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猪肠病毒G型的分离鉴定及致病性研究
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作者 林艳 夏嘉鑫 +4 位作者 周远成 李敏 郑勤琴 陈莉群 岳丰雄 《中国猪业》 2025年第1期63-72,共10页
为分析临床腹泻发病猪场疫情发生的原因,在开展初生仔猪腹泻样品病毒分离试验中,获得了能够在Marc145细胞上稳定增殖的病毒,并对该病毒进行宏基因组测序、核酸序列分析、培养特性研究、仔猪回归试验等研究。该病毒的分离株鉴定为猪肠病... 为分析临床腹泻发病猪场疫情发生的原因,在开展初生仔猪腹泻样品病毒分离试验中,获得了能够在Marc145细胞上稳定增殖的病毒,并对该病毒进行宏基因组测序、核酸序列分析、培养特性研究、仔猪回归试验等研究。该病毒的分离株鉴定为猪肠病毒G1型(EV-G1),能在Marc145、 ST、 Vero等多种细胞上生长,无胰酶依赖性,对氯仿不敏感,适应细胞培养滴度均能达到10^(7.0)TCID_(50)/mL以上。人工感染3~5日龄仔猪,可导致一过性腹泻,在感染仔猪的脑、心脏、空肠、回肠、盲肠、结肠中均可检测到该病毒。本研究从与猪轮状病毒混合感染的组织样品中分离到1株EV-G病毒,该病毒可导致新生仔猪腹泻,且病毒有良好的细胞适应性,旨在充分了解仔猪感染EV-G病毒的致病性,为EV-G免疫原性研究以及疫苗研发奠定基础。 展开更多
关键词 仔猪 猪肠病毒g 分离鉴定 生物学特性 人工感染模 腹泻
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猪肠病毒G型部分VP1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
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作者 边金妮 黄诗婷 +7 位作者 许佳乐 米雪 王奕斐 杜琛 陈樱 韦祖樟 黄伟坚 欧阳康 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第3期178-182,共5页
本研究扩增猪肠病毒G型(EV-G)的部分VP1基因,将其克隆至原核表达载体,并对其进行诱导表达,获得重组蛋白并制备多克隆抗体,通过酶联免疫吸附试验,免疫印迹试验和间接免疫荧光试验对其进行验证。结果表明,本研究制备的兔抗EV-G-VP1多克隆... 本研究扩增猪肠病毒G型(EV-G)的部分VP1基因,将其克隆至原核表达载体,并对其进行诱导表达,获得重组蛋白并制备多克隆抗体,通过酶联免疫吸附试验,免疫印迹试验和间接免疫荧光试验对其进行验证。结果表明,本研究制备的兔抗EV-G-VP1多克隆抗体具有良好的免疫原性和反应性,可以特异性识别EV-G感染Marc-145细胞表达的VP1蛋白,为猪肠病毒G型免疫学检测方法的建立提供良好的生物学材料。 展开更多
关键词 猪肠病毒g 部分VP1蛋白 原核表达 多克隆抗体
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广西地区猪肠病毒G型的流行病学调查及VP1基因序列分析 被引量:4
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作者 杨春杰 刘雪婷 +4 位作者 米雪 陈樱 韦祖樟 黄伟坚 欧阳康 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第4期1216-1224,共9页
