检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

猪表皮生长因子在乳酸乳球菌中的表达及其生物活性研究: 1; 作者周鑫鑫郭莹莹 +4 位作者肖运才王金硕周祖涛刘华珍石德时《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2823-2836,共14页; 【目的】构建表达猪表皮生长因子(pEGF)的乳酸乳球菌原核表达系统,并探究其对断奶仔猪腹泻的影响。【方法】以pUC57-SP45-LEISSTCDA-pEGF序列为模板,利用PCR扩增获得缺失LEISSTCDA片段的融合产物,将其与酶切pNZ8149表达载体连接后电转... 展开更多; 关键词乳酸乳球菌 pEGF-NZ重组菌猪表皮生长因子(pEGF); 在线阅读下载PDF 职称材料

猪表皮生长因子真核表达产物的体外活性试验被引量：2: 2; 作者张万江王秀梅 +1 位作者吴波浪杨桂香《动物医学进展》 CSCD 2008年第4期31-34,共4页; 为建立一种快速检测猪表皮生长因子(pEGF)活性的方法,用本实验室构建的pEGF酵母表达载体进行摇瓶培养,通过鉴定为所需要的目的蛋白,用pEGF为添加物培养Balbc/3T3细胞,以pEGF浓度为横坐标,吸光度为纵坐标建立曲线。结果表明,理想的接种... 展开更多; 关键词猪表皮生长因子生物活性体外CCK-8; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪表皮生长因子间接竞争ELISA检测方法的建立被引量：2: 3; 作者张万江王秀梅杨桂香《动物医学进展》 CSCD 2008年第3期25-28,共4页; 为建立酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测猪血清或尿液中猪表皮生长因子(porcinee pidermal growth factor,pEGF)的含量,以pEGF为包被原,人表皮生长因子(hu-mane pidermal growth factor,hEGF)为竞争抗原... 展开更多; 关键词猪表皮生长因子多克隆抗体间接竞争ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪表皮生长因子的原核表达及纯化: 4; 作者刘庭汤慧 +6 位作者唐青海刘莎薛姣雄吴广艳马洁赵婷芳唐斯萍《湖南畜牧兽医》 2022年第2期45-50,共6页; [目的]:提高重组猪表皮生长因子(pEGF)的表达量和纯化量,为后续研究pEGF对仔猪生长发育的影响奠定基础。[方法]:将人工合成的pEGF基因克隆至pEGF4T-1载体,转化至大肠杆菌Rossetta(DE3)中,得到重组菌株Rossetta(DE3)-pGEX-pEGF,IPTG诱导... 展开更多; 关键词猪表皮生长因子诱导表达 GST标签蛋白纯化条件优化融合表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

分泌表达pEGF的重组酿酒酵母在断奶仔猪上的应用研究被引量：8: 5; 作者王蜀金王斌星 +4 位作者郭春华柏雪彭忠利张正帆周琳《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期944-954,共11页; 本研究对分泌表达pEGF的重组酿酒酵母在断奶仔猪日粮中的应用效果进行验证。72头21~24日龄的断奶仔猪((6.10±0.15)kg),随机分为3组(每组4个重复,每个重复6头):对照组(基础日粮+228mL·kg^(-1)空白培养液)、空载体组(基础日粮+2... 展开更多; 关键词猪表皮生长因子酿酒酵母断奶仔猪肠道发育免疫功能; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪表皮生长因子在乳酸乳球菌中的表达及其生物活性研究: 1; 作者周鑫鑫郭莹莹肖运才王金硕周祖涛刘华珍石德时; 机构华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院华中农业大学北京三诺佳邑生物技术有限责任公司; 出处《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2823-2836,共14页; 基金湖北省重点研发计划项目(2023DJC145) 知识创新专项-基础研究项目(2022020801010224)。; 文摘【目的】构建表达猪表皮生长因子(pEGF)的乳酸乳球菌原核表达系统,并探究其对断奶仔猪腹泻的影响。【方法】以pUC57-SP45-LEISSTCDA-pEGF序列为模板,利用PCR扩增获得缺失LEISSTCDA片段的融合产物,将其与酶切pNZ8149表达载体连接后电转至乳酸乳球菌NZ3900,以LacF为筛选标记获得重组菌pEGF-NZ。用nisin诱导重组菌pEGF-NZ表达重组蛋白pEGF,并通过Tricine-SDS-PAGE检测其表达情况。改良实验室及工业发酵条件以提高pEGF表达量。利用猪回肠上皮细胞(IPEC-J2)增殖试验体外验证表达的pEGF生物活性。