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2拷贝SLT-ⅡvB在猪霍乱沙门氏菌C500crp^-/asd^-缺失株中的表达及小鼠免疫试验
被引量:
1
1
作者
徐引弟
王治方
+1 位作者
朱文豪
郭成留
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第7期70-73,共4页
为研制仔猪副伤寒—猪水肿病新型二联疫苗,从pMDSLT-Ⅱ中扩增去信号肽后的SLT-ⅡvB基因,将2拷贝SLT-ⅡvB与pYA3493连接。阳性质粒pYA2B电转化C500crp-/asd-缺失株,进行SDS-PAGE电泳和Western blotting,重组菌C500crp-/asd-(pYA2B)口服...
为研制仔猪副伤寒—猪水肿病新型二联疫苗,从pMDSLT-Ⅱ中扩增去信号肽后的SLT-ⅡvB基因,将2拷贝SLT-ⅡvB与pYA3493连接。阳性质粒pYA2B电转化C500crp-/asd-缺失株,进行SDS-PAGE电泳和Western blotting,重组菌C500crp-/asd-(pYA2B)口服免疫小鼠,腹腔攻10 LD50的猪霍乱沙门氏菌强毒C78-1和2 LD50的猪水肿大肠杆菌强毒ED3株,计算攻毒保护率。结果显示,2 SLT-ⅡvB在C500crp-/asd-缺失株中获得了表达。C500crp-/asd-(pYA2B)免疫组对ED3的攻击能提供60%保护,而对照组不能提供任何保护。2组对C78-1攻击均提供100%保护,为研制仔猪副伤寒—猪水肿病二联疫苗及进一步提高免疫效果提供依据。
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关键词
猪霍乱沙门氏菌c500crp-/asd-缺失株
宿主载体平衡致死系统
2拷贝SLT-ⅡvB
基因表达
免疫反应
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职称材料
表达副猪格拉瑟菌GAPDH和OmP26的重组猪霍乱沙门氏菌构建及免疫学评价
2
作者
陈丽璇
符颖
+3 位作者
陈政权
李莉莉
张伟孝
张建民
《华南农业大学学报》
北大核心
2025年第3期319-325,共7页
【目的】构建能同时表达副猪格拉瑟菌Glaesserella parasuis关键抗原GAPDH和OmP26的重组猪霍乱沙门氏菌Salmonella choleraesuis,并评估其作为二联疫苗候选株的潜力,以期为预防G.parasuis和S.choleraesuis感染提供一种新型高效的解决方...
【目的】构建能同时表达副猪格拉瑟菌Glaesserella parasuis关键抗原GAPDH和OmP26的重组猪霍乱沙门氏菌Salmonella choleraesuis,并评估其作为二联疫苗候选株的潜力,以期为预防G.parasuis和S.choleraesuis感染提供一种新型高效的解决方法。【方法】选取多种血清型的G.parasuis中广泛存在的抗原GAPDH和OmP26作为外源抗原,以S.choleraesuis C500Δasd缺失株为载体,构建同时表达GAPDH和OmP26的G.parasuis-S.choleraesuis重组菌株,并对其生物学特性和免疫效果展开研究。【结果】PCR与测序结果共同表明,本研究成功构建重组菌株C501(pYA-GAPDH-OmP26),该菌株能稳定携带GAPDH和OmP26基因片段(大小分别为1020和798 bp),在连续传代100次中均能稳定扩增目标片段;且生长曲线、生化特性与对照菌C501(pYA3493)一致。重组菌株C501(pYA-GAPDH-OmP26)对S.choleraesuis C78-1和G.parasuis 5型强毒株SH0165的保护率分别为62.5%和50.0%,而C501(pYA3493)对S.choleraesuis C78-1的保护率为50.0%,对G.parasuis 5型强毒株SH0165则无保护作用。【结论】重组沙门氏菌C501(pYA-GAPDH-OmP26)能稳定携带异源基因,具有与亲本菌株相近的生物学特性及良好的表达特性,能够诱导机体对G.parasuis和S.choleraesuis产生联合免疫反应,为G.parasuis-S.choleraesuis二联基因工程疫苗的研发奠定了基础。
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关键词
猪
副猪格拉瑟菌
猪霍乱
沙门氏菌
c
500
Δasd
缺失
株
GAPDH
OmP26
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职称材料
crp缺失对猪霍乱沙门氏菌强弱毒株毒力的影响
3
作者
徐引弟
梁跃
+2 位作者
王治方
朱文豪
郭成留
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2012年第4期143-145,共3页
猪霍乱沙门氏菌C500株是用化学方法将强毒株C78-1致弱,用于预防仔猪副伤寒的弱毒疫苗株,虽具有较好的免疫原性,但仍有一定的残余毒力。SC-1是临床分离的猪霍乱沙门氏菌强毒株。为了研制更加安全的弱毒株,利用重组自杀性质粒通过接合转...
