高玉伟 +6 位作者 胡桂学 杨松涛 赵艳丽 刘秋燕 徐春忠 梁秀娟 夏咸柱 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期973-977,共5页
根据GenBank中编码猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白ORF2的保守序列,设计并合成了一对引物和相应的TaqMan探针,建立了快速检测FCV的荧光定量PCR方法.通过对该方法的反应体系和反应条件进行优化,建立了标准曲线,给出了特异性、敏感性和重复性实验... 根据GenBank中编码猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白ORF2的保守序列,设计并合成了一对引物和相应的TaqMan探针,建立了快速检测FCV的荧光定量PCR方法.通过对该方法的反应体系和反应条件进行优化,建立了标准曲线,给出了特异性、敏感性和重复性实验,并对临床24份疑似样品(其中阳性3份、阴性21份)进行检测.结果表明:该方法检测cDNA的线性关系为0.992,线性范围为2.26×1011-2.26×101拷贝/μL;可检测出样品中的FCV,其他猫相关病毒检测为阴性;批内重复性实验变异系数为2.158%,与病毒分离结果相符. 展开更多
关键词 杯状病毒fcv 荧光定量PCR 检测方法
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1株猫嵌杯病毒的分离鉴定及全基因序列分析 被引量:1
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作者 陈昌毅 李根 +4 位作者 何红玲 陈昱彤 黄学喆 罗均 郭霄峰 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3707-3718,共12页
【目的】从疑似患猫鼻咽拭子和粪便病料中分离猫嵌杯病毒(Feline calicivirus, FCV),为研究FCV的生物学特性及流行分布提供理论依据。【方法】从广东省江门市采集的11份疑似患猫的病料中,以RT-PCR筛选含有FCV的病料,利用F81细胞及病毒... 【目的】从疑似患猫鼻咽拭子和粪便病料中分离猫嵌杯病毒(Feline calicivirus, FCV),为研究FCV的生物学特性及流行分布提供理论依据。【方法】从广东省江门市采集的11份疑似患猫的病料中,以RT-PCR筛选含有FCV的病料,利用F81细胞及病毒空斑纯化试验对其进行纯化和扩繁。电镜下观察纯净化分离病毒的形态。通过间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, IFA)测定病毒的半数组织培养感染剂量(median tissue culture infectious dose, TCID50)及不同收毒时间的病毒滴度,绘制分离病毒的一步生长曲线。对分离病毒全基因序列进行核苷酸序列测定,并对其遗传进化及相似性进行分析。【结果】从疑似患猫的粪便病料中分离获得1株FCV,经空斑纯化后,该毒株会导致F81细胞发生皱缩、变圆、葡萄串样聚集和脱落等细胞病变效应。在电镜下病毒粒子呈圆形、直径35~39 nm、无囊膜。IFA结果显示,分离病毒可与兔源FCV VP1-F蛋白特异性多克隆抗体发生结合,在荧光显微镜下可见明显特异性荧光,病毒滴度为1×109TCID50/mL。分离病毒基因组全长为7 722 bp,与FCV-SH毒株核苷酸相似性最高,为83.94%,属于同一分支。VP1基因与FCV-SH1902毒株核苷酸相似性最高,为81.32%,与FCV-SH1901毒株氨基酸相似性最高,为89.99%。【结论】本研究成功分离到1株FCV,并对其全基因序列进行分析。该研究为FCV致病机理及疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 病毒(fcv) 分离鉴定 基因测序 遗传进化分析
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FHV-1和FCV双重TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立和应用 被引量:1
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作者 静争 金红岩 +4 位作者 王春艳 王文杰 沈佳宇 范志坚 侯绍华 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第5期58-64,共7页
为了快速、便捷、准确诊断猫疱疹病毒1型(FHV-1)和猫杯状病毒(FCV),本试验选取FHV-1的糖蛋白C(GC)基因(Gen Bank登录号:OR504662)和FCV的衣壳蛋白1(VP1)基因(Gen Bank登录号:OP904215)以及一段猫外源性内标序列设计并合成引物和探针,构... 为了快速、便捷、准确诊断猫疱疹病毒1型(FHV-1)和猫杯状病毒(FCV),本试验选取FHV-1的糖蛋白C(GC)基因(Gen Bank登录号:OR504662)和FCV的衣壳蛋白1(VP1)基因(Gen Bank登录号:OP904215)以及一段猫外源性内标序列设计并合成引物和探针,构建重组阳性质粒标准品p MD19-T-G、p MD19-T-P和p MD19-T-C,建立了双重Taq Man实时荧光定量PCR方法。以重组阳性质粒标准品绘制标准曲线,验证该方法的特异性、灵敏性和重复性,利用建立的方法检测33份临床样本评估该方法的可行性,并对泰州市292份流浪猫眼口鼻分泌物样本进行检测。结果显示,本试验建立的双重Taq Man实时荧光定量PCR方法具有良好的线性关系,对其他病原无交叉反应,对FHV-1和FCV的最低检测限均为1×10^(1)copies/μL,组内和组间的变异系数均小于2%;对33份临床样本的检测结果显示,FHV-1和FCV的阳性符合率为100%,FHV-1总符合率为93.9%,FCV总符合率为90.9%;292份流浪猫眼口鼻分泌物样本中,FHV-1阳性率为20.9%,FCV阳性率为46.2%,FHV-1和FCV混合阳性率为12.0%。结果表明,本试验建立的双重Taq Man实时荧光定量PCR,特异性强、灵敏度高、重复性好,为临床猫呼吸系统疾病病原鉴别诊断和宠物健康监测提供了技术支持。 展开更多
关键词 疱疹病毒1型(FHV-1) 杯状病毒(fcv) 实时荧光定量PCR
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猫杯状病毒快速检测方法的建立
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作者 顾晏羽 钱刚 +3 位作者 施桦千 赵庚彤 袁海宏 王睿涵 《现代畜牧科技》 2023年第3期17-19,共3页
根据GenBank上公布猫杯状病毒(FCV)保守区域序列的6个区域,应用引物设计软件PrimerExplorerV5.0设计合成4条特异性引物,并对反应体系进行优化,建立用于检测FCV的环介导等温扩增(LAMP)方法。试验结果显示:该方法仅对FCV呈阳性反应,与猫... 根据GenBank上公布猫杯状病毒(FCV)保守区域序列的6个区域,应用引物设计软件PrimerExplorerV5.0设计合成4条特异性引物,并对反应体系进行优化,建立用于检测FCV的环介导等温扩增(LAMP)方法。试验结果显示:该方法仅对FCV呈阳性反应,与猫泛白细胞减少症病毒、猫疱疹病毒、猫冠状病毒等其他常见猫传染病病原均无交叉反应,特异性强。与常规PCR方法检测相比,LAMP方法敏感性是常规PCR的100倍,敏感性强。对66份临床疑似病料样品分别采用新建立LAMP方法和常规PCR方法进行检测,结果显示,LAMP方法共检测出38例阳性样本,而常规PCR方法检测出29例。本研究建立一种猫杯状病毒的LAMP检测方法,具有简便快捷、灵敏度高等特点,能够用于FCV的临床快速检测。 展开更多
关键词 环介导等温扩增(LAMP) 杯状病毒(fcv) 可视化
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