通过动物试验验证重组蛋白pEGF对小鼠及断奶仔猪腹泻的影响。【结果】试验成功构建重组菌pEGF-NZ,并分泌表达pEGF蛋白。体外试验结果显示,pEGF蛋白能促进细胞增殖。pEGF-NZ重组菌及其表达的pEGF蛋白能延缓小鼠腹泻发生时间,降低腹泻率,保护小鼠肠绒毛的完整性。与对照组相比,pEGF-NZ重组菌处理后,小鼠结肠中乳酸菌数显著增加(P<0.05),大肠杆菌数、肠球菌数显著降低(P<0.05),白细胞介素-1α(IL-1α)、IL-1β含量显著降低(P<0.05),IL-13含量显著升高(P<0.05)。饲粮中添加pEGF-NZ重组菌后,断奶仔猪腹泻情况明显缓解,平均日增重有升高趋势,但差异不显著(P>0.05)。【结论】pEGF-NZ重组菌及其分泌表达的pEGF能够修复肠道屏障,抑制病原菌黏附,调控肠道菌群,其主要通过下调部分促炎因子、上调抑炎因子表达发挥抑炎效果,从而保护断奶仔猪肠道健康,有效缓解腹泻。; 关键词乳酸乳球菌 pEGF-NZ重组菌猪表皮生长因子(pEGF); Keywords Lactococcus lactis pEGF-NZ recombinant bacteria porcine epidermal growth factor(pEGF); 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪表皮生长因子真核表达产物的体外活性试验被引量：2: 2; 作者张万江王秀梅吴波浪杨桂香; 机构华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价实验室; 出处《动物医学进展》 CSCD 2008年第4期31-34,共4页; 基金广州市科技攻关项目(2006Z3-E0051); 文摘为建立一种快速检测猪表皮生长因子(pEGF)活性的方法,用本实验室构建的pEGF酵母表达载体进行摇瓶培养,通过鉴定为所需要的目的蛋白,用pEGF为添加物培养Balbc/3T3细胞,以pEGF浓度为横坐标,吸光度为纵坐标建立曲线。结果表明,理想的接种细胞的个数为5 000个/孔,细胞计数试剂盒(CCK-8)孵育的最佳时间为1.5 h,pEGF和人表皮生长因子(hEGF)标准品,在1 ng/mL^100 ng/mL范围内对细胞的增值作用相当,表明pEGF和hEGF有相同的生物学活性。建立了用CCK-8快速测定pEGF活性的方法。; 关键词猪表皮生长因子生物活性体外CCK-8; Keywords porcime epidermal grouth factor bioactivity in vitro CCK-8; 分类号 Q516 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪表皮生长因子间接竞争ELISA检测方法的建立被引量：2: 3; 作者张万江王秀梅杨桂香; 机构华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价实验室; 出处《动物医学进展》 CSCD 2008年第3期25-28,共4页; 基金广州市科技攻关项目(2006Z3-E0051); 文摘为建立酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测猪血清或尿液中猪表皮生长因子(porcinee pidermal growth factor,pEGF)的含量,以pEGF为包被原,人表皮生长因子(hu-mane pidermal growth factor,hEGF)为竞争抗原,两者与一定量的抗pEGF多抗反应。结果表明,理想的包被抗原浓度为0.625μg/mL,抗pEGF工作浓度为1∶64000,酶标二抗工作浓度为1∶20000,可检测的最适范围为0.4ng/mL^32ng/mL,最低检测限为1ng/mL,批内和批间变异系数分别为3.50%和5.22%。得到回归方程y=-34.53x+76.06(R2=0.993)和标准曲线,从而建立了快速定量测定pEGF含量的酶联免疫吸附试验方法。; 关键词猪表皮生长因子多克隆抗体间接竞争ELISA; Keywords pEGF polyclonal antibodies ELISA; 分类号 S854.43 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪表皮生长因子的原核表达及纯化: 4; 作者刘庭汤慧唐青海刘莎薛姣雄吴广艳马洁赵婷芳唐斯萍; 机构衡阳师范学院生命科学与环境学院\南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室\动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室; 出处《湖南畜牧兽医》 2022年第2期45-50,共6页; 基金湖南省教育厅科学研究项目重点项目(21A0442) 湖南省自然科学基金面上项目(2021JJ30060) +1 种基金湖南省重点研发计划(2021NK2026) 国家级大学生创新创业训练计划项目(202110546001)。