猪霍乱沙门氏菌C500株是用化学方法将强毒株C78-1致弱,用于预防仔猪副伤寒的弱毒疫苗株,虽具有较好的免疫原性,但仍有一定的残余毒力。SC-1是临床分离的猪霍乱沙门氏菌强毒株。为了研制更加安全的弱毒株,利用重组自杀性质粒通过接合转移的方法构建了猪霍乱沙门氏菌C500株、C78-1及SC-1的crp缺失株。C78-1、crp-C78-1、SC-1、crp-SC-1、C500、crp-C500 6个毒株经小鼠毒力试验检测。LD50结果显示,crp缺失对猪霍乱沙门氏菌的毒力影响不大,毒力只是略为降低,其中以crp-C500株毒力最弱。综上所述,可以选用crp-C500株毒株作为猪霍乱沙门氏菌弱毒疫苗株的选择。
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关键词
猪霍乱
沙门氏菌
弱毒
株
c
500
株
强毒
株
c
78-1
强毒
株
S
c
-1
c
rp
缺失
LD50
毒力
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职称材料
题名
2拷贝SLT-ⅡvB在猪霍乱沙门氏菌C500crp^-/asd^-缺失株中的表达及小鼠免疫试验
被引量:
1
1
作者
徐引弟
王治方
朱文豪
郭成留
机构
河南省农业科学院畜牧兽医研究所
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第7期70-73,共4页
基金
河南省科技攻关计划项目(072102140004)
河南省农科院高技术产品孵化项目(200712)
文摘
为研制仔猪副伤寒—猪水肿病新型二联疫苗,从pMDSLT-Ⅱ中扩增去信号肽后的SLT-ⅡvB基因,将2拷贝SLT-ⅡvB与pYA3493连接。阳性质粒pYA2B电转化C500crp-/asd-缺失株,进行SDS-PAGE电泳和Western blotting,重组菌C500crp-/asd-(pYA2B)口服免疫小鼠,腹腔攻10 LD50的猪霍乱沙门氏菌强毒C78-1和2 LD50的猪水肿大肠杆菌强毒ED3株,计算攻毒保护率。结果显示,2 SLT-ⅡvB在C500crp-/asd-缺失株中获得了表达。C500crp-/asd-(pYA2B)免疫组对ED3的攻击能提供60%保护,而对照组不能提供任何保护。2组对C78-1攻击均提供100%保护,为研制仔猪副伤寒—猪水肿病二联疫苗及进一步提高免疫效果提供依据。
关键词
猪霍乱沙门氏菌c500crp-/asd-缺失株
宿主载体平衡致死系统
2拷贝SLT-ⅡvB
基因表达
免疫反应
Keywords
S.
