【目的】建立一种猪A群轮状病毒(porcine rotavirus group A, PoRV A)快速检测方法,用于PoRV检测和流行病学调查。【方法】参考GenBank中猪A群轮状病毒(PoRVA)VP6基因序列(登录号MT025937.1、OP978242.1、PP566178.1)设计特异性引物和探...【目的】建立一种猪A群轮状病毒(porcine rotavirus group A, PoRV A)快速检测方法,用于PoRV检测和流行病学调查。【方法】参考GenBank中猪A群轮状病毒(PoRVA)VP6基因序列(登录号MT025937.1、OP978242.1、PP566178.1)设计特异性引物和探针,优化反应体系中引物和探针的浓度,建立Taq Man RT-qPCR检测方法,并通过特异性、灵敏性和重复性的结果以及临床应用对该方法进行评价。【结果】该方法可特异性扩增PoRV核酸,最低检出限度为27.0 copies·μL^(-1),灵敏度高于普通RT-PCR 100倍;与猪流行性腹泻病毒(porcine epidemicdiarrheavirus,PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(porcinedeltacoronavirus,PDCoV)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis of swine, TGEV)核酸均无交叉反应;组内和组间变异系数均小于1.10%,重复性好。151份疑似PoRV的临床样品使用RT-qPCR进行检测,结果显示检出率为42.38%(64/151),优于常规RT-PCR的检出率(33.11%,50/151)。【结论】本研究基于猪A群轮状病毒VP6基因,建立了适用于PoRV A检测及其流行病学调查的Taq Man实时荧光定量PCR检测方法,具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优势,为猪轮状病毒检测和流行病学调查提供了技术手段。展开更多
A群轮状病毒(Group A porcinerotavirus,RVA)是对世界各地的养殖业构成的严重威胁,与仔猪严重腹泻有关。病毒通过粪口途径传播,主要感染和破坏小肠成熟的肠细胞和肠内分泌细胞,导致急性胃肠炎。猪轮状病毒(Porcine Rotavirus,PoRV)于197...A群轮状病毒(Group A porcinerotavirus,RVA)是对世界各地的养殖业构成的严重威胁,与仔猪严重腹泻有关。病毒通过粪口途径传播,主要感染和破坏小肠成熟的肠细胞和肠内分泌细胞,导致急性胃肠炎。猪轮状病毒(Porcine Rotavirus,PoRV)于1976年首次从受感染的猪中分离出来。随后,许多研究记录了PoRV感染在世界各地的广泛流行。PoRV自被发现以来,已经给全球养猪业造成了巨大的经济损失。PoRV是一种双股正链RNA(dsRNA)病毒,属于呼肠孤病毒科的成员。展开更多
文摘【目的】建立一种猪A群轮状病毒(porcine rotavirus group A, PoRV A)快速检测方法,用于PoRV检测和流行病学调查。【方法】参考GenBank中猪A群轮状病毒(PoRVA)VP6基因序列(登录号MT025937.1、OP978242.1、PP566178.1)设计特异性引物和探针,优化反应体系中引物和探针的浓度,建立Taq Man RT-qPCR检测方法,并通过特异性、灵敏性和重复性的结果以及临床应用对该方法进行评价。【结果】该方法可特异性扩增PoRV核酸,最低检出限度为27.0 copies·μL^(-1),灵敏度高于普通RT-PCR 100倍;与猪流行性腹泻病毒(porcine epidemicdiarrheavirus,PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(porcinedeltacoronavirus,PDCoV)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis of swine, TGEV)核酸均无交叉反应;组内和组间变异系数均小于1.10%,重复性好。151份疑似PoRV的临床样品使用RT-qPCR进行检测,结果显示检出率为42.38%(64/151),优于常规RT-PCR的检出率(33.11%,50/151)。【结论】本研究基于猪A群轮状病毒VP6基因,建立了适用于PoRV A检测及其流行病学调查的Taq Man实时荧光定量PCR检测方法,具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优势,为猪轮状病毒检测和流行病学调查提供了技术手段。
文摘A群轮状病毒(Group A porcinerotavirus,RVA)是对世界各地的养殖业构成的严重威胁,与仔猪严重腹泻有关。病毒通过粪口途径传播,主要感染和破坏小肠成熟的肠细胞和肠内分泌细胞,导致急性胃肠炎。猪轮状病毒(Porcine Rotavirus,PoRV)于1976年首次从受感染的猪中分离出来。随后,许多研究记录了PoRV感染在世界各地的广泛流行。PoRV自被发现以来,已经给全球养猪业造成了巨大的经济损失。PoRV是一种双股正链RNA(dsRNA)病毒,属于呼肠孤病毒科的成员。