; 文摘 [目的]:提高重组猪表皮生长因子(pEGF)的表达量和纯化量,为后续研究pEGF对仔猪生长发育的影响奠定基础。[方法]:将人工合成的pEGF基因克隆至pEGF4T-1载体,转化至大肠杆菌Rossetta(DE3)中,得到重组菌株Rossetta(DE3)-pGEX-pEGF,IPTG诱导表达,进行表达条件的优化,用GST-tag亲和层析纯化方法进行纯化。[结果]:pEGF基因大小为159 bp,融合表达蛋白分子量为32k Da,最佳诱导表达条件为IPTG浓度0.01mmol/L、诱导温度15℃和诱导时间24h。流穿液和洗涤液中目的蛋白含量极少,洗脱液得到了高纯度的GST-pEGF融合蛋白,纯化较为成功。[结论]:成功构建了pEGF表达菌株,得到了最优的诱导表达条件和最优的纯化工艺,为pEGF相关产品的开发以及应用奠定了基础。; 关键词猪表皮生长因子诱导表达 GST标签蛋白纯化条件优化融合表达; Keywords Porcine epidermal growth factor Induced expression GST tag Protein purification Conditions optimization Fusion expression; 分类号 S831.4 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名分泌表达pEGF的重组酿酒酵母在断奶仔猪上的应用研究被引量：8: 5; 作者王蜀金王斌星郭春华柏雪彭忠利张正帆周琳; 机构西南民族大学生命科学与技术学院动物遗传育种学国家民委一教育部重点实验室深圳比利美英伟营养饲料有限公司; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期944-954,共11页; 基金西南民族大学动物科学专业学位建设项目(2014XWD-S0905); 文摘本研究对分泌表达pEGF的重组酿酒酵母在断奶仔猪日粮中的应用效果进行验证。72头21~24日龄的断奶仔猪((6.10±0.15)kg),随机分为3组(每组4个重复,每个重复6头):对照组(基础日粮+228mL·kg^(-1)空白培养液)、空载体组(基础日粮+228mL·kg^(-1)空载体)及重组酵母组(基础日粮+228mL·kg^(-1) INVSc1(pYES2-Mfα-spEGF))。21d后,每组每栏选取1头仔猪屠宰,分别测定其小肠组织形态、小肠黏膜中IgA、IgG及IgM水平,碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)的酶活力及mRNA转录水平,小肠黏膜中表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGF-R)的mRNA转录水平。结果表明,与对照组及空载体组相比,重组酵母组INVSc1(pYES2-Mfα-spEGF)能够显著提高断奶仔猪小肠各段(十二指肠、空肠及回肠)黏膜中EGF-R及消化酶(ALP、CK及LDH)的mRNA转录水平(P<0.05),极显著提高CK和LDH的酶活力(P<0.01),显著促进其空肠及回肠黏膜中IgA、IgG及IgM水平(P<0.05),提高其平均日增重(ADG)及降低F/G(P<0.05)。综上,本研究获得的重组酿酒酵母INVSc1(pYES2-Mfα-spEGF)表达的EGF蛋白具有较高的生物学活性,能明显促进断奶仔猪小肠黏膜发育及其免疫功能,具有向养猪生产进一步转化的开发价值。; 关键词猪表皮生长因子酿酒酵母断奶仔猪肠道发育免疫功能; Keywords Porcine epidermal growth factor Saccharornyces cerevisiae early-weaned piglets in-testinal development immune function; 分类号 S828 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪表皮生长因子在乳酸乳球菌中的表达及其生物活性研究	周鑫鑫郭莹莹肖运才王金硕周祖涛刘华珍石德时	《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪表皮生长因子真核表达产物的体外活性试验	张万江王秀梅吴波浪杨桂香	《动物医学进展》 CSCD	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪表皮生长因子间接竞争ELISA检测方法的建立	张万江王秀梅杨桂香	《动物医学进展》 CSCD	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪表皮生长因子的原核表达及纯化	刘庭汤慧唐青海刘莎薛姣雄吴广艳马洁赵婷芳唐斯萍	《湖南畜牧兽医》	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	分泌表达pEGF的重组酿酒酵母在断奶仔猪上的应用研究	王蜀金王斌星郭春华柏雪彭忠利张正帆周琳	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	8	在线阅读下载PDF 职称材料