c
holeraesuis
c
500
crp-/
asd-
mutant
balan
c
ed lethal host-ve
c
tor system
2
c
opies SLT-ⅡvB
gene expression
immune test
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
表达副猪格拉瑟菌GAPDH和OmP26的重组猪霍乱沙门氏菌构建及免疫学评价
2
作者
陈丽璇
符颖
陈政权
李莉莉
张伟孝
张建民
机构
人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室/农业农村部人兽共患病重点实验室/农业农村部兽用疫苗创制重点实验室/广东省动物源性人兽共患病重点实验室/华南农业大学兽医学院
出处
《华南农业大学学报》
北大核心
2025年第3期319-325,共7页
基金
“十四五”国家重点研发计划(2022YFD1800901)。
文摘
【目的】构建能同时表达副猪格拉瑟菌Glaesserella parasuis关键抗原GAPDH和OmP26的重组猪霍乱沙门氏菌Salmonella choleraesuis,并评估其作为二联疫苗候选株的潜力,以期为预防G.parasuis和S.choleraesuis感染提供一种新型高效的解决方法。【方法】选取多种血清型的G.parasuis中广泛存在的抗原GAPDH和OmP26作为外源抗原,以S.choleraesuis C500Δasd缺失株为载体,构建同时表达GAPDH和OmP26的G.parasuis-S.choleraesuis重组菌株,并对其生物学特性和免疫效果展开研究。【结果】PCR与测序结果共同表明,本研究成功构建重组菌株C501(pYA-GAPDH-OmP26),该菌株能稳定携带GAPDH和OmP26基因片段(大小分别为1020和798 bp),在连续传代100次中均能稳定扩增目标片段;且生长曲线、生化特性与对照菌C501(pYA3493)一致。重组菌株C501(pYA-GAPDH-OmP26)对S.choleraesuis C78-1和G.parasuis 5型强毒株SH0165的保护率分别为62.5%和50.0%,而C501(pYA3493)对S.choleraesuis C78-1的保护率为50.0%,对G.parasuis 5型强毒株SH0165则无保护作用。【结论】重组沙门氏菌C501(pYA-GAPDH-OmP26)能稳定携带异源基因,具有与亲本菌株相近的生物学特性及良好的表达特性,能够诱导机体对G.parasuis和S.choleraesuis产生联合免疫反应,为G.parasuis-S.choleraesuis二联基因工程疫苗的研发奠定了基础。
关键词
猪
副猪格拉瑟菌
猪霍乱
沙门氏菌
c
500
Δasd
缺失
株
GAPDH
OmP26
Keywords
Pig
Glaesserella parasuis
Salmonella
c
holeraesuis
c
500
Δasd deletion strain
GAPDH
OmP26
分类号
S855.12 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
crp缺失对猪霍乱沙门氏菌强弱毒株毒力的影响
3
作者
徐引弟
梁跃
王治方
朱文豪
郭成留
机构
河南省农业科学院畜牧兽医研究所
出处
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2012年第4期143-145,共3页
基金
河南省科技攻关计划项目(072102140004)
河南省农科院高技术产品孵化项目(200712)
文摘
猪霍乱沙门氏菌C500株是用化学方法将强毒株C78-1致弱,用于预防仔猪副伤寒的弱毒疫苗株,虽具有较好的免疫原性,但仍有一定的残余毒力。SC-1是临床分离的猪霍乱沙门氏菌强毒株。为了研制更加安全的弱毒株,利用重组自杀性质粒通过接合转移的方法构建了猪霍乱沙门氏菌C500株、C78-1及SC-1的crp缺失株。C78-1、crp-C78-1、SC-1、crp-SC-1、C500、crp-C500 6个毒株经小鼠毒力试验检测。LD50结果显示,crp缺失对猪霍乱沙门氏菌的毒力影响不大,毒力只是略为降低,其中以crp-C500株毒力最弱。综上所述,可以选用crp-C500株毒株作为猪霍乱沙门氏菌弱毒疫苗株的选择。
关键词
猪霍乱
沙门氏菌
弱毒
株
c
500
株
强毒
株
c
78-1
强毒
株
S
c
-1
c
rp
缺失
LD50
毒力
Keywords
Salmonella
c
holeraesuis
attenuated strain
c
500
virulent strain
c
78-1
S
c
-1
c
rp mutant
LD50
Virulen
c
e
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
2拷贝SLT-ⅡvB在猪霍乱沙门氏菌C500crp^-/asd^-缺失株中的表达及小鼠免疫试验
徐引弟
王治方
朱文豪
郭成留
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010
1
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职称材料
2
表达副猪格拉瑟菌GAPDH和OmP26的重组猪霍乱沙门氏菌构建及免疫学评价
陈丽璇
符颖
陈政权
李莉莉
张伟孝
张建民
《华南农业大学学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
3
crp缺失对猪霍乱沙门氏菌强弱毒株毒力的影响
徐引弟
梁跃
王治方
朱文豪
郭成留
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2012
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