为分析广西地区猪肠病毒G型(EV-G)的流行状况及分子遗传演化特征,本研究收集2017-2018年广西地区222份临床腹泻样品,进行EV-G的检测、流行病学调查及VP1基因的扩增、克隆和序列分析。流行病学调查结果显示,广西地区2017-2018年EV-G的样... 为分析广西地区猪肠病毒G型(EV-G)的流行状况及分子遗传演化特征,本研究收集2017-2018年广西地区222份临床腹泻样品,进行EV-G的检测、流行病学调查及VP1基因的扩增、克隆和序列分析。流行病学调查结果显示,广西地区2017-2018年EV-G的样品阳性率为6.76%(15/222),而猪场阳性率则高达16.98%(9/53)。值得注意的是,广西地区2017-2018年EV-G的样品阳性率从2017年的4.55%上升至2018年的10.00%,上升幅度较大。同时发现该病毒在冬春季节的检出率较高。序列同源性分析结果显示,本研究获得的2株EV-G VP1基因之间的核苷酸同源性为99.2%,氨基酸同源性为98.8%,与国内外毒株VP1基因的核苷酸同源性为62.4%~80.1%,氨基酸同源性为45.7%~71.7%。遗传进化分析显示,本研究获得的2株EV-G VP1序列在同一分支,均属于G1亚型,与美国分离株13-03212遗传关系密切。氨基酸序列比较结果显示,广西地区该2株EV-G VP1氨基酸在多个位点发生了变异。抗原指数分析显示,广西地区EV-G型流行毒株的抗原性变化较大。表明2017-2018年广西地区存在一定程度的EV-G感染,本研究结果为明确EV-G型的流行概况及EV-G型的分子特性提供了参考依据。 展开更多
关键词 猪肠病毒g(ev-g) 流行病学 序列分析 抗原性
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2013—2022年云南地区猪肠病毒G型的分子流行病学调查 被引量:2
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作者 王位 朱沛 +5 位作者 李占鸿 薛晓岩 杨钦鸿 李雪 李素华 姚俊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5000-5012,共13页
【目的】了解肠病毒G型(Enterovirus G,EV-G)在云南地区猪场中的流行状况及其分子特征,为云南地区EV-G的防控提供理论依据。【方法】根据EV-G的5′-非翻译区(UTR)保守区域设计引物,RT-PCR扩增监测2013-2022年云南地区猪临床腹泻样品的E... 【目的】了解肠病毒G型(Enterovirus G,EV-G)在云南地区猪场中的流行状况及其分子特征,为云南地区EV-G的防控提供理论依据。【方法】根据EV-G的5′-非翻译区(UTR)保守区域设计引物,RT-PCR扩增监测2013-2022年云南地区猪临床腹泻样品的EV-G阳性率,从阳性样品来源的区域、猪群结构及类型分析EV-G在云南地区的感染情况。利用EV-G VP 1基因巢式PCR引物,通过RT-PCR扩增EV-G VP 1基因全序列;采用MegAlign软件分析EV-G云南株的VP1序列与EV-G的20个基因型标准株的相似性及关键氨基酸突变,采用Mega 7.0软件构建VP 1基因的遗传进化树,并通过Protean软件的Jameson-Wolf分析法对VP1蛋白进行抗原指数分析。【结果】云南地区2013-2022年收集的1941份临床样品EV-G总阳性率为19.42%(377/1941),其中大理(54.54%)、玉溪(45.45%)、红河(43.24%)猪群的EV-G感染阳性率明显高于云南其他地区;乳猪(25.19%)和保育猪(24.68%)2个年龄组的猪群阳性感染率高于其他猪群;肛拭子阳性样品的检出率(53.58%)高于肠道内容物(29.71%)及粪便(16.71%)样品。基于20株EV-G代表株VP 1基因序列相似性分析及遗传进化表明,17个云南株为EV-G1型,2株为EV-G6型,1株为EV-G17型。17个EV-G1基因型云南分离株VP1蛋白在第125-150、170-190位氨基酸处抗原指数活跃度显著增强,此区域同时存在多个亲水性氨基酸位点的突变,如P^(127) S、P^(143) S、G^( 146) R、P^( 188 )S。【结论】EV-G1、EV-G6和EV-G17等多种基因型在云南地区猪群中流行,以EV-G1型流行为主。EV-G1基因型云南分离株的VP1蛋白在第125-150、170-190位氨基酸处存在显著的抗原活跃度,可能介导EV-G1基因型毒株在云南的感染和流行。 展开更多
关键词 病毒g(ev-g) VP1 分子流行病学 基因